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牛乳中粪肠球菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立

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牛乳中粪肠球菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立

作者：王歆远内蒙古民族大学

学位级别：硕士

在我国内蒙古地区,奶牛乳房炎对乳品的安全构成了极大的威胁,研究表明,粪肠球菌是引发奶牛乳房炎的第一大致病菌,同时病源乳样中也携带粪肠球菌。粪肠球菌属于人及动物肠道中的共生菌,粪肠球菌是一种机会致病菌,在人或动物体免疫力低时... 详细信息

在我国内蒙古地区,奶牛乳房炎对乳品的安全构成了极大的威胁,研究表明,粪肠球菌是引发奶牛乳房炎的第一大致病菌,同时病源乳样中也携带粪肠球菌。粪肠球菌属于人及动物肠道中的共生菌,粪肠球菌是一种机会致病菌,在人或动物体免疫力低时可引起感染。粪肠球菌通过原料乳转移到成品乳中,可引起人类多种复杂的疾病,难治愈,常复发,顽固持续感染。因此,建立高效特异的检测方法是当下亟待解决的问题。如何准确、及时的检测致病菌在乳品安全的保障中起着至关重要的作用。目前对粪肠球菌检测方法主要是传统的细菌培养法和PCR法,尚未建立有效的ELISA检测方法,本研究主要针对粪肠球菌Esp蛋白的多克隆抗体制备和建立牛乳中粪肠球菌的双抗体夹心ELISA检测方法,做到对粪肠球菌污染牛乳的快速准确检测。本实验以Genbank上公布的序列号AY032999.1的粪肠球菌esp基因序列为模板,对esp基因进行克隆及序列分析,成功克隆出序列长度为891bp的目的DNA条带后进行pET-30a-esp/BL21的构建及Esp蛋白的高效表达。通过家兔与小鼠的免疫试验来制备出两组抗Esp血清的多克隆抗体,将抗体纯化后通过间接ELISA试验测定两组多克隆抗体效价,最终确定兔源抗体效价为1:1600,鼠源抗体效价为1:3200且抗体特异性良好。后续在原有的双抗体夹心ELISA实验方法基础上优化反应条件,建立优化后的双抗体夹心ELISA检测方法用来检测牛乳制品中的粪肠球菌,最终确定使用兔源抗体作为包被抗体,以1:200稀释,在4℃,12h下包被,后37℃封闭60min,加入抗原37℃,60min,使用鼠源抗体作为检测抗体,以1:100稀释,在37℃反应60min,酶标抗体选用HRP-羊抗鼠IgG,最佳反应条件为37℃,60min,最佳稀释度为1:8000,后通过加入TMB显色液避光处理10min后终止反应。绘制出该ELISA检测方法的标准曲线,又使用此方法对选取的36份阴性样本进行检测,计算该方法的Cut-off值为0.382,对本方法进行准确度、重复性及特异性验证均获得良好结果。使用本方法对实际牛乳样品检测能够成功检测出被粪肠球菌污染的乳液,后探究该方法在增菌牛乳样品的灵敏度,得到结果可以检测出细菌浓度在1×10CFU/m L的牛乳。本研究建立的双抗体夹心ELISA检测方法准确稳定、特异性好、灵敏度高,在牛乳的实际检测中能够实现快速有效的检测目的。

关键词：粪肠球菌 esp 多克隆抗体双抗体夹心ELISA检测方法

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数字经济促进乡村振兴研究

中国农业资源与区划 2024年第1期45卷 44-44,56页

作者：王歆牛习现河北科技大学经济管理学院河北青年管理干部学院

“互联网+”时代,数字经济已经成为了全球经济发展的重要趋势。随着数字技术与生产要素的深度融合,数字经济逐渐渗透到各个行业,成为了一种全新的经济形态。在这一背景下,我国农业经济也正在经历着数字化转型,数字经济的大力发展将有助... 详细信息

“互联网+”时代,数字经济已经成为了全球经济发展的重要趋势。随着数字技术与生产要素的深度融合,数字经济逐渐渗透到各个行业,成为了一种全新的经济形态。在这一背景下,我国农业经济也正在经历着数字化转型,数字经济的大力发展将有助于缩小城乡收入差距,推动农业经济蓬勃发展,进而成为促进乡村振兴的重要力量。为此,经研究出版社于2023年1月出版的《探访乡村振兴:数字经济进行时》一书,以作者数年的走访经历和思考作为依据,系统阐述了互联网企业是如何在下沉市场发力,以及他们的业务是如何在广大乡镇和农村市场扎根。

关键词：乡村振兴我国农业经济互联网企业数字化转型全球经济发展深度融合城乡收入差距

产业政策、人力资本投资与长期工作回报——来自经济开发区的经验证据

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浙江社会科学 2024年第4期 32-44,156页

作者：张杭王歆北京大学新结构经济学研究院北京100871

经济开发区的设立是产业政策的重要实践,对微观个体的人力资本投资和长期工作回报有重要影响。基于经济开发区的相关数据和人口普查微观调查数据,本文利用队列双重差分模型研究了经济开发区的设立对微观个体教育投入和长期工作回报的影... 详细信息

经济开发区的设立是产业政策的重要实践,对微观个体的人力资本投资和长期工作回报有重要影响。基于经济开发区的相关数据和人口普查微观调查数据,本文利用队列双重差分模型研究了经济开发区的设立对微观个体教育投入和长期工作回报的影响。研究发现:(1)由于教育的机会成本提高,经济开发区的设立在短期内降低了微观个体的受教育年限。(2)长期来看,若经济开发区的产业发展与地区要素禀赋结构匹配程度较高,则受经济开发区设立影响的微观个体的收入水平与其他微观个体相比无显著差异。

关键词：产业政策人力资本投资要素禀赋结构新结构经济学

面向网联自动驾驶混合交通流的高速公路流量控制方法

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交通信息与安全 2023年第5期41卷 74-82页

作者：高金勇罗晟王歆远周成安连华福建省高速公路集团有限公司福州350001 北京百度网讯科技有限公司北京100085 同济大学道路与交通工程教育部重点实验室上海201804

由网联自动驾驶车辆(connected and autonomous vehicles,CAVs)与人类驾驶车辆(human-driven vehicles,HDVs)组成的新型混合交通流,是未来交通发展趋势。利用CAVs精准可控的优势提升交通管控能力是重要的研究方向之一。通过控制上游路段... 详细信息

由网联自动驾驶车辆(connected and autonomous vehicles,CAVs)与人类驾驶车辆(human-driven vehicles,HDVs)组成的新型混合交通流,是未来交通发展趋势。利用CAVs精准可控的优势提升交通管控能力是重要的研究方向之一。通过控制上游路段的CAVs目标巡航速度,间接影响HDVs的车速,实现上游交通需求的精准调控。考虑混合交通流具有时变特性以及平顺性需求,基于模型预测控制,以CAVs速度为控制量,建立流量控制偏差和CAVs速度变化幅度最小为目标的混合交通流量控制模型,实现控制过程优化;并设计控制模型的分布式求解算法,提高模型求解速度。基于VISSIM仿真结果表明:流量控制模型在不同CAVs渗透率、需求水平、目标需求下降率和控制更新时间间隔下均表现良好,流量控制精度均在80%以上;控制策略求解时间小于0.1 s,能够满足CAVs实时控制需求,从而更快调节流量到目标值,避免下游拥堵;模型可实现上游需求流量最高可下降40%,能够应对高速公路需求大幅波动情况,最大程度预防高速公路瓶颈拥堵。该方法对于预防高速公路拥堵、提高通行效率具有借鉴意义,为基于CAVs的主动交通管控方法开发提供参考。

关键词：交通控制主动交通管控网联自动驾驶速度协调控制

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不同物种肌动蛋白聚合功能及其差异分析

中国生物化学与分子生物学报 2024年

作者：凌莉任展宏王歆湖北科技学院药学院湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室湖北科技学院数学与统计学院

肌动蛋白聚合在细胞过程中发挥着关键作用，包括细胞分裂、发育、形态发生、运动和极性建立等重要过程。肌动蛋白聚合异常可引发心血管疾病、神经系统疾病和癌症等多种疾病。肌动蛋白聚合在细胞功能和疾病的发生和发展中发挥着至关重要... 详细信息

肌动蛋白聚合在细胞过程中发挥着关键作用，包括细胞分裂、发育、形态发生、运动和极性建立等重要过程。肌动蛋白聚合异常可引发心血管疾病、神经系统疾病和癌症等多种疾病。肌动蛋白聚合在细胞功能和疾病的发生和发展中发挥着至关重要的作用。尽管物种间和种内肌动蛋白的氨基酸序列高度保守，暗示其功能可能相似，然而最新研究发现，它们在聚合功能方面有差异性。研究表明，大部分动物或植物肌动蛋白能够在酵母细胞中被异源使用，但是兔子骨骼肌和玉米花粉肌动蛋白在聚合功能方面几乎无法互相替代。与此相比，酵母肌动蛋白则可以与动物或植物肌动蛋白共聚。本文综述了近年来动物、植物和酵母肌动蛋白的聚合特性以及其在体内外聚合功能上的差异性研究进展，以及靶向干预肌动蛋白聚合的药物，不仅为治疗人类疾病提供了新的途径，同时也为我们深入了解种内外肌动蛋白的分子机制奠定了基础，有助于开发治疗人类疾病的新型药物。进一步的研究探索将有助于揭示肌动蛋白多样性和功能进化的潜在规律，为相关领域的研究提供了重要的指导和启示。

关键词：肌动蛋白共聚显微注射异源表达

数字金融普惠视角下金融资金经营性资产的关联性分析——以沈阳市上市公司为例

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财会通讯 2024年第10期 164-169页

作者：徐丽军王歆懿沈阳大学工商管理学院辽宁沈阳110004

文章以沈阳市上市公司为例,对数字金融深化前后金融资产结构及其与经营性资产的关联度进行分析。结果显示:数字金融普惠前后上市公司金融资产结构显著变化,由高非流动性金融资产持有转变为高流动性金融资产持有,上市公司之间金融资产结... 详细信息

文章以沈阳市上市公司为例,对数字金融深化前后金融资产结构及其与经营性资产的关联度进行分析。结果显示:数字金融普惠前后上市公司金融资产结构显著变化,由高非流动性金融资产持有转变为高流动性金融资产持有,上市公司之间金融资产结构特征由高度趋同转向两极分化,金融资产配置长呈现多样化态势;企业金融资产相对规模下降,但绝对规模仍持续缓速增长,与此同时企业金融资产结构与经营性资产关联度下降,证明企业金融化程度不断加深;二者的关联度不受房地产等泛金融化行业的影响;短期内二者关联度下降,但长期来看下降有所缓解。

关键词：数字金融普惠金融资产经营性资产关联度分析

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飞机防除冰机理及超疏水材料的机载应用

科学技术与工程 2024年第1期24卷 72-87页

作者：王瑜王歆铖南京工业大学城市建设学院南京211816

飞机表面结冰改变飞机的飞行动力学特性,严重威胁了飞行安全,因此飞机防除冰技术对于安全飞行有重要意义。首先,通过分析飞机结冰的基本原理、类型、影响等,介绍现有的防除冰技术的方法及优缺点对比,详细综述了超疏水材料的润湿性模型... 详细信息

飞机表面结冰改变飞机的飞行动力学特性,严重威胁了飞行安全,因此飞机防除冰技术对于安全飞行有重要意义。首先,通过分析飞机结冰的基本原理、类型、影响等,介绍现有的防除冰技术的方法及优缺点对比,详细综述了超疏水材料的润湿性模型、机理等,同时对超疏水材料研究现状进行了全面综述并对其特定条件(超疏水特性失效)进行分析,特别指出了存在的问题和挑战。其次,在单一防除冰系统缺陷的基础上提出了复合型防除冰系统,并对几种复合防除冰系统进行介绍且将其与单一防除冰系统进行对比。此外,针对超疏水材料应用可能出现的问题,提出了一种回路热管+超疏水材料相结合的飞机防除冰系统。最后,就超疏水表面与复合型防除冰系统存在的问题进行分析与展望,认为主被动复合型防除冰系统具有良好的应用潜力。

关键词：结冰机理超疏水表面回路热管复合型防除冰系统

纳秒脉冲电压幅值和上升/下降沿时间对大气压氮气DBD均匀性的影响

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高电压技术 2024年第2期50卷 852-860页

作者：李梦遥王歆昀赵昱雷刘峰方志南京工业大学电气工程与控制科学学院南京211816

大气压氮气介质阻挡放电在材料改性、环境保护、消毒灭菌、臭氧合成以及流动控制等领域具有广阔的应用前景,放电均匀性是影响其应用效果的关键。通过电学及光学诊断方法研究了电压幅值、上升/下降沿时间、及重复频率对纳秒脉冲氮气DBD... 详细信息

大气压氮气介质阻挡放电在材料改性、环境保护、消毒灭菌、臭氧合成以及流动控制等领域具有广阔的应用前景,放电均匀性是影响其应用效果的关键。通过电学及光学诊断方法研究了电压幅值、上升/下降沿时间、及重复频率对纳秒脉冲氮气DBD均匀性和放电过程的影响。利用灰度分析方法和等效电路模型定量分析放电图像和电压电流波形,得到放电均匀性和电学微观参数。结果表明:增加电压幅值或重复频率,氮气DBD均匀性呈现不均匀到均匀再到不均匀的变化规律,并且频率较低时的氮气DBD需要更大的电压幅值以实现均匀放电;增大脉冲上升或下降沿时间会导致放电均匀性显著下降,且相比于下降沿,上升沿对放电均匀性影响更大。测量发射光谱对比了不同纳秒脉冲参数下化学活性物种含量的变化,发现增大电压幅值、重复频率均会导致N_(2)各激发态粒子谱线强度增强;脉冲上升沿或下降沿时间的增加使主要粒子谱线强度下降。此研究揭示了纳秒脉冲参数对N_(2)DBD过程影响机制,有利于制备均匀、稳定且高活性的大气压等离子体源。

关键词：纳秒脉冲脉冲参数介质阻挡放电氮气均匀性

基于K-prototypes聚类算法的上海地铁运营故障分析与风险管控对策研究

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基于K-prototypes聚类算法的上海地铁运营故障分析与风险管控对策...