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谷子萌发期耐盐种质鉴定及应用

植物科学学报 2024年第1期42卷 75-84页

作者：吕宗环韩康妮杜晓芬王智兰李禹欣连世超张林义王军山西农业大学谷子研究所山西省后稷实验室山西长治046011

本研究利用不同浓度NaCl溶液对10份谷子(Setaria italica L.)种质进行处理,通过分析其萌发期的相对发芽势、相对发芽率、相对芽长以及相对根长等4项指标,明确了适于谷子萌发期耐盐性鉴定的NaCl浓度为180 mmol/L。在该浓度下,利用主成分... 详细信息

本研究利用不同浓度NaCl溶液对10份谷子(Setaria italica L.)种质进行处理,通过分析其萌发期的相对发芽势、相对发芽率、相对芽长以及相对根长等4项指标,明确了适于谷子萌发期耐盐性鉴定的NaCl浓度为180 mmol/L。在该浓度下,利用主成分分析和聚类分析等方法,对180份种质资源进行了耐盐性综合评价和等级划分。结果显示,除相对发芽率和相对芽长之间相关性不显著以外,其余指标之间均呈极显著正相关;主成分分析结果表明,这4项指标可作为谷子耐盐性评价的重要指标;聚类分析结果将180份谷子种质分为极端耐盐、耐盐、盐敏感和极端盐敏感4类;进一步采用隶属函数进行综合评价,筛选到硷谷、衡谷12、齐头白、K-3606和晋谷20等5份极端耐盐种质材料。最后,在该浓度处理下,对黑枝谷×长农35号(极端盐敏感×耐盐)F7代重组近交系遗传群体进行了初步分析,发现40份株系耐盐性等级频率分布近似正态分布,表明该群体适宜耐盐QTL挖掘。研究结果说明,在180 mmol/L NaCl处理下,通过谷子萌发期相对发芽势、相对发芽率、相对芽长和相对根长等4个指标能较好地区分不同种质耐盐性的差异。

关键词：谷子盐胁迫萌发期综合评价

谷子黄绿叶突变体ygl7的精细定位及候选基因分析

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华北农学报 2024年第2期39卷 27-38页

作者：连世超韩康妮杜晓芬王智兰李禹欣李颜方成锴张林义王军山西农业大学谷子研究所山西长治046011 山西省后稷实验室山西太原030031

叶色突变体是研究C4光合途径及叶绿素代谢机制的理想材料。为了研究谷子黄绿叶突变的分子机制,为黄绿叶基因的功能研究及叶绿素代谢的分子机制解析奠定基础,在长农35号甲基磺酸乙酯(EMS)突变体库中鉴定到1份可稳定遗传的谷子黄绿叶突变... 详细信息

叶色突变体是研究C4光合途径及叶绿素代谢机制的理想材料。为了研究谷子黄绿叶突变的分子机制,为黄绿叶基因的功能研究及叶绿素代谢的分子机制解析奠定基础,在长农35号甲基磺酸乙酯(EMS)突变体库中鉴定到1份可稳定遗传的谷子黄绿叶突变体ygl7,并对突变体及野生型进行农艺性状调查、光合色素含量及光合参数测定、叶绿体超微结构观察;同时对突变体叶色进行遗传分析,采用BSA法进行基因初定位,利用F_(2)群体进行精细定位,并根据功能注释结合RNA-Seq预测候选基因。采用qRT-PCR进行表达模式分析,采用酵母双杂交试验进行蛋白互作验证。结果表明,与野生型相比,ygl7苗期、拔节期叶片呈明显黄绿色,抽穗期逐步转为浅绿色,ygl7整个生育期叶绿素含量及光合速率都显著低于野生型,且叶绿体结构出现异常。遗传分析表明,ygl7黄绿叶表型由1对隐性单基因控制,基因精细定位将黄绿叶基因定位于第Ⅶ染色体434.9 kb区间内,候选基因分析预测编码原卟啉Ⅸ镁鳌合酶Ⅰ亚基的Seita.7G290300为调控黄绿叶的候选基因。qRT-PCR结果显示,Seita.7G290300在叶片中高表达,且在突变体中的表达量低于野生型;叶绿素合成途径(CHLD、CHLI)和光系统(LHCB1、LHCB6)相关基因在突变体中均下调表达。酵母双杂交试验表明,SiYGL7与MORF_(2)存在互作。

关键词：谷子黄绿叶突变体精细定位镁鳌合酶Ⅰ亚基

谷子SiPHYA和SiPHYB基因对光质、光周期和非生物胁迫的响应

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农业生物技术学报 2024年第5期32卷 983-994页

作者：杜晓芬沈蒙蒙王智兰韩康妮李颜方成锴李禹欣连世超王军山西农业大学谷子研究所/山西省后稷实验室山西农业大学农学院

光敏色素是一类红光/远红光受体，调控植物种子萌发、株高、开花和避荫性。为探究谷子(Setaria italica)光敏色素A (phytochromes A, PHYA)和光敏色素B (PHYB)基因对光质、光周期和非生物胁迫的响应模式，本研究采用RT-PCR克隆得到SiPHY... 详细信息

光敏色素是一类红光/远红光受体，调控植物种子萌发、株高、开花和避荫性。为探究谷子(Setaria italica)光敏色素A (phytochromes A, PHYA)和光敏色素B (PHYB)基因对光质、光周期和非生物胁迫的响应模式，本研究采用RT-PCR克隆得到SiPHYA (Seita.9G113600)和SiPHYB (Seita.9G427800)的c DNA序列，SiPHYA编码区长度为3 396 bp，编码1 131个氨基酸；SiPHYB编码区长度为3 507 bp，编码1 169个氨基酸。利用MEGA-X软件构建多物种进化树，谷子SiPHYA和SiPHYB分别与玉米(Zea mays)ZmPHYA和ZmPHYB亲缘关系最近。通过在线网站植物转录调控图谱(plant transcriptional regulatory map, PlantRegMap, http://***/index.php)预测SiPHYA和SiPHYB启动子区结合转录因子情况，结果显示，29个家族共计109个转录因子可结合到SiPHYA启动子区，27个家族共计93个转录因子可结合到SiPHYB启动子区。最后利用qRT-PCR研究其在谷子不同组织器官及不同光质、光周期和逆境处理下的表达模式。结果表明，SiPHYA和SiPHYB在谷子的根、茎、叶和幼穗中均有表达，且都在旗叶中表达量最高；不同光质处理下，SiPHYA和SiPHYB在’衡谷12号’和’长农35号’中响应模式有所不同。其中，’衡谷12号’中SiPHYA在黑暗下表达量最高，而’长农35号’中SiPHYA在远红光下表达量最高，SiPHYB在’衡谷12号’和’长农35号’中均表现为白光下表达量最高，红光下表达量最低；长日照条件下，SiPHYA在’衡谷12号’和’长农35号’中均表现出相似的昼夜节律变化，SiPHYB在’长农35号’中表现出昼夜节律变化，但在’衡谷12号’中无昼夜节律变化；短日照条件下，SiPHYA和SiPHYB在’衡谷12号’和’长农35号’中均无昼夜节律变化；SiPHYA和SiPHYB对高盐、高热、低温和干旱均有响应，但响应模式有所不同。本研究为深入挖掘SiPHYA和SiPHYB在谷子生长发育和非生物胁迫中的功能机制提供线索，并为其在谷子分子遗传改良中的应用提供依据。

关键词：谷子光敏色素光质光周期逆境胁迫表达分析

基于InDel标记的长杂谷2922杂交种纯度鉴定

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种子 2024年第2期43卷 95-98页

作者：钱枰励杜晓芬王智兰韩康妮李禹欣连世超李颜方成锴田岗李会霞郭杰王军山西农业大学谷子研究所/山西省后稷实验室山西长治046011 山西农业大学农学院山西太谷030801

为了鉴定谷子杂交种长杂谷2922的纯度,本研究从11个候选InDel标记中筛选出在长杂谷2922及其双亲之间具有多态性的InDel标记Re2632,利用Re2632对长杂谷2922进行分子标记鉴定,并喷施除草剂进行验证。分子鉴定结果显示,杂交种纯度在20.83%~... 详细信息

为了鉴定谷子杂交种长杂谷2922的纯度,本研究从11个候选InDel标记中筛选出在长杂谷2922及其双亲之间具有多态性的InDel标记Re2632,利用Re2632对长杂谷2922进行分子标记鉴定,并喷施除草剂进行验证。分子鉴定结果显示,杂交种纯度在20.83%~44.68%之间,平均纯度为33.72%。除草剂鉴定结果显示,杂交种纯度在18.32%~50.60%之间,平均纯度为32.59%。t测验结果显示,2种方法鉴定结果无显著差异,表明Re2632可以作为长杂谷2922分子鉴定的标记。

关键词：谷子杂交种纯度鉴定 InDel标记除草剂

参附注射液治疗毛细血管渗漏综合征的临床疗效

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临床合理用药杂志 2022年第18期15卷 132-135页

作者：黄赟王智兰江苏省南通市中医院 226001

目的观察参附注射液治疗毛细血管渗漏综合征(CLS)的临床疗效。方法回顾性选取2020年2月-2021年2月南通市中医院收治的CLS患者60例,根据治疗方法不同分为对照组和研究组,各30例。对照组采用常规治疗,研究组在对照组基础上予以参附注射... 详细信息

目的观察参附注射液治疗毛细血管渗漏综合征(CLS)的临床疗效。方法回顾性选取2020年2月-2021年2月南通市中医院收治的CLS患者60例,根据治疗方法不同分为对照组和研究组,各30例。对照组采用常规治疗,研究组在对照组基础上予以参附注射液治疗。2组均连续治疗1个月。比较2组临床疗效,治疗情况(入住ICU时间、病死率),治疗前后肝肾功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)]、生命体征(体温、呼吸频率、心率)、炎性反应指标[白细胞计数、白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、血管内皮生长因子(VEGF),不良反应。结果研究组总有效率为93.3%,高于对照组的73.3%(χ^(2)=4.320,P=0.038)。研究组入住ICU时间短于对照组,病死率低于对照组(P <0.01)。治疗后,研究组血清ALT、AST、BUN、Scr水平低于对照组(P <0.05)。2组体温、呼吸频率、心率低于治疗前,且研究组低于对照组(P <0.05)。2组白细胞计数及血清IL-6、TNF-α、VEGF水平低于治疗前,且研究组低于对照组(P <0.05)。研究组不良反应总发生率为13.3%,与对照组的16.7%比较,差异无统计学意义(P=1.000)。结论采用参附注射液治疗CLS的临床疗效确切,可有效缩短患者的治疗时间,降低病死率,改善肝肾功能及血管内皮细胞功能,维持生命体征平稳,且安全性较高。

关键词：毛细血管渗漏综合征参附注射液血管外肺水指数治疗结果

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谷子萌发期耐盐种质鉴定及应用

植物科学学报 2023年

作者：吕宗环韩康妮杜晓芬王智兰李禹欣连世超张林义王军山西农业大学谷子研究所山西省后稷实验室

谷子(Setaria italica L.)耐盐种质资源鉴定是谷子耐盐育种中需要解决的首要问题，也是开展耐盐机制研究的前提。本研究利用不同浓度NaCl盐溶液对10份谷子种质进行处理，通过分析其萌发期相对发芽势、相对发芽率、相对芽长以及相对根长... 详细信息

谷子(Setaria italica L.)耐盐种质资源鉴定是谷子耐盐育种中需要解决的首要问题，也是开展耐盐机制研究的前提。本研究利用不同浓度NaCl盐溶液对10份谷子种质进行处理，通过分析其萌发期相对发芽势、相对发芽率、相对芽长以及相对根长等4项指标，明确了适于谷子萌发期耐盐性鉴定的NaCl浓度为180 mmol/L。在该浓度下，利用主成分分析和聚类分析等方法，对180份种质资源进行了耐盐性综合评价和等级划分。结果表明，除相对发芽率和相对芽长之间相关性不显著以外，其余指标之间均呈现极显著正相关；主成分分析结果发现，相对发芽势、相对发芽率、相对芽长和相对根长可作为谷子耐盐性评价的重要指标；聚类分析将180份谷子种质分为极端耐盐、耐盐、盐敏感和极端盐敏感4类，采用隶属函数进行综合评价，筛选到硷谷、衡谷12、齐头白、K-3606和晋谷20等5份极端耐盐种质材料。最后，在该浓度处理下，对“黑枝谷×长农35号”(极端盐敏感×耐盐)F7代重组近交系(RIL，Recombinant inbred lines)遗传群体进行了初步分析，发现40份株系耐盐性等级频率分布近似正态分布，表明该群体适宜耐盐QTL(Quantitative trait locus)挖掘。以上结果说明适于谷子萌发期耐盐性鉴定的NaCl浓度为180 mmol/L，在该浓度处理下，通过谷子萌发期相对发芽势、相对发芽率、相对芽长和相对根长等4个指标能较好区分不同种质耐盐性差异。这些研究结果为谷子萌发期耐盐种质鉴定与耐盐机制解析奠定了重要基础。

关键词：谷子盐胁迫萌发期综合评价

谷子GRAS转录因子家族的全基因组鉴定、表达分析及标记开发

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核农学报 2022年第9期36卷 1723-1737页

作者：王智兰韩康妮杜晓芬李禹欣连世超王军山西农业大学谷子研究所/杂粮种质资源发掘与遗传改良山西省重点实验室/杂粮种质创新与分子育种山西省重点实验室山西长治046011

为了鉴定谷子GRAS家族基因并揭示SiGRASs响应外源植物激素和逆境胁迫过程的表达规律,本研究采用生物信息学方法对谷子GRAS转录因子家族进行全基因组鉴定,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行4种激素和2种胁迫处理后的表达分析,并根据SiGRA... 详细信息

为了鉴定谷子GRAS家族基因并揭示SiGRASs响应外源植物激素和逆境胁迫过程的表达规律,本研究采用生物信息学方法对谷子GRAS转录因子家族进行全基因组鉴定,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行4种激素和2种胁迫处理后的表达分析,并根据SiGRAS23序列差异开发分子标记。结果表明,谷子全基因组共包含52个GRAS转录因子基因,大部分编码亲水性蛋白;82.69%的基因编码酸性蛋白,长度为362~734 aa,分子量为39.81~100.09 kDa,等电点为4.85~9.53。系统发育分析将谷子GRAS家族划分为10个亚家族。组织表达量分析表明,各亚族基因具有明显的组织表达特异性,LISCL、DELLA和SHR亚族基因分别在叶、茎和根中有较高的表达量,PAT1和HAM亚族大部分基因为组成型表达,但在叶中的表达量最高。SiGRASs启动子区含有多种植物激素、逆境响应相关的顺式作用元件;qRT-PCR结果显示,SiGRASs在不同激素和非生物胁迫下的表达水平存在较大差异,其中PAT1亚族中Seita.2G369400对6种不同的处理响应最为敏感;少数SiGRASs基因在各组织和各种激素和非生物胁迫处理下,表达量均在极低水平。DELLA亚族中的SiGRAS23在遗传群体AJF的双亲矮宁黄和晋谷21号间存在序列差异,据此开发的分子标记D8-1与该群体株高性状紧密连锁。本研究为解析谷子GRAS家族基因参与激素信号转导及逆境胁迫响应的功能研究奠定了基础,SiGRAS23的分子标记可用于今后谷子种质资源株高等位变异的筛选。

关键词：谷子 GRAS 全基因组鉴定表达分析分子标记

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谷子叶绿体基因RNA编辑位点的鉴定与分析

作物学报 2022年第4期48卷 873-885页

作者：杜晓芬王智兰韩康妮连世超李禹欣张林义王军山西农业大学谷子研究所/杂粮种质创新与分子育种山西省重点实验室/杂粮种质资源发掘与遗传改良山西省重点实验室山西长治046011

RNA编辑是高等植物叶绿体基因转录后加工修饰的现象,它会影响叶绿体发育,导致植株叶片出现黄化或白化等表型。本研究以长农35号及其2份叶色突变体(E752和E1005)为试验材料,利用紫外分光光度计测定了苗期叶绿素含量,通过透射电镜观察了... 详细信息

RNA编辑是高等植物叶绿体基因转录后加工修饰的现象,它会影响叶绿体发育,导致植株叶片出现黄化或白化等表型。本研究以长农35号及其2份叶色突变体(E752和E1005)为试验材料,利用紫外分光光度计测定了苗期叶绿素含量,通过透射电镜观察了叶绿体结构;利用在线工具Prep-Cp对谷子叶绿体基因RNA编辑位点进行了预测,通过PCR、RT-PCR及测序等方法对预测到的编辑位点进行了验证,并与其他单子叶作物的编辑位点进行了比较分析;进一步利用荧光实时定量方法,分析rpoB及依赖PEP转录的光合途径相关基因(ndhG、psaA、psbA和rbcL)在不同发育时期的表达水平;最后,利用生物信息学分析ropB编辑前后蛋白二级结构的变化。结果表明,与长农35号相比,2份叶色突变体叶绿素含量显著降低,叶绿体发育异常;在谷子中,有10个叶绿体基因共计20个位点发生RNA编辑,所有编辑位点均为胞嘧啶(C)和尿嘧啶(U)的转换,不同基因的编辑位点存在数量差异,其中ndhB编辑位点数量最多,共计6个;20个编辑位点中,有19个位点在物种进化上具有较高保守性,只有rpoC1-2753为谷子中特有的编辑位点;在长农35号及其2份叶色突变体中,rpoB的3个编辑位点(rpoB-467、rpoB-545和rpoB-560)存在编辑效率差异,而这种编辑效率的改变导致rpoB表达水平改变,进一步可能影响了ndhG、psaA、psbA和rbcL表达水平的变化;生物信息学分析表明,rpoB-467和rpoB-560编辑前后影响了蛋白二级结构。研究结果为解析叶绿体RNA编辑参与谷子叶绿体发育的分子机制奠定了一定基础。

关键词：谷子叶绿体 RNA编辑突变体

周颙与宋齐佛教——以钟山隐舍与草堂寺为中心

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西南民族大学学报（人文社会科学版） 2018年第6期39卷 81-86页

作者：王荣国王智兰厦门大学人文学院厦门大学哲学系

周颙于宋泰始四年自蜀返建康后造山茨精舍,嗣在其前造草堂寺,二者独立又为整体,位于钟山(北山)西而非"雷次宗旧宅"处。"山茨精舍——草堂寺"的建造为僧人提供止锡、修持、著述乃至弘法的场所,蜀法绍是精舍最早的住僧,法度开创摄山前于宋... 详细信息

周颙于宋泰始四年自蜀返建康后造山茨精舍,嗣在其前造草堂寺,二者独立又为整体,位于钟山(北山)西而非"雷次宗旧宅"处。"山茨精舍——草堂寺"的建造为僧人提供止锡、修持、著述乃至弘法的场所,蜀法绍是精舍最早的住僧,法度开创摄山前于宋末"游于京师",当居其中,二人并称"北山二圣"。慧约在草堂寺弘法十余年,"清虚满世"。僧朗前往摄山前亦应止锡山寺。山茨精舍亦为周颙的"隐舍",他长居其中习佛修静,解经著述,其《抄成实论序》昭示周颙永明八年尚健在,可补正史记载不足,特别是《三宗论》的撰成使"三宗之旨"在江南传布,对摄山三论学派的兴起有积极作用。文中对汤用彤、任继愈、鎌田茂雄的相关论述展开讨论并予以补证或订正。

关键词：周颙山茨精舍草堂寺南朝佛教摄山三论学