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HCMV重组嵌合抗原表达质粒构建及免疫反应的初步鉴定

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安徽医科大学学报 2014年第6期49卷 752-756页

作者：曾宪聪汪小五陈伟王林定安徽医科大学微生物学教研室合肥230032 安徽医科大学病原与免疫学实验室合肥230032

目的选用人巨细胞病毒(HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入... 详细信息

目的选用人巨细胞病毒(HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株,经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化,获得目的蛋白,采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白,采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HCMV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒,并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。

关键词：人巨细胞病毒重组融合抗原免疫反应性

潜伏相关核抗原在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染过程中的作用

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安徽医科大学学报 2023年第12期58卷 2150-2154页

作者：路正东晏巍振(综述) 王林定周畅(审校) 安徽医科大学第一临床医学院合肥230032 安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验室合肥230032 安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明... 详细信息

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明LANA蛋白在KS发病机制中的具体过程,为KS潜伏期治疗提供参考。

关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒潜伏相关核抗原发病机制信号通路裂解复制免疫逃逸

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医学微生物学双语教学的实践和思考

东方企业文化 2012年第14期 265-265页

作者：王林定安徽医科大学微生物学教研室

总结医学微生物学双语教学的体会和经验,提出:(1)提高双语教学认识,选择合理教学方式;(2)选择合适教材;(3)培养双语教学能力,提高教师讲授水平;(4)充分发挥现代教育技术的作用;(5)及时总结教学经验,提高学生学习兴趣,以期进一步提高医... 详细信息

总结医学微生物学双语教学的体会和经验,提出:(1)提高双语教学认识,选择合理教学方式;(2)选择合适教材;(3)培养双语教学能力,提高教师讲授水平;(4)充分发挥现代教育技术的作用;(5)及时总结教学经验,提高学生学习兴趣,以期进一步提高医学微生物学的外语教学能力。

关键词：医学微生物学双语教学实践

换来三秦新农田——胡光莹同志早年推广良种纪事

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种子世界 1984年第9期 12-12页

作者：王林定

胡光莹,曾是陕西省农林斤和成阳地区主持科技工作和农业生产负责人之一,他也是陕西省良种推广的先驱者之一. 他为陕西省良种推广,特别对解放初期种子工作局面的打开作过很大贡献。陕西,特别是历史上有名的'八百里泰川',土壤、气候都很... 详细信息

胡光莹,曾是陕西省农林斤和成阳地区主持科技工作和农业生产负责人之一,他也是陕西省良种推广的先驱者之一. 他为陕西省良种推广,特别对解放初期种子工作局面的打开作过很大贡献。陕西,特别是历史上有名的'八百里泰川',土壤、气候都很化越,小麦是主要粮食作物。但解放前,反动统治者不顾农民的生产,良种得不到推广,小麦生产水平很低。

关键词：种子工作光莹良种推广生产水平农业生产泰川省农林厅科技工作八百里成阳

肺炎支原体P1蛋白的制备及其应用的初步研究

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安徽医科大学学报 2014年第12期49卷 1709-1713页

作者：汪小五曾宪聪陈伟王林定安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

目的研究肺炎支原体(MP)特异性抗原免疫反应性及检测合肥地区138份儿童血清样本感染MP的情况,并初步分析其危险因素。方法构建含r P1-513基因的克隆和表达质粒分别命名为T-r P1-513和PQE-80L-r P1-513。诱导PQE-80L-r P1-513重组菌蛋白... 详细信息

目的研究肺炎支原体(MP)特异性抗原免疫反应性及检测合肥地区138份儿童血清样本感染MP的情况,并初步分析其危险因素。方法构建含r P1-513基因的克隆和表达质粒分别命名为T-r P1-513和PQE-80L-r P1-513。诱导PQE-80L-r P1-513重组菌蛋白表达。Western blot法检测其免疫反应性和ELISA法筛选血清样本感染MP的阳性标本。结果 Western blot法检测约30 ku的r P1-513蛋白有免疫反应性。ELISA法筛选出34份阳性血清,同时用商业MP ELISA试剂盒检测出24份阳性血清,两种P1蛋白作为抗原ELISA检测法检出率分别为24.6%和17.4%,且两个检出率差异有统计学意义(P<0.05)。MP感染与C-反应蛋白有显著相关性,但与性别、年龄、白细胞无相关性。结论初步证明r P1-513蛋白具有免疫反应性,且以此蛋白构建的ELISA法有较高的灵敏度和特异性,为临床诊断MP提供一定的帮助。

关键词：肺炎支原体 rP1-513蛋白儿童危险因素

HIV-1跨膜蛋白gp41重组抗原的表达及其免疫反应性

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临床检验杂志 2008年第2期26卷 99-101页

作者：王林定付碧石李宝林钟平中国科学院院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室武汉430071 上海市艾滋病研究中心上海200336

目的为开发和建立敏感、特异的抗HIV-1抗体的检测方法研制重组gp41抗原。方法根据HIV-1的基因序列,设计并合成了1对PCR扩增引物,应用PCR技术从HIV-1外膜基因组中扩增出HIV-1的gp41截短体,将扩增的基因片段插入质粒pET-28a中构建成重组... 详细信息

目的为开发和建立敏感、特异的抗HIV-1抗体的检测方法研制重组gp41抗原。方法根据HIV-1的基因序列,设计并合成了1对PCR扩增引物,应用PCR技术从HIV-1外膜基因组中扩增出HIV-1的gp41截短体,将扩增的基因片段插入质粒pET-28a中构建成重组表达质粒pET-gp41。诱导表达并纯化gp41重组抗原,对gp41进行了初步应用分析。结果gp41在大肠埃希菌BL21(DE3)中获得高表达,表达量占菌体总蛋白量的26.08%。纯化后截短体gp41的纯度为97.94%。经间接ELISA和免疫印迹检测,纯化后的表达产物gp41具有很高的抗原特异性和免疫反应性。结论研制的重组抗原gp41有较强的抗原性和潜在的应用价值。

关键词：人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 gp41抗原免疫原性

提高医学微生物学课堂教学质量的授课方式探索

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安徽医学 2012年第8期33卷 1072-1073页

作者：王林定安徽医科大学微生物学教研室病原与免疫学实验室合肥230032

医学微生物学的教学效果与医学生今后从事医疗实践的能力高低密切相关。如何提高学生学习医学微生物学的兴趣,促进学生主动学习新知识和新技能,提高医学微生物学的教学质量和效果,这就对教师的教学手段和方法提出了更高的要求。教研室... 详细信息

医学微生物学的教学效果与医学生今后从事医疗实践的能力高低密切相关。如何提高学生学习医学微生物学的兴趣,促进学生主动学习新知识和新技能,提高医学微生物学的教学质量和效果,这就对教师的教学手段和方法提出了更高的要求。教研室通过教学实践作了教改尝试,收到较好的效果。

关键词：医学微生物学教学模式教学改革

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KSHV信号膜蛋白K15的致病机制

安徽医科大学学报 2022年第2期57卷 333-336页

作者：王心琛桂思语华玮董凯旋(综述) 王林定(审校) 安徽医科大学第二临床医学院合肥230032 安徽医科大学第二附属医院眼科合肥230601 安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

人类疱疹病毒-8(HHV-8)是卡波西肉瘤(KS)的致病因子,又被称为卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)。KSHV编码的信号膜蛋白K15通过与宿主细胞蛋白的相互作用激活多种细胞内信号通路,诱导血管生成和炎症反应。对K15蛋白的基本作用机制,包括其直... 详细信息

人类疱疹病毒-8(HHV-8)是卡波西肉瘤(KS)的致病因子,又被称为卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)。KSHV编码的信号膜蛋白K15通过与宿主细胞蛋白的相互作用激活多种细胞内信号通路,诱导血管生成和炎症反应。对K15蛋白的基本作用机制,包括其直接和间接介导的细胞信号通路的研究有助于深入了解K15蛋白在KS发病机制中的潜在作用,也对该病的靶向治疗有重要的参考价值。

关键词：卡波西肉瘤相关疱疹病毒 K15 发病机制细胞信号通路

新疆某地区吸毒人群卡波济肉瘤相关疱疹病毒血清流行病学分析

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中华流行病学杂志 2009年第4期30卷 418-419页

作者：杨培荣谭晓华郭淑霞付碧石曾妍王林定陈彬杨磊石河子大学预防医学系 832002 医学院新疆地方与民族高发病重点实验室中国科学院武汉病毒研究所杭州师范大学医药卫生管理学院

卡波济肉瘤相关疱疹病毒（KSHV），又称人疱疹病毒8型（HHV8），有研究发现不同地区不同人群中KSHV有不同程度的流行，新疆是少数民族聚集区，吸毒人群又是该地HIV感染的高危人群，本研究初步探讨新疆某地区吸毒人群中KSHV的血清流行病... 详细信息

卡波济肉瘤相关疱疹病毒（KSHV），又称人疱疹病毒8型（HHV8），有研究发现不同地区不同人群中KSHV有不同程度的流行，新疆是少数民族聚集区，吸毒人群又是该地HIV感染的高危人群，本研究初步探讨新疆某地区吸毒人群中KSHV的血清流行病学特点，为深入研究提供基础资料。

关键词：吸毒人群卡波济肉瘤疱疹病毒血清流行病学