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作者：王晶哲江苏大学

学位级别：硕士

目的:本实验室前期的研究发现在SLE患者和RA患者血清中mi R-34a表达水平上调,同时证实IL-6/TNF-α可通过NF-κB-mi R-34a信号轴调节Th17和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的平衡。本研究采用体外转染mi R-34a的模拟物和抑制剂以及... 详细信息

目的:本实验室前期的研究发现在SLE患者和RA患者血清中mi R-34a表达水平上调,同时证实IL-6/TNF-α可通过NF-κB-mi R-34a信号轴调节Th17和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的平衡。本研究采用体外转染mi R-34a的模拟物和抑制剂以及NF-κB抑制剂对NF-κB-mi R-34a信号轴进行干预,进一步验证NF-κB、mi R-34a、Foxp3(Treg细胞的关键转录因子)这三者之间的关系。应用DBA小鼠建立胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,给予mi R-34a模拟物和抑制物处理,观察mi R-34a对CIA模型鼠的病程影响,及其对局部Treg/Th17的调节作用。利用mi R-34a转基因小鼠(mi R-34a TG)建立CIA模型,进一步验证mi R-34a对CIA进程和Treg/Th17平衡的影响。方法:(1)小鼠T淋巴瘤细胞系EL-4细胞于体外分别转染mi R-34a模拟物(agomi R-34a)和mi R-34a抑制物(antagomi R-34a)36 h,将转染agomi R-34a的EL-4细胞与转化生长因子β(Transforming growth factor-beta,TGF-β)共培养12 h,转染antagomi R-34a的EL-4细胞与TGF-β、IL-6及TNF-α共培养12 h,利用Immunoblot技术检测Foxp3的蛋白表达水平。(2)免疫磁珠法分选出小鼠脾脏的初始CD4+T细胞(Na?ve CD4+T cells),在诱导i Treg的细胞因子条件下,分别加入IL-6、TNF-α和NF-κB抑制剂(BAY11-7082)培养24 h,利用q PCR技术检测mi R-34a的表达水平,通过Immunoblot技术检测Foxp3的蛋白表达水平。(3)建立DBA小鼠的胶原诱导性关节炎模型,分别于初次免疫后的第28 d、31 d、34 d、37 d和40 d尾静脉注射200μL的agomi R-34a(10 n M)、antagomi R-34a(60 n M)以及对照试剂,观察小鼠的发病情况(小鼠一般情况、临床评分、病理学检查和影像学检查)。利用流式细胞术检测小鼠脾脏及引流淋巴结的Treg/Th17细胞比例情况。(4)建立C57BL/6背景的mi R-34a转基因小鼠的胶原诱导性关节炎模型,将其与正常的野生型C57BL/6进行对比,检测体内各项指标(同(3)),对比两种小鼠对CIA诱导的易感性。结果:(1)Immunoblot结果显示在TGF-β诱导的Foxp3+EL4细胞中,mi R-34a模拟物能够下调Foxp3的蛋白表达水平。而mi R-34a抑制物能够上调EL-4细胞中的Foxp3蛋白水平。(2)将初始CD4+T细胞诱导为i Treg的过程中,加入的IL-6和TNF-α能够上调mi R-34a的表达水平,下调Foxp3的表达水平。当使用NF-κB抑制剂阻断其信号通路时,则部分逆转了IL-6/TNF-α对Foxp3的抑制作用,mi R-34a的表达水平明显降低。(3)成功应用DBA小鼠建立CIA模型。空白对照组小鼠未发病,诱导的小鼠在23 d左右发病。agomi R-34a组在第二次注射后炎症程度明显加重,临床评分呈持续上升趋势,最高达11分。antagomi R-34a组的临床评分呈明显的下降趋势,平均在3-4分。影像学和病理学检测与临床得分一致,即CIA-agomi R-34a组的疾病严重程度高于CIA组,注射antagomi R-34a后能够有效缓解关节炎症。流式细胞术分析结果显示CIA的发病严重程度与Treg/Th17的失衡呈正相关,注射了antagomi R-34a后能够部分逆转Treg/Th17的失衡。(4)采用C57BL/6背景的mi R-34a转基因小鼠成功建立CIA模型。两组小鼠的发病时间都在初次免疫后的24 d左右发病。CIA-C57组小鼠的临床评分约为6分。CIA-mi R-34a TG组小鼠的临床临床评分高达10分。病理学,影像学等检测结果与上述CIA-agomi R-34a组的趋势一致。结论:确定了IL-6/TNF-α可以通过NF-κB-mi R-34a信号通路调节Treg细胞的分化发育。在CIA模型中,mi R-34a能够通过加剧Treg/Th17的失衡,从而加重关节炎的严重程度,这一结果在mi R-34a转基因鼠的CIA模型中也得到了证实。mi R-34a抑制物能够部分逆转Treg/Th17的失衡,从而减轻CIA的病情。

关键词：核转录因子κB 微小RNA-34a Treg Th17 类风湿性关节炎

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磷酸肌酸钠酶促合成法的优势探讨

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世界中西医结合杂志 2008年第4期3卷 233-234页

作者：陈妍陈月王晶哲魏玲范国良吉林大学生命科学学院吉林长春130000 吉林大学药学院吉林长春130000 长春英联生物技术有限公司吉林长春130000

磷酸肌酸是存在于脊椎动物体内的一种小分子生物活性物质，主要存在于心、脑、肾、视网膜、精细胞和神经末梢等高耗能细胞中．在细胞的能量代谢中发挥重要作用，既是能量最直接的供给物，又是能量在细胞内转移的载体。磷酸肌酸于1927年... 详细信息

磷酸肌酸是存在于脊椎动物体内的一种小分子生物活性物质，主要存在于心、脑、肾、视网膜、精细胞和神经末梢等高耗能细胞中．在细胞的能量代谢中发挥重要作用，既是能量最直接的供给物，又是能量在细胞内转移的载体。磷酸肌酸于1927年被发现，但对它生理功能的了解却花了约50年时间。在多年的深入研究后，人们才了解到这一药物的许多生理功能：首先它是高耗能细胞胞内ATP浓度恒定的“缓冲剂”。高耗能细胞是指肌肉、心肌、脑、视网膜、肾和精子等器官或细胞。这些器官或细胞的共同特点是，在生命活动过程中需消耗大量ATP，所耗ATP的补充要靠胞内的磷酸肌酸来转化。

关键词：磷酸肌酸钠酶促合成法优势

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外源性磷酸肌酸对介入治疗术后心肌损伤的作用

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中华老年心脑血管病杂志 2011年第10期13卷 874-876页

作者：刘宇扬杨士伟周玉杰申华贾德安方哲胡宾高霏王晶哲首都医科大学附属北京安贞医院心内科12病房 100029

目的评价外源性补充磷酸肌酸对PCI术后心肌损伤的影响。方法选择接受PCI的冠心病患者200例,随机分为试验组和对照组,每组各100例。对照组采用指南推荐的常规治疗方案,试验组在常规治疗的基础上,术后即刻给予磷酸肌酸钠静脉滴注,2次/d,2... 详细信息

目的评价外源性补充磷酸肌酸对PCI术后心肌损伤的影响。方法选择接受PCI的冠心病患者200例,随机分为试验组和对照组,每组各100例。对照组采用指南推荐的常规治疗方案,试验组在常规治疗的基础上,术后即刻给予磷酸肌酸钠静脉滴注,2次/d,2 g/次,连续应用3 d。所有患者PCI术前及术后3 d检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平。结果试验组与对照组PCI术前CK-MB和cTnI差异无统计学意义(P>0.05),对照组PCI术后CK-MB及cTnI较试验组明显升高(P3倍的比例均明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论冠心病患者PCI术后即刻给予外源性磷酸肌酸有助于减少心肌损伤。

关键词：磷酸肌酸肌酸激酶 MB型肌钙蛋白1 再灌注损伤手术后并发症

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磷酸肌酸钠药学研究浅析

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中国医药科学 2014年第17期4卷 139-141页

作者：郭超王晶哲姜晶吉林大学化学学院吉林长春130012 吉林英联生物制药股份有限公司吉林长春130033

磷酸肌酸作为一种的新能量供给剂,能够给心肌细胞提供外源性能量,维持细胞高能磷酸水平,同时它还能通过稳定心肌细胞的纤维膜,抑制膜磷脂的降解,从而保护心肌。自国内仿制品上市十余年来,临床应用的适应症不断扩大,具有使用安全,疗效确... 详细信息

磷酸肌酸作为一种的新能量供给剂,能够给心肌细胞提供外源性能量,维持细胞高能磷酸水平,同时它还能通过稳定心肌细胞的纤维膜,抑制膜磷脂的降解,从而保护心肌。自国内仿制品上市十余年来,临床应用的适应症不断扩大,具有使用安全,疗效确切,质量可控等特性,因此国家药典委员会拟将载入2015版中国药典二部,在药学研究方面做出了更高的要求,本文针对磷酸肌酸钠的药学研究中,结晶水与晶型,质量标准提高的具体方面,如稳定性及贮藏条件,杂质限量及钡盐的控制,合成工艺与含量等进行了详细的解析。国家药典委员会制订的磷酸肌酸钠原料及制剂的质量标准,全面提升了产品的安全性,有效性和质量可控水平,最大程度地保证了患者的使用利益,维护了公众健康。

关键词：磷酸肌酸药学研究质量标准合成工艺

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miR-376c-3p通过靶向谷氨酸受体相互作用蛋白1影响乳腺癌细胞的增殖和迁移

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江苏大学学报（医学版） 2021年第5期31卷 380-385页

作者：王超高雨婷刘子瑶李涛王晶哲刘璐谢岩孙晓春江苏大学医学院江苏镇江212013

目的:探讨miR-376c-3p在乳腺癌中的表达水平、生物学功能及分子调控机制。方法:通过实时荧光定量PCR检测乳腺上皮MCF-10A细胞及乳腺癌细胞中miR-376c-3p表达水平;然后,用miR-376c-3p mimic转染乳腺癌MCF-7与MDA-MB-231细胞,用平板克隆... 详细信息

目的:探讨miR-376c-3p在乳腺癌中的表达水平、生物学功能及分子调控机制。方法:通过实时荧光定量PCR检测乳腺上皮MCF-10A细胞及乳腺癌细胞中miR-376c-3p表达水平;然后,用miR-376c-3p mimic转染乳腺癌MCF-7与MDA-MB-231细胞,用平板克隆实验、划痕实验以及Transwell实验分别检测其增殖与迁移能力。利用Starbase数据库预测miR-376c-3p的下游靶基因,并通过蛋白质印迹实验进行验证。结果:与人乳腺上皮MCF-10A细胞相比,乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中miR-376c-3p表达水平显著降低(P<0.01);平板克隆实验显示,过表达miR-376c-3p可以显著抑制乳腺癌细胞增殖(P均<0.05);Transwell实验和划痕实验表明,miR-376c-3p表达上调可抑制乳腺癌细胞迁移能力;通过生物信息学预测分析,结果显示miR-376c-3p可以与谷氨酸受体相互作用蛋白1(glutamate receptor interacting protein 1,GRIP1)结合,且蛋白质印迹实验证实过表达miR-376c-3p可以抑制乳腺癌细胞GRIP1表达,同时波形蛋白表达水平明显下调,E-钙黏蛋白表达明显上调。结论:在乳腺癌细胞中,miR-376c-3p表达下调;在体外,过表达miR-376c-3p可显著抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,可能通过靶向GRIP1调节乳腺癌细胞上皮间质转化进程。

关键词： miR-376c-3p 谷氨酸受体相互作用蛋白1 乳腺癌上皮间质转化细胞增殖与迁移

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关于高职院校微生物学课程教学改革探讨

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时代金融 2018年第12期 278-278页

作者：王晶哲赤峰工业职业技术学院内蒙古赤峰024000

高职院校是人才培养的重要基地,当前随着科学技术的不断发展,我国技术型人才严重缺乏,高职院校应当做好人才专业化技能的培养,有效提升学生的实践应用能力。微生物学是高职院校的重要学科,其涉及到的内容比较多,并且很多内容比较抽象,... 详细信息

高职院校是人才培养的重要基地,当前随着科学技术的不断发展,我国技术型人才严重缺乏,高职院校应当做好人才专业化技能的培养,有效提升学生的实践应用能力。微生物学是高职院校的重要学科,其涉及到的内容比较多,并且很多内容比较抽象,学生在学习的过程中容易产生厌倦的情绪,因此高职院校的教师应当做好课程教学体系和教学方法的改革,立足于学生职业能力培养的目标,紧跟专业发展的形势,提升教学的有效性,为社会培养专业化技能型人才。本文就高职院校微生物学课程教学改革方面的问题进行分析和探究,并提出一系列有效的改革对策,希望能够有助于高职微生物学课程教学。

关键词：微生物学教学改革改革对策高职院校

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高职院校微生物实验技术人员队伍研究

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现代营销（下） 2013年第4期 89-89页

作者：王晶哲赤峰工业职业技术学院 024000

在很多高职院校,它们在管理微生物实验室的过程不能严格地按照规定执行。从大多数的高职院校来看,没有具体地规定实验员岗位的工作职责和内容,缺乏有关的考核指标和考试体系。最近若干年来很多学校转变了办学指导思想,高职院校的招生规... 详细信息

在很多高职院校,它们在管理微生物实验室的过程不能严格地按照规定执行。从大多数的高职院校来看,没有具体地规定实验员岗位的工作职责和内容,缺乏有关的考核指标和考试体系。最近若干年来很多学校转变了办学指导思想,高职院校的招生规模在逐年扩大。如此一来,很多高职院校在微生物实验室方面的实验教学人员队伍的专业素质比较低,在管理运行模式方面也暴露出很多问题。因此,高职院校要切实通过各种措施来强化和增强微生物实验技术人员队伍的职责,切实增强学生的专业技能,提升人才培养质量。

关键词：高职院校微生物实验技术人员队伍

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关于食品微生物检测的质量控制管理探讨

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大众投资指南 2018年第11期 177-177页

作者：王晶哲赤峰工业职业技术学院

随着社会的不断发展和进步,人们对于食品安全的要求也越来越高,食品检测行业的标准也有了更高的要求。食品检测行业的工作人员们应该做好相关的检测工作,并且加强对于检测工作的质量控制与管理。这项检测工作不仅关系对食品企业的声誉,... 详细信息

随着社会的不断发展和进步,人们对于食品安全的要求也越来越高,食品检测行业的标准也有了更高的要求。食品检测行业的工作人员们应该做好相关的检测工作,并且加强对于检测工作的质量控制与管理。这项检测工作不仅关系对食品企业的声誉,更关系着食用相关产品的消费者的健康,本文就食品微生物检测的质量控制管理进行探讨,希望通过讨论进一步提高食品微生物检测水平。

关键词：食品微生物检测质量控制管理

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试论城市生活垃圾处理中微生物技术的应用

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环渤海经济瞭望 2018年第5期32卷 196-196页

作者：王晶哲赤峰工业职业技术学院

城市规模的迅速扩大和居民生活水平的提高,造成我国现阶段城市生活垃圾数量迅速增加,不仅给垃圾处理带来了较大的难度,也严重威胁着人们的身体健康以及自然环境,已经成为当今社会的主要问题之一。自然界中的微生物种类繁多,而且由于其... 详细信息

城市规模的迅速扩大和居民生活水平的提高,造成我国现阶段城市生活垃圾数量迅速增加,不仅给垃圾处理带来了较大的难度,也严重威胁着人们的身体健康以及自然环境,已经成为当今社会的主要问题之一。自然界中的微生物种类繁多,而且由于其特殊功效,在城市生活垃圾的处理过程中也发挥了重要的作用。笔者根据多年来的一些实际工作经验,先对城市生活垃圾现状、危害以及微生物特点进行简要论述,继而详述微生物技术在城市生活垃圾处理中的应用,希望能够对生活垃圾处理有所帮助,为保护我国宝贵的自然环境做出贡献。

关键词：城市生活垃圾现状微生物特点应用

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磷酸肌酸钠对劳力型心绞痛患者PCI术心肌损伤的干预

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中国循证心血管医学杂志 2011年第3期3卷 183-185,188页

作者：王静熊永红惠永明周玉杰杨士伟王晶哲首都医科大学附属北京安贞医院北京100029 北京丰台医院

目的评价外源性补充磷酸肌酸钠对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术心肌损伤的影响。方法选择住院并接受PCI治疗的劳力型心绞痛患者206例作为研究对象,随机分为2组,每组103例。对照组采用指南推荐的常规治疗方案,试验组患者在常规治疗的基础... 详细信息

目的评价外源性补充磷酸肌酸钠对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术心肌损伤的影响。方法选择住院并接受PCI治疗的劳力型心绞痛患者206例作为研究对象,随机分为2组,每组103例。对照组采用指南推荐的常规治疗方案,试验组患者在常规治疗的基础上术后即刻给予磷酸肌酸钠静脉滴注,每次2g,2次/日,连续应用3d。所有患者术前及术后3d(磷酸肌酸钠疗程结束)检测酸磷酸激酶同工酶MB(CK-MB)和肌钙蛋白I(TnI)浓度。结果 PCI术后对照组较试验组患者CK-MB(82.1±59.0vs.55.4±40.8U/L,P=0.01)及TnI水平(0.483±0.402vs.0.388±0.415ng/ml,P=0.02)均显著增高。结论劳力型心绞痛患者PCI术后即刻给予外源性磷酸肌酸有助于减轻心肌损伤。

关键词：磷酸肌酸经皮冠状动脉介入术冠状动脉疾病心肌损伤

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