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病理性瘢痕研究的进展

中华整形外科杂志 2008年第5期24卷 405-408页

作者：王珍祥李世荣第三军医大学西南整形外科医院重庆400038

增生性瘢痕（hypertrophic scar，HS）和瘢痕疙瘩是特发于人类的病理性瘢痕，是整形外科的常见疾病，也是长期以来国内外学者研究的难点和重点，研究及文献报道每年以50％的速度增长。随着细胞生物学和分子生物学在瘢痕形成机制方面研... 详细信息

增生性瘢痕（hypertrophic scar，HS）和瘢痕疙瘩是特发于人类的病理性瘢痕，是整形外科的常见疾病，也是长期以来国内外学者研究的难点和重点，研究及文献报道每年以50％的速度增长。随着细胞生物学和分子生物学在瘢痕形成机制方面研究的深入以及动物模型和瘢痕组织工程的建立，对于其发病机制有了较深一步的认识。

关键词：病理性瘢痕增生性瘢痕分子生物学细胞生物学 scar 瘢痕疙瘩常见疾病整形外科

增生性与非增生性瘢痕中细胞骨架蛋白表达差异的研究

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中华创伤杂志 2002年第7期18卷 413-414页

作者：王珍祥吴军易绍萱第三军医大学附属西南医院烧伤研究所重庆400038

基因芯片是近二十年发展起来的一项新技术。马兵等利用基因苡片的方法，对烧伤后早期的增生性瘢痕相关基因表达变化进行筛选，发现细胞凋亡、免疫相关、细胞骨架和动动、原（抑）癌基因、细胞信号等多种基因参与了增生性瘢痕的发生。据... 详细信息

基因芯片是近二十年发展起来的一项新技术。马兵等利用基因苡片的方法，对烧伤后早期的增生性瘢痕相关基因表达变化进行筛选，发现细胞凋亡、免疫相关、细胞骨架和动动、原（抑）癌基因、细胞信号等多种基因参与了增生性瘢痕的发生。据此，笔者利用多种原位杂交技术，系统动态地研究细胞骨架和运动基因表达变化与瘢痕组织过度收缩之间相互关系，以期为发现治疗增生性瘢痕的新方法寻求理论依据。

关键词：增生性瘢痕非增生性瘢痕细胞骨架蛋白表达

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C-mer在增生性瘢痕中表达与意义

第三军医大学学报 2004年第3期26卷 251-253页

作者：王珍祥李世荣吴军第三军医大学西南医院整形外科重庆400038

目的　原癌基因C mer与增生性病变关系密切。本研究探讨它在增生性瘢痕中所起的作用及意义。方法　收集瘢痕作为研究对象 ,利用原癌基因C mer的基因特异片段制成寡核苷酸探针 ,与瘢痕组织切片和成纤维细胞爬片原位杂交 ,统计学处理后分... 详细信息

目的　原癌基因C mer与增生性病变关系密切。本研究探讨它在增生性瘢痕中所起的作用及意义。方法　收集瘢痕作为研究对象 ,利用原癌基因C mer的基因特异片段制成寡核苷酸探针 ,与瘢痕组织切片和成纤维细胞爬片原位杂交 ,统计学处理后分析其变化规律。结果　早期增生性瘢痕中C mer基因的探针在组织细胞中有较强阳性的反应 ,而非增生瘢痕则阳性反应较低 ,正常皮肤则更少。将增生性瘢痕与非增生瘢痕对比 ,二者差别特别显著。成纤维细胞爬片杂交结果存在相同的结果。结论　原癌基因C mer与瘢痕增生之间存在密切关系。同时 ,抑制该基因的表达 ,有望实现减轻瘢痕增生。

关键词：增生性瘢痕细胞骨架基因原癌基因 C-mer

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前纤维蛋白在增生性瘢痕收缩中的作用

中国临床康复 2002年第22期6卷 3362-3363页

作者：王珍祥吴军易绍萱陈希纬解放军第三军医大学西南医院重庆400038

目的探讨前纤维蛋白在增生性瘢痕形成与收缩中所起的作用及意义。方法收集患者不同时期增生与非增生瘢痕作为研究对象,利用前纤维蛋白的基因特异片段,制成寡核苷酸探针与瘢痕组织切片原位杂交,同时,将各标本进行组织块培养,制成成纤维... 详细信息

目的探讨前纤维蛋白在增生性瘢痕形成与收缩中所起的作用及意义。方法收集患者不同时期增生与非增生瘢痕作为研究对象,利用前纤维蛋白的基因特异片段,制成寡核苷酸探针与瘢痕组织切片原位杂交,同时,将各标本进行组织块培养,制成成纤维细胞爬片,进行原位杂交,分析基因在组织与细胞中变化规律。结果前纤维蛋白基因在早期增生性瘢痕中表达均明显强于晚期增生及非增生瘢痕。结论瘢痕增生挛缩与细胞骨架运动的相关基因存在密切关系,而前纤维蛋白起到十分重要的作用。同时,如果抑制该基因的表达,可能实现减轻瘢痕挛缩。

关键词：前纤维蛋白增生性瘢痕收缩

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猴移植皮肤感觉再生的实验研究

中国临床康复 2003年第8期7卷 1246-1247,F002页

作者：王珍祥李世荣吴军解放军第三军医大学西南医院整形外科重庆市400038

目的移植皮肤的感觉再生缺乏深入的实验研究。通过恒河猴额部与手指掌侧无毛皮肤的相互移植,观察无毛皮肤移植后感觉小体再生过程与再生类别。方法实验用恒河猴2只,随机抽取前肢指4个,将指腹与额、臀部的无毛皮对换移植,在3,9个月时切... 详细信息

目的移植皮肤的感觉再生缺乏深入的实验研究。通过恒河猴额部与手指掌侧无毛皮肤的相互移植,观察无毛皮肤移植后感觉小体再生过程与再生类别。方法实验用恒河猴2只,随机抽取前肢指4个,将指腹与额、臀部的无毛皮对换移植,在3,9个月时切取标本进行抗神经丝免疫组化与电镜观察。结果移植皮肤在3个月时神经末梢与触觉小体开始不典型再生;9个月的皮肤内已有典型的再生触觉小体,而上皮细胞—轴突复合体内有神经长入;移植皮肤内有较多的再生触觉小体,上皮细胞—轴突复合体有完整的再生结构。结论移植皮肤内存在感觉小体的再生,这些结构与移植后的功能需要有关。

关键词：猴皮肤移植实验再生感觉小体神经纤维真皮

外用环孢素A联合CTLA4Ig延长异体移植鼠耳存活的研究

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中国修复重建外科杂志 2002年第4期16卷 281-283页

作者：曹川李世荣孙志成王珍祥罗高兴吴军第三军医大学西南医院整形外科重庆400038 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆400038

目的　探讨局部外用环孢素 A(Cs A)联合细胞毒性淋巴细胞相关抗原 4融合蛋白 (CTL A4 Ig)对异体复合组织移植的免疫抑制及诱导免疫耐受的作用。方法　建立吻合血管的同种异体大鼠耳廓移植模型 ,术后在移植耳皮肤表面外涂 Cs A并联合 CTL... 详细信息

目的　探讨局部外用环孢素 A(Cs A)联合细胞毒性淋巴细胞相关抗原 4融合蛋白 (CTL A4 Ig)对异体复合组织移植的免疫抑制及诱导免疫耐受的作用。方法　建立吻合血管的同种异体大鼠耳廓移植模型 ,术后在移植耳皮肤表面外涂 Cs A并联合 CTL A4 Ig腹腔注射治疗 ,观察移植物的排斥反应及存活时间 ,检测移植后受体血清白细胞介素 - 2 (IL- 2 )含量变化。结果　对照组平均存活时间为 (7.8± 1.7)天 ;单纯用 Cs A治疗组为 (15 .2± 1.9)天 ,单纯CTL A4 Ig治疗组为 (16 .6± 2 .1)天 ;Cs A +CTL A4 Ig联合治疗组为 (2 8.8± 3.5 )天 ,与其它各组相比均有统计学意义 (P<0 .0 1) ;且联合治疗组的受体血清 IL - 2含量最低 ,尤以第 5、7天为著 ,与其它各组相比有统计学意义 (P<0 .0 1)。结论　局部外用 Cs A联合 CTL A4 Ig能有效抑制异体复合组织移植排斥反应 ,显著延长移植物存活时间。

关键词：复合组织异体移植环孢素A 细胞毒性淋巴细胞相关抗原4融合蛋白

纳米脂肪混合颗粒脂肪移植在瘢痕性面部凹陷及萎缩治疗中的临床作用及相关实验机制

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中华烧伤杂志 2019年第4期35卷 266-276页

作者：邹彦龙谈希田婷李乐李哲旭程炜王珍祥陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形外科重庆400038

目的了解纳米脂肪混合颗粒脂肪移植在瘢痕性面部凹陷及萎缩治疗中的临床作用,探讨相关实验机制。方法(1)2012年1月—2018年4月,笔者单位收治符合入选标准的瘢痕性面部凹陷及萎缩畸形需行面部脂肪移植患者105例,对其病历资料进行回顾性... 详细信息

目的了解纳米脂肪混合颗粒脂肪移植在瘢痕性面部凹陷及萎缩治疗中的临床作用,探讨相关实验机制。方法(1)2012年1月—2018年4月,笔者单位收治符合入选标准的瘢痕性面部凹陷及萎缩畸形需行面部脂肪移植患者105例,对其病历资料进行回顾性分析。根据患者意愿,54例10~59岁患者(男12例、女42例)接受传统自体单纯腹部/大腿颗粒脂肪移植,纳入单纯移植组;另51例7~63岁患者(男14例、女37例)接受自体腹部/大腿纳米脂肪混合颗粒脂肪移植,纳入混合移植组。自制量表并根据手术前后照片资料,通过面部饱满度、对称度、瘢痕及并发症等情况评估患者术后3、6个月治疗满意度;术后6个月评估患者是否需行二次手术,计算二次手术率;于患者第2次手术时取其第1次手术移植的脂肪,扫描电子显微镜下观察脂肪细胞形态及微血管情况。(2)从1只4周龄雄性SD大鼠腹部脂肪分离培养脂肪源性干细胞(ADSC),取第5代细胞,培养14d,观察细胞形态,免疫荧光法观察细胞波形蛋白和细胞角蛋白18的表达,行成骨、成脂诱导分化鉴定,流式细胞仪检测CD29、CD44阳性细胞率(样本数为3)。取18只4周龄雄性SD大鼠,按随机数字表法分为ADSC移植组、单纯瘢痕组、空白对照组,每组6只。ADSC移植组、单纯瘢痕组大鼠均经背部皮下注射1mL质量浓度为1mg/mL的溶于磷酸盐缓冲液(PBS)中的博莱霉素溶液建立瘢痕模型,3h后ADSC移植组大鼠于前述注射部位注射1×106个悬于0.1mLPBS中的ADSC,单纯瘢痕组大鼠注射0.1mLPBS;空白对照组大鼠于前述2个时间点在相同部位分别注射相同剂量PBS。各组连续注射28d后,取所有大鼠注射区域的全层皮肤组织,行Masson染色观察胶原纤维情况,免疫组织化学法观察α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达并计数阳性细胞。对数据行Mann-WhitneyU检验、χ2检验、单因素方差分析、LSD检验。结果(1)与术前比较,单纯移植组患者术后3个月面部饱满度、对称度更佳且瘢痕颜色更接近周围皮肤,该组患者术后6个月填充容积较术后3个月有所减少;与术前比较,混合移植组患者术后3、6个月面部饱满度、对称度更佳且瘢痕颜色、质地更接近周围皮肤,该组患者术后6个月填充容积未见较术后3个月明显减少的情况。单纯移植组患者在术后3个月内出现脂肪液化、皮下结节形成各1例。混合移植组患者术后3、6个月治疗满意度均明显高于单纯移植组(Z=-2.566、-3.084,P0.05),均明显少于单纯瘢痕组的每20倍视野下(135±13)、(121±23)个(P<0.05)。结论与单纯颗粒脂肪移植比较,纳米脂肪混合颗粒脂肪移植治疗瘢痕性面部凹陷及萎缩患者的填充饱满度更好,填充后效果维持更久,瘢痕质地改善更明显。大鼠瘢痕模型实验显示,其机制可能为ADSC抑制α-SMA和TGF-β1的表达,从而抑制瘢痕形成。

关键词：瘢痕萎缩组织移植凹陷纳米脂肪

重组正反义α-SMA逆转录病毒载体对瘢痕与皮肤成纤维细胞的影响

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第三军医大学学报 2003年第12期25卷 1056-1058页

作者：王珍祥吴军易绍萱陈希炜李世荣第三军医大学附属西南医院整形外科重庆400038

目的　利用α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)基因重组反义和正义逆转录病毒载体 ,探讨α SMA逆转录病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的影响。方法　用含α 平滑肌肌动蛋白cDNA ,重组反义和正义逆转录病毒载体 ,并感染培养的瘢痕和皮肤成纤维细胞 ... 详细信息

目的　利用α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)基因重组反义和正义逆转录病毒载体 ,探讨α SMA逆转录病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的影响。方法　用含α 平滑肌肌动蛋白cDNA ,重组反义和正义逆转录病毒载体 ,并感染培养的瘢痕和皮肤成纤维细胞 ,进行α SMA在蛋白水平表达等的研究 ,观察瘢痕与皮肤成纤维细胞形态学与功能的变化。结果　反义α SMA逆转录病毒抑制了瘢痕成纤维细胞的增殖 ,细胞形态变小 ;α SMA在瘢痕与皮肤成纤维细胞表达降低 ,并随着作用时间延长 ,效果更明显 ;正义α SMA逆转录病毒则具有相反的作用 ,促进α SMA的表达。结论　α SMA重组病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的形态、生长。

关键词：逆转录病毒转染 α-平滑肌肌动蛋白成纤维细胞

免疫共沉淀-蛋白测序技术验证Periostin和SFRP2之间的相互作用

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第三军医大学学报 2009年第21期31卷 2078-2080页

作者：陶熹王珍祥袁顺忠李世荣吴军第三军医大学西南医院整形外科重庆400038 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的验证凋亡相关蛋白基因SFRP2(secreted frizzled-related protein2)和骨母细胞特异性因子-2Periostin(osteoblast-specific factor2)间的相互作用。方法分别构建重组载体pCMV-Myc-SFRP2和pCMV-HA-Periostin经双酶切鉴定正确,共转染HEK293细胞,抗Myc单克隆抗体沉淀Myc-SFRP2相互作用蛋白复合物后,进行SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色,切下目的条带,利用HPLC-Chip/MS纳流液质联用技术进行肽序列分析,经SpectrumMill搜索Swissport数据库后鉴定蛋白质。结果经HPLC-Chip/MS纳流液质联用技术分析,免疫沉淀复合物内可检测出Periostin的表达。结论Peri-ostin与SFRP2间存在相互作用。

关键词：免疫共沉淀相互作用 SFRP2 Periostin 瘢痕疙瘩