检索结果-南通市图书馆

作者：王炳卫南方医科大学

学位级别：硕士

[课题背景] 前列腺癌(Prostate cancer, PCa)是男性生殖系统最为常见的恶性肿瘤,其发病率为欧美国家男性恶性肿瘤的第1位和死亡率第2位。我国PCa的发病率虽低于欧美国家,但随着生活方式改变、人口老龄化及前列腺特异性抗原(PSA)广泛应... 详细信息

[课题背景] 前列腺癌(Prostate cancer, PCa)是男性生殖系统最为常见的恶性肿瘤,其发病率为欧美国家男性恶性肿瘤的第1位和死亡率第2位。我国PCa的发病率虽低于欧美国家,但随着生活方式改变、人口老龄化及前列腺特异性抗原(PSA)广泛应用于筛查,近年来,PCa的发病率呈明显上升趋势。国内一项PSA筛查研究发现,50岁以上男性的前列腺癌发病率为0.78%,提示中国的前列腺癌实际发病率并不低。因此,寻找前列腺癌有效治疗方法已成为一个急待解决的世界性公共卫生问题。生物体内的大多数蛋白质都以糖蛋白的形式存在,糖蛋白中的糖链直接影响着糖蛋白生物功能的发挥。N-糖链的结构改变是细胞恶性转化的关键步骤,在肿瘤细胞中,复杂糖链的结构发生异常改变,且这种变化与肿瘤侵袭转移密切相关。N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V (N-acetylglucosaminyltransferase V,GnT-V)是一个与肿瘤及肿瘤转移相关的酶,研究表明GnT-V在很多恶性肿瘤中增多,其产物GIcNAcβ1,6Manαl,6结构有利于外链的延伸,已发现该结构与细胞的恶性转化和肿瘤的转移有密切关系。基因治疗是一种有前景的肿瘤治疗手段,RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是近年来迅速发展起来的一项新的基因功能研究手段,它是利用与靶基因同源的小片段双链RNA(dsRNA),即：siRNA,转染靶细胞,促进靶基因mRNA降解,从而特异性诱导转录后基因沉默。将siRNA所对应的模板DNA双链序列克隆入质粒转染细胞,DNA模板在细胞内转录成小片段发夹状]RNA (shRNA),与化学合成的小干扰RNA (siRNA)具有相同的基因封闭作用,但作用时间可长达2个月,因其特异性和高效性成为当前肿瘤基因治疗的热点。本实验利用RNAi原理和技术,针对前列腺癌中高表达基因GnT-V的shRNA表达质粒,将其转染高转移潜能的人前列腺癌PC-3细胞,观察RNAi对GnT-V基因表达的抑制效应,寻找抑制效率较高的RNAi片段,为寻找有效治疗前列腺癌分子靶向研究中新靶点提供实验依据。 [实验方法] 1、pGPU6/GFP/Neo GnT-V shRNA质粒的构建及鉴定 (1) GnT-V siRNA序列的设计：根据NCBI数据库中GnT-V基因已知序列(NM02410.3)和siRNA设计原则,设计针对GnT-VcDNA的RNA片段,其序列为：GnT-V/1079 sense’GGAAGTGCATGCAACTGTTTA 3’;经Blast检索确认与GnT-V以外的人类已知基因序列无同源性。将其中一对的序列打乱排列,通过Blast分析无同源性超过70%的序列,作为阴性对照干扰序列,序列为：GnT-V/NC sense5’GTTCTCCGAACGTGTCACGT 3’。由上海吉玛公司采用化学合成方法合成上述siRNA。 (2)shRNA转录模板DNA的设计：根据前面设计的siRNA序列,设计模板DNA链,其顺序分别为BbsⅠ酶切位点、正义序列、9nt loop连接序列、反义序列、RNA聚合酶Ⅲ终止子(6个T)、BamHⅠ酶切位点。 (3)质粒pGPU6/GFP/Neo GnT-V的构建及鉴定：先将各组2条模板单链退火处理,再与双酶切后的pGPU6/GFP/Neo质粒连接,构建成重组体质粒。将重组体转化大肠杆菌DH5α,筛选卡那霉素抗性克隆,利用限制性内切酶BbsⅠ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组质粒。大量扩增摇菌后,抽提质粒纯化。 2、细胞培养与转染人前列腺癌细胞株PC-3在含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中,37℃、5%CO2湿度下培养,每周传代2～3次。PC-3细胞培养至对数生长期,参照invitrogen公司Lipofectamine2000TM产品说明书,用脂质体Lipofectamine2000TM将质粒导入PC-3细胞。 3、干扰效果检测 (1)半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GnT-V mRNA表达转染成功后,继续培养PC-3细胞48h后,收集细胞,经Trizo1一步法提取总RNA,采用AMV逆转录合成cDNA,进行PCR反应。GnT-V上游引物为5’AACTCTTGGACCATCCTGGGTTC3’,下游引物为5’TTGCTGCTTTTGGGTGGGTT 3’,产物长度为555bp。PCR反应条件：94℃预变性5min,94℃变性30s,40℃退火30s,72℃延伸30s,共30个循环;最后72℃再延伸10min.以β-actin为内参,上游引物为5’GAMCTACCTTCAACTCCATC3’下游引物为5’CGAGGCCAGGATGGAGCCGCC 3’,产物长度为219 bp。以扩增产物3μl在2%琼脂糖凝胶中

关键词： GnT-V RNAi 前列腺癌侵袭能力实验研究

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GnT-V RNAi对人前列腺癌PC-3细胞侵袭能力的影响

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广东医学 2010年第10期31卷 1263-1265页

作者：王炳卫魏婷李亚辉张健南方医科大学珠江医院肿瘤中心广州510282

目的通过研究GnT-V基因的表达变化对人前列腺癌PC-3细胞迁移、侵袭能力的影响,观察RNAi对PC-3细胞GnT-V表达的抑制效应,寻求较高抑制率的靶点。方法设计针对GnT-V基因的siRNA靶序列,构建siRNA表达载体并转染PC-3细胞,采用趋化运动和侵... 详细信息

目的通过研究GnT-V基因的表达变化对人前列腺癌PC-3细胞迁移、侵袭能力的影响,观察RNAi对PC-3细胞GnT-V表达的抑制效应,寻求较高抑制率的靶点。方法设计针对GnT-V基因的siRNA靶序列,构建siRNA表达载体并转染PC-3细胞,采用趋化运动和侵袭实验评价GnT-V siRNA对人前列腺癌PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建了siRNA表达载体GnT-V siRNA,趋化运动实验表明下调GnT-V表达可显著抑制PC-3细胞的趋化运动性(P<0.01);侵袭实验显示,抑制GnT-V表达可显著抑制PC-3细胞的侵袭能力,PC-3GnT-V/1079组较对照组明显减少(P<0.05)。结论 RNAi可以显著降低人前列腺癌PC-3细胞GnT-V的表达,从而有效抑制PC-3细胞的迁移和侵袭能力,因此,具有较高抑制效率的GnT-V的siRNA可能成为治疗前列腺癌的有效靶点。

关键词： RNA干扰 GnT-V基因前列腺癌侵袭能力

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中西医结合治疗慢性前列腺炎的疗效

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广东医学 2008年第8期29卷 1406-1407页

作者：王炳卫卓冰帆刘跃东陈克时南方医科大学江都医院泌尿外科广州510450 南方医科大学中医药学院广州510515

目的探讨中西医结合治疗慢性前列腺炎的临床疗效。方法96例患者符合美国国立卫生研究院（NIH）制定的慢性前列腺炎诊断标准，分为西医治疗组（Ⅰ组，48例）和中西医结合治疗组（Ⅱ组，48例）。Ⅰ组口服左氧氟沙星与特拉唑嗪，Ⅱ组在Ⅰ... 详细信息

目的探讨中西医结合治疗慢性前列腺炎的临床疗效。方法96例患者符合美国国立卫生研究院（NIH）制定的慢性前列腺炎诊断标准，分为西医治疗组（Ⅰ组，48例）和中西医结合治疗组（Ⅱ组，48例）。Ⅰ组口服左氧氟沙星与特拉唑嗪，Ⅱ组在Ⅰ组的基础上加服中药前列康汤，治疗6—8周后，按慢性前列腺炎症状评分（NIH—CPSI）和前列腺液白细胞计数（EPS—WBC）评估疗效，观察两组有效率及副作用发生率。结果Ⅰ，Ⅱ组NIH—CPSI分别为（13．2±4．8）分和（10．3±4．3）分，较治疗前均显著下降（P〈0．01），治疗后两组NIH-CPSI与EPS—WBC均差异有显著性（P〈0．05）；Ⅰ，Ⅱ组总有效率分别为79．2％和93．8％，差异有显著性（P〈0．05）；副作用发生率分别为10．4％和4．2％。结论中西医结合治疗慢性前列腺炎疗效显著，可明显改善症状，提高生活质量，且副作用应少。

关键词：前列康汤慢性前列腺炎中西医结合治疗

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维胃方对胃溃疡大鼠治疗作用的实验研究

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新中医 2009年第1期41卷 93-95页

作者：卓冰帆刘晓伟肖卫平王炳卫贺红燕南方医科大学中医药学院中医临床基础教研室广东广州510515 南方医科大学江都医院外科广东广州510450

目的:观察维胃方治疗实验性胃溃疡的疗效及其机制。方法:采用冰醋酸制备大鼠胃溃疡模型,各治疗组造模3d后予维胃方高、中、低剂量及雷尼替丁灌胃7d;并设正常组、模型组及对照组。处死大鼠检测胃液pH值、溃疡指数,测定胃黏膜前列腺素E_2(... 详细信息

目的:观察维胃方治疗实验性胃溃疡的疗效及其机制。方法:采用冰醋酸制备大鼠胃溃疡模型,各治疗组造模3d后予维胃方高、中、低剂量及雷尼替丁灌胃7d;并设正常组、模型组及对照组。处死大鼠检测胃液pH值、溃疡指数,测定胃黏膜前列腺素E_2(PGE_2)含量,并作组织病理学观察。结果:干预后雷尼替丁组、维胃方高、中、低剂量组溃疡指数明显降低,与模型组、对照组比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01);中剂量组降低较雷尼替丁组更明显(P<0.05)。维胃方各剂量组的溃疡抑制率均高于雷尼替丁组。雷尼替丁组、维胃方高、中、低剂量组胃液pH值明显升高,与对照组、模型组比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01)。雷尼替丁组、维胃方高、中、低剂量组PGE_2含量升高,与模型组、时照组比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01);低剂量组升高较雷尼替丁组更明显(P<0.05)。结论:维胃方对实验性胃溃疡具有明显修复治疗作用。其机制可能通过减少胃酸分泌,增加胃黏膜PGE_2含量,从而在抑制攻击因子和增强防御因子两个环节发挥作用。

关键词：胃溃疡维胃方前列腺素E2 大鼠实验研究

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后腹腔镜手术对肾癌患者免疫功能及神经内分泌功能的影响

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中华实验外科杂志 2014年第6期31卷 1187-1189页

作者：王炳卫杨国胜范立新邱晓拂李高远广东省第二人民医院泌尿外科广州510317

目的观察后腹腔镜手术对局限性肾癌患者免疫功能及神经内分泌功能的影响，评价后腹腔镜手术的临床疗效。方法分析2010年1月至2013年1月我科采用后腹腔镜根治性肾切除术（LRN组，36例）及开放性根治性肾切除术（ORN组，27例）治疗肾癌患... 详细信息

目的观察后腹腔镜手术对局限性肾癌患者免疫功能及神经内分泌功能的影响，评价后腹腔镜手术的临床疗效。方法分析2010年1月至2013年1月我科采用后腹腔镜根治性肾切除术（LRN组，36例）及开放性根治性肾切除术（ORN组，27例）治疗肾癌患者的临床资料。经术前B超、CT、MRI和术后病理诊断为肾细胞癌，临床分期均为T1-T2N0M0。肿瘤直径约2．2—9．8cm，平均5．6cm，单发。评估两种术式的手术时间、术中出血量、术后住院时间，并检测患者手术前后血液的免疫指标（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋）和神经内分泌指标[β-内啡肽、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇]。结果所有手术均顺利完成，围术期未出现严重并发症。LRN、ORN组的术中出血量分别为（95．0±29．5）和（112．8±31．3）ml（P〈0．05）；术后住院时间分别为（7．1±1．3）和（8．7±1．7）d（P〈0．05）。两组手术时间差异无统计学意义（P〉0．05）。LRN组术后CD3^＋、CD4^＋及CIB^＋／CD8^＋明显高于ORN组（P〈0．05）；且LRN组术后β-内啡肽、ACTH及皮质醇水平明显低于ORN组，差异有统计学意义（P〈0．05）。随访3—33个月，平均14个月，2例失访，随访患者无远期并发症，影像学检查未见肿瘤复发或转移。结论后腹腔镜根治性肾切除术具有视野清晰、创伤小、术中出血少、术后恢复快、住院时间短等优点，且腹腔镜手术治疗局限性肾癌比开放性手术更有保护免疫功能和减轻应激反应的优势。

关键词：肾细胞癌腹腔镜手术根治性肾切除术免疫功能

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两种不同包皮套环术式的疗效比较

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实用医学杂志 2013年第4期29卷 579-581页

作者：王炳卫杨国胜邱晓拂范立新刘百川钟瑞伦广东省第二人民医院泌尿外科广州市510317

目的:探讨包皮套环术的两种术式治疗包茎、包皮过长的方法和疗效。方法:320例包茎、包皮过长患者随机分为两组,分别行两种术式的包皮套环术,第一种内环外置型术式160例(I组),第二种内环内置型术式160例(Ⅱ组),比较分析两组患者的手术时... 详细信息

目的:探讨包皮套环术的两种术式治疗包茎、包皮过长的方法和疗效。方法:320例包茎、包皮过长患者随机分为两组,分别行两种术式的包皮套环术,第一种内环外置型术式160例(I组),第二种内环内置型术式160例(Ⅱ组),比较分析两组患者的手术时间、术中及术后出血量、术后并发症等情况。结果:I组手术时间4～7min,Ⅱ组手术时间3～6min,Ⅱ组较Ⅰ组术中、术后出血少(P<0.05);I组术后并发症发生率为8.8%,与Ⅱ组(3.1%)相比,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:包皮套环术的第二种套环术式较第一种套环术式具有优越性,其操作简单,耗时短,并发症少,值得临床推广。

关键词：包皮套环术包茎包皮过长对比研究

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经尿道前列腺电切术后发生膀胱颈挛缩的影响因素及诊治分析

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医师在线 2024年第10期14卷 24-27页

作者：许晖阳陈波特王炳卫邱晓拂广东省第二人民医院泌尿外科广州510317

目的探讨经尿道前列腺电切术(TURP)后发生膀胱颈挛缩(BNC)的影响因素。方法选取我院2018年3月~2023年6月210例行TURP的良性前列腺增生患者,根据术后是否发生BNC分为两组,对照组(未发生BNC,190例)和研究组(发生BNC,20例),收集所有患者的... 详细信息

目的探讨经尿道前列腺电切术(TURP)后发生膀胱颈挛缩(BNC)的影响因素。方法选取我院2018年3月~2023年6月210例行TURP的良性前列腺增生患者,根据术后是否发生BNC分为两组,对照组(未发生BNC,190例)和研究组(发生BNC,20例),收集所有患者的临床资料,对TURP后发生BNC的影响因素进行单因素分析、多因素Logistic回归分析;对20例发生BNC的患者进行TURP联合曲安奈德膀胱颈注射治疗,分析诊治效果。结果单因素分析结果显示,两组年龄、体重指数(BMI)、是否术前尿潴留行保留导尿、术后尿管牵拉时间、术后尿管留置时间比较,无统计学差异(P>0.05);研究组合并糖尿病、长期吸烟(每天>1包)、合并前列腺炎/泌尿道感染、术前前列腺体积≤30 ml、单位时间切除重量≤0.5 g/min、工作电流强度160 W、电凝切开深度至外膜脂肪层的患者比例多于对照组,差异有统计学意义(P1包)、术前前列腺体积(≤30 ml)、合并前列腺炎/泌尿道感染、单位时间切除重量(≤0.5 g/min)、工作电流强度(160 W)、电凝切开深度至外膜脂肪层是良性前列腺增生患者TURP后发生BNC的主要危险因素;20例发生BNC的患者手术时间为35~90 min,平均(45.25±3.15)min;术中出血5~50 ml,平均(25.67±5.44)ml,无输血;术后尿管留置时间4~7 d,平均(3.01±1.02)d;持续膀胱冲洗1~3 d,平均(2.01±0.25)d。术后随访1年,无尿失禁发生。一次手术治愈17例(85.00%),术后1年内复发3例(15.00%),经再次或三次手术治愈。结论合并糖尿病、长期吸烟、前列腺体积小、合并前列腺炎/泌尿系感染、单位时间切除重量小、工作电流强度大、电凝切开深度至外膜脂肪层是良性前列腺增生患者TURP后发生BNC的危险因素,临床可针对性给予干预措施,以降低BNC的发生风险;发生BNC后采用TURP联合曲安奈德膀胱颈注射治疗的效果较好。

关键词：经尿道前列腺电切术良性前列腺增生膀胱颈挛缩影响因素

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腹腔镜肾上腺切除术不同手术入路对机体免疫功能的影响

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广东医学 2014年第6期35卷 838-841页

作者：王炳卫杨国胜范立新邱晓拂李高远钟瑞伦刘百川广东省第二人民医院泌尿外科广州510317

目的：探讨腹腔镜不同手术入路治疗肾上腺肿瘤的临床疗效，以及其对患者免疫功能的影响。方法对117例采用腹腔镜手术治疗的肾上腺肿瘤患者进行回顾性分析。经腹膜后途径（ RLA组）86例，经腹腔途径（TLA组）31例，术前经B超、CT或MRI等... 详细信息

目的：探讨腹腔镜不同手术入路治疗肾上腺肿瘤的临床疗效，以及其对患者免疫功能的影响。方法对117例采用腹腔镜手术治疗的肾上腺肿瘤患者进行回顾性分析。经腹膜后途径（ RLA组）86例，经腹腔途径（TLA组）31例，术前经B超、CT或MRI等诊断为肾上腺占位，病变位于左侧63例，右侧54例，瘤体最大径1.2～9.8 cm，平均（4.3±1.9） cm，单发。评估两种术式的手术时间、术中出血量、术后禁食时间及术后住院时间，并检测手术前后血液的免疫指标：血白细胞（WBC）、C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和T淋巴细胞亚群（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋）。结果所有患者均顺利完成手术，围术期未出现严重并发症。 RLA组手术时间、术中出血量、术后禁食时间及住院时间依次为（86.2±38.1） min、（43.2±11.4）mL、（1.1±0.6）d、（4.7±2.2）d，TLA组分别为（103.7±54.3）min、（62.9±18.7）mL、（1.9±1.0）d、（6.4±3.1）d；RLA组在减少出血量，缩短手术时间、禁食时间及住院时间均明显优于TLA组（P＜0.05）。 RLA组术后CRP、IL-6水平明显低于TLA组（ P＜0.05）；且RLA组术后CD3^＋、CD4^＋及CD4^＋/CD8^＋明显高于TLA组（ P＜0.05）；两组术后WBC、IgG、IgA、IgM水平差异无统计学意义（P＞0.05）。随访3～35个月，平均（13.4±10.7）个月，3例失访，随访患者无远期并发症，影像学检查未见肿瘤残留及复发。结论与经腹腔途径相比，腹膜后腹腔镜肾上腺切除术具有创伤小、手术时间短、出血少、住院时间短、恢复快、更好地保护免疫功能等优势。在外科医生技术娴熟和选择合适的患者时，腹膜后腹腔镜肾上腺切除术可以成为治疗肾上腺良性肿瘤的首选术式。

关键词：腹腔镜手术肾上腺肿瘤肾上腺切除术免疫功能

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输尿管软镜碎石术和经皮肾镜碎石术治疗小于2cm肾结石对机体应激反应的探讨

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中国内镜杂志 2015年第9期21卷 906-909页

作者：钟瑞伦杨国胜邱晓拂刘百川王炳卫王健富李高远江郁慧广东省第二人民医院泌尿外科广东广州510000

目的探讨输尿管软镜碎石术(DURL)和经皮肾镜碎石术(PCNL)治疗<2 cm肾结石对机体的应激反应。方法选择80例<2 cm肾结石患者,分为两组:输尿管软镜手术组40例(Ⅰ组),经皮肾镜手术组40例(Ⅱ组)。分别于术前、术后1 h、术后第1、3和5天采取... 详细信息

目的探讨输尿管软镜碎石术(DURL)和经皮肾镜碎石术(PCNL)治疗<2 cm肾结石对机体的应激反应。方法选择80例<2 cm肾结石患者,分为两组:输尿管软镜手术组40例(Ⅰ组),经皮肾镜手术组40例(Ⅱ组)。分别于术前、术后1 h、术后第1、3和5天采取患者外周静脉血,测定白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、皮质醇(Cor)、白细胞(WBC)和C反应蛋白(CRP)含量并进行比较。结果Ⅰ组与Ⅱ组患者围手术期IL-6、IL-10、Cor和WBC均于手术后1 h达高峰,CRP于术后第1天达高峰,较术前均有统计学意义(P<0.05),但前者峰值较低。结论 1手术创伤可引起炎性因子的释放增加,抗炎性细胞因子的分泌也随之增加;2输尿管软镜碎石术较经皮肾镜碎石术治疗肾结石对机体的应激反应小,术后恢复更快。

关键词：输尿管软镜经皮肾镜肾结石细胞因子应激反应

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输尿管软镜与微创经皮肾镜治疗最大径2～3 cm肾结石的效果及对肾功能影响的比较

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广东医学 2018年第10期39卷 1525-1527页

作者：王炳卫杨国胜张福霖张涛邱晓拂陈波特广东省第二人民医院泌尿外科广东广州510317

目的比较输尿管软镜钬激光碎石术(FURSL)与微创经皮肾镜碎石术(PCNL)治疗最大径2~3cm肾结石的效果及对肾功能的影响。方法将93例2~3 cm肾结石患者按照随机分配的方式分为两组,其中FURSL 52例(F组),PCNL(P组)41例,比较两组手术时间、术... 详细信息

目的比较输尿管软镜钬激光碎石术(FURSL)与微创经皮肾镜碎石术(PCNL)治疗最大径2~3cm肾结石的效果及对肾功能的影响。方法将93例2~3 cm肾结石患者按照随机分配的方式分为两组,其中FURSL 52例(F组),PCNL(P组)41例,比较两组手术时间、术中出血量、术后住院时间、结石清除率及并发症,并测定两组患者术前24 h和术后24 h血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和血中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)。结果 F组和P组的手术时间分别为(62.5±22.6)min和(49.5±20.3)min,差异有统计学意义(P0.05)。一期结石清除率分别为88.5%和92.3%,差异无统计学意义(P>0.05)。并发症发生率分别为5.8%和15.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。术后24 h两组血NGAL均明显升高,F组由术前(3.8±0.9)μg/L升至(5.9±1.2)μg/L(P<0.01),P组由术前(3.9±0.8)μg/L升至(7.4±1.5)μg/L(P<0.01),P组显著高于F组,差异无统计学意义(P<0.05)。结论 FURSL及MPCNL均是治疗最大径2~3 cm肾结石有效、安全的方法,FURSL在减少住院时间、减少出血量、保护肾功能,术后恢复快,减少并发症方面更具有优势,值得临床推广。

关键词：肾结石输尿管软镜经皮肾镜肾功能

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