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扶正膏临床前安全性评价及免疫增强作用和机制初探

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扶正膏临床前安全性评价及免疫增强作用和机制初探

作者：王继达天津中医药大学

学位级别：硕士

目的本研究首先通过急性毒性实验和长期毒性实验系统评价扶正膏临床使用剂量的安全性;进而以免疫功能低下小鼠模型为研究对象,明确扶正膏对免疫功能低下的影响;最后以扶正膏增强细胞免疫功能为切入点,探究扶正膏增强细胞免疫功能的可能... 详细信息

目的本研究首先通过急性毒性实验和长期毒性实验系统评价扶正膏临床使用剂量的安全性;进而以免疫功能低下小鼠模型为研究对象,明确扶正膏对免疫功能低下的影响;最后以扶正膏增强细胞免疫功能为切入点,探究扶正膏增强细胞免疫功能的可能作用机制,以期为扶正膏的临床使用提供分子生物学依据。方法1.扶正膏临床前安全性评价1.1急性毒性研究本研究以《中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则》为指导原则,通过给与14天不同浓度的扶正膏水溶液,以体重、饮食、外观等客观指标为观察内容,进行急性毒性实验评价。1.2长期毒性研究本研究以《中药、天然药物长期毒性研究技术指导原则》为指导原则,通过给与90天不同浓度的扶正膏水溶液,进行如下指标的观察与检测:(1)一般状况观察:体重、摄食量。(2)血液学指标:白细胞、红细胞计数及其分类、血小板、凝血酶原时间等。(3)血液生化学指标:天门冬氨酸转移酶、谷氨酸转移酶、肌酐、尿素氮、总蛋白、白蛋白、血糖、总胆固醇、钠离子、钾离子、氯离子等。(4)尿液检查指标:尿液外观、比重、PH值、尿蛋白、尿胆红素、白细胞等。(5)脏器指数和组织病理学检查:肝脏、脾脏、心脏、肾脏、脾脏、肾上腺、胸腺、睾丸(雄鼠)、子宫(雌鼠)。2.扶正膏对免疫功能低下的影响本研究以腹腔注射80mg/kg环磷酰胺3天复制免疫功能低下小鼠模型,模型复制之后给与不同浓度的扶正膏水溶液,分别为正常组(Contrl)、模型组(Model)、扶正膏低剂量组(FZG-L)、扶正膏中剂量组(FZG-M)、扶正膏高剂量组(FZG-H)、阳性对照药玉屏分散组(YPF)、阳性对照药左旋咪唑组(LYC),以各组小鼠体重,脾脏指数、胸腺指数,脾脏及胸腺病理学检查,血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM,血清细胞因子IL-2、γ-干扰素(IFN-γ),脾脏中CD、CDT淋巴细胞的比例,以及体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性等内容作为免疫功能的评价指标,明确扶正膏对免疫功能低下的影响。3.扶正膏增强细胞免疫功能机制初探复制免疫功能低下小鼠模型,利用Wsetern Blot技术检测脾脏组织中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6等蛋白的表达情况。接着体外分离、培养正常小鼠脾淋巴细胞,分组为正常组、扶正膏含药血清组、抑制剂组、扶正膏含药血清+抑制剂组,使用MyD88抑制剂ST2825和扶正膏含药血清干预后,检测细胞上清液中IL-2、IFN-γ的变化,同时Wsetern Blot技术检测各组脾淋巴细胞中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6的蛋白表达变化。结果1.扶正膏临床前安全性评价1.1急性毒性研究与正常组相比,扶正膏低、中、高剂量组(最大给药量且相当于临床用药101倍)体重均与正常组无明显差异,且小鼠精神状态佳,未出现死亡,未测得半数致死量(LD),说明扶正膏无毒性。1.2长期毒性研究与正常组相比,扶正膏低、中、高剂量组(相当于临床用药71倍)体重、摄食量、精神状态均与正常组无明显差异。血液学指标:凝血功能、白细胞计数(WBC#)、淋巴细胞计数(Lymph#)、单核细胞数(Mon#)、中性粒细胞计数(Gran#)、淋巴细胞百分比(Lymph%)、中性粒细胞百分比(Gran%)、单核细胞百分比(Mon%)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)均与正常组相比无明显差异。血液生化指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、血糖(GLU)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、和离子检测包括钠离子(Na)、钾离子(K)、氯离子(Cl)与正常组相比均无明显统计学差异。尿液检查指标:尿常规、尿PH值、尿比重与正常组相比均无明显统计学差异。通过嗜多染红细胞微核试验检测骨髓状态,结果显示扶正膏并未对骨髓分化有影响。检测心、肝、肾、肺、脾、胸腺、肾上腺、睾丸(雄鼠)、子宫(雌鼠)等脏器的器官指数,扶正膏低、中、高剂量组与正常组相比均无明显统计学差异。给药各组HE结果显示,心脏:心肌纤维排列整齐,结构清晰;肾脏:肾小球血管袢薄而清晰,周围的肾小管结构完整,管腔清晰,基底膜完整,肾小管上皮细胞排列整齐,镜下未见空泡细胞形成,未见炎性细胞浸润;肝脏:肝细胞结构形态正常,无坏死及炎症细胞浸润;脾脏:脾脏组织形态正常,被膜、小梁、白髓和红髓结构清晰,脾小体未见增大,生发中心明显,脾窦内壁光滑,未见充血和淋巴细胞;肺脏:肺组织结构均正常,肺泡隔、肺泡腔完整,肺间质分布均匀。胸腺:胸腺被膜完整,皮质较厚,髓质边界清晰;肾上腺:网状带、束状带均增宽,细胞规则排列,结构清晰;睾丸:生精小管中精原细胞核大而圆,贴于基膜内,排列整齐,各级精母细胞层数清晰可见,近管腔侧可见大量精子细胞,管腔内充满精子;子宫:子宫平滑肌细胞交错成束整齐排列,平滑肌细胞呈纺锤形,细胞核均匀分布;以上结果说明,扶正膏无毒性。2.扶正膏对

关键词：扶正膏免疫功能低下安全性评价 TLR4

黄芪注射液辅助放化疗对癌症患者疗效和不良反应的系统评价

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药物评价研究 2022年第6期45卷 1147-1157页

作者：王继达王丽刘海朝孟令康边育红贾贝田天津中医药大学天津301617 天津市第二人民医院天津300192 南京中医药大学附属南京中医院江苏南京210023

目的系统评价黄芪注射液联合放化疗对癌症患者疗效和免疫功能的影响,为临床使用提供循证医学的相关参考。方法计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库(Wanfang Deta)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普生物医学数据库(VIP)、... 详细信息

目的系统评价黄芪注射液联合放化疗对癌症患者疗效和免疫功能的影响,为临床使用提供循证医学的相关参考。方法计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库(Wanfang Deta)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普生物医学数据库(VIP)、PubMed、Cochrane图书馆等数据库中有关黄芪注射液联合放化疗治疗癌症的随机对照临床试验(RCT),检索时间为各数据库建库起至2021年11月1日。使用Cochrane工具评价文献质量,用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入16项RCTs,1340例患者。Meta分析结果显示:黄芪注射液在辅助癌症的放化疗治疗中能显著提高治疗有效率[RR=1.96,95%CI(1.53,2.50)],提高患者CD_(3)^(+)[MD=7.47,95%CI(5.05,9.90)]、CD_(4)^(+)[MD=4.96,95%CI(3.84,6.09)]、CD_(8)^(+)[MD=7.47,95%CI(5.05,9.90)]水平、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)的值[MD=0.29,95%CI(0.20,0.14)],有效改善患者生存质量[RR=11.48,95%CI=(10.44,12.51)],改善放化疗引起的口干、黏膜损伤、皮炎损伤等不良反应发生率,与对照组比较差异均具有显著意义(P<0.00001)。结论黄芪注射液协同放化疗治疗癌症可以提高治疗有效率、改善患者生活质量、促进患者免疫功能、降低不良反应,鉴于研究局限性,尚需更多高质量、大样本RCTs进一步验证。

关键词：黄芪注射液癌症肿瘤有效性免疫功能 Meta分析

红景天苷激活HIF-1α信号通路促进成骨细胞增殖的机制

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中国药理学通报 2022年第2期38卷 190-195页

作者：金昱彤祁琳牛芯蕊王继达于爽李佳颖边育红王越天津中医药大学中西医结合学院天津301617 武警特色医学中心药剂科天津300162

目的以小鼠原代成骨细胞(mouse primary osteoblasts, MOB)作为研究对象,探索红景天苷(salidroside, SAL)对成骨细胞增殖的作用及分子机制。方法采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法对提取的原代细胞进行鉴定,MTT法检测不... 详细信息

目的以小鼠原代成骨细胞(mouse primary osteoblasts, MOB)作为研究对象,探索红景天苷(salidroside, SAL)对成骨细胞增殖的作用及分子机制。方法采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法对提取的原代细胞进行鉴定,MTT法检测不同浓度SAL对MOB的增殖作用,RTPCR、Western blot、ELISA技术,研究SAL作用MOB的分子机制。结果将提取的细胞进行ALP染色后出现黑褐色沉淀,表明确为成骨细胞。SAL能够促进MOB的增殖,并上调缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素样蛋白4(angiopoietin-like protein 4,ANGPTL4)及白介素6(interleukin 6,IL-6)的mRNA和蛋白表达水平,在加入HIF-1α阻断剂YC-1后蛋白表达下调。结论 SAL通过激活HIF-1α/VEGF、ANGPTL4、IL-6信号通路促进成骨细胞的增殖。

关键词：红景天苷缺氧诱导因子-1α 增殖血管生成骨形成成骨细胞

基于TLR4信号通路探讨扶正膏增强细胞免疫功能机制

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现代中西医结合杂志 2023年第23期32卷 3242-3247,3267页

作者：王继达王丽满姗姗王相玲边育红天津中医药大学天津301617 天津市第二人民医院天津300192

目的基于Toll样受体4(TLR4)信号通路探讨扶正膏增强细胞免疫功能的机制。方法(1)将20只雄性ICR小鼠随机分为正常组、免疫功能低下组、扶正膏组、左旋咪唑组,每组5只。除正常组外,其余组小鼠均连续3 d腹腔注射环磷酰胺建立免疫功能低下... 详细信息

目的基于Toll样受体4(TLR4)信号通路探讨扶正膏增强细胞免疫功能的机制。方法(1)将20只雄性ICR小鼠随机分为正常组、免疫功能低下组、扶正膏组、左旋咪唑组,每组5只。除正常组外,其余组小鼠均连续3 d腹腔注射环磷酰胺建立免疫功能低下模型。造模成功后,扶正膏组给予扶正膏2250 mg/kg灌胃,左旋咪唑组给予左旋咪唑20 mg/kg灌胃,空白组和免疫功能低下组给予等量生理盐水灌胃,均连续灌胃28 d。流式细胞术检测脾脏组织中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞比例,Western blot法检测脾脏组织中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)蛋白表达情况。(2)取大鼠20只,给予扶正膏69.6 g/(kg·d)连续灌胃14 d制备扶正膏含药血清。体外分离、培养正常小鼠脾淋巴细胞,分为4组:正常组体外正常培养;扶正膏含药血清组加入10%扶正膏含药血清培养48 h;MyD88抑制剂组加入5μmol/L MyD88抑制剂ST2825培养8 h;MyD88抑制剂+含药血清组加入5μmol/L ST2825培养8 h后,离心去上清,然后加入10%扶正膏含药血清培养48 h。ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平,Wsetern blot法检测脾淋巴细胞中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白表达情况。结果免疫功能低下组脾脏组织中CD4^(+)T细胞比例和TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白相对表达量均明显低于正常组(P均达量均明显高于免疫功能低下组(P均达水平和TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白相对表达量均明显高于正常组、MyD88抑制剂组和MyD88抑制剂+含药血清组(P均达水平和TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白相对表达量均明显低于正常组(P均0.05)。结论扶正膏可能通过激活TLR4信号通路增强细胞免疫功能。

关键词：扶正膏环磷酰胺免疫功能低下左旋咪唑细胞免疫

近年来青藏高原湖泊水位异常变化的多源测高遥感监测及其原因分析

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近年来青藏高原湖泊水位异常变化的多源测高遥感监测及其原因分析

强化教学管理　改善教学条件　拓宽办学门路　提高教学质量

2022年中国地球科学联合学术年会

作者：詹鹏飞宋春桥王继达李文铠柯灵红刘凯陈探 Nanjing Institute of Geography and Limnology University of Chinese Academy of Sciences Kansas State University Nanjing University of Information Science & Technology Hohai University

青藏高原湖泊作为气候变化的重要指示器,监测高原湖泊水位变化对于准确评估该地区的气候及其对周围水文与环境的影响至关重要。利用多源测高卫星数据可以有效地监测湖泊水位长时序连续变化,促进对青藏高原湖泊气候变化响应特征的理解。...

青藏高原湖泊作为气候变化的重要指示器,监测高原湖泊水位变化对于准确评估该地区的气候及其对周围水文与环境的影响至关重要。利用多源测高卫星数据可以有效地监测湖泊水位长时序连续变化,促进对青藏高原湖泊气候变化响应特征的理解。大量前人的研究结果表明,青藏高原中部的湖泊的在2010-2016年期间扩张速度减缓甚至有部分湖泊出现萎缩。但是,在接下来的几年中这种变化趋势是否会持续还不清楚。尽管已有研究将湖泊水位变化信息延长到了最近几年,但对近几年湖泊水位异常变化特征及原因未做系统性分析。因此,本研究旨在结合水位数据集以及多源雷达测高数据,从而获取湖泊水位的长时序变化信息,据此分析近几年青藏高原湖泊水位变化特征。此外,我们将探讨湖泊近期变化趋势的潜在气候驱动机制。

关键词：

来源： cnki会议评论

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职业 1997年第5期 39-41页

作者：王继达山东省建材工业技校

北京市大兴区安定镇生态农业建设规划——循环经济在农业及社会层面的应用设计

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农业环境与发展 2006年第1期23卷 27-31页

作者：王继达陈运辉北京石油化工学院北京102617

20世纪90年代以来,各国学者和政府在探索可持续发展战略的过程中逐渐发现,当代资源环境问题日益严重的根本原因在于工业化运动以来形成的以高开采、低利用、高排放为特征的线形经济模式,为此提出人类社会的未来应该建立一种以物质闭环... 详细信息

20世纪90年代以来,各国学者和政府在探索可持续发展战略的过程中逐渐发现,当代资源环境问题日益严重的根本原因在于工业化运动以来形成的以高开采、低利用、高排放为特征的线形经济模式,为此提出人类社会的未来应该建立一种以物质闭环流动为特征的经济,即循环经济,从而实现可持续发展所要求的环境与经济双赢。本文以循环经济为理论支持,阐述其在农业和社会层面的应用,结合大兴区安定镇的实际发展状况,对该镇建设生态农业园和农业社会系统作出可行性分析及其规划。

关键词：观光农业经济合作组织循环经济有机农业

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束骨姜黄化学成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性

山东大学学报（理学版） 2013年第7期48卷 20-23页

作者：张春梅王继达张永睿思范培红山东大学药学院山东济南250012 陕西省植物化学重点实验室陕西宝鸡721013

采用硅胶层析、反相硅胶中压柱层析、高效液相等色谱技术对姜科姜黄属束骨姜黄(Curcuma xanthorrhiza Roxb.)根茎中的低极性化学成分进行了分离纯化,并通过MS和NMR等波谱技术确定了化合物结构,分离纯化化合物6个,分别鉴定为蓬莪术环氧酮... 详细信息

采用硅胶层析、反相硅胶中压柱层析、高效液相等色谱技术对姜科姜黄属束骨姜黄(Curcuma xanthorrhiza Roxb.)根茎中的低极性化学成分进行了分离纯化,并通过MS和NMR等波谱技术确定了化合物结构,分离纯化化合物6个,分别鉴定为蓬莪术环氧酮(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、愈创木内酯Guai-1(10),3,5,7(11),8-pentaen-2-on-11,8-olide(Ⅲ)、郁金二酮(Ⅳ)、莪术双环烯酮(Ⅴ)、花侧柏烯(Ⅵ)。化合物Ⅲ、Ⅵ为首次从该科植物中分离得到,化合物Ⅳ、Ⅴ为首次从该种中分离得到。对所分离获得化合物进行了乙酰胆碱酯酶抑制活性测定,其中化合物Ⅳ、Ⅵ具有活性,化合物Ⅳ的TLC生物自显影最小抑制量为95μg。

关键词：束骨姜黄化学成分乙酰胆碱酯酶抑制活性

全球气温上升因素研究——能源利用中热能散失对气温的影响

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环境科学学报 2006年第3期26卷 515-520页

作者：王继达唐薇李向前赵国飞吴修栋周燕芳刘洋北京石油化工学院北京102617

为了分析能源不完全利用产生的热能散失对近三十年来全球气温升高的影响,首先对近三十年来的全球气温、主要温室气体浓度和主要能源利用中的热能散失量等数据进行了收集和整理;结合各温室气体对温室效应的相对贡献值引入了温室效应值这... 详细信息

为了分析能源不完全利用产生的热能散失对近三十年来全球气温升高的影响,首先对近三十年来的全球气温、主要温室气体浓度和主要能源利用中的热能散失量等数据进行了收集和整理;结合各温室气体对温室效应的相对贡献值引入了温室效应值这一参数,之后通过二元线性回归法来分析温室效应和能耗散失双因素对气温升高的权重影响.借助于黑体辐射定律等相关物理模型,估算出分别由此二因素引起的全球气温升高值,并对两者贡献值进行了量化比较,结果表明,虽然温室效应是气温升高的主要原因,但热能散失也对这一气候变化具有一定程度的影响.

关键词：温室效应能耗散失全球气温上升黑体辐射