检索结果-南通市图书馆

作者：王淋荆广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种革兰阴性非发酵菌,是临床常见的条件致病菌,可以引起呼吸道、泌尿道、皮肤、腹腔和血液等多个部位的感染。且PA在抗生素的影响下可以通过突变等机制产生获得性耐药,使临床治疗面临... 详细信息

目的:铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种革兰阴性非发酵菌,是临床常见的条件致病菌,可以引起呼吸道、泌尿道、皮肤、腹腔和血液等多个部位的感染。且PA在抗生素的影响下可以通过突变等机制产生获得性耐药,使临床治疗面临极大的困境。而质粒介导的耐药基因水平转移是PA产生耐药性的重要机制。细菌在生长过程中向周围释放特定的信号分子,以感知菌群密度变化,当信号分子随着细菌密度增加而积累到一定浓度,达到特定阈值时,信号分子会与受体蛋白相结合,使受体蛋白构象或基团发生变化,启动一系列基因表达,进而调节细菌的群体行为,这种现象被称为群体感应(Quorum sensing,QS)。在革兰阴性杆菌中存在以酰基高丝氨酸内酯(acyl homoserine lactone,AHL)类物质作为信号分子的QS系统,AHL可以与细菌的LuxR类蛋白受体结合,实现对下游一系列基因的调控。有些细菌例如大肠埃希菌、霍乱弧菌等基因组内不含有QS系统,不能产生AHL类信号分子,但是却表达LuxR类蛋白同源分子—SdiA蛋白,可以与周围环境中的AHL结合,同时SdiA也是转录因子,可以通过SdiA box与基因启动子结合,调控基因的表达。接合(Conjugation)是细菌以性菌毛为桥梁进行基因水平转移(horizontal gene transfer,HGT)的过程,是由质粒介导耐药基因传播的主要机制。传统观念认为,接合主要由质粒携带的接合性元件调控。本课题组前期通过构建大肠埃希菌-铜绿假单胞菌接合模型,研究受体菌PA在接合调控中的作用,发现PA QS系统的信号分子AHL具有抑制质粒接合性转移的重要作用。本部分实验利用同样的接合模型,观察在抗生素干预下接合效率的变化,以及QS系统关键基因lasI、rhlI,接合关键基因traI的表达水平的变化,并以细菌非编码小RNA为切入点探讨在抗生素干预下接合表型及相关基因产生变化的具体机制。方法:本实验构建的接合模型是以SM10λπ作为供体菌。该菌的染色体上整合了接合性质粒RP4(含有基因traI),且菌体内含有重组质粒pUCP24T,该质粒是由本实验室构建,以质粒pUCP24为骨架,通过基因重组的方法,插入质粒pCVD442基因组内控制接合反应的起始序列oriT片段,该片段含有松弛酶识别位点,是决定质粒能否进行接合转移的关键,质粒pUCP24T含有庆大霉素(Gm)抗性基因,可以作为接合子筛选的标记。此外有以SM10λπsdiA基因敲除株SM10λπΔsdiA作为供体菌的接合模型,蛋白sdiA是大肠埃希菌内QS系统信号分子的受体蛋白,AHL与SdiA结合后,可以通过sdiA box抑制接合相关基因traI的表达。本实验使用SM10λπΔsdiA突变株,可以排除受体菌所分泌的信号分子对供体菌以及接合效率的影响。本实验受体菌选用铜绿假单胞菌野生株PAO1,以及其lasI、rhlI基因敲除株PAO1ΔrhlI、PAO1ΔlasI,其中rhlI、lasI基因分别调控QS系统信号分子C4-HSL、3-oxo-C12-HSL的合成和分泌,且PAO1对于氨苄西林(APM)天然耐药,只有获得质粒pUCP24T的接合子才同时具有Gm和APM抗性,才能在Gm+APM筛选平板上生长。为了观察在没有QS系统的情况下,抗生素对于接合效率的影响,本实验以同为大肠埃希菌的SM10λπ、EC600分别作为供体菌和受体菌,利用EC600对于利福平(RIF)天然耐药的特性,选用Gm+RIF抗性平板筛选接合子。分别将供体、受体菌培养至对数生长期,使用全自动尿液分析仪测量菌液浓度,按照1:1比例将供、受体菌混合,使其终浓度为1.0×10CFU/mL,取200μL混合菌液,37℃,共培养6h。用抗生素平板筛选接合子并计数,计算其接合效率。收集共培养后的混合菌液,提取RNA并逆转录为cDNA,以cDNA作为模板,使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测QS系统关键基因lasI、rhlI以及接合相关基因tarI的相对表达量。PA基因组不含有tarI基因,而大肠埃希菌基因组没有QS系统,因此使用两种菌的混合菌液提取的全RNA组,不会对qPCR的结果产生影响。利用生物信息学软件IntaRNA对PA中已注释过的sRNA进行靶基因预测,筛选QS系统相关sRNA,qPCR检测筛选到的候选sRNA与QS系统关键基因的相互关系。通过无痕同源重组的方法敲除铜绿假单胞菌PAO1株的prrH基因。利用PCR扩增prrH基因上下游同源臂片段,连接到载体pGSM(含有庆大霉素抗性基因aacC1片段、蔗糖敏感基因sacB片段以及接合转移基因mob片段)上,构建质粒pGSM-PrrHAB,并转化入大肠埃希菌SM10λπ

关键词：铜绿假单胞菌抗生素接合反应群体感应系统细菌非编码小RNA

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穿膜肽标记的荧光素酶蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及其活性研究

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实验技术与管理 2018年第2期35卷 62-66页

作者：余婷玉方志远黄卫王淋荆徐宁广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 中国科学院广州生物医药与健康研究院广东广州510530 广州中医药大学广东省中医院检验医学部广东广州510370

将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在不同的诱导时机、诱导温度、IPTG的浓度和Mg^(2+)浓度条件下培养大肠杆菌,通过SDS-PAGE和发光强度检测分析TAT-LUC的酶活性强度及表达量;将高活性的TAT-LUC与LUC对比检测ATP,通过发光强度分析TAT... 详细信息

将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在不同的诱导时机、诱导温度、IPTG的浓度和Mg^(2+)浓度条件下培养大肠杆菌,通过SDS-PAGE和发光强度检测分析TAT-LUC的酶活性强度及表达量;将高活性的TAT-LUC与LUC对比检测ATP,通过发光强度分析TAT-LUC的敏感性和可靠性。表明:在含Mg^(2+)浓度为50mmol/L的LB培养基中将大肠杆菌培养至OD600为0.6时,加入终浓度为0.5mmol/L的IPTG,22℃诱导16h可获得大量高活性的TAT-LUC;相比LUC,TAT-LUC可以检测到小于10nmol/L的ATP,发光强度与ATP含量呈强相关性(R2=0.99);并且不用裂解细胞,TAT-LUC可直接检测至少40个细胞内ATP;穿膜肽标记的荧光素酶蛋白成功用于检测活细胞内的ATP含量。

关键词：荧光素酶穿膜肽 ATP 表达条件酶活性

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中药对多重耐药铜绿假单胞菌外排泵的作用研究

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分子诊断与治疗杂志 2017年第6期9卷 401-407页

作者：王淋荆曾建明鲁洋蓝锴罗强林冬玲张伟铮陈茶广东省中医院检验医学部广东广州510006 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006

目的研究中药与常用抗生素的相互作用和对多重耐药铜绿假单胞菌(multi drug resistant Pseudomonas aeruginosa,MDR-PA)外排泵的作用。方法采用外排泵抑制剂联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)筛选外排泵阳性MDR-PA,并用实时荧光定量PCR(r... 详细信息

目的研究中药与常用抗生素的相互作用和对多重耐药铜绿假单胞菌(multi drug resistant Pseudomonas aeruginosa,MDR-PA)外排泵的作用。方法采用外排泵抑制剂联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)筛选外排泵阳性MDR-PA,并用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,q PCR)确认外排泵基因高表达菌株。检测10种常用中药对抗生素的作用和对外排泵阳性MDR-PA外排泵基因表达的影响。结果从34株MDR-PA中筛选到5株外排泵阳性菌,q PCR法检测到这5株菌外排泵基因的表达水平是野生型铜绿假单胞菌PAOl的2倍或2倍以上(P<0.05)。黄芩、金银花和夏枯草对环丙沙星有较强的拮抗作用,穿心莲和五倍子对庆大霉素的拮抗作用最强,穿心莲和夏枯草对美罗培南的协同作用最强。穿心莲、金银花、夏枯草和五倍子具有促进外排泵基因表达的作用。结论中药穿心莲、金银花、夏枯草和五倍子可通过促进外排泵基因的表达拮抗抗生素的抗菌作用,临床抗感染治疗时需谨慎使用。

关键词：铜绿假单胞菌多重耐药外排泵穿心莲金银花夏枯草五倍子

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新疆南天山榆树沟含石榴夕线石泥质麻粒岩的超高温变质作用及其构造意义

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岩石学报 2025年第1期41卷 215-236页

作者：荆彦清仝来喜刘兆李超大陆动力学国家重点实验室西北大学地质学系西安710069

天山造山带是中亚造山带的重要组成部分,新疆南天山造山带出露有橄榄岩-麻粒岩地体,其北部榆树沟地区麻粒岩超高温变质作用的确定及P-T-t轨迹的建立为南天山造山带增生造山过程的研究提供了重要依据。本文主要以榆树沟地区3个含石榴夕... 详细信息

天山造山带是中亚造山带的重要组成部分,新疆南天山造山带出露有橄榄岩-麻粒岩地体,其北部榆树沟地区麻粒岩超高温变质作用的确定及P-T-t轨迹的建立为南天山造山带增生造山过程的研究提供了重要依据。本文主要以榆树沟地区3个含石榴夕线石泥质麻粒岩为研究对象,在详细岩相学研究的基础上进行了温压计算、相平衡模拟及锆石U-Pb年龄分析。结果显示其普遍保留了4个阶段的矿物组合:(1)峰前阶段(M1)主要是石榴子石核部与核部包裹体矿物Grt1+Bt1+Pl1+Ilm1+Rt1+Qz1±Ksp1;(2)峰期阶段(M2)由石榴子石幔部和基质矿物核部组成,Grt2+Sil2+Ksp2+Pl2+Ilm2+Rt2+Qz2+Liq2,其温压条件为910~973℃和0.90~1.09GPa;(3)高压麻粒岩相阶段(M3)主要是石榴子石内边部和边部包裹体及基质中矿物的边部,Grt3+Bt3+Sil3+Ksp3+Pl3+Ilm3+Rt3+Qz3+Liq3,其温压结果为845~869℃和1.01~1.14GPa;(4)角闪岩相退变质阶段(M4)以石榴子石的外边部及围绕石榴子石的矿物为代表,Grt4+Bt4+Sil4+Ksp4+Pl4+Ilm4+Qz4±Rt4,其温压条件为701~737℃和0.7~0.8GPa。温压结果指示泥质麻粒岩记录了一条逆时针P-T轨迹。锆石U-Pb年龄分析结果指示原岩沉积是在427Ma之后,超高温变质作用发生在397~409Ma,压力峰期变质作用年龄范围为381~395Ma,退变质年龄结果为355~387Ma。超高温变质作用的热源可能是泥盆纪弧岩浆侵入,随后麻粒岩及与之接触的橄榄岩被俯冲板片捕获并经历了高压变质作用,后期受挤压折返发生了退变质降压冷却。

关键词：泥质麻粒岩超高温变质作用 P-T轨迹榆树沟南天山

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肺痹方干预肺纤维化小鼠肺泡上皮细胞线粒体途径凋亡的机制

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2334-2339页

作者：程雪荆焕熙张运克方泓河南中医药大学河南省郑州市450046 上海中医药大学附属龙华医院上海市200032

背景:研究表明,线粒体介导的肺泡上皮细胞凋亡在肺纤维化发病中起着重要的作用,而肺痹方可以减轻肺纤维化,抑制肺纤维化小鼠细胞外机制转化。目的:探讨肺痹方对博来霉素致肺纤维化小鼠肺泡上皮细胞线粒体途径凋亡的机制。方法:40只C57B... 详细信息

背景:研究表明,线粒体介导的肺泡上皮细胞凋亡在肺纤维化发病中起着重要的作用,而肺痹方可以减轻肺纤维化,抑制肺纤维化小鼠细胞外机制转化。目的:探讨肺痹方对博来霉素致肺纤维化小鼠肺泡上皮细胞线粒体途径凋亡的机制。方法:40只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组、模型组、吡非尼酮组、肺痹方组,每组10只。除空白对照组外,其他3组腹腔注射博来霉素[7.5 mg/(kg·d)]建立肺纤维化模型,连续注射10 d。造模后第1天各药物组小鼠灌胃给药[51.43/(kg·d)]吡非尼酮或[12.86 mg/(kg·d)肺痹方],连续给药28 d。用药结束后取材,采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察小鼠肺组织的形态学变化,ELISA法检测血清中白细胞介素1、白细胞介素6、白细胞介素17、白细胞介素37水平,Western-blot法检测肺组织中Bax、Bcl-2、Beclin-1和Caspase3表达。结果与结论:①肺组织的形态学观察显示,模型组肺泡间隔及肺泡腔有大量炎症细胞浸润,出现大片融合成团的纤维灶;吡非尼酮组肺泡间隔增厚,炎症细胞少量浸润,出现肺纤维灶;肺痹方组肺泡结构增宽,少量的炎症细胞浸润,肺泡结构几乎无明显受损,少量肺纤维灶。②与空白对照组相比,模型组小鼠血清白细胞介素1、白细胞介素6、白细胞介素17和白细胞介素37质量浓度明显升高(P<0.01),两用药组明显低于模型组(P<0.01),肺痹方组低于非尼酮组。③与空白对照组相比,模型组小鼠肺组织Bax和Caspase3蛋白表达显著升高,两用药组均低于模型组;与空白对照组相比,模型组Bcl-2和Beclin-1蛋白表达显著降低,两用药组均高于模型组。④结论:肺痹方可以减轻肺纤维化,其机制可能与下调白细胞介素1、白细胞介素6、白细胞介素17和白细胞介素37水平,以及调节线粒体凋亡Bax、Bcl-2、Beclin-1和Caspase3相关蛋白从而减少肺泡上皮细胞凋亡有关。

关键词：肺痹方肺纤维化线粒体博来霉素 C57BL/6小鼠

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元宇宙助力博物馆文创“智”造新风尚

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文化产业 2025年第1期 151-153页

作者：许亚赵岩荆咪西北大学现代学院

在元宇宙视域下，陕西体育博物馆可以尝试通过创新的数字文创产品开发与综合营销策略，提升其影响力和用户参与度，实现文化传播和经济效益的双重目标。现概述了数字文创产品的类型、技术支持和营销策略，以全面展示博物馆在元宇宙中的...

在元宇宙视域下，陕西体育博物馆可以尝试通过创新的数字文创产品开发与综合营销策略，提升其影响力和用户参与度，实现文化传播和经济效益的双重目标。现概述了数字文创产品的类型、技术支持和营销策略，以全面展示博物馆在元宇宙中的发展路径。

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失眠的中西医病因病机浅析

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中国中医药现代远程教育 2025年第2期23卷 144-147页

作者：潘夏彦荆桧张彬山东中医药大学第一临床医学院山东济南250355 淄博市中医医院脑病科山东淄博255300

现代医学在失眠发病机制方面已取得较多进展。失眠属于中医学“不寐”范畴。历代医家对失眠认知丰富,对本病均有不同论述。作者梳理近几年相关文献,发现诸医家临证经验与辨治思路迥异,临床缺少统一诊疗标准,且多拘泥于单一辨治理论。因... 详细信息

现代医学在失眠发病机制方面已取得较多进展。失眠属于中医学“不寐”范畴。历代医家对失眠认知丰富,对本病均有不同论述。作者梳理近几年相关文献,发现诸医家临证经验与辨治思路迥异,临床缺少统一诊疗标准,且多拘泥于单一辨治理论。因此作者希冀总结归纳不寐的中西医病因病机,为临床诊疗提供佐助。

关键词：不寐失眠发病机制现代医学病因病机中医学

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糖尿病前期中西医结合早期诊断的国内外进展与挑战

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中国全科医学 2025年第3期28卷 262-272页

作者：彭红叶荆雅楠留典淳王莹薛雪鲁春丽广东省代谢病中西医结合研究中心(中医药研究所)广东药科大学广东省广州市510006 糖脂代谢病教育部重点实验室广东省广州市510006 北京中医药大学北京市100029 北京市海淀区北下关社区卫生服务中心中医科 100082 湖北中医药大学附属湖北省中医院肾病科/时珍实验室湖北省武汉市430006

糖尿病前期是一种表现为空腹血糖受损、糖耐量异常或两者的混合状态的疾病,属于中医“脾瘅”范畴。随着现代生活模式的改变,糖尿病前期的患病率不断升高,具有和糖尿病相当的预后风险,及时诊断并早期干预至关重要。本文从中医学和现代医... 详细信息

糖尿病前期是一种表现为空腹血糖受损、糖耐量异常或两者的混合状态的疾病,属于中医“脾瘅”范畴。随着现代生活模式的改变,糖尿病前期的患病率不断升高,具有和糖尿病相当的预后风险,及时诊断并早期干预至关重要。本文从中医学和现代医学两个角度梳理了糖尿病前期的起源与定义,发现早在《素问》成书时,中医学便已对“脾瘅”形成了一定的认识。随着循证医学的发展和规范化临床研究的实施,我国逐步构建了具有中医特色的规范化糖尿病前期临床实践指南。在诊断方面,血糖检测指标类型和阈值、中医证候诊断、中西医结合诊断模型、疾病风险评分模型、生物标志物、可穿戴设备等多种无创中西医结合诊断方法不断完善,但多针对糖尿病患者的预防而非糖尿病前期的早期诊断和筛查;餐后1 h血糖可能是未来诊断糖尿病前期或糖尿病高危人群的新指标,但需进一步研究证实以推广使用。针对糖尿病前期中西医结合早期诊断面临的诊断标准的动态性、筛查流程的复杂性、临床症状的不典型性、疾病的低知晓性等挑战,未来需不断更新和完善诊断标准,融合数字化健康管理和可穿戴设备,充分发挥中医优势,构建针对糖尿病前期人群的基于中医宏观表征与组学微观数据相结合的疾病诊断模型,开发更简便、快捷的中西医结合筛查方法,实现糖尿病前期的“早筛查、早诊断、早干预、早康复”。

关键词：糖尿病前期脾瘅早期诊断中西医结合糖尿病预防

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西部地区生产性服务业与制造业互动关系研究 ——以重庆为例

西部地区生产性服务业与制造业互动关系研究 ——以重庆为例

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作者：王淋重庆工商大学

学位级别：硕士

上个世纪末，西方发达国家的服务业在国民经济发展中已经起主导作用，尤其是生产性服务业的发展，由于其具有较强的集聚效应和辐射效应，对经济增长及促进制造业优化升级的贡献引人关注。与发达国家相比，我国生产性服务业的发展存在明... 详细信息

上个世纪末，西方发达国家的服务业在国民经济发展中已经起主导作用，尤其是生产性服务业的发展，由于其具有较强的集聚效应和辐射效应，对经济增长及促进制造业优化升级的贡献引人关注。与发达国家相比，我国生产性服务业的发展存在明显的滞后。加快生产性服务业的发展，可以加速制造业的升级，优化产业结构，提升创新发展质量，对构建和谐社会有着重要的意义。随着我国国民经济的快速发展，2012年我国GDP已经跃居世界第二位，工业化的进程不断加快，生产性服务业发展的需求空间广阔，通过生产性服务业的发展拉动国民经济的高质量发展已成为一种最佳的选择。东部地区依托良好的区位优势及经济发展基础，生产性服务业发展迅速，但是西部地区一直是我国经济社会发展的落后地区，近年来，虽借助产业转移等机遇，经济得到了快速的发展，但生产性服务业的发展并不充分，难以发挥其经济功能，更难以对国民经济的发展做出较大的贡献。生产性服务业的有关研究已得到国内外学术界的广泛重视，西方国家的学者在生产性服务业的研究上早有探索，内容也相对较为全面，我国近年来也涌现了大量的优秀研究成果，对优化产业结构、促进经济增长起到了一定的借鉴作用。但对西部地区的生产性服务业的发展研究较少。西部地区由于其地理，历史的特殊性，经济基础差，在先阶段经济快速发展的情况下，研究是否能利用生产性服务业与制造业的互动关系，推动经济快速、高质的发展，对缩小区域发展差距有重要的现实意义。本文以西部地区生产性服务业的发展问题为研究重点，以代表城市重庆为例，在梳理国内外生产性服务业与制造业互动发展的相关理论和文献的基础上，深入剖析生产性服务业与制造业的互动发展机制，论证西部地区应通过发展生产性服务业对制造业的拉动作用，优化产业结构的调整，促进制造业的升级，加快国民经济的发展。

关键词：生产性服务业制造业互动机制

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谱姿态迁移在多边形网格模型上的研究与实现

谱姿态迁移在多边形网格模型上的研究与实现

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作者：王淋广西大学

学位级别：硕士

网格模型变形编辑是数字几何处理的重要内容。通过对网格模型变形编辑,可以迅速生成新的几何形状,为建模设计师提供了一种新的模型获取方法,提升了几何模型的设计效率。作为基于样例的几何建模技术,变形迁移利用参考模型多个不同姿态之... 详细信息

网格模型变形编辑是数字几何处理的重要内容。通过对网格模型变形编辑,可以迅速生成新的几何形状,为建模设计师提供了一种新的模型获取方法,提升了几何模型的设计效率。作为基于样例的几何建模技术,变形迁移利用参考模型多个不同姿态之间的形变来驱动源网格模型发生相似的形变。与变形迁移不同的是,谱姿态迁移只需要输入参考模型的一个姿态,极大地扩展了基于样例的几何建模技术的应用范围。目前,谱姿态迁移主要在三角网格模型之间进行,而很少能够运用于多边形网格模型。以四边形网格模型为代表的多边形网格模型也是一类重要的几何模型表示方法,在纹理映射、有限元模拟、CAD/CAM、计算机动画等领域也有自身的优势。本文在三角网格模型谱姿态迁移的基础之上,研究多边形网格模型谱姿态迁移,使其能够操纵更多类型的网格模型,主要包括三角网格模型和四边形网格模型。本文首先引入多边形网格模型拉普拉斯矩阵,分析了拉普拉斯矩阵的谱和特征向量,并在此基础之上对多边形网格模型的拉普拉斯光顺和重构进行了代码实现。其次,在多边形网格模型的情形下讨论了泛函映射和网格模型特征对应,并对泛函矩阵、调和基以及耦合准调和基进行了可视化。最后,在多边形网格模型上分别设计并实现了平凡的谱姿态迁移和基于耦合准调和基的谱姿态迁移。实验结果表明,本文所设计的两类谱姿态迁移能够操纵三角网格模型和四边形网格模型。

关键词：数字几何处理谱姿态迁移变形编辑耦合准调和基拉普拉斯矩阵

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