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基于免化学氧化技术的5hmC的检测及基于纳米金技术的DTT的检测

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基于免化学氧化技术的5hmC的检测及基于纳米金技术的DTT的检测

作者：王瑞鹏河北大学

学位级别：硕士

5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)是一种重要的DNA甲基化修饰,与疾病的产生有着重要联系。当前5hmC的定量分析方法中,样品前处理大部分用到了化学试剂。这些方法不仅步骤繁琐,还会对DNA造成一定的损伤。因此,有必要建立操作简便、不使用化学试剂的5... 详细信息

5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)是一种重要的DNA甲基化修饰,与疾病的产生有着重要联系。当前5hmC的定量分析方法中,样品前处理大部分用到了化学试剂。这些方法不仅步骤繁琐,还会对DNA造成一定的损伤。因此,有必要建立操作简便、不使用化学试剂的5hmC定量分析方法。二硫苏糖醇(DTT)是一种巯基保护剂,在生物化学和细胞生物学中有着广泛的应用。当前,DTT的检测分析方法常见的有荧光探针法和液质联用法,但是这些分析方法有的需要耗费大量的有机试剂,有的需要设计合成特定探针,有的步骤繁琐,花费时间较长。因此,建立一种快速、便捷的DTT检测方法非常有必要。本论文的具体研究内容如下:一、基于免化学氧化法和连接-实时定量荧光PCR扩增技术,建立了一种步骤简便、特异性好的特定位点5hmC检测方法,实现了对鼠脑DNA中特定位点5hmC百分比含量的检测。该方法分别用T4噬菌体β-葡糖基转移酶(β-GT)和Aba SI限制性内切酶对目标链进行糖基化和酶切处理,使用连接酶连接Hairpin探针和处理后的目标链,之后利用实时定量荧光PCR技术对连接产物进行扩增,实现检测5hmC的目的。该样品处理方法不使用化学试剂,简化了实验步骤,避免了对DNA样品的损伤。用建立的分析方法检测了特定位点5hmC的含量和胞嘧啶的总含量。另外,本文将该方法应用到了鼠脑DNA样品中某一特定位点5hmC的百分比含量的测定。二、基于不对称PCR技术和便携式血糖仪检测5hmC。该方法使用免化学氧化的方法对目标链5hmC进行处理,之后用连接酶连接Hairpin探针和处理后的目标链,使用不对称PCR技术扩增出单链,利用磁珠捕获分离单链产物。之后使用磁珠上的单链产物与蔗糖转化酶修饰的探针进行杂交,利用蔗糖转化酶将蔗糖转化为葡萄糖。通过便携式血糖仪检测葡萄糖浓度,间接实现对5hmC的便捷检测。该方法不需使用昂贵仪器,成本低。三、线性探针介导的连接-PCR反应检测5hmC。该方法使用免化学氧化的方法对目标链进行处理,用线性探针进行连接反应,结合实时定量荧光PCR技术对连接产物进行扩增,实现5hmC的检测。相较于Hairpin探针,线性探针可以有效降低非特异扩增。四、基于DNA修饰的Au NPs可视化检测DTT。此方法使用单链DNA修饰的金纳米粒子检测DTT。DTT中的双巯基可以破坏单链DNA与金纳米粒子之间的作用力,使得单链DNA释放,体系颜色由红色变为蓝色,裸眼观察体系颜色变化即可实现对DTT的可视化检测。测定特定波长下体系的吸光度,利用吸光度比值与DTT浓度的关系可快速定量检测DTT。此方法不仅步骤简便,耗时少,而且干扰较小。

关键词：免化学氧化 5-羟甲基胞嘧啶扩增技术金纳米粒子二硫苏糖醇

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外商直接投资与中国对外贸易关系的实证分析

商业时代 2006年第33期 39-40页

作者：王瑞鹏江南大学商学院江苏无锡214112

本文拟将时滞因素引入多元回归模型,以中国为研究对象并展开分析,探讨FDI和中国对外贸易的关系,以及FDI和中国出口国际竞争力的关系。并提出相关的对策和建议。

关键词：外商直接投资贸易结构国际竞争力

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新疆高校核心竞争力研究

新疆高校核心竞争力研究

作者：王瑞鹏石河子大学

学位级别：硕士

二十年来,中国高等教育管理体制改革不断深入。2000年,条块分割的管理体制基本上被打破。随着政府扶强战略、高校大合并、隶属关系调整、民办高校加盟等现象的出现,中国高校之间的竞争日益加剧。上述情况对于以中小型高校占多数的新疆... 详细信息

二十年来,中国高等教育管理体制改革不断深入。2000年,条块分割的管理体制基本上被打破。随着政府扶强战略、高校大合并、隶属关系调整、民办高校加盟等现象的出现,中国高校之间的竞争日益加剧。上述情况对于以中小型高校占多数的新疆高校无疑形成了巨大的压力,为了保证新疆高校在今后的竞争中取胜,必须提升新疆高校整体的竞争优势。因此,研究新疆高校核心竞争力很有必要。论文采用实证研究与理论研究相结合的方法。在理论研究方面,论文借鉴企业内生成长理论,对高校知识的内在积累机制进行透彻的分析,指出高校核心竞争力的本质是高校全体员工的知识整合能力。接着,依据高校资源要素对核心竞争力形成的贡献不同,将高校核心竞争力的构成要素分为一般要素与核心要素,为高校核心竞争力评价指标体系的构建打下坚实的理论基础;在实证研究方面,论文选取12所“省部”共建综合型高校与8所“省属”多科型高校为研究对象,建立评价指标体系,收集数据,对这两种类型的高校分别进行主成分分析。研究结果表明:首先,与国内其他同层次高校相比,新疆大部分高校缺乏竞争力。造成这种情况的主要原因是,新疆高校的学科缺乏竞争力。其次,政府政策倾向程度和高校文化氛围也是影响高校核心竞争力水平高低的主要因素;第三,新疆综合型高校与多科型高校的提升策略不同,即综合型高校应主要是进行科技创新提升自身的核心竞争力,而多科型高校的应主要通过人才培养来提升自身的核心竞争力。基于上面的研究结果,论文提出了新疆高校核心竞争力的提升对策:制定科学合理的办学目标、建立高校协调发展机制、强化学科建设、全力打造高水平的核心人才队伍、优化人才培养结构等5条措施。

关键词：新疆高校核心竞争力

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青岛市国有资产监督管理信息系统建设研究

青岛市国有资产监督管理信息系统建设研究

作者：王瑞鹏山东大学

学位级别：硕士

目前,我国国有资产监督管理信息系统的发展还不成熟,国有资产监督管理信息系统的建设功能过于单一,还主要停留在实现公文流转等办公自动化和企业日常财务报表的采集上,系统的分析和决策支持功能相对较弱,尤其在事中监督和事前预测方面,... 详细信息

目前,我国国有资产监督管理信息系统的发展还不成熟,国有资产监督管理信息系统的建设功能过于单一,还主要停留在实现公文流转等办公自动化和企业日常财务报表的采集上,系统的分析和决策支持功能相对较弱,尤其在事中监督和事前预测方面,不能实现以管理信息系统辅助国有资产监督管理的目的,少数地方虽然实现了个别业务的管理信息系统,相对于国有资产监督管理的全局来说,无法满足当前国有资产监督管理的需要。出现这种情况的根本原因是由于国资委成立时间较短,现有的职能范围的部分业务管理流程还不太明晰,部门之间业务管理有重叠,系统建设的全局性不强,建设过于分散。本文针对以上问题,对如何能更有效的利用管理信息系统辅助国有资产监督管理,通过建立管理信息系统来进一步梳理国有资产监督管理业务,优化整合国有资产监督管理业务流程等,以青岛市国资委国有资产监督管理为例做出相关研究。本文共分6章。第1章是引言部分,对青岛市国有资产监督管理信息系统分析设计的背景进行了综述,并对国内外国有资产监督管理发展模式及信息系统发展现状进行了分析。第2章是理论与应用综述,对诺兰模型、信息系统开发理论、业务流程再造等理论及其在国有资产监督管理信息系统分析设计中的应用进行了描述。第3章是青岛市国有资产监督管理信息系统的现状与问题分析,以青岛市国资委为例,对其业务现状与存在问题、系统现状与存在问题以及信息系统建设的必要性进行了分析。第4章是青岛市国有资产监督管理信息系统整体规划与系统分析,对青岛市国有资产监督管理信息系统进行了整体规划,并对每个系统用业务流程图的方式进行了分析。第5章是青岛市国有资产监督管理信息系统的实施描述,这一章对信息系统的实施策略、实施过程进行了简要描述,并对信息系统的预期实施效果进行了评价。第6章是论文总结,对全文进行了概括性的描述。本论文的创新点主要在于,一是论文研究了如何利用信息系统全面辅助国资监管。虽然各地都在局部的国有资产监督管理业务中应用了信息系统辅助,但是利用延伸到国有资产监督管理各项业务中的信息系统全面辅助国有资产监督管理的情况在全国范围内尚不多见。二是论文研究了如何利用信息系统支持国资监管决策。目前大多数国有资产管理部门中的信息系统都集中于OA、财务等方面,切实应用到业务流程中辅助日常业务,并对业务信息进行分析继而提供决策辅助的系统为数不多。三是论文研究了如何利用信息系统避免信息数据失真。目前主观上瞒报漏报以及上报数据不规范,客观上由于业务重叠交叉造成信息统计口径不一致等问题会造成信息数据的失真。

关键词：信息系统国有资产监督管理

考虑台基影响的应县木塔地震模拟分析及加固方法的探讨

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考虑台基影响的应县木塔地震模拟分析及加固方法的探讨

作者：王瑞鹏西安建筑科技大学

学位级别：硕士

本文以应县木塔塔身结构及考虑台基作用的整体结构的动力特性及地震作用下的响应为研究目标,应用ANSYS APDL大型有限元分析软件,分别建立了基于现场测绘数据及相关试验结果所建立的应县木塔局部模型、应县木塔塔身结构模型及考虑台基作... 详细信息

本文以应县木塔塔身结构及考虑台基作用的整体结构的动力特性及地震作用下的响应为研究目标,应用ANSYS APDL大型有限元分析软件,分别建立了基于现场测绘数据及相关试验结果所建立的应县木塔局部模型、应县木塔塔身结构模型及考虑台基作用下的整体结构模型。并对上述模型进行了四种波形八种工况作用下双向地震波或三向地震波瞬态模拟加载。以柱顶位移、最大加速度、最大层间位移角等参数为参考对象,研究了并对比了应县木塔及考虑台基影响下的整体结构在多频谱特性地震波作用下的地震响应。模拟结果表明,夯土八角台基具有较高的自振频率,且频率分布较为密集,相邻频率相差不大;塔身木结构自振频率变化幅度较大,在低阶频率范围内,应县木塔台基对于木塔本身动力特性的影响基本可忽略不计。但当上部塔体高阶频率与台基频率接近时,整体结构自振频率将发生改变;以五层明层柱顶位移大小为参考指标,对四条地震波所引起的木塔地震反应大小排序为:Tianjin波>El-Centro波≈Taft波>Lanzhou波。从对八种工况下的柱顶位移增幅百分数及动力系数增幅求平均值的结果可以看出,整体结构柱顶侧移较木结构增幅在30%上下,且增大幅度随地震动增大而增加。柱顶动力系数增幅较小,基本维持在8%左右。考虑到台基对于地震动的放大效果不可忽略,因此在对木塔进行地震反应分析时需考虑台基对上部木结构的影响。本文亦对破坏倾斜状况较为严重的二层明层提出了一种基于专利的采用新型柱间耗能加固装置的加固方案。并以此方案为研究客体,应用ANSYS APDL中的地震反应谱分析方法,对在专利中所提出的“引入粘滞性阻尼器的新型柱间耗能加固装置”在应县木塔加固工程中的工作性能和实用性进行了模拟验证,得到了较好的模拟结果。结果表明,这种新型加固装置对以加固手段限制木塔塔身位移变形的应县木塔修缮思路有一定的借鉴作用。

关键词：应县木塔台基有限元数值模拟地震时程分析反应谱分析应县木塔加固

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热轧过程中轧机耦合振动机理研究

热轧过程中轧机耦合振动机理研究

作者：王瑞鹏燕山大学

学位级别：硕士

随着工业技术的发展，热轧板带生产规格越来越薄，同时对带钢生产尺寸精度和板形质量要求也越来越高。薄板带热轧生产中频繁出现轧机异常振动的现象，损害机械设备和电气控制设备，影响板带产品的板形、板厚和表面质量，严重时甚至引发... 详细信息

随着工业技术的发展，热轧板带生产规格越来越薄，同时对带钢生产尺寸精度和板形质量要求也越来越高。薄板带热轧生产中频繁出现轧机异常振动的现象，损害机械设备和电气控制设备，影响板带产品的板形、板厚和表面质量，严重时甚至引发断带、堆钢等生产事故。轧机的异常振动包含轧机垂直振动、工作辊水平振动和主传动系统扭振，这三种振动形式复杂且交叉影响，增加振动模型的建立的复杂程度，不利于理论分析。本文分析轧机垂直振动、轧辊水平振动和轧机主传动系统的扭振三种振动的影响;基于不同属性振动的耦合影响与轧制力对机架水平刚度的影响，建立轧机系统振动模型;分析轧机耦合模型的振动特性，分析轧机振动机理;并结合生产数据，分析不同工艺与不同结构下的轧机振动特性，分析不同参数对轧机振动的影响。本课题结合首钢迁钢1580热轧机组的参数进行仿真分析，验证不同参数对轧机振动的影响;分析热轧薄带钢时频繁发生异常振动的原因，并提出合理的改进优化建议。进行轧机生产测试分析，对比仿真结论，验证模型的可靠性;进行抑振方案实验，对实验效果跟踪监测，分析改进方法的可靠性;对今后轧机耦合振动研究和轧机生产抑振方案制定具有一定的理论支撑和参考价值。

关键词：热轧垂直振动水平振动扭振固有频率耦合振动

关节内注射鸡尾酒式镇痛复合液的近期及远期效果

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关节内注射鸡尾酒式镇痛复合液的近期及远期效果

作者：王瑞鹏河北医科大学

学位级别：硕士

目的:评估全膝关节置换术后关节内注射鸡尾酒式镇痛复合液镇痛的近期及远期效果。方法:由相同的医师组手术治疗的的单侧TKA骨性关节炎(OA)患者40例(40膝),并随机分成两组(A组和B组),分别为20人,A组中有男性患者3名,女性患者17名,年龄54... 详细信息

目的:评估全膝关节置换术后关节内注射鸡尾酒式镇痛复合液镇痛的近期及远期效果。方法:由相同的医师组手术治疗的的单侧TKA骨性关节炎(OA)患者40例(40膝),并随机分成两组(A组和B组),分别为20人,A组中有男性患者3名,女性患者17名,年龄54-76岁,平均(62.75±5.80)岁;B组中有男性患者2名,女性患者18名,年龄51-67岁,平均(59.95±1.04)岁。A组术中采取“鸡尾酒”方案,即:罗哌卡因注射液150 mg、舒芬太尼注射液10ug,加生理盐水至100 ml,对关节周围软组织(包含关节囊、韧带和皮下组织)进行注射。整个过程分为三步。首先,截骨后于关节后方关节囊注射约40ml,注射前轻轻回抽以防止注入腘窝血管。然后,安装假体后在骨水泥固化前,于内外侧副韧带、前方关节囊、骨膜、股四头肌腱、关节囊切口及髌下韧带注射30ml,最后关闭切口及松止血带前在切口周围(皮下组织)注射30ml。B组:术中只给予生理盐水100 ml,不包括罗哌卡因及舒芬太尼,与A组患者操作一致,对关节周围软组织(包含关节囊、韧带和皮下组织)进行注射。若患者术后自觉疼痛无法忍受,可给患者100 mg盐酸曲马多肌注。比较两组患者术后48小时内的患者镇痛药物追加次数、一般情况及不良反应发生情况,术后48小时内及术后1年时膝关节视觉模拟疼痛评分。VAS评分的操作是采用一条约10cm长的尺子,一个面刻有10个刻度,两端各自表示为0分和10分,0分代表了无痛,10分代表了难以忍受的剧痛,中间部分代表了不同程度的疼痛,测试时患者面对着无刻度的一面,让其在标尺上指出能代表自己此时疼痛程度的相应的位置。同时操作者面对有刻度的一面,然后再根据患者标出的位置得到相应的分值。随访时的活动VAS评分通过爬楼梯测试来完成,具体操作如下:让随访患者爬上10阶楼梯(每阶大概15cm高),然后再回到原点。其中慢性疼痛定义为术后1年时在爬楼梯试验中VAS评分大于等于4的疼痛。结果:1两组患者在年龄、性别比例、体重及手术时间等方面均无统计学意义(P>0.05)。2术后48小时内VAS评分A组患者静息时的VAS评分在4h、8h、16h、24h、48h时分别为3.27±0.39,3.46±0.41,4.08±0.31,3.47±0.42,3.33±0.36,活动时的VAS评分在4h、8h、16h、24h、48h时分别为4.14±0.46,4.80±0.44,5.17±0.44,4.62±0.36,4.32±0.30;B组患者静息时的VAS评分在4h、8h、16h、24h、48h时分别为3.38±0.40,4.05±0.29,4.65±0.40,4.48±0.32,3.29±0.37,活动时的VAS评分在4h、8h、16h、24h、48h时分别为4.85±0.38,5.35±0.30,5.74±0.34,5.41±0.36,4.40±0.31。A组患者活动时的VAS评分在术后4h、8h、16h、24h均低于B组,具有统计学差异(P0.05);两组患者静息时的VAS评分在术后4h内的差异无统计学意义(P>0.05),而A组患者术后8h、16h、24h的VAS评分均较B组患者低,差异具有统计学意义(P0.05)。3术后镇痛药物追加次数两组患者术后盐酸曲马多在各个时间段的追加次数无统计学差异(P>0.05)。4术后一般情况两组患者在心率、血氧饱和度及平均动脉压等生命体征上,差异无统计学意义(P>0.05)。5不良反应发生率A组与B组比较,两组患者术后的恶心、呕吐、皮肤瘙痒以及呼吸抑制等不良反应的发生率差异无显著性(P>0.05)。6术后1年随访情况两组患者静息时的VAS评分分别为0.89±0.25和1.06±0.34,无统计学差异(P>0.05);活动时的VAS评分分别为2.81±0.47和3.22±0.68,A组患者VAS评分较B组患者低,具有统计学意义(P<0.05)。A组患者慢性疼痛发生率为5.0%(1/20),B组为30.0%(6/20),B组患者慢性疼痛发生率明显高于A组,具有统计学差异(P<0.05),尚不能排除B组慢性疼痛的发生率是A组慢性疼痛发生率的6倍。结论:关节腔内注射鸡尾酒镇痛可以有效缓解术后急性疼痛,促进早期功能恢复,并且在预防患者的慢性疼痛方面起到了重要作用,是全膝关节置换术后镇痛的良好选择。

关键词：全膝关节置换术术后镇痛药物注射关节内关节周围

FDI对我国劳动力转移和二元经济结构的影响

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FDI对我国劳动力转移和二元经济结构的影响

作者：王瑞鹏江南大学

学位级别：硕士

在全球化不断深化的背景下,我国外商直接投资（FDI）的流入量迅速增加,其流动规模、资本的产业构成亦发生了深刻的变化。我国作为外商直接投资引进最多的发展中国家,有着典型的二元经济结构和周期性、大规模的人口跨区域流动,外商直接... 详细信息

在全球化不断深化的背景下,我国外商直接投资（FDI）的流入量迅速增加,其流动规模、资本的产业构成亦发生了深刻的变化。我国作为外商直接投资引进最多的发展中国家,有着典型的二元经济结构和周期性、大规模的人口跨区域流动,外商直接投资的流入,必然会对我国劳动力的区域布局、产业布局产生重大影响;同时通过产业前向和后向的关联作用,对我国基础设施、公共服务、零部件和原材料供应、中间产品的供应均产生显著的影响,从而深刻改变我国的产业结构、就业结构、经济增长方式、人口流动的规模和方向等宏观经济运行指标。在完成FDI对我国劳动力转移作用机制的理论分析后,本文通过大量的数据调研、文献检索,结合案例分析和问卷调查,深入分析FDI对我国剩余劳动力的拉动效应、FDI在东道地区的就业诱导效应,同时就FDI对我国经济结构的影响进行阶段性的实证考察。最后文章以FDI在我国的重点流入区域-长江三角洲为案例,考察FDI对长三角地区劳动力流入的影响、就业创造效应及其作用的产业路径。文章通过实证计量研究、结合案例得出结论:FDI对我国劳动力转移产生了显著的拉动作用,但到目前为止,FDI未从本质上推动我国二元经济结构的转型,我国的经济结构仍然保持稳定。FDI对劳动力转移的拉动作用主要体现在区域维度（珠三角、长三角和环渤海地区）和产业维度（劳动密集型加工制造业）。文章通过实证分析还得出:FDI引致的“民工流”未能推进城市化进程、FDI未改变我国落后部门的生产方式是FDI未推动二元经济转型的根本原因。而农民工每年一度的“侯鸟式“迁徙,加上农民心理层面和经济层面的原因是“民工流”未推进城市化进程的内在根源。

关键词：外商直接投资劳动力转移二元经济结构转型

网络嵌入、资源整合能力与孵化绩效的关系研究

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网络嵌入、资源整合能力与孵化绩效的关系研究

作者：王瑞鹏武汉理工大学

学位级别：硕士

当前大力提倡创新驱动发展战略背景下,我国孵化器不断扩张,至2020年底全国科技企业孵化器数量达到5843家,孵化器的繁荣发展为初创企业的成功提供了有效的支持。但现在我国孵化器发展偏重规模,市场上孵化器数量过多、同质化竞争严重,服... 详细信息

当前大力提倡创新驱动发展战略背景下,我国孵化器不断扩张,至2020年底全国科技企业孵化器数量达到5843家,孵化器的繁荣发展为初创企业的成功提供了有效的支持。但现在我国孵化器发展偏重规模,市场上孵化器数量过多、同质化竞争严重,服务质量与效率不高。孵化器未来如何提质增效已成为国家关注的焦点。目前孵化器网络化发展已成为主流趋势,在开放式创新的社会环境下,孵化器的网络嵌入行为会为在孵企业带来丰富的创新资源,有效整合这部分资源是提高孵化绩效的关键影响因素之一。但现有文献很少从孵化器层面研究孵化器网络,忽略了孵化器自身资源整合能力对孵化绩效的影响。因此,本研究在开放式创新理论的指导下,选择网络嵌入、资源整合能力和创新孵化绩效为研究变量,构建了理论模型框架,探讨了网络嵌入与孵化绩效关系以及资源整合能力的中介作用。通过对孵化器管理者和员工进行问卷调研获取了220份有效问卷,使用AMOS23.0版软件和SPSS22.0版软件进行实证分析,来验证假设的正确性。实证结果表明,网络嵌入及其两个维度(关系嵌入和结构嵌入)与创新孵化绩效显著正相关;资源整合能力及其两个维度(资源识取能力和资源配用能力)与创新孵化绩效显著正相关;网络嵌入与资源整合能力显著正相关;资源整合能力及其两个维度部分中介网络嵌入与创新孵化绩效之间的正向关系。总体来看,本研究以开放创新理论为研究基础,通过理论分析和实证研究深入探讨了孵化器的网络嵌入对孵化绩效的作用机制,以及在该过程中资源整合能力的中介影响。研究结果不仅揭示了孵化器网络嵌入对孵化绩效的影响机制和路径,弥补了现有文献中对于孵化器自身网络嵌入和能力的研究的不足,具有重要的理论意义。给孵化器提供了建立外部网络进行资源整合的信心,同时强调孵化器需要根据自身条件和外部环境来增强自身的资源整合能力,具有一定的实际意义。

关键词：网络嵌入资源整合能力孵化绩效