检索结果-南通市图书馆

语文建设 2021年第9期 F0003-F0003页

作者：王睿劼浙江横店影视职业学院

当代网络文学中前现代、后现代思潮倾向的传播研究

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嘉应文学 2024年第3期 22-24页

作者：王睿劼浙江横店影视职业学院

网络文学作为现代中国重要的通俗文学组成部分，在一定程度上反映了当前网络文学创作者与主要受众的思想倾向。研究当前各网络文学平台阅读量较高的作品后发现，大部分网络文学作品中出现了或是前现代思想、或是后现代思想、或是两者矛... 详细信息

网络文学作为现代中国重要的通俗文学组成部分，在一定程度上反映了当前网络文学创作者与主要受众的思想倾向。研究当前各网络文学平台阅读量较高的作品后发现，大部分网络文学作品中出现了或是前现代思想、或是后现代思想、或是两者矛盾地兼备的思潮传播。文章从传播学角度出发分析该现象出现的成因与反映的社会问题。

关键词：网络文学前现代思潮后现代思潮

植物褪黑素合成关键酶的生物信息学分析暨转mgfp-5基因烟草的愈伤诱导

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植物褪黑素合成关键酶的生物信息学分析暨转mgfp-5基因烟草的愈伤...

作者：王睿劼西北大学

学位级别：硕士

第一部分:褪黑素（melatonin,MT）是一种小分子的神经-内分泌激素,分泌于脊椎动物松果体中,后来发现普遍存在在植物、动物等生物体内。褪黑素可以调节脊椎动物生物节律和光周期反应,改善睡眠障碍,增强免疫等;可以促进植物生根及提高植... 详细信息

第一部分:褪黑素（melatonin,MT）是一种小分子的神经-内分泌激素,分泌于脊椎动物松果体中,后来发现普遍存在在植物、动物等生物体内。褪黑素可以调节脊椎动物生物节律和光周期反应,改善睡眠障碍,增强免疫等;可以促进植物生根及提高植物抗氧化能力等。相比而言,植物中褪黑素的代谢类似于动物途径,由色氨酸合成前体,经过色氨酸羟化酶（T5H）、色氨酸脱羧酶（TDC）、5-羟色胺-N-乙酰转移酶（AANAT）、羟基吲哚-O-甲基转移酶（HIOMT）催化,形成褪黑素来完成一系列功能,其功能研究刚刚开始。对植物褪黑激素合成关键的酶研究有助于了解植物褪黑激素的作用机制、动态累积及其功能。基于此,本研究采用比较基因组学的方法,分析比较不同植物物种中TDC、T5H、AANAT、HIOMT的生物信息学数据,为褪黑素合成关键酶的研究提供参考,为后期植物中褪黑激素的代谢、功能的深入研究鉴定基础。所取得的主要结果有:（1）除薯蓣种TDC蛋白的分子量较小外,不同植物的TDC蛋白的分子量分布在55000Da-58000Da之间,理论等电点在5.35-6.65之间;除大麦的TDC1、TDC2蛋白以及薯蓣的TDC2蛋白以外,其余的TDC蛋白均为不稳定蛋白;样本中TDC蛋白呈现亲水性,有两个明显的疏水区域;除长春花、萝芙木、蛇根草以及水稻以外,其他样本中TDC蛋白转运肽存在于细胞质中;TDC蛋白蛋白的进化树呈现3个分支。（2）除桑树T5H1蛋白的分子量较小之外,不同植物的T5H蛋白的分子量分布在50000Da-57000Da之间,理论等电点在8.80-9.10之间;除桑树T5H1及T5H2蛋白外,其余T5H蛋白均为不稳定蛋白;样本中T5H蛋白都呈现亲水性,有两个明显的疏水区域;紫衫T5H 1-T5H 5号蛋白中,叶绿体转运肽信号几乎不存在,线粒体转运肽的分值较高,而桑树的三种T5H蛋白的分泌途径信号肽和其他分值较高;T5H蛋白的进化树呈现3个分支。（3）对比莱茵衣藻的AANAT与HIOMT蛋白,AANAT蛋白的氨基酸残基数、分子量与等电点均小于HIOMT蛋白;AANAT蛋白为稳定蛋白,而HIOMT蛋白为不稳定蛋白;AANAT蛋白的整个多肽链是呈亲水性的,有两个很明显的疏水区域;HIOMT蛋白的整个多肽链是呈疏水性的,整个多肽链上有三个明显的亲水区域。第二部分:贻贝粘合蛋白（Mussel Adhesive Protein,MAP）,亦称贻贝足丝蛋白（Mytilus foot p roteins,Mfps）是海洋软体动物贻贝（Mytilus）足丝腺分泌的蛋白质复合物。Mfps耐腐蚀,在湿性环境有强粘性,医学中使用无毒、无免疫原性,生物相容性好。天然的贻贝粘合蛋白,提取时易固化且含量低,难以获得。目前利用基因工程技术,在原核表达（大肠杆菌）及真核表达（酵母、烟草）系统中重组贻贝粘合蛋白研究其性质及功能。前期在烟草中表达了地中海贻贝蛋白（Mytilusgalloprovincia均isfoot protein type 5,Mgfp-5）基因,得到转mgfp-5基因烟草。植物组织培养具有细胞增殖快、培养周期短、材料均一、重复性好、不受季节与环境限制等优点,在烟草组织和细胞培养、基因转化和次生物质生产等已有不少成功报道,然而未见到借助烟草组织研究重组蛋白Mgfp-5的报道。基于此,实验借助前期转贻贝基因mgfp-5的T1代烟草作为外植体,诱导、培养得到重组蛋白Mgfp-5可以稳定表达愈伤组织,拓宽重组蛋白Mgfp-5的植物材料来源,为重组贻贝粘蛋白的研究提供参考。研究的主要结果如下:（1）转贻贝基因mgfp-5的烟草愈伤组织诱导:20 mg/L卡那霉素（Kan）,抗性萌发转基因T1代种子无菌苗进行愈伤组织诱导,在附加不同浓度的2,4-D、6-BA、NA A 的 MS 培养基上,诱导率≥90.0%;MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+20 mg/Lkan时诱导率为100%。（2）愈伤组织的固/液培养:用 MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+20 mg/Lkan培养基,固/液培养愈伤组织,愈伤组织均呈现“S”型曲线生长;固体培养时12-27d鲜质量增长率为3.73,液体培养时间缩短6d,在6-15d时间内鲜质量会增加8.56-8.63 倍。（3）重组蛋白Mgfp-5的稳定表达鉴定:固/液培养的继代的烟草愈伤组织中,PCR、RT-PCR扩增到预期600 bp与260 bp条带,Western blot检测到预期（9.8kD）的蛋白,显示了在继代培养的转基因烟草愈伤组织,外源mgfp-5基因及Mgfp-5蛋白可以稳定表达。

关键词：植物褪黑素生物信息学贻贝粘蛋白 mgfp-5基因转基因烟草

《琅琊榜》再解读中的主动阅听人现象研究设计

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卫星电视与宽带多媒体 2019年第6期 58-59页

作者：王睿劼浙江横店影视职业学院

本文从主动阅听人理论(积极受众论)中出发,设计了一个关于电视剧《琅琊榜》的受众在解读现象的研究,本研究运用批判话语分析的研究方法,期望可以了解受众对古装正剧再解读中的意识形态与趣味取向。

关键词：主动阅听人再解读批判话语分析

“新媒体语言表达”实验课线上教学模式的探索

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中国地市报人 2023年第11期 87-89页

作者：王睿劼浙江横店影视职业学院

在新媒体环境下,培养播音主持专业学生的语言表达能力,需要充分考虑学生个性表达的语言风格是否得到了有效训练,还要重新定位动态演绎的语言表达能力是否符合新媒体环境需要,尤其需要进一步增强学生的即兴互动语言表达能力。因此,需要... 详细信息

在新媒体环境下,培养播音主持专业学生的语言表达能力,需要充分考虑学生个性表达的语言风格是否得到了有效训练,还要重新定位动态演绎的语言表达能力是否符合新媒体环境需要,尤其需要进一步增强学生的即兴互动语言表达能力。因此,需要为“新媒体语言表达”新课程开设线上实验课,通过具体的模拟演练的实践,锻炼学生新媒体语言表达技巧,逐步塑造学生在短视频配音和直播活动主持方面的职业能力。文章结合播音主持专业课程教学经验,进一步分析了“新媒体语言表达”课程教学特点和开展实验课线上教学的必要性,提出了实验课线上教学资源筹备方案,总结新媒体语言文本创作、新媒体语言短视频设计、新媒体语言直播互动演练等新型线上教学模式,旨在改善“新媒体语言表达”实验课线上教学质量,全面提高播音主持专业学生的新媒体语言表达能力和职业素养。

关键词： “新媒体语言表达” 实验课线上教学

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转mgfp-5基因烟草的愈伤诱导及培养

基因组学与应用生物学 2017年第5期36卷 2061-2067页

作者：王英娟王睿劼吕亚维张雨靖杨泽熵西北大学生命科学学院/陕西省生物技术重点实验室/西部资源与现代生物技术省部共建教育部重点实验室西安710069

海洋软体动物贻贝(Mytilidae)足丝腺分泌的贻贝粘蛋白(mussel adhesive protein,MAP)即贻贝足丝蛋白(mussel foot protein,Mfp),不仅有水中高粘性及耐腐蚀性,而且无毒、无免疫原性,生物相容性好,其中Mfp-5粘性最强。现用的贻贝粘蛋白主... 详细信息

海洋软体动物贻贝(Mytilidae)足丝腺分泌的贻贝粘蛋白(mussel adhesive protein,MAP)即贻贝足丝蛋白(mussel foot protein,Mfp),不仅有水中高粘性及耐腐蚀性,而且无毒、无免疫原性,生物相容性好,其中Mfp-5粘性最强。现用的贻贝粘蛋白主要是天然获取,但是其含量低易固化难获得,基因工程重组贻贝粘蛋白的研究刚刚开始。前期我们在烟草中表达了地中海贻贝蛋白(mytilus galloprovincialis foot protein type 5,Mgfp-5)基因,得到转mgfp-5基因烟草种子。本实验将转基因T1代种子无菌苗进行愈伤组织诱导,在附加不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA的MS培养基上,诱导率≥90.0%,其中2,4-D 1.0 mg/L、6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.1 mg/L时诱导率为100%;愈伤组织固/液培养过程中均以"S"型曲线生长,固体培养时12~27 d鲜质量增长率为3.73%,液体培养时间缩短6 d,在6~15 d时间内鲜质量会增加8.56~8.63倍;固/液培养的继代愈伤组织,PCR、RT-PCR及Western blotting分别检测到预期大小的电泳条带,显示了外源mgfp-5基因及Mgfp-5蛋白稳定表达。稳定表达Mgfp-5蛋白的愈伤组织,可以为获得重组蛋白Mgfp-5的原材料提供新途径,为研究植物表达贻贝粘蛋白提供参考。

关键词：贻贝粘蛋白 mgfp-5基因转基因烟草愈伤培养

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贻贝粘蛋白Mgfp-5基因在烟草中的转化

基因组学与应用生物学 2016年第1期35卷 172-182页

作者：吕玉伟张雨靖吕亚维王睿劼杨泽熵王英娟西北大学生命科学学院/陕西省生物重点实验室/西部资源与现代生物技术省部共建教育部重点实验室西安710069

贻贝(Mytilus galloprovincialis)足腺分泌的粘蛋白Mgfp-5,是一种粘合强度高、生物相容性好的生物粘合剂,可以广泛应用于医学、化学表面以及海洋工程等领域。天然获取Mgfp-5时易固化且含量低,难获得、成本高制约了其应用,所以更多学者... 详细信息

贻贝(Mytilus galloprovincialis)足腺分泌的粘蛋白Mgfp-5,是一种粘合强度高、生物相容性好的生物粘合剂,可以广泛应用于医学、化学表面以及海洋工程等领域。天然获取Mgfp-5时易固化且含量低,难获得、成本高制约了其应用,所以更多学者尝试基因工程方法获得粘蛋白Mgfp-5,其中鲜见借助植物基因工程表达Mgfp-5的报道。本研究构建携带Mgfp-5基因的植物表达载体p RI101-Mgfp,以秦烟95烟草叶片为受体,通过根癌农杆菌LBA4404介导方法,遗传转化外植体,历经转染、抗性筛选及分子生物学鉴定,获得转基因烟草植株。研究表明正确构建的植物表达载体p RI101-Mgfp,可以在外植体预培养3 d,农杆菌菌液OD600=0.6,侵染10 min,共培养3 d,20 mg/L卡那霉素抗性筛选培养的条件下,携带外源Mgfp-5基因,顺利转化进入烟草小苗,经过PCR、RT-PCR检测目标基因Mgfp-5在转化小苗基因组中可以整合及表达,得到转Mgfp-5基因烟草植株,生根后移栽成活。本研究为粘合蛋白Mgfp-5的表达、提取纯化及功能等深入研究提供参考,也是优质粘合剂粘合蛋白材料获得的一条新途径。

关键词：粘蛋白Mgfp-5 根癌农杆菌遗传转化烟草

重组贻贝黏蛋白Mgfp-5的表达及功能评价

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基因组学与应用生物学 2017年第10期36卷 4108-4115页

作者：吕亚维王睿劼张雨靖高文英杨泽滳王英娟西部资源与现代生物技术省部共建教育部重点实验室陕西省生物重点实验室西北大学生命科学学院西安710069

贻贝(Mytilus)中富含各种黏附蛋白,其中贻贝足丝蛋白5(Mytilus galloprovincialis foot protein type 5,Mgfp-5)是贻贝与外界基质进行黏附的主要蛋白分子之一。贻贝黏蛋白天然提取时产量低、易凝固且纯化困难,通过化学合成和基因工程等... 详细信息

贻贝(Mytilus)中富含各种黏附蛋白,其中贻贝足丝蛋白5(Mytilus galloprovincialis foot protein type 5,Mgfp-5)是贻贝与外界基质进行黏附的主要蛋白分子之一。贻贝黏蛋白天然提取时产量低、易凝固且纯化困难,通过化学合成和基因工程等方法重组贻贝黏蛋白解决该问题。本研究在*** BL21(DE3)中表达了贻贝蛋白Mgfp-5,亲和层析纯化到Mgfp-5蛋白的含量为12.25%,纯度为96.92%;酪氨酸酶修饰Mgfp-5后,其DOPA(多巴,3,4-二羟基苯丙氨酸)含量为9.60 pmol/g,是修饰前的9.32倍,生物黏性增强到1 116 n N,是Cell-Tak TM黏性的1.60倍;3.0μg/cm2的Mgfp-5蛋白的毒性级别为1级;Mgfp-5浓度≤20μg/m L时对红细胞无溶血现象,具有生物安全性。本研究可为重组Mgfp-5蛋白研究奠定基础,同时为来源于Mgfp-5黏蛋白的临床生物黏合剂的研制提供参考。

关键词：贻贝黏蛋白 Mgfp-5 DOPA 黏附性安全性

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贻贝蛋白Mgfp-5的原核表达与纯化

西北大学学报（自然科学版） 2016年第3期46卷 390-396页

作者：吕玉伟吕亚维杨泽熵王睿劼张雨靖王英娟西北大学生命科学学院/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室/生物技术省级重点实验室陕西西安710069

贻贝(Mytilus galloprovincialis)足丝中黏附蛋白,是一种黏合强度高、生物相容性好、优质的生物黏合剂,可以应用于医学、表面化学、海洋工程等领域,其中富含DOPA(多巴,3,4-二羟基苯丙氨酸)的贻贝足丝蛋白5(Mytilus galloprovincialis fo... 详细信息

贻贝(Mytilus galloprovincialis)足丝中黏附蛋白,是一种黏合强度高、生物相容性好、优质的生物黏合剂,可以应用于医学、表面化学、海洋工程等领域,其中富含DOPA(多巴,3,4-二羟基苯丙氨酸)的贻贝足丝蛋白5(Mytilus galloprovincialis foot protein type 5,Mgfp-5)显著表现出此特性。天然获取Mgfp-5含量低,易固化,纯化困难,越来越多学者尝试基因工程获得黏蛋白。文中构建重组质粒p ET28a-mgfp,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导表达出重组蛋白Mgfp-5。为得到高质量的Mgfp-5蛋白,优化了Mgfp-5蛋白诱导表达参数:菌液OD_(600)=0.8,诱导剂异丙基-β-D巯基半乳糖苷(IPTG)0.8 mmol/L,37℃,诱导8h;优化镍离子亲和层析纯化蛋白Mgfp-5最佳条件为:Elution Buffer的p H为7.0,500 mmol/L咪唑。Western Blot鉴定到重组Mgfp-5可以特异性表达。该研究为得到大量Mgfp-5蛋白奠定了基础,为加速黏蛋白的黏附机理及生物医学黏合剂的开发提供参考。

关键词：贻贝 mgfp-5基因原核表达优化纯化

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21世纪西方性别数字鸿沟研究

地理科学进展 2024年第6期43卷 1247-1260页

作者：王睿冯健北京大学城市与环境学院北京100871

性别数字鸿沟是西方学术界较为热门的研究话题,对该话题的梳理和探讨有助于推动国内相关研究发展。性别数字鸿沟的研究历程可以通过分析文献计量软件CiteSpace的运行结果,将其划分为三个阶段。性别数字鸿沟的研究主题种类多样,涉及空间... 详细信息

性别数字鸿沟是西方学术界较为热门的研究话题,对该话题的梳理和探讨有助于推动国内相关研究发展。性别数字鸿沟的研究历程可以通过分析文献计量软件CiteSpace的运行结果,将其划分为三个阶段。性别数字鸿沟的研究主题种类多样,涉及空间、时间、社会三大视角,覆盖了从全球尺度到家庭空间、从学校教育到职业生涯、从刻板印象到社会环境的各个领域。性别数字鸿沟的影响因素主要有宏观的社会、经济、政策因素,基本的平台载体引导因素以及人们主观的心理因素。为了应对已有的和可能的性别数字鸿沟现象,学者们提出了种种建议,部分国家和地区也已经出台了各类举措,不过要想有切实的效果,在政策制定和推行实施阶段还需要认真推敲。

关键词：性别数字鸿沟数字鸿沟西方学术界信息通信技术(ICT) CiteSpace