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去甲肾上腺素对腹外侧视前区神经元的作用途径研究

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安徽医科大学学报 2021年第7期56卷 1026-1031页

作者：邴利洁张平平程娟张乐莎王烈成安徽医科大学基础医学院生理学教研室合肥230032

目的研究去甲肾上腺素(NA)对腹外侧视前区(VLPO)中两种类型神经元(促睡眠神经元和中间神经元)的作用途径。方法采用全细胞膜片钳技术,通过药理学方法在C57BL/6小鼠脑片上,研究NA对VLPO中两种类型神经元兴奋或抑制作用的途径。通过RT-PC... 详细信息

目的研究去甲肾上腺素(NA)对腹外侧视前区(VLPO)中两种类型神经元(促睡眠神经元和中间神经元)的作用途径。方法采用全细胞膜片钳技术,通过药理学方法在C57BL/6小鼠脑片上,研究NA对VLPO中两种类型神经元兴奋或抑制作用的途径。通过RT-PCR鉴定VLPO脑区NMDA受体表达的类型。结果电生理结果显示,NA(100μmol/L)对VLPO中间神经元的兴奋作用能被NMDA受体阻断剂(AP5)阻断(P<0.05,n=8),不能被AMPA受体阻断剂(CNQX)和γ-氨基丁酸受体阻断剂阻断。NA(100μmol/L)对VLPO促睡眠神经元的抑制作用均不能被AP5、CNQX和氟马西尼(flumazenil)阻断。RT-PCR结果显示NMDA受体的3种亚型(GluN2A、GluN2B、GluN1)在VLPO中均有表达。结论NA对VLPO中间神经元的兴奋作用是通过谷氨酸能神经元释放谷氨酸引起的间接效应,该兴奋效应由VLPO中间神经元上的NMDA受体介导。

关键词：去甲肾上腺素腹外侧视前区谷氨酸受体

豚鼠肠系膜下神经节细胞的5-羟色胺快去极化反应及其受体亚型

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中国药理学通报 2001年第1期17卷 119-120页

作者：王烈成孔德虎胡金兰黄振信马如纯安徽医科大学生理学教研室合肥230032

我们［1］及一些学者［2,3］以往的工作表明, 5-HT 可使大部分豚鼠交感椎前神经节细胞出现快、慢去极化反应，但迄今为止尚未完全明确这一去极化反应由何种 5-HT 受体亚型介导。本工作旨在应用离体神经节细胞内记录，观察不同 5-HT 受... 详细信息

我们［1］及一些学者［2,3］以往的工作表明, 5-HT 可使大部分豚鼠交感椎前神经节细胞出现快、慢去极化反应，但迄今为止尚未完全明确这一去极化反应由何种 5-HT 受体亚型介导。本工作旨在应用离体神经节细胞内记录，观察不同 5-HT 受体亚型拮抗剂对豚鼠肠系膜下神经节(IMG)细胞 5-HT 去极化反应的影响, 并观察 5-HT3 受体亚型激动剂对豚鼠IMG细胞膜电位的作用, 以期阐明 5-HT 快去极化究竟是由何种 5-HT 受体亚型所介导。1 材料与方法实验用豚鼠63只，♀♂不拘，体重200～300 g。击豚鼠后脑致昏并颈动脉放血处死动物。剖开腹腔，迅速摘取 IMG 及其相连的神经, 迅速移入灌流-记录浴槽，并以95% O2与5% CO2饱和的Krebs液(35℃±0.5℃，pH 7.4±0.05)持续灌流(3 ml*min-1)。实验方法同我们以往的报道［4］。 5-HT，赛庚啶(cyproheptadine，5-HT1/2受体拮抗剂)由Sigma 公司生产。MDL 72222(5-HT3受体拮抗剂)和 2-methyl-5-HT(5-HT3受体激动剂)由Research Biochemicals公司提供。将各类5-HT受体拮抗剂分别用克氏液配成所需浓度，以灌流法给药;各类5-HT3受体激动剂分别注入玻璃微电极内，随后将微电极与压力注射装置(Picospritzer, General Valve Co.)相连,其尖端与记录电极靠近,通过压力注射装置定量给药。5-HT则借灌注及压力注射两种方法给药。

关键词： 5-羟色胺肠系膜下神经节受体去极化反应

剥夺小鼠睡眠后促觉醒中枢TMN内小胶质细胞在睡眠-觉醒中的变化

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安徽医科大学学报 2018年第5期53卷 657-664页

作者：洪艳施伍梁悦李晓凤王媛许奇伍龙军王烈成安徽医科大学基础医学院生理学教研室合肥230032 安徽省立医院重症医学科合肥230001

目的探讨剥夺小鼠睡眠后促觉醒中枢结节乳头体核(TMN)内小胶质细胞的变化规律。方法将C57BL/6小鼠随机分为生理盐水自然睡眠组(NS-TODS)、腹腔注射米诺环素自然睡眠组(mino-TODS)、睡眠剥夺生理盐水组(NSSD)和腹腔注射米诺环素后睡眠剥... 详细信息

目的探讨剥夺小鼠睡眠后促觉醒中枢结节乳头体核(TMN)内小胶质细胞的变化规律。方法将C57BL/6小鼠随机分为生理盐水自然睡眠组(NS-TODS)、腹腔注射米诺环素自然睡眠组(mino-TODS)、睡眠剥夺生理盐水组(NSSD)和腹腔注射米诺环素后睡眠剥夺组(mino-SD)。采用脑立体定位埋放电极、多导睡眠描计技术和免疫荧光法观察4组小鼠的睡眠和觉醒时间以及小胶质细胞形态的变化。结果(1)NS-TODS组和mino-TODS组小鼠在觉醒(W)、快速眼动(REM)睡眠以及非快速眼动(NREM)睡眠时间呈昼夜节律变化,两者之间差异无统计学意义;(2)与NS-TODS相比,NS-SD组可见明显的睡眠增加,主要表现在非快速眼动(NREM)睡眠总量增加(P<0.05),觉醒时间减少(P<0.05);(3)与NS-SD组相比,mino-SD组在ZT 5~6时间段内,其觉醒总量增多(P<0.05),睡眠总量减少(P<0.05),但在ZT 6~11时段内,无显著性变化;(4)与NS-TODS相比,NS-SD组睡眠剥夺5 h后,TMN区的小胶质细胞直径明显增大(P<0.01),其荧光强度增强(P<0.05);而mino-SD组睡眠剥夺5 h后,小胶质细胞体积有变小的趋势,但差异无统计学意义。结论 TMN内的小胶质细胞可能参与睡眠-觉醒稳态的调节。

关键词：小胶质细胞觉醒睡眠剥夺结节乳头体核

缝隙连接蛋白36表达变化对帕金森病模型大鼠基底节环路功能的影响

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中国现代神经疾病杂志 2013年第8期13卷 697-703页

作者：高冕王海雷王烈成陈先文安徽医科大学第一附属医院神经内科合肥230022 安徽医科大学生理学教研室合肥30022

目的观察缝隙连接蛋白36(Cx36)在帕金森病模型大鼠纹状体和运动皮质区的表达变化,并探讨缝隙连接功能异常与帕金森病基底节环路功能紊乱间的关系。方法采用6羟多巴胺注射法建立帕金森病动物模型,免疫组织化学染色及Westernblotting... 详细信息

目的观察缝隙连接蛋白36(Cx36)在帕金森病模型大鼠纹状体和运动皮质区的表达变化,并探讨缝隙连接功能异常与帕金森病基底节环路功能紊乱间的关系。方法采用6羟多巴胺注射法建立帕金森病动物模型,免疫组织化学染色及Westernblotting法检测纹状体及运动皮质区Cx36表达变化,免疫荧光双标染色进一步分析纹状体脑啡肽阳性传出神经元及Parvalbumin阳性中间神经元Cx36表达变化。结果 (1)免疫组织化学染色显示,帕金森病组大鼠右侧纹状体及运动皮质区Cx36表达水平高于正常对照组(均P<0.05)。(2)免疫荧光双标染色显示,纹状体脑啡肽阳性神经元数目和Cx36表达水平高于正常对照组(均P<0.05),而Parvalbumin阳性神经元数目和Cx36表达水平低于正常对照组(均P<0.05)。(3)Westernblotting法检测显示,帕金森病组大鼠右侧纹状体[(119.31±8.92)%]及运动皮质区[(138.20±17.88)%]Cx36表达水平高于正常对照组[(104.05±3.82)和(105.27±2.82)%,均P<0.05]。结论帕金森病大鼠右侧纹状体及运动皮质区Cx36表达水平升高,纹状体脑啡肽阳性传出神经元Cx36表达上调,Parvalbumin阳性中间神经元Cx36表达下调。提示缝隙连接异常可能参与帕金森病皮质基底节皮质环路功能紊乱的发生机制。

关键词：帕金森病基底神经节缝隙接合部连接蛋白类免疫组织化学免疫印迹法疾病模型,动物

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促进机能实验技术人员工作的几点探讨

卫生职业教育 2015年第21期33卷 35-36页

作者：解敏王烈成杜鹃张瑾安徽医科大学基础医学院安徽合肥230031 南京医科大学第二附属医院江苏南京210000

机能实验学课程的开展,是医学实验教学改革的必然要求,也对机能实验技术人员提出了更高要求。目前,实验技术人员在教学中地位较低,工作积极性不高,实验能力不强。本文分析了如何从管理层面、自我层面促进实验技术人员的工作,并提出做好... 详细信息

机能实验学课程的开展,是医学实验教学改革的必然要求,也对机能实验技术人员提出了更高要求。目前,实验技术人员在教学中地位较低,工作积极性不高,实验能力不强。本文分析了如何从管理层面、自我层面促进实验技术人员的工作,并提出做好实验工作的建议和措施。

关键词：机能实验实验技术人员工作能力

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颞叶癫痫大鼠睡眠障碍的初步研究

颞叶癫痫大鼠睡眠障碍的初步研究

内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节神经元的形态学和兴奋性研究

2008年中国睡眠研究会第五届学术年会

作者：许奇吴政马嵘王烈成安徽医科大学基础医学院细胞功能实验室美国德州大学北方卫生科学中心

目的:以多导睡眠图为主要指标分析癫痫大鼠的睡眠结构变化及不同睡眠时相特异性痫样放电的发放情况。方法:雄性Wistar大鼠16只,220-260g,运用立体定位技术在右侧海马CA3区微量注射Kainic acid （KA）建立颞叶癫痫动物模型,在大鼠海马CA... 详细信息

目的:以多导睡眠图为主要指标分析癫痫大鼠的睡眠结构变化及不同睡眠时相特异性痫样放电的发放情况。方法:雄性Wistar大鼠16只,220-260g,运用立体定位技术在右侧海马CA3区微量注射Kainic acid （KA）建立颞叶癫痫动物模型,在大鼠海马CA3区的同一位点微量注射等量的生理盐水（NS）作为对照组。定期称量大鼠体重和视频实时监控大鼠行为,并在模型建立8周后利用EBNeuron脑电图机进行多导睡眠图（PSG）描记,对结果进行统计学处理。结果:术后癫痫组大鼠体重明显下降,3天后癫痫组和对照组体重无统计学差异;癫病组大鼠在麻醉清醒后出现痫样发作,发作约在清醒6h后减弱。注射KA后1周发作基本终止,但在1个月后,大鼠又逐渐出现面部肌肉抽动、跌倒、翻滚等自发性发作。8周后PSG描记显示与对照组相比,癫痫大鼠深慢波睡眠时间和异相睡眠时间减少。癫痫大鼠睡眠时痫样放电比率比清醒时升高。结论:KA微量注射法建立的癫痫动物模型能理想地模拟人类颞叶癫痫,癫痫发作能引起睡眠结构的改变,主要表现为觉醒次数增加,深慢波睡眠减少,异相睡眠减少。癫痫动物在睡眠时痫样放电几率明显增加。

关键词：癫痫颞叶多导睡眠图大鼠慢波睡眠异相睡眠睡眠障碍 kainic acid

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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安徽医科大学学报 2013年第11期48卷 1300-1303页

作者：袁莉莉余跃蒋楠陈凤琴王巧民王烈成安徽医科大学附属省立医院消化内科合肥230001 安徽医科大学基础医学院生理学教研室合肥230032

目的探讨内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节神经元的形态学和兴奋性研究。方法取出生10d的大鼠，结肠内给予0．5％乙酸溶液制备内脏高敏感大鼠模型（AA组），对照组（NS组）给予等量0．9％生理盐水。对成年后的大鼠进行结直肠扩张（... 详细信息

目的探讨内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节神经元的形态学和兴奋性研究。方法取出生10d的大鼠，结肠内给予0．5％乙酸溶液制备内脏高敏感大鼠模型（AA组），对照组（NS组）给予等量0．9％生理盐水。对成年后的大鼠进行结直肠扩张（CRD），用腹部回撤反射（AWR）值来评估内脏敏感性。在结肠壁上注射1，1’-二（十八烷基）-3，3，3’，3’-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐（DiI）逆行标记的背根神经节（DRG）神经元为结肠特异DRG神经元，酶解分离神经节成单细胞后，荧光显微镜下观察细胞形态并计数。采用全细胞膜片钳技术记录神经元的阈电位和动作电位频率。结果与NS组比较，AA组大鼠在相同结直肠扩张压力（5．332、7．998、10．664kPa）下AWR值明显增高（P〈O．05）；AA组结肠特异DRG神经元细胞直径为35～45在μm，Ns组为25～35μm；AA组神经元阈电流低于NS组（P〈0．05），2倍阈电流刺激下，引发出的AA组动作电位频率高于NS组（P〈0．05）。结论大鼠结肠特异背根神经节神经元在内脏高敏感后细胞增大且兴奋性增加，这有利于今后更深层次地研究内脏敏感性增高的神经机制。

关键词：内脏高敏感背根神经节形态学膜片钳 1,1’-二(十八烷基)-3,3,3’,3’-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐

左旋多巴诱发异动症大鼠模型的制作及其行为学研究

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安徽医科大学学报 2009年第3期44卷 355-358页

作者：孙慧勤陈先文李芳许奇王烈成李光武安徽医科大学第一附属医院神经内科合肥230032 安徽医科大学生理学教研室合肥230032 安徽医科大学解剖学教研室合肥230032

目的探讨左旋多巴(L-dopa)诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,以及多巴胺受体激动剂与拮抗剂对异动症大鼠不自主运动的影响。方法6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)立体定向注射制备偏侧PD大鼠模型并给予L-dopa+苄丝肼治疗21d,... 详细信息

目的探讨左旋多巴(L-dopa)诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,以及多巴胺受体激动剂与拮抗剂对异动症大鼠不自主运动的影响。方法6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)立体定向注射制备偏侧PD大鼠模型并给予L-dopa+苄丝肼治疗21d,对其异常不自主运动(AIM)进行录像并评分,观察肢体运动功能及旋转行为改变情况。对出现异动症的大鼠给予多巴胺受体激动剂和拮抗剂并观察其行为学改变。结果PD大鼠在接受L-dopa慢性治疗后出现不自主运动,第3天评分:(31.13±0.32)分,肢体运动功能在接受治疗过程中同时改善。D2受体激动剂可诱发大鼠不自主运动(48.24±1.27)分,D2受体拮抗剂可减轻L-dopa诱发的大鼠不自主运动(41.93±2.27)分,但同时拮抗L-dopa运动功能改善效应。结论慢性脉冲式L-do-pa治疗PD大鼠可以诱发大鼠AIM,与人类L-dopa诱导的异动症(LID)具有相似的特点,可作为研究异动症的动物模型。

关键词：左旋多巴帕金森病疾病模型动物

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《泌尿和男性生殖系统》模块教学的体会

考试周刊 2018年第89期 11-12页

作者：王宇翎王烈成安徽医科大学基础医学院

医学整合课程是安徽医科大学课程体系改革的内容之一。在对《泌尿和男性生殖系统》模块教学的过程中,总结出一些心得体会:整合课程的教学方式比较符合学习的认知规律,整合课程的教学质量与师资队伍的建设、教材的编写、教学方式的多样... 详细信息

医学整合课程是安徽医科大学课程体系改革的内容之一。在对《泌尿和男性生殖系统》模块教学的过程中,总结出一些心得体会:整合课程的教学方式比较符合学习的认知规律,整合课程的教学质量与师资队伍的建设、教材的编写、教学方式的多样性、实验课的教学、模块内部教师间的沟通、各模块小组之间的联系、学生反馈信息的重视,有着密切的关系。

关键词：医学整合课程教学质量教学改革