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表皮细胞生长因子样结构域3对SNU-449肝癌细胞增殖、凋亡、转移、侵袭的影响

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中华实验外科杂志 2024年第3期41卷 481-484页

作者：李伟涛罗福星王百林吴帆广州市红十字会医院肝胆外科广州510220 贵州医科大学贵阳550004

目的观察表皮细胞生长因子样结构域3(EGFL3)基因敲减对SNU-449人肝癌细胞生长增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,探索EGFL3发挥作用的分子机制。方法利用慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建EGFL3基因敲减的SNU-449细胞系,并利用实时荧光... 详细信息

目的观察表皮细胞生长因子样结构域3(EGFL3)基因敲减对SNU-449人肝癌细胞生长增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,探索EGFL3发挥作用的分子机制。方法利用慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建EGFL3基因敲减的SNU-449细胞系,并利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测EGFL3基因干扰效率,选出敲减效率最高的一组作为基因敲减组(KD组),同时设阴性对照组(NC组),随后进行噻唑蓝(MTT)实验、细胞克隆形成实验、细胞凋亡实验、Transwell实验以及Transwell小室侵袭实验,以对比两组SNU-449细胞系的生长、增殖、凋亡、侵袭和转移的能力,最后通过RT-qPCR技术检测两组SNU-449细胞系中转化生长因子-β1(TGF-β1)、SMAD基因的相对表达水平。组间样本比较采用独立样本t检验。结果相较于NC组,KD组SNU-449细胞系中EGFL3基因的敲减效率为75.7%(t=13.730,P0.05)。结论EGFL3基因可促进SNU-449肝癌细胞系的生长、增殖、侵袭、转移并抑制凋亡,其机制可能与抑制TGF-β1/SMAD信号通路有关。

关键词：肝细胞癌表皮细胞生长因子样结构域3 增殖侵袭凋亡转化生长因子-β1/SMAD信号通路

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SLC7A11在肝癌中的研究进展

中国医药导报 2024年第13期21卷 191-193页

作者：郝定盈朱山飞毛本亮苑伟吴帆王百林贵州医科大学临床医学院贵州贵阳550004 暨南大学附属广州红十字会医院普外科广东广州510220

原发性肝癌因其易转移性、高复发性及耐药性导致患者预后较差,故寻找肝癌治疗的特异性分子靶标至关重要。SLC7A11是铁死亡的关键抑制因子,通过介导胱氨酸摄取促进谷胱甘肽合成,保护细胞免受氧化应激损伤。近期有文献报道了SLC7A11在肝... 详细信息

原发性肝癌因其易转移性、高复发性及耐药性导致患者预后较差,故寻找肝癌治疗的特异性分子靶标至关重要。SLC7A11是铁死亡的关键抑制因子,通过介导胱氨酸摄取促进谷胱甘肽合成,保护细胞免受氧化应激损伤。近期有文献报道了SLC7A11在肝癌发生、发展,介入栓塞治疗,免疫治疗,放射治疗,靶向药物耐药等方面的生物学作用。本文对此作一综述,旨在为肝癌分子靶向治疗提供新的思路与方向。

关键词： SLC7A11 肝癌铁死亡研究进展

肝细胞癌中泛凋亡相关长链非编码RNA预后风险模型的构建与评估

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中华实验外科杂志 2024年第3期41卷 485-490页

作者：庹云郝定盈裴捷毛本亮庄润宇吴帆王百林贵州医科大学临床医学院贵阳550004 暨南大学附属广州红十字会医院普通外科广州510220

目的利用生物信息学对癌症基因组图谱(TCGA)数据库进行挖掘并筛选对肝细胞癌(HCC)患者预后有显著影响的泛凋亡(PANoptosis)相关长链非编码RNA(lncRNA),构建HCC中PANoptosis相关lncRNA(PANRlncRNA)的预后风险模型。方法在TCGA数据库下载... 详细信息

目的利用生物信息学对癌症基因组图谱(TCGA)数据库进行挖掘并筛选对肝细胞癌(HCC)患者预后有显著影响的泛凋亡(PANoptosis)相关长链非编码RNA(lncRNA),构建HCC中PANoptosis相关lncRNA(PANRlncRNA)的预后风险模型。方法在TCGA数据库下载377例HCC患者临床数据,在多种数据库中检索关键词"PANoptosis"并从文献中获取泛凋亡相关基因(PANR-Gs),通过对PANR-Gs和lncRNAs进行共表达分析确定PANRlncRNAs,在癌组织及癌旁组织中进行差异性分析。对377例患者的临床数据预处理后筛选到符合标准的343例样本(全集),将全集随机分组为训练集(172例)和测试集(171例),通过单因素Cox、LASSO、多因素Cox风险回归分析建立训练集的预后风险模型,得到每个患者的风险评分,按风险评分的中位值将其分为高、低风险组,采用Kaplan-Meier方法对两组患者进行生存分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线对模型进行效能评估。分析高、低风险组的生存时间和免疫功能,通过Wilcoxon检验完成两组间比较。结果共筛选到147个PANRlncRNAs,108个差异表达的PANRlncRNAs,最终确定4个PANRlncRNAs构成HCC预后风险模型,该模型在训练集患者的1年、3年和5年生存预测性能曲线下面积(AUC)值分别为0.740、0.774和0.791;高风险组患者的总生存期明显低于低风险组(P<0.05),测试集和全集中也呈现出良好的预测效能,进一步分析表明在高、低风险组中,免疫细胞及其功能差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于4个PANRlncRNAs建立预后风险模型有良好的预测能力,可有效预测HCC患者的生存预后,其风险评分可能成为HCC独立的预后因素。

关键词：肝细胞癌泛凋亡长链非编码RNA 风险模型免疫浸润

肝细胞癌双硫死亡相关长链非编码RNA预后风险模型的构建与评估

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中华实验外科杂志 2024年第4期41卷 704-709页

作者：郝定盈肖俊豪庹云裴捷黄杰钰苑伟吴帆王百林贵州医科大学临床医学院贵阳550004 暨南大学附属广州红十字会医院普通外科广州510220

目的探讨双硫死亡相关长链非编码RNA(DRlncRNA)在肝细胞癌(HCC)中的预后价值,构建肝细胞癌DRlncRNA的预后风险模型。方法从TCGA数据库中下载377例HCC患者的RNA测序数据以及临床数据(包括374个HCC组织和50个癌旁组织),使"R"软件进行共表... 详细信息

目的探讨双硫死亡相关长链非编码RNA(DRlncRNA)在肝细胞癌(HCC)中的预后价值,构建肝细胞癌DRlncRNA的预后风险模型。方法从TCGA数据库中下载377例HCC患者的RNA测序数据以及临床数据(包括374个HCC组织和50个癌旁组织),使"R"软件进行共表达分析确定DRlncRNA,并在癌组织及癌旁组织中进行差异性分析。预处理临床数据得到343例合格的样本,并随机分为训练集(train)172例、测试集(test)171例,在训练集中通过单因素Cox、最小绝对收缩和选择算法(LASSO)、多因素Cox分析确定预后风险模型,计算出风险评分并根据风险评分的中位值将患者分为高、低风险组;对两组患者进行生存分析并绘制受试者工作特征(ROC)曲线进行效能评估。在测试集和整个队列中验证。进一步分析高、低风险组间生物学富集通路和免疫相关功能的差异。两组间比较通过Wilcoxon检验完成。结果提取lncRNA数据并进行共表达分析以及差异分析后共得到211个DRlncRNA,将差异分析后的DRlncRNA与临床样本合并后最终筛选出4个DRlncRNA用来构建预后风险模型,该模型中高风险组患者的生存率明显低于低风险组(P<0.05),训练集患者1年、3年和5年的生存预测性能曲线下面积(AUC)值分别为0.790、0.601、0.690。测试集和整个队列中也具有良好的预测效能。进一步分析表明高、低风险组在生物学富集通路和免疫相关功能方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论DRlncRNA在HCC中具有较高的预后价值,且以4个DRlncRNA构建的预后风险模型可以有效预测HCC患者的生存预后。

关键词：肝细胞癌双硫死亡长链非编码RNA 预后

槲皮素调控肝缺血-再灌注损伤的研究进展及应用

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中华肝脏外科手术学电子杂志 2024年第2期13卷 244-249页

作者：裴捷毛本亮郝定盈苑伟颜勇吴帆王鹏珍王百林暨南大学附属广州红十字会医院肝胆外科 510020 贵州医科大学临床医学院贵阳550000 广州市创伤外科研究所 510020

由于肝切除或肝移植手术需要进行一定时间入肝血流阻断,导致发生肝缺血-再灌注损伤(HIRI)不可避免,尤其伴有脂肪肝、肝硬化时,严重影响手术预后。槲皮素是一种来自大自然的类黄酮化合物,具有抗炎、抗氧化、抗衰老、抗癌等药理活性。近... 详细信息

由于肝切除或肝移植手术需要进行一定时间入肝血流阻断,导致发生肝缺血-再灌注损伤(HIRI)不可避免,尤其伴有脂肪肝、肝硬化时,严重影响手术预后。槲皮素是一种来自大自然的类黄酮化合物,具有抗炎、抗氧化、抗衰老、抗癌等药理活性。近年来的研究表明,槲皮素在心、脑、肾、肝等多器官的功能失调保护机制中发挥重要作用,且其抗HIRI的肝保护作用逐渐成为目前研究的热点。总结文献发现,槲皮素在抗氧化应激、减轻炎症反应以及抗细胞凋亡与自噬等方面均能发挥不错的作用,这使得其用于临床改善HIRI具有良好的潜力。

关键词：槲皮素肝脏缺血-再灌注损伤抗氧化应激抗炎

锌指蛋白22基因对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响

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中华肝胆外科杂志 2023年第8期29卷 609-614页

作者：李钦国吴帆谭国钳王百林暨南大学附属广州红十字会医院肝胆外科广州510220

目的检测锌指蛋白22(ZNF22)基因在肝癌组织中的表达水平并观察ZNF22对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响。方法收集2020年1月至2021年6月在暨南大学附属广州红十字会医院行手术切除的32例肝细胞癌患者的肝癌组织及癌旁肝组织标... 详细信息

目的检测锌指蛋白22(ZNF22)基因在肝癌组织中的表达水平并观察ZNF22对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响。方法收集2020年1月至2021年6月在暨南大学附属广州红十字会医院行手术切除的32例肝细胞癌患者的肝癌组织及癌旁肝组织标本。分析ZNF22基因在32例肝癌标本以及癌症基因组图谱数据库371例肝癌样本中的表达水平。构建ZNF22基因敲减的SNU-449和JHH-7肝癌细胞系。通过细胞增殖实验、平板克隆形成实验、细胞凋亡实验、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验、裸鼠皮下成瘤、尾静脉注射转移和小动物活体成像实验,观察ZNF22对肝癌细胞的影响。结果ZNF22基因在肝癌组织中表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。ZNF22敲减的SNU-449和JHH-7细胞的生长速度均低于相应的对照组细胞,差异有统计学意义(均P<0.001)。相比阴性对照组,ZNF22敲减的SNU-449细胞形成的克隆数目减少(26±8比59±5),细胞凋亡水平增加(6.60%±0.22%比2.38%±0.30%),细胞的迁移率降低(14.47%±6.42%比68.84%±8.01%),侵袭细胞数也降低(48.00±2.23比179.00±4.81),差异均有统计学意义(均P<0.05)。ZNF22敲减的JHH-7细胞注射于裸鼠皮下后未见明显肿瘤生长,全身荧光表达量低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),裸鼠解剖观察亦未见转移瘤。结论ZNF22在肝癌组织中的表达升高,ZNF22基因敲减抑制了肝癌细胞的生长、增殖、侵袭、转移和成瘤能力,并可诱导肝癌细胞的凋亡。

关键词：癌,肝细胞锌指蛋白22 增殖凋亡转移

甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因对肝癌细胞的影响

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中华肝胆外科杂志 2023年第6期29卷 455-461页

作者：陆钢李阳光吴帆王百林暨南大学附属广州红十字会医院肝胆外科广州510220

目的检测甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(Mus81)在肝细胞癌中的表达,并观察Mus81对人肝癌细胞迁移、侵袭及转移能力的影响。方法32例组织标本选自2020年1月至2021年6月在暨南大学附属广州红十字会医院进行手术切除的肝细胞癌患者的肝... 详细信息

目的检测甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(Mus81)在肝细胞癌中的表达,并观察Mus81对人肝癌细胞迁移、侵袭及转移能力的影响。方法32例组织标本选自2020年1月至2021年6月在暨南大学附属广州红十字会医院进行手术切除的肝细胞癌患者的肝癌组织及相应癌旁组织。分析Mus81在32例肝癌标本、癌症基因组图谱数据库的374例肝癌样本、人正常肝细胞系HL-7702和人肝癌细胞系JHH-7、Huh-7、Hep3B中的表达水平,构建Mus81敲减的JHH-7、Huh-7和过表达的Hep3B肝癌细胞系,通过划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验和裸鼠尾静脉注射转移实验观察Mus81对肝癌细胞的影响。结果Mus81在肝癌组织或细胞系中的表达量高于癌旁组织或正常肝细胞系,差异有统计学意义(均P<0.05)。Mus81敲减的Huh-7肝癌细胞的迁移率、转移及侵袭细胞数分别为22.24%±2.16%、49.04±5.62、3.81±1.08,阴性对照组分别为26.89%±1.15%、86.81±4.79、19.78±3.30,两组比较差异有统计学意义(t=4.24、26.59、23.92,均P<0.01);Mus81过表达的Hep3B肝癌细胞迁移率、转移及侵袭细胞数分别为80.57%±5.12%、18.74±8.07、33.81±8.44,均高于空载体组的64.17%±7.20%、10.96±5.32、3.04±1.13,差异有统计学意义(t=4.15、4.18、18.78,均P<0.01)。裸鼠尾静脉转移实验显示,注射Mus81敲减组JHH-7细胞的裸鼠总荧光量、转移瘤重量均低于对照组,且肾、脊柱、颈部、腋下及皮下的转移率均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论Mus81基因在肝癌中表达上调,且可促进肝癌细胞的迁移、侵袭、转移能力,提示Mus81可能是一个潜在的肝细胞癌治疗靶点。

关键词：癌,肝细胞 Mus81基因侵袭转移动物模型动物活体成像

肝细胞癌坏死性凋亡相关长链非编码RNA预后风险模型的建立与评估

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中华实验外科杂志 2022年第12期39卷 2443-2446页

作者：肖俊豪颜勇王百林贵州医科大学临床医学院贵阳550000 暨南大学附属广州红十字会医院肝胆外科 510220

目的:基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库建立肝细胞癌(HCC)的坏死性凋亡相关长链非编码RNA(NRlncRNA)预后风险模型。方法:从TCGA中下载377例HCC患者样本转录组数据和临床资料(包括374个HCC组织和50个癌旁组织),通过对坏死性凋亡相关基因和... 详细信息

目的:基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库建立肝细胞癌(HCC)的坏死性凋亡相关长链非编码RNA(NRlncRNA)预后风险模型。方法:从TCGA中下载377例HCC患者样本转录组数据和临床资料(包括374个HCC组织和50个癌旁组织),通过对坏死性凋亡相关基因和lncRNA进行共表达分析确定NRlncRNA;筛选两种组织的差异性,用于后续分析。对377例临床资料进行预处理共筛选到合格的343例样本,随机分组为训练集(172例)和测试集(171例)。在训练集中通过单因素Cox、LASSO、多因素Cox分析确定预后风险模型,计算风险评分,按照风险评分的中位值分为高、低风险组;采用Kaplan-Meier法对两组患者进行生存分析,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线对预后风险模型进行效能评估。在测试集和整个队列进一步验证。分析高、低风险模型组间生物学通路富集和免疫相关功能的差异。两组间比较通过Wilcoxon检验完成。结果:共筛选到362个NRlncRNA,差异分析筛选出85个差异NRlncRNA,最终筛选出6个NRlncRNA组成的预后风险模型,该模型对训练集患者1年、3年和5年的生存预测性能曲线下面积(AUC)值分别为0.833、0.790和0.803;高风险组患者的总生存期明显低于低风险组(P<0.05)。测试集和整个队列中也具有良好的预测效能。进一步分析表明免疫细胞及功能在高、低风险组中存在不同程度的差异。结论:基于6个NRlncRNA建立预后风险模型可以有效的预测HCC患者的生存预后,风险评分为HCC独立的预后因素。

关键词：肝细胞癌坏死性凋亡长链非编码RNA 预后免疫

基于裸鼠模型研究EGFL9对肝癌细胞增殖、转移能力的调控作用

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暨南大学学报:自然科学与医学版 2023年第4期44卷 339-346页

作者：李伟锋谭国钳吴帆王百林暨南大学附属广州红十字会医院肝胆外科广东广州510220

目的:旨在通过裸鼠模型分析EGFL9对肝癌细胞增殖、转移能力的影响。方法:通过慢病毒介导的小干扰RNA技术构建EGFL9沉默的JHH-7肝癌细胞系。采用MTT生长曲线分析EGFL9对JHH-7肝癌细胞增殖能力的影响。采用裸鼠皮下成瘤实验和尾静脉注射... 详细信息

目的:旨在通过裸鼠模型分析EGFL9对肝癌细胞增殖、转移能力的影响。方法:通过慢病毒介导的小干扰RNA技术构建EGFL9沉默的JHH-7肝癌细胞系。采用MTT生长曲线分析EGFL9对JHH-7肝癌细胞增殖能力的影响。采用裸鼠皮下成瘤实验和尾静脉注射转移实验观察EGFL9基因在动物活体内对JHH-7肝癌细胞增殖、转移能力的影响。结果:荧光显微镜观察结果显示JHH-7shEGFL9组和JHH-7shCtrl组肝癌细胞慢病毒感染效率高于80%,qRT-PCR检测结果显示JHH-7shEGFL9组EGFL9干扰效率达98.3%,提示EGFL9沉默的JHH-7人肝癌细胞系构建成功。MTT生长曲线结果提示,JHH-7shEGFL9组肝癌细胞的增殖能力明显低于JHH-7shCtrl组(P0.05)。结论:沉默EGFL9基因可明显抑制裸鼠体内肝癌细胞的增殖和远处转移,提示其可能是一个潜在的肝癌治疗靶点。

关键词：肝细胞癌 EGFL9 增殖转移裸鼠