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母体镉暴露靶向PLCβ4/1信号通路损害雄性子代的学习记忆能力

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母体镉暴露靶向PLCβ4/1信号通路损害雄性子代的学习记忆能力

作者：王有金暨南大学

学位级别：硕士

背景:镉（Cadmium）是一种常见的有毒重金属,通过饮食和呼吸摄入体内,可在多个器官蓄积。短期大量接触Cd或长期摄入含Cd的物质均对机体造成严重的危害。Cd的直接暴露对肝、肾、睾丸、肺和大脑等器官都会产生毒理损伤,该领域的研究也取... 详细信息

背景:镉（Cadmium）是一种常见的有毒重金属,通过饮食和呼吸摄入体内,可在多个器官蓄积。短期大量接触Cd或长期摄入含Cd的物质均对机体造成严重的危害。Cd的直接暴露对肝、肾、睾丸、肺和大脑等器官都会产生毒理损伤,该领域的研究也取得了一定的进展,但母代Cd暴露对子代中枢神经系统损伤的详细机理尚不明确。本课题组前期研究发现:母代孕期及哺乳期Cd暴露后,雄性子代海马组织的磷脂酶PLCβ4呈现异常高表达,BDNF作为重要的神经营养因子,外源加入能够逆转Cd对海马神经元中PLCβ4的上调,提示PLCβ4与BDNF存在相互调节作用。此外,PLCβ4的同工酶PLCβ1也广泛参与中枢神经生长发育的调控。目前针对胎儿及幼儿Cd暴露损害大脑发育的研究还只是停留在表观流行病学上,涉及的靶点及分子机制鲜有报道。阐明母代Cd暴露损害子代中枢神经系统发育的分子机制,对拓展儿童学习记忆功能损害研究的相关实验室数据和理论依据具有重要意义。目的:明确磷脂酶PLCβ4/1参与母代Cd暴露损害雄性子代学习记忆能力的分子机制,探讨Cd下调雄性子代海马组织中PLCβ1,上调PLCβ4蛋白的作用机制。方法:将性成熟的SD雌性大鼠和雄性大鼠按1:1或1:2的比例合笼交配3-4 d,确认雌鼠交配成功后,将雌鼠随机分为空白组（Ctrl:0.9%生理盐水）、低剂量组（Cd1:1 mg/kg）和高剂量组（Cd5:5 mg/kg）,每天上午9:00给雌性大鼠灌胃给药一次,并每周称重,按体重确定给药量,给药时间一直持续到孕鼠哺乳期结束。分别在子代雄鼠出生后（Postnatal,PND）21天、35天和56天麻醉后灌注,准确分离皮质和海马,心脏穿刺取血,一部分海马皮质用多聚甲醛固定制备冰冻切片,另一部分迅速置于-80℃冰箱冻存。子代大鼠PND 35和PND 56时,对其进行Y迷宫行为学实验;在雄性子代老年时,对其进行水迷宫行为学实验,评价雄性子代学习记忆功能的受损情况;同时对其海马CA1区进行核磁共振扩散峰度成像（Magnetic resonance imaging-Diffusion Kurtosis Imaging,MRI-DKI）,评价组织复杂度和神经元丢失情况。在PND 21、PND 35和PND 56的雄性子一代海马中,WB测定PLCβ4﹑孕酮膜受体PGRMC1和BDNF的蛋白表达水平;运用液相质谱联用仪（Liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS）测定内源性大麻素2-AG的含量,WB测定内源性大麻素逆行性通路mGlu R5/PLCβ1/DGLα/中各蛋白分子的表达水平。在老年雄性子一代中,WB测定海马组织中内源性大麻素逆行性通路mGlu R5/PLCβ1/DGLα中各蛋白分子的表达水平,WB测定各个发育时期的PLCβ4、PGRMC1和BDNF的蛋白表达水平和BDNF效应通路中Trkβ蛋白及其磷酸化水平。体外实验:取刚出生24 h的雄性SD乳鼠,在无菌操作台中于冰上迅速准确分离海马,然后剪碎消化组织获得海马神经元,使用Neurobasal+2%B27培养基培养雄性大鼠原代海马神经元。然后在37℃培养箱培养至第5天给予Cd暴露,浓度梯度分别为:2μM、4μM和6μM。24 h后收取细胞提蛋白,WB测定神经元中mGlu R5、PLCβ1和DGLα蛋白分子的表达水平;使用si RNA干扰技术敲低PC12细胞株和海马神经元中PLCβ4蛋白的表达水平,WB测定细胞中PGRMC1、BDNF和PLCβ4的蛋白表达水平。在海马神经元中外源加入孕酮（P4）和一定浓度的Cd（2μM）,WB测定细胞中PGRMC1、BDNF和PLCβ4的蛋白表达水平。结果:1.Y迷宫实验中,在青年期（PND 35）时,与对照组相比较,Cd1组和Cd5组的自主交替率显著下降（P＜0.01）;在成年期（PND 56）时,与对照组相比较,Cd1组和Cd5组的自主交替率也显著下降（P＜0.001）。2.在Morris水迷宫实验中,雄性子一代在老年时,与Ctrl组相比较,Cd5组的逃避潜伏期显著延长（P＜0.05）,穿越平台次数上也显著减少（P＜0.05）。3.在老年雄性子代MRI-DKI图像中,Cd5组对比Ctrl组,水分子平均弥散率（Diffusion Kurtosis Imaging-Mean diffusivity,DKI-MD）数值显著增大,在Pearson’s相关性检验中,水迷宫的逃避潜伏期和DKI-MD呈高度正相关关系（r=0.9783,P＜0.0001）;而水分子平均扩散峰度（Diffusion Kurtosis Imaging-Mean kurtosis,DKI-MK）数值则显著降低,且和水迷宫中逃避潜伏期呈高度负相关关系（r=-0.9708,P＜0.000

关键词：镉子一代学习记忆 PLCβ1/β4 BDNF mGlu R5/PLCβ1/DGLα/2-AG

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谈天津港南疆新建构件预制厂设计思路

港工技术 2005年第2期42卷 28-29页

作者：冯会芳王有金天津港湾工程设计院天津300456 中港一航局一公司天津300456

天津港南疆新建构件预制厂总平面为纵向布置,在台座设计中运用了明压柱式台座和暗压柱式台座2种结构形式。具有一线多用、投资省、施工快等特点,获得较好的经济效益。

关键词：预制厂天津港设计思路构件新建南疆纵向布置结构形式台座设计经济效益总平面柱式

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高考体育800米跑训练的教学方法探究

田径 2020年第5期 54-55页

作者：王有金安徽省阜阳市临泉第二中学

800米跑是历年体育高考项目中的重点测试内容之一,参加测试的学生需要在耐力、速度的持久性等方面保持一种较为持续的状态,因而对机体要求较高。近些年受到应试教育的影响,高中学生的总体运动能力明显不足,800米跑也成为了他们的薄弱项... 详细信息

800米跑是历年体育高考项目中的重点测试内容之一,参加测试的学生需要在耐力、速度的持久性等方面保持一种较为持续的状态,因而对机体要求较高。近些年受到应试教育的影响,高中学生的总体运动能力明显不足,800米跑也成为了他们的薄弱项目。体育教师如何根据学生的运动现状进行合理地调整与训练,促进学生运动能力的全面提升是一个亟待解决的教学难题。

关键词：高考体育 800米跑训练方法

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农民要增收须有新思路

地方政府管理 1999年第6期 46-47页

作者：王有金鹰潭市委办公室

解决好农民增收问题始终是农业和农村工作的一项重要任务。当前，农村存在的突出问题之一就是农民收入增长速度减缓，若不采取有效措施加以解决，必将影响国民经济健康发展和社会的稳定。一、当前制约我市农民增收的主要因素１．农民收... 详细信息

解决好农民增收问题始终是农业和农村工作的一项重要任务。当前，农村存在的突出问题之一就是农民收入增长速度减缓，若不采取有效措施加以解决，必将影响国民经济健康发展和社会的稳定。一、当前制约我市农民增收的主要因素１．农民收入结构构成过于单一。从总体上看，我...

关键词：增加农民收入精准农业农民负担农民增收农产品价格特色农业增长极城市化水平农村剩余劳动力农业产业化经营

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高中立定三级跳远训练研究

田径 2022年第7期 13-15页

作者：王有金安徽省临泉第二中学

立定三级跳远不仅是提升学生体能素质的方式,也是体育考试中的一个重要田径项目。学生需要采用原地起跳的方式,经过跨步跳和跳跃这三个提升速度的过程,并且通过各种协调的肢体动作,提高最后一跳的距离。因此,学生需要具备超强的爆发力... 详细信息

立定三级跳远不仅是提升学生体能素质的方式,也是体育考试中的一个重要田径项目。学生需要采用原地起跳的方式,经过跨步跳和跳跃这三个提升速度的过程,并且通过各种协调的肢体动作,提高最后一跳的距离。因此,学生需要具备超强的爆发力和弹跳力,同时要掌握规范的动作技巧,笔者结合体育教学经验,对高中生立定三级跳远训练进行研究,希望可以为高中体育教师的训练带来一定的参考价值。

关键词：高中立定三级跳远训练

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柳树的扦插育苗和造林技术

黑龙江科技信息 2009年第36期 180-180,216页

作者：王有金王有贵吉林省柳河县三源浦镇林业工作站吉林柳河135300 吉林省柳河县林业工作总站吉林柳河135300

阐述了柳树的用途、生态学特性、育苗、造林、抚育管理、主要病虫害防治等方面的技术要点。

关键词：柳树育苗造林抚育病虫害防治

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建立大强度训练后肌体疲劳维护体系的重要性

青少年体育 2012年第6期 34-35页

作者：王有金陈文辉临泉县第二中学安徽阜阳236400 常州市邹区中心小学江苏常州213100

现代竞技运动训练中,大强度训练已经大量运用于训练实践当中,但大强度训练后的对肌体的维护却经常被忽视。实践证明,大强度训练后的维护应是训练过程的一部分,且占有非常重要的地位。

关键词：大强度训练疲劳维护

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釉里红的研究

中国陶瓷工业 2011年第4期18卷 20-22页

作者：王有金付江盛石棋景德镇陶瓷学院材料科学与工程学院江西景德镇333000

在已有的研究基础上,本实验通过改变釉里红釉的色料、盖釉和底釉的配方及组合方式,探讨了影响釉里红呈色及流动状态的因素。实验结果表明:CuO含量不仅影响釉里红釉的呈色,还对釉料的高温流动性有明显的影响。底釉、盖釉配料中的熔剂对... 详细信息

在已有的研究基础上,本实验通过改变釉里红釉的色料、盖釉和底釉的配方及组合方式,探讨了影响釉里红呈色及流动状态的因素。实验结果表明:CuO含量不仅影响釉里红釉的呈色,还对釉料的高温流动性有明显的影响。底釉、盖釉配料中的熔剂对釉里红呈色的影响十分明显。

关键词：釉里红呈色熔剂

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航空制造业产业集群知识共享的演化博弈研究

系统科学学报 2025年 147-154页

作者：刘祎凡王有远马小凡南昌航空大学经济管理学院南昌市航空复杂系统与智能科学重点实验室

知识共享效率的提高对于提升航空制造企业竞争力具有重要意义。本文建立地方政府、核心企业及其上下游企业三方的知识共享概念模型,构建三方的演化博弈模型,考虑三方策略的稳定性;采用系统动力学方法仿真三种环境下的演化博弈过程。研... 详细信息

知识共享效率的提高对于提升航空制造企业竞争力具有重要意义。本文建立地方政府、核心企业及其上下游企业三方的知识共享概念模型,构建三方的演化博弈模型,考虑三方策略的稳定性;采用系统动力学方法仿真三种环境下的演化博弈过程。研究发现:自私行为的惩罚力度与不进行知识共享的概率相关联的动态策略下,整个系统存在稳定均衡解;可以通过降低知识共享成本、强化集体惩罚力度、提高奖励程度等,实现航空制造业产业集群知识共享体系的优化。

关键词：航空制造业产业集群知识共享演化博弈系统动力学