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产气荚膜梭菌多重TaqMan 荧光定量PCR检测方法的建立

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中国兽医科学 2024年第2期54卷 174-184页

作者：王景松郭亚男王健霖李继东王建东宁夏农林科学院动物科学研究所宁夏银川750002 宁夏大学动物科技学院宁夏银川750021

为建立一种可以对产气荚膜梭菌(***)5种毒素基因cpa、cpb、etx、itx和cpe进行快速检测并分型的方法,根据NCBI数据库中公布的产气荚膜梭菌cpa、cpb、etx、itx和cpe毒素基因序列,设计特异性引物和TaqMan探针,通过构建标准阳性质粒、优化... 详细信息

为建立一种可以对产气荚膜梭菌(***)5种毒素基因cpa、cpb、etx、itx和cpe进行快速检测并分型的方法,根据NCBI数据库中公布的产气荚膜梭菌cpa、cpb、etx、itx和cpe毒素基因序列,设计特异性引物和TaqMan探针,通过构建标准阳性质粒、优化反应条件、构建标准曲线,并进行特异性、灵敏度、重复性试验以及临床样本检测,建立可同时检测5种毒素基因的多重TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示,建立的多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的扩增曲线具有良好的线性关系,R^(2)>0.99,90%

关键词：产气荚膜梭菌毒素基因多重TaqMan荧光定量PCR

米曲霉菌和枯草芽孢杆菌混合菌剂对致病性微生物的影响

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动物医学进展 2024年第7期45卷 124-129页

作者：郭亚男杨萌萌王景松王建东毕敬全梁小军宁夏农林科学院动物科学研究所宁夏银川750002 宁夏大学动物科技学院宁夏银川750021 山东九一生物科技股份有限公司山东淄博255020

堆肥是牛粪回收利用的一种有效方法,是实现种植与资源化的关键环节。为了探讨米曲霉菌和枯草芽孢杆菌复合微生物菌剂对肉牛粪堆肥及牛致病性原核微生物和真核微生物的影响,采用条垛式堆肥发酵工艺,以添加复合微生物菌剂发酵的肉牛粪为... 详细信息

堆肥是牛粪回收利用的一种有效方法,是实现种植与资源化的关键环节。为了探讨米曲霉菌和枯草芽孢杆菌复合微生物菌剂对肉牛粪堆肥及牛致病性原核微生物和真核微生物的影响,采用条垛式堆肥发酵工艺,以添加复合微生物菌剂发酵的肉牛粪为研究材料,堆肥持续40 d,监测堆肥过程中物料温度、pH、C/N比值、全磷、全钾、粗纤维、铵态氮、硝态氮和对肉牛具有致病性的原核微生物和真核微生物的动态变化。结果表明,接种复合微生物菌剂第7天进入高温期(>50℃),最高温度达58.1℃,高温持续9 d。堆肥结束时,pH为8.63,C/N比值降至13.6;全磷、全钾基本呈现逐渐下降趋势;铵态氮和硝态氮含量显著增高;寄生原虫卵囊含量OPG由1200降低至0;大肠埃希氏菌含量由4×10^(8)CFU/mL降低至0 CFU/mL。葡萄球菌、放线菌、克雷伯菌、变形杆菌和不动杆菌、芽孢杆菌、链球菌等原核微生物,阿米巴、隐孢子虫、艾美耳球虫、念珠菌、曲霉菌等真核微生物菌被完全杀灭或显著减少。综上所述,复合微生物菌剂不仅对肉牛粪发酵堆肥腐熟效果良好,而且可有效减少或杀灭牛粪中对牛有害的微生物。

关键词：牛粪米曲霉菌枯草芽孢杆菌堆肥

牛支原体可视化重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

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浙江农业学报 2024年第8期36卷 1811-1819页

作者：王健霖田兴苗王景松戴莎莎郭亚男何生虎李继东宁夏大学动物科技学院宁夏农林科学院动物科学研究所

为建立一种对牛支原体高效、快捷的可视化重组酶聚合酶扩增（LFD-RPA）临床诊断方法，以牛支原体uvrc基因序列为靶基因，设计特异性引物和探针，通过筛选引物和探针、优化反应条件，并通过灵敏度、特异性、重复性和临床样本检测试验进... 详细信息

为建立一种对牛支原体高效、快捷的可视化重组酶聚合酶扩增（LFD-RPA）临床诊断方法，以牛支原体uvrc基因序列为靶基因，设计特异性引物和探针，通过筛选引物和探针、优化反应条件，并通过灵敏度、特异性、重复性和临床样本检测试验进行验证。结果显示，该试验建立的牛支原体LFD-RPA最佳引物为F2/R2,最佳反应条件为39℃、 25 min;检测灵敏度可达2.08 copies·μL-1,是普通PCR灵敏度的100倍；与滑液囊支原体、沙门氏菌、绵羊肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和产气荚膜梭菌之间无交叉反应；重复性稳定；对50份鼻拭子样本进行检测，阳性率为26%,与我国行业标准PCR检测方法的符合率为89.6%。该试验成功建立了牛支原体LFD-RPA检测方法，该方法具有操作简便、快速、高效、敏感等优点，为牛支原体的临床快速诊断提供了技术支撑。

关键词：牛支原体重组酶聚合酶扩增可视化检测方法

宁夏部分地区犊牛腹泻样本大肠杆菌分离菌株的毒力因子检测与分析

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畜牧兽医学报 2024年第7期55卷 3261-3266页

作者：王玮王景松郭亚男高乐王玲玲陈灿王健霖王建东马科李继东宁夏农林科学院动物科学研究所银川750002 宁夏大学动物科技学院银川750021 宁夏同心县科技服务中心同心751300

旨在调查宁夏地区犊牛腹泻性大肠杆菌(Escherichia coli,***)流行情况及毒力因子流行特点。对宁夏地区共采集332份腹泻犊牛直肠粪便进行病原分离,利用PCR方法对156株大肠杆菌分离株进行13种相关毒力基因检测。结果共分离出156株大肠杆菌... 详细信息

旨在调查宁夏地区犊牛腹泻性大肠杆菌(Escherichia coli,***)流行情况及毒力因子流行特点。对宁夏地区共采集332份腹泻犊牛直肠粪便进行病原分离,利用PCR方法对156株大肠杆菌分离株进行13种相关毒力基因检测。结果共分离出156株大肠杆菌(46.99%),共检出136株含有毒力因子的大肠杆菌,表明目前宁夏地区腹泻犊牛大肠杆菌阳性率较高,毒力因子组合复杂,优势毒力因子为irp2。

关键词：犊牛腹泻性大肠杆菌毒力因子

绵羊大肠杆菌与A型产气荚膜梭菌混合感染的病原分离鉴定

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现代畜牧兽医 2024年第3期 1-6页

作者：王玲玲王景松王健霖王玮陈灿宋前进郭亚男李继东宁夏大学动物科技学院宁夏银川750021 宁夏农林科学院动物科学研究所宁夏银川750021 银川市畜牧技术推广服务中心宁夏银川750021

试验旨在对宁夏一绵羊场疑似大肠杆菌与A型产气荚膜梭菌混合感染的死亡病例进行确诊并提出相应的防治方案。采用产气荚膜梭菌显色培养基及伊红美蓝固体培养基进行病原分离培养,对分离菌株进行16S rRNA基因序列PCR检测,依据16S rRNA序列... 详细信息

试验旨在对宁夏一绵羊场疑似大肠杆菌与A型产气荚膜梭菌混合感染的死亡病例进行确诊并提出相应的防治方案。采用产气荚膜梭菌显色培养基及伊红美蓝固体培养基进行病原分离培养,对分离菌株进行16S rRNA基因序列PCR检测,依据16S rRNA序列构建分离株分子进化树;之后对大肠杆菌分离株毒素因子进行PCR检测,对产气荚膜梭菌分离株进行毒素分型鉴定。结果显示,分离株PCR检测获得了16S rRNA特异性条带;分子进化树结果显示,大肠杆菌分离菌株NXDC001与大肠杆菌在同一分支,产气荚膜梭菌分离菌株NXSJ001与产气荚膜梭菌在同一分支。大肠杆菌分离株检测出毒素因子HPI(irp2)及LEE(eae);产气荚膜梭菌分离株携带毒素因子cpa,证明分离株为A型产气荚膜梭菌。研究表明,试验成功分离鉴定大肠杆菌及A型产气荚膜梭菌各一株,证明病死羊为大肠杆菌及A型产气荚膜梭菌混合感染。

关键词：大肠杆菌 A型产气荚膜梭菌混合感染绵羊

他有一支犀利的笔——新华日报高级编辑李承邰

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中国记者 1989年第10期 7-8页

作者：王景松

李承邰在新闻战线上是从当小兵起步的。先是搞通联,后当编辑、记者,再到现在的高级编辑,并担任新华日报编委、秘书长、兼江苏新闻研究所所长。多方面的实践使他受到严格锻炼,积累了比较深厚的理论和专业功底。他敏于观察,勤于思考。采... 详细信息

李承邰在新闻战线上是从当小兵起步的。先是搞通联,后当编辑、记者,再到现在的高级编辑,并担任新华日报编委、秘书长、兼江苏新闻研究所所长。多方面的实践使他受到严格锻炼,积累了比较深厚的理论和专业功底。他敏于观察,勤于思考。采编过许多有分量、有影

关键词：高级编辑新华日报四项基本原则

牛羊产气荚膜梭菌多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与流行病学调查

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牛羊产气荚膜梭菌多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与流行病...

作者：王景松宁夏大学

学位级别：硕士

产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性厌氧菌,广泛存在于环境中,包括污染的水、食物和土壤中,当机体胃肠道菌群紊乱、气温骤降等应激反应时,其可大量繁殖并产生不同毒素,引起人类和动物气性坏疽、食物中毒、肠炎、肠毒血症等多种疾病,严重危害... 详细信息

产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性厌氧菌,广泛存在于环境中,包括污染的水、食物和土壤中,当机体胃肠道菌群紊乱、气温骤降等应激反应时,其可大量繁殖并产生不同毒素,引起人类和动物气性坏疽、食物中毒、肠炎、肠毒血症等多种疾病,严重危害人类和动物的健康,不仅给养殖户造成严重的经济损失,影响畜牧业的发展,而且对公共安全造成危胁。产气荚膜梭菌分型比较复杂,特异性诊断是防治该病的重要环节,因此,本研究以产气荚膜梭菌5种毒素α、β、ε、ι和cpe为靶基因,设计特异性引物和TaqMan探针,建立一种可以检测5种毒素基因的多重TaqMan荧光定量PCR检测方法,并对宁夏部分地区牛羊产气荚膜梭菌开展流行病学调查。研究结果如下:1.产气荚膜梭菌多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立根据NCBI数据库中产气荚膜梭菌α、β、ε、ι、cpe毒素基因序列,设计特异性引物和TaqMan探针,通过构建标准阳性质粒、优化反应条件、构建标准曲线,并进行特异性、灵敏度、重复性和临床样本检测试验,建立可同时检测5种毒素基因的多重TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的多重TaqMan荧光定量PCR检测方法其扩增曲线具有良好的线性关系,R2>0.99,90%

关键词：产气荚膜梭菌毒素多重TaqMan荧光定量PCR 流行病学

廊坊邮政物流配送服务满意度调查及提升对策研究

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廊坊邮政物流配送服务满意度调查及提升对策研究

作者：王景松河北经贸大学

学位级别：硕士

随着中国经济的快速增长,城乡二元差距已经成为制约和阻碍我国经济进一步发展的关键因素,因而国家出台了一系列鼓励农业发展的产业政策。物流业作为第三产业,不仅能够降低农民的生活和生产成本,而且能够有效缩小城乡发展差距。目前农村... 详细信息

随着中国经济的快速增长,城乡二元差距已经成为制约和阻碍我国经济进一步发展的关键因素,因而国家出台了一系列鼓励农业发展的产业政策。物流业作为第三产业,不仅能够降低农民的生活和生产成本,而且能够有效缩小城乡发展差距。目前农村物流价格的高昂和服务效率低下等问题严重阻碍了农村物流市场的专业化发展,影响了物流企业的市场占有率和发展水平,同时也影响了农民对物流公司服务满意度和信任度。本文在关于客户满意度相关理论和模型的研究基础上,及对现有邮政物流践行的经验分析上,通过实证调研、深度访谈等调查方式,对廊坊市的农村邮政物流的经营业绩进行研究剖析,分析邮政物流作为国有企业在农村市场中的经营业绩和服务表现。鉴于经营绩效的多元性和复杂性,本文从消费者的角度选择了顾客满意度这一指标,从消费者的消费感知与期望的角度分析农村邮政物流的经营情况,及其邮政物流业绩的优劣表现和顾客的期望,为增强邮政物流企业的市场竞争能力,为提高市场占有率、提升消费者忠诚度提供借鉴,同时也为行政部门对农村物流业的规划与管理提供借鉴之处。本文通过实证调研和制定顾客满意度量表的基础上,得出以下结论:邮政物流市场占有率、营业收入、网点建设、商业结构等方面经营绩效得到较大提升;服务便捷性、服务效能、服务安全性、服务价格等四个变量对客户满意度影响较大,进而影响到客户满意度和忠诚度;邮政物流客户满意度基本处于满意状态,但物流企业还存在问题与不足,从而提出目前廊坊邮政物流公司所存在的服务质量问题及其相应的改进措施,对物流企业起到一定的借鉴作用。

关键词：邮政物流顾客满意度物流配送

GeS2-Sb2S3-PbCl2红外硫系玻璃与玻璃陶瓷材料研究

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GeS2-Sb2S3-PbCl2红外硫系玻璃与玻璃陶瓷材料研究

作者：王景松宁波大学

学位级别：硕士

硫系玻璃的析晶研究一直以来都是玻璃科学中的研究热点。通过对玻璃微晶化处理后得到的硫系玻璃陶瓷,在保留良好红外透过性能的同时,热学、力学与机械等性能都能得到较大程度地提高,已经成为一种新的红外光学材料。但是,目前大多数关于... 详细信息

硫系玻璃的析晶研究一直以来都是玻璃科学中的研究热点。通过对玻璃微晶化处理后得到的硫系玻璃陶瓷,在保留良好红外透过性能的同时,热学、力学与机械等性能都能得到较大程度地提高,已经成为一种新的红外光学材料。但是,目前大多数关于硫系玻璃的析晶研究主要都集中在提升玻璃的基础性能这一方面,而针对玻璃基质中析出晶体的功能化设计却鲜有报道。针对此问题,本工作中提出了将硫系玻璃析晶与稀土离子掺杂发光两个研究点相结合,研发出适于稀土离子掺杂的新型硫系玻璃陶瓷。PbCl晶体是一种重要红外功能晶体,而且适于稀土掺杂。因此,本工作将PbCl引入硫系玻璃并进行微晶化实验,期望制备出PbCl纳米晶体复合的硫系玻璃陶瓷,为今后稀土离子的高效发光提供一种新的基质材料。本文开展了GeS-SbS-PbCl硫系玻璃的形成区、性能和析晶行为的研究工作。第一章为绪论,首先简单说明了硫系玻璃的特性及其应用;然后着重介绍了新型硫卤玻璃及玻璃陶瓷的研究进展,其中,详细介绍了卤化物掺杂Ge-Ga-S、Ge-Ga-Se、Ge-Sb-S、Ge-Sb-Se等几种不同基质玻璃的研究情况,而玻璃陶瓷部分主要分为硫属化物晶体复合的硫系玻璃陶瓷以及卤化物晶体复合的硫系玻璃陶瓷两方面进行介绍;其次介绍了卤化铅晶体复合玻璃陶瓷的研究情况。最后提出了本研究工作的具体内容、研究目的和意义。第二章介绍了本研究实验工作中所用到的实验原料、实验仪器和硫系玻璃的详细制备流程及注意事项,并对结构性能、热学性能、光学性能、机械性能的测量原理和表征仪器进行了认识和学习。第三章详细地研究了GeS-SbS-PbCl的玻璃形成区、性能及析晶行为。在成玻区方面,根据样品析晶程度的不同将其划分为三个区域:玻璃区,玻璃陶瓷区以及陶瓷区。并对PbCl在GeS-SbS硫系玻璃中的溶解行为作出解释,详细阐述了这种特殊玻璃形成区出现的内在原因。值得一提的是,该成玻区的确定为制备复合PbCl晶体的硫系玻璃陶瓷提供两种方式:一种是传统的在玻璃区选取样品进行热处理,另一种是在玻璃陶瓷区利用精确的组分设计通过一步熔融淬冷法直接制得含纳米PbCl晶粒的透明硫系玻璃陶瓷。尤其是第二种方式,这为硫系玻璃陶瓷的制备提供了一种新的可能。第四章细致地探讨了PbCl含量对GeS-SbS玻璃网络结构与性能的影响以及GeS-SbS玻璃中PbCl的自析晶行为。选取(100-x)(0.5GeS-0.5SbS)-xPbCl(0≤x≤25)系列样品为研究对象。分析了不同含量PbCl对玻璃光学透过性、热学性能、物理机械性能的影响。并利用XRD、SEM与Raman等技术对x>10 mol%时出现的PbCl自析晶行为展开了深入研究,发现不同于传统的通过二次热处理在玻璃基质中析出晶体的方式,在玻璃熔制过程中PbCl出现一种有趣的过饱和与重结晶行为,这种行为是自发的。第五章选取成玻区内不同样品进行了可控析晶实验(选取不同样品进行重复性实验目的是为了验证不同组分中PbCl晶体析出的可重复性以及更清晰地认识GeS-SbS玻璃中PbCl的受控析晶机理),认识到析晶进一步改善了样品的物理机械性能,分析了热处理温度以及热处理持续时间这两种变量对晶体生长速率的影响问题,并利用Ostwald熟化理论对GeS-SbS玻璃基质中PbCl晶体的生长行为模式进行了清晰的论述。最后一章为结论,总结了本研究工作得出的主要实验结论,包含了GeS-SbS-PbCl伪三元体系的玻璃形成区、PbCl的引入对GeS-SbS硫系玻璃的性能与网络结构的影响、GeS-SbS硫系玻璃中PbCl自发析晶与受控析晶机理的总结分析。通过本论文工作,对GeS-SbS-PbCl的玻璃形成区、性能和析晶行为开展了细致的研究,完善了GeS-SbS-PbCl硫系玻璃的组成、结构和性能三者之间关联规律,并通过自发析晶与受控析晶两种不同方式成功制得了性能优良的新型PbCl纳米晶复合的硫系玻璃陶瓷材料,同时对其析晶机理进行了详细的分析论述,为今后PbCl晶体复合硫系玻璃陶瓷的功能化设计提供了理论与数据参考。

关键词：硫系玻璃析晶 PbCl2 玻璃陶瓷