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外泌体介导LOXL4通过PI3K/AKT信号通路调控口腔鳞癌的免疫逃逸相关因子表达

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免疫学杂志 2021年第8期37卷 679-685页

作者：王梦漪朴维英苗伟内蒙古自治区人民医院口腔科呼和浩特010000

目的探讨外泌体(EXO)介导的赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4)对口腔鳞癌细胞(OSCC)免疫逃逸相关因子表达的影响和调控机制。方法q RT-PCR检测口腔鳞癌细胞SCC9以及人口腔上皮细胞HOEC培养上清液中LOXL4的mRNA水平。差速离心法提取SCC9的外泌... 详细信息

目的探讨外泌体(EXO)介导的赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4)对口腔鳞癌细胞(OSCC)免疫逃逸相关因子表达的影响和调控机制。方法q RT-PCR检测口腔鳞癌细胞SCC9以及人口腔上皮细胞HOEC培养上清液中LOXL4的mRNA水平。差速离心法提取SCC9的外泌体,进行表征分析。Western blot检测外泌体标志物CD63、CD9以及目标基因LOXL4的表达量。使用荧光蛋白标记外泌体、SCC9细胞以及细胞核,利用共聚焦显微镜观察SCC9细胞对LOXL4-EXO的摄取。SCC9细胞和CD8+T细胞共培养,共培养体系分为空白对照组、LOXL4-EXO处理组、LOXL4-EXO联合PI3K/AKT的阻断剂Wortmannin处理组(LOXL4-EXO+WOR组)。CCK-8法检测细胞增殖率,ELISA法检测细胞培养液中IL-2、INF-γ、TNF-α的水平,Western blot检测PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达变化。结果与HOEC相比,LOXL4的m RNA水平在SCC9培养上清液中上调(P<0.05),并且成功分离和鉴定LOXL4-EXO,而且SCC9可摄取LOXL4-EXO。与空白对照组相比、LOXL4-EXO组的细胞增殖率上调(P<0.05),IL-2、INF-γ、TNF-α的水平下调(P<0.05),PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达量上调(P<0.05)。与LOXL4-EXO组相比,LOXL4-EXO+WOR组的细胞增殖率下调(P<0.05),IL-2、INF-γ、TNF-α的水平上调(P<0.05),PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达量下调(P<0.05)。结论外泌体介导LOXL4通过PI3K/AKT信号通路调节口腔鳞癌的免疫逃逸相关因子IL-2、INF-γ、TNF-α、PD-L1的表达。

关键词：外泌体赖氨酰氧化酶样蛋白4 PI3K/AKT信号通路口腔鳞癌免疫逃逸相关因子

氨肽酶P2在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

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实用医学杂志 2020年第2期36卷 210-215页

作者：曾瑶徐惠丽王梦漪张子龙华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院肿瘤科武汉430014 华中科技大学同济医学院附属荆州医院荆州434020

目的探讨氨肽酶P2(XPNPEP2)在结直肠癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测113例配对的结直肠癌组织和癌旁组织中XPNPEP2的表达情况,采用卡方检验分析XPNPEP2表达水平与患者临床病理特征的关... 详细信息

目的探讨氨肽酶P2(XPNPEP2)在结直肠癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测113例配对的结直肠癌组织和癌旁组织中XPNPEP2的表达情况,采用卡方检验分析XPNPEP2表达水平与患者临床病理特征的关系,Kaplan⁃Meier法绘制不同XPNPEP2表达水平结直肠癌患者无复发生存和总体生存曲线,组间生存差异采用Log⁃rank检验进行比较,并进一步通过单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析影响结直肠癌预后的独立危险因素。结果结直肠癌组织中XPNPEP2蛋白的表达水平显著高于癌旁组织(P0.05)。XPNPEP2高表达组结直肠癌患者的无复发生存率和总生存率均显著低于低表达组(均P<0.05)。COX多因素分析示XPNPEP2表达水平是影响患者无复发生存率和总生存率的独立危险因素(均P<0.05)。结论XPNPEP2蛋白在结直肠癌中表达上调,其高表达与多种不良临床病理特征及预后密切相关,可作为判断结直肠癌患者预后的重要生物标志物。

关键词： XPNPEP2 结直肠癌免疫组化临床病理特征预后

miRNA-424-5p靶向SIRT4促进胃癌细胞迁移和侵袭的分子机制

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实用医学杂志 2020年第8期36卷 1022-1029页

作者：陈莉徐惠丽王梦漪张子龙华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院肿瘤科武汉430014 华中科技大学同济医学院附属荆州医院湖北荆州434020

目的探究miRNA-424-5p(miR-424-5p)调控SIRT4表达影响胃癌细胞迁移和侵袭能力的潜在分子机制。方法利用RT-qPCR检测57例胃癌患者肿瘤组织与癌旁组织中miR-424-5p和SIRT4的表达水平。用脂质体法将miR-424-5p inhibitor和miR-424-5p mimic分别瞬时转染入MNK-28和HGC-27胃癌细胞中,RT-qPCR检测细胞中miR-424-5p和SIRT4 mRNA的表达水平,Western Blot检测细胞中SIRT4蛋白的表达量,划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力。双荧光素酶基因报告实验检测miR-424-5p对SIRT4的靶向调控机制。共转染miR-424-5p和SIRT4进一步验证miR-424-5p和SIRT4对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果胃癌组织中miR-424-5p的表达明显高于癌旁组织(P<0.001),SIRT4的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.001),相关性分析表明胃癌组织中miR-424-5p的表达与SIRT4呈负相关(r=-0.382,P=0.034)。此外,miR-424-5p高表达与肿瘤的浸润深度、TNM分期、脉管侵犯和神经侵犯显著相关(均P<0.05)。过表达miR-424-5p能促进胃癌细胞迁移和侵袭能力,而抑制miR-424-5p表达则呈现出相反的效果。过表达miR-424-5p可降低胃癌细胞中SIRT4 m RNA和蛋白的表达水平,相反,抑制miR-424-5p表达则上调胃癌细胞中SIRT4 m RNA和蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验显示miR-424-5p能显著影响野生型SIRT4-3’UTR表达载体的荧光素酶活性。回复实验结果显示miR-424-5p和SIRT4能显著影响胃癌细胞的迁移和侵袭能力。结论miR-424-5p在胃癌中高表达,其通过靶向抑制抑癌基因SIRT4的表达促进肿瘤细胞的迁移和侵袭,从而参与胃癌的的发生、发展。

关键词： miRNA-424-5p 乙酰化酶4(sirtuin 4,SIRT4) 胃癌迁移侵袭

miR-192负性调控人肝癌细胞株HepG2中RB1基因的表达

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华中科技大学学报（医学版） 2011年第6期40卷 656-661页

作者：谢琼慧王梦漪谢卫国何星星常莹蒋翔阮琼芳林菊生华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所武汉430030 武汉市第三医院烧伤研究所武汉430060 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科武汉430030

目的探讨miR-192对人肝癌细胞株HepG2中RB1基因表达的调节作用。方法运用生物信息学方法对miR-192进行靶基因预测并分析其潜在靶基因RB1;将含有miR-192结合位点的RB1mRNA 3′端非编码区(3′UTR)片段和在miR-192结合位点进行突变的RB1 3... 详细信息

目的探讨miR-192对人肝癌细胞株HepG2中RB1基因表达的调节作用。方法运用生物信息学方法对miR-192进行靶基因预测并分析其潜在靶基因RB1;将含有miR-192结合位点的RB1mRNA 3′端非编码区(3′UTR)片段和在miR-192结合位点进行突变的RB1 3′UTR突变片段克隆至报告基因载体pMIR-Report luciferase vector,重组质粒分别命名为pMIR-RB1和pMIR-RB1-mut;将重组质粒、Beta-gal内参质粒和microRNA共转染HepG2细胞,双荧光素酶报告基因系统检测各实验组中细胞荧光素酶的表达;SYBR Green荧光定量PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测miR-192对内源性RB1表达的调节作用。结果生物信息学分析筛选出89个miR-192的潜在靶基因,RB1基因是其中之一;测序验证重组质粒pMIR-RB1和pMIR-RB1-mut构建成功;过表达miR-192时,共转染pMIR-RB1质粒的细胞相对荧光素酶活性(4.80±0.36)较相应过表达miR-NC组(7.90±0.91)明显降低(P<0.05),而共转染pMIR-Luc或pMIR-RB1-mut质粒的细胞相对荧光素酶活性[pMIR-Luc:(7.68±1.04);pMIR-RB1-mut:(7.56±0.99)]较相应过表达miR-NC组[pMIR-Luc:(7.86±0.73);pMIR-RB1-mut:(7.82±1.05)]无显著差异;上调miR-192水平显著降低HepG2细胞中内源性RB1mRNA[(0.56±0.10)vs(1.05±0.13)]和蛋白(47%vs 100%)的表达。结论 RB1基因是miR-192的一个靶基因,在HepG2细胞中,miR-192通过直接结合RB1mRNA 3′UTR而负性调控RB1基因表达。

关键词： miR-192 RB1基因 HepG2细胞基因表达

乙型肝炎病毒X蛋白对HepG2细胞羧末端结合蛋白反应蛋白表达的影响

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中华肝脏病杂志 2011年第8期19卷 577-581页

作者：刘庆王梦漪何星星陈曼宋起龙蒋翔谢琼慧林菊生华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科武汉430030

目的研究乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）对博莱霉素诱导HepG2细胞DNA双链断裂（DSB）损伤修复关键因子羧末端结合蛋白反应蛋白（CtIP）的影响。方法建立稳定表达HBx的HepG2肝癌细胞株（HepG2-HBx）及空质粒对照细胞株（HepG2-vec）。用博莱... 详细信息

目的研究乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）对博莱霉素诱导HepG2细胞DNA双链断裂（DSB）损伤修复关键因子羧末端结合蛋白反应蛋白（CtIP）的影响。方法建立稳定表达HBx的HepG2肝癌细胞株（HepG2-HBx）及空质粒对照细胞株（HepG2-vec）。用博莱霉素诱导细胞DSB损伤后，用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况，用实时定量PCR及Western blot检测CtIP的mRNA与蛋白表达水平，并用激光共聚焦显微镜观察CtIP蛋白在细胞内的定位情况。多组数据采用单因素方差分析和SNK—q检验；两组数据间比较用t检验。结果经检测转染HBx基因的HepG2细胞（HepG2-HBx）能稳定表达HBx。博莱霉素处理后，HepG2-HBx细胞与HepG2-vec细胞的凋亡比例分别为16．90％±0．89％和15．30％±0．86％，差异无统计学意义（q=2．074，P〉0．05），但死亡细胞比例分别为8．71％±0．74％和4．90％±0．46％，差异有统计学意义（q=7．126，P〈0．01）；同时两种细胞株都出现了细胞周期G2／M期阻滞，差异有统计学意义（F=11．401，P〈0．05）。HBx使CtIP蛋白表达水平和mRNA表达水平均下调，HeDG2-HBx细胞与HepG2-vec细胞CtIP蛋白的相对表达量分别为0．66±0．04、0．73±0．05，差异有统计学意义（t=2．314，P〈0．05）;CtIP mRNA相对表达量分别为1．00±0．06、1．23±0．08，差异有统计学意义（t=2．732，P〈0．05）。同时观察到CtIP蛋白主要在细胞胞核内表达。结论HBx能干扰肿瘤抑制蛋白CtIP的表达，可能影响细胞DSB损伤的修复。

关键词：癌肝细胞乙型肝炎病毒X蛋白 DNA双链断裂修复

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政企联动，合力提升交通运输服务效能

政企联动，合力提升交通运输服务效能

宫颈癌组织中miR-216b与FOXM1表达及与临床病理特征的关系

南京日报

作者：杨康王梦漪许兵马道军许震宁

“掌握了电话预约车子的方法，现在老年人出门打车更方便、更容易了。”前不久，家住秦淮区秦虹街道武定新村的孟先生，专门拨打“12345”政务服务热线感谢交通部门的暖心做法。针对老年群体“打车难”，市交通运输局提供“适老化”出... 详细信息

“掌握了电话预约车子的方法，现在老年人出门打车更方便、更容易了。”前不久，家住秦淮区秦虹街道武定新村的孟先生，专门拨打“12345”政务服务热线感谢交通部门的暖心做法。针对老年群体“打车难”，市交通运输局提供“适老化”出行服务，在出租汽车行业开发了出租汽车电......

关键词：交通运输服务交通运输部门出租汽车政企联动

来源： cnki报纸评论

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cnki报纸

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中国医药导报 2019年第35期16卷 86-89页

作者：王梦漪卢宏达陈莉雷章华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院肿瘤科

目的研究宫颈癌组织中微小RNA(mi R)-216b与叉头框蛋白M1(FoxM1)表达及其与临床病理特征的关系。方法选取2016年3月~2019年3月华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院诊治的宫颈癌患者84例作为病例组,同期选择宫颈上皮内瘤变(CIN)... 详细信息

目的研究宫颈癌组织中微小RNA(mi R)-216b与叉头框蛋白M1(FoxM1)表达及其与临床病理特征的关系。方法选取2016年3月~2019年3月华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院诊治的宫颈癌患者84例作为病例组,同期选择宫颈上皮内瘤变(CIN)患者40例作为CIN组,子宫良性病变患者40例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组mi R-216b及FoxM1表达水平,比较其与临床病理特征的关系及相关性分析。结果病例组mi R-126b表达水平显著低于CIN组及对照组,FOXM1表达水平显著高于CIN组及对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。mi R-126b及FOXM1的表达与FIGO分期、肿瘤分化程度及浸润深度有关,而与年龄、病理类型、有无淋巴结转移及是否存在人乳头状瘤病毒(HPV)16/18感染无关。mi R-126b水平与FOXM1水平呈负相关(r=-0.694,P=0.001)。结论宫颈癌组织中mi R-126b及FOXM1均异常表达,两者共同参与宫颈癌的发生发展过程,有可能成为宫颈癌诊断、治疗及预后评估的新肿瘤标志物。

关键词：宫颈癌微小RNA-216b 叉头框蛋白M1 浸润

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即刻种植骨缺损及其修复的研究进展

内蒙古医学杂志 2014年第1期46卷 40-42页

作者：王梦漪屈志国周亚军内蒙古医科大学内蒙古自治区人民医院口腔科内蒙古呼和浩特010017

即刻种植修复术是目前牙种植术中较常见而又热门的选择,它减少了手术的次数,缩短了疗程,手术创伤小,患者痛苦少。即刻种植修复术的适应证相对更为严格,特别是对牙槽骨骨量的要求。而大多数患者都存在着不同形式、不同种类的骨缺损,如何... 详细信息

即刻种植修复术是目前牙种植术中较常见而又热门的选择,它减少了手术的次数,缩短了疗程,手术创伤小,患者痛苦少。即刻种植修复术的适应证相对更为严格,特别是对牙槽骨骨量的要求。而大多数患者都存在着不同形式、不同种类的骨缺损,如何修复骨缺损是如今研究的重点。故本文将从即刻种植骨缺损的类型、即刻种植引导骨组织再生和植骨材料的应用、骨缺损剩余骨壁对其修复的影响3方面的研究进展作一简要综述。

关键词：即刻种植骨缺损骨缺损修复

荷兰团体肖像画的戏剧性表征——以李格尔《荷兰团体肖像画》为中心

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学术研究 2024年第3期 169-176页

作者：左漪漪南京大学艺术学院江苏南京210045

李格尔在《荷兰团体肖像画》中认为,团体肖像画是荷兰艺术意志的集中体现,他使用了“意志、情感和注意”“内部一致性”“外部一致性”等几个概念来阐明这一主题。团体肖像画是一个发现问题、解决问题的动态发展过程,其目标是对注意的描... 详细信息

李格尔在《荷兰团体肖像画》中认为,团体肖像画是荷兰艺术意志的集中体现,他使用了“意志、情感和注意”“内部一致性”“外部一致性”等几个概念来阐明这一主题。团体肖像画是一个发现问题、解决问题的动态发展过程,其目标是对注意的描绘,并与画外的观者建立起联系。在其发展的第三个阶段,即最成熟的戏剧—小说时期,伦勃朗就是运用戏剧性元素将团体肖像画推至顶峰的荷兰艺术意志的最佳代言人。通过《杜普教授的解剖课》《夜巡》《布商行会的样品检验师》这三幅作品,伦勃朗实现了荷兰艺术意志的最高理想:在时间与空间中统一内部一致性与外部一致性。

关键词：注意戏剧性伦勃朗