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作者：王日玮南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年约有130万人被诊断为乳腺癌,约40万人死于该病。随着生活环境、生活方式和膳食结构的改变,世界各地乳腺癌的发病率明显上升,并呈年轻化的趋势。在我国过去的十年中,乳腺癌发病... 详细信息

研究背景：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年约有130万人被诊断为乳腺癌,约40万人死于该病。随着生活环境、生活方式和膳食结构的改变,世界各地乳腺癌的发病率明显上升,并呈年轻化的趋势。在我国过去的十年中,乳腺癌发病率上升了27%,其中40%的患者在5年内的死亡率呈现出接近西方的态势。在京津沪等大城市,乳腺癌患病率已居女性恶性肿瘤之首。乳腺癌业已成为威胁妇女生命和健康的头号杀手。随着现代分子生物学技术的不断发展,对乳腺癌的认识变得越来越深入：乳腺癌是一种生物学特征高度异质性的恶性肿瘤,根据组织学、免疫组化及分子生物学技术可将其分为不同的亚型。三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer TNBC)是指ER、PR、Her-2都为阴性的乳腺癌,约占所有乳腺癌类型的10-17%左右。随着对TNBC的了解不断深入,现已明确其生物学特性有别于其它类型的乳腺癌。目前对TNBC的研究多从basal-like乳腺癌入手,原因在于多数TNBC具有basal-like乳腺癌表现：侵袭性强,淋巴细胞多呈阳性,核分裂相等级高,有丝分裂计数多,肿瘤细胞坏死,肿瘤中间形成硬化灶等。学者Nielsen利用免疫组化研究发现：basal-like乳腺癌中ER、Her-2阴性,但表达细胞角蛋白(cytokeratin)、CK5/6及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor EGFR)。CK5/6为表达于正常基底或者肌上皮乳腺组织的高分子量细胞角蛋白,被认为是鉴定basal-like乳腺癌最有效的标志。basal-like乳腺癌其它的生物学标志还有CK14,CK17,p53,平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin), c-kit、钙联蛋白(P-cadherin)等。一些研究显示,至少有25%的TNBC发生BRCA1的有害突变,而其它类型的乳腺癌只有2%发生BRCA1突变,这些研究证据表明了BRCA1突变与TNBC之间的关联。虽然大多数basal-like乳腺癌是TNBC,但不能笼统认为两者是一种类型,因为basal-like乳腺癌有时候会表达ER、PR或Her-2,且TNBC有时也不会表达基底样标志。目前TNBC的治疗策略主要有：化疗、放疗、基因治疗及靶向药物治疗。继续探索TNBC的治疗方法将是乳腺癌研究的一个重点方向。 TNBC中多种肿瘤抑制因子缺失,其中包括Beclinl基因。Beclinl基因包含12个外显子,长度从61至794bp;内含子长度从106bp至2kbp。完整的Beclinl基因序列编码2098bp转录子,包含120-bp5’UTR,1353-bp编码区和625-bp3’UTR,其mRNA编码60kDa大小的蛋白,此蛋白能与凋亡抑制剂Bcl-2相互作用。 Beclinl含Bcl-2同源区(BH3),卷曲螺旋区(CCD)及进化保守区(ECD),这些区域能够结合不同的蛋白。通过ECD, Beclinl能结合磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),Vps34,从而募集更多的Atg蛋白,调节自噬溶酶体的形成。通过BH3, Beclinl能结合Bcl-2/Bcl-XL,从而形成Bcl-2/Bcl-XL-Beclinl复合物(Bcl-2通过抑制凋亡的诱导而促进细胞的生存,其在多种肿瘤中过表达),从而调节细胞凋亡。基于此,Beclinl基因可双重调节细胞自噬及凋亡。哺乳类细胞过表达Beclinl基因时,能调节细胞自噬。自噬可通过与凋亡不同的降解机制(膜泡降解)和分子机制(特定基因的激活),使细胞程序性死亡,可作为第二种程序性细胞死亡。当前多从自噬角度探讨Beclinl基因与各种肿瘤的关系,其在多种人类癌症中表达下调,包括75%的卵巢癌,50%的乳腺癌、40%的前列腺癌、结直肠癌等。学者Liang利用Western blot技术分析了乳腺癌来源的细胞系、正常乳腺组织及来源于侵袭性散发乳腺癌的组织。分析了11种乳腺癌细胞系,其中只有3种乳腺癌细胞发现了Beclinl基因。在17例正常乳腺组织及对照的乳腺癌组织中,15例正常组织检测到了高水平的Beclin1基因表达,远远高于癌组织。而与之相反的是,16例癌组织中发现了对照蛋白的高表达,而正常组织则无如此表现,Beclin1在乳腺癌中表达下调。从凋亡角度研究Beclin1基因与肿瘤的关系较少。学者Furuya发现人类胃癌细胞MKN28过表达Beclin1能够促进顺铂诱导的癌细胞凋亡,用RNA干扰技术沉默MKN1细胞系中Beclin1基因的表达,则能减轻细胞毒性,与此同时,caspase-9活性的增加。因此,Beclin1通过caspase-9来促进顺铂诱导的胃癌细胞凋亡。他们的研究表明Beclin1可作为一个促凋亡分子。

关键词： Beclin1基因自噬凋亡 BT-549细胞多柔比星

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自噬基因Beclin1与乳腺癌的关系

中国普通外科杂志 2012年第5期21卷 591-596页

作者：王日玮吴爱国南方医科大学珠江医院普通外科广东广州510282

Beclin1基因是近年来许多学者研究的热点。笔者就自噬在癌症中的作用及其调节机制,Beclin1在乳腺癌中的缺失或下调机制、自噬与乳腺癌的关系、利用自噬治疗乳腺癌的策略等方面进行综述。

关键词：乳腺肿瘤 Beclin1基因自噬综述文献

腹腔镜与开腹手术治疗胃癌的近期临床效果对比分析

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医学理论与实践 2017年第19期30卷 2873-2875页

作者：王日玮江西省九江市第一人民医院普外科 332000

目的:对比腹腔镜与开腹手术治疗胃癌的近期临床效果。方法:选取我院2014年4月-2016年12月所收治的89例进展期胃癌并进行手术的患者为观察对象,根据不同手术方式分为两组,记录两组的手术情况、近期并发症、术后恢复情况及住院费用并进行... 详细信息

目的:对比腹腔镜与开腹手术治疗胃癌的近期临床效果。方法:选取我院2014年4月-2016年12月所收治的89例进展期胃癌并进行手术的患者为观察对象,根据不同手术方式分为两组,记录两组的手术情况、近期并发症、术后恢复情况及住院费用并进行统计学分析。结果:两组在手术耗时、手术出血量、肿瘤近远端切缘长度、淋巴结清扫数目、住院费用及近期并发症方面差异无统计学意义(P>0.05);腹腔镜组在术后排气时间、使用止痛药物次数及住院时长方面均低于开腹组,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:腹腔镜手术相比较开腹手术在治疗胃癌方面效果相当,但创伤小、恢复快,不增加住院费用及术后近期并发症的发生率,在充分掌握适应证的前提下,应优先考虑应用。

关键词：腹腔镜手术胃肿瘤近期疗效

Beclin1基因增强三阴性乳腺癌细胞BT-549对多柔比星的敏感性

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实用医学杂志 2013年第6期29卷 870-873页

作者：王日玮吴爱国王梦川原红军南方医科大学珠江医院普外科广州市510282

目的:探讨Beclin1基因对三阴性乳腺癌细胞BT-549增殖及多柔比星作用于癌细胞的影响。方法:脂质体法分别将质粒pDsRed-C1、pDsRed-C1-Beclin1转染于人三阴性乳腺癌BT-549细胞株。转染后一组用多柔比星处理,另一组不做处理。MTT法分析Becl... 详细信息

目的:探讨Beclin1基因对三阴性乳腺癌细胞BT-549增殖及多柔比星作用于癌细胞的影响。方法:脂质体法分别将质粒pDsRed-C1、pDsRed-C1-Beclin1转染于人三阴性乳腺癌BT-549细胞株。转染后一组用多柔比星处理,另一组不做处理。MTT法分析Beclin1过表达对BT-549细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:多柔比星处理前后,Beclin1组细胞增殖均慢于阴性对照组和空白组细胞(各P<0.01);细胞凋亡的变化:多柔比星处理前转染pDsRed-C1-Beclin1的BT-549细胞凋亡率为(8.81±1.45)%,高于转染pDsRed-C1细胞组和空白组(P<0.05),多柔比星处理后,Beclin1组细胞的凋亡率为(14.3±1.09)%,亦高于阴性对照组和空白组(P=0.00)。结论:Beclin1基因过表达抑制BT-549细胞的增殖,增强癌细胞对多柔比星的敏感性。

关键词： Beclin1基因 BT-549细胞多柔比星

MRI与MSCT诊断胃癌淋巴结转移的应用价值及其影像学特点

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微创医学 2022年第3期17卷 336-338,375页

作者：夏云王日玮九江市第一人民医院江西省九江市332000

目的探究磁共振成像(MRI)与多层螺旋CT(MSCT)在胃癌淋巴结转移中的诊断价值及其影像学特点。方法选择行手术治疗的75例胃癌患者为研究对象,所有患者均行MRI及MSCT检查,分析两种检查方法的影像学特点,并以病理结果作为诊断“金标准”,分... 详细信息

目的探究磁共振成像(MRI)与多层螺旋CT(MSCT)在胃癌淋巴结转移中的诊断价值及其影像学特点。方法选择行手术治疗的75例胃癌患者为研究对象,所有患者均行MRI及MSCT检查,分析两种检查方法的影像学特点,并以病理结果作为诊断“金标准”,分析MRI与MSCT对胃癌淋巴结转移(术前N分期)的诊断价值。结果75例胃癌患者,共切除淋巴结572枚,其中39例患者病变位于胃体,36例病变位于贲门;N0期7例,N1期12例,N2期27例,N3a期18例,N3b期11例。术前MRI检查诊断N0期、N1期、N2期、N3a期、N3b期的准确率分别为94.67%、89.33%、88.00%、92.00%、96.00%;术前MSCT检查诊断N0期、N1期、N2期、N3a期、N3b期的准确率分别为96.00%、94.67%、94.67%、93.33%、97.33%。Kappa检验结果显示,MRI诊断胃癌淋巴结转移N0、N1、N3a分期与病理检查结果的一致性均尚可(Kappa值=0.685、0.603、0.746,均P<0.001),诊断N2及N3b分期与病理检查结果的一致性良好(Kappa值=0.772、0.834,均P<0.001);MSCT诊断胃癌淋巴结转移N0、N1、N2、N3a及N3b分期与病理检查结果的一致性均良好(Kappa值=0.778、0.787、0.886、0.821、0.885,均P<0.001)。结论MRI及MSCT在胃癌淋巴结转移的诊断中均具有较高的临床应用价值,可为胃癌淋巴结转移术前诊断提供可靠依据。

关键词：胃癌淋巴结转移磁共振成像多层螺旋CT 诊断价值影像学表现

大黄素联合5-氟尿嘧啶对结肠癌荷瘤小鼠免疫功能及移植瘤生长的影响

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中国临床药理学杂志 2020年第22期36卷 3773-3777页

作者：王日玮廖强明万焱华鲍新民九江市第一人民医院普外三科江西九江332000

目的研究大黄素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对结肠癌荷瘤小鼠免疫功能及移植瘤生长的影响。方法采用小鼠右侧背部皮下接种结肠癌细胞株CT26的方法建立结肠癌荷瘤小鼠模型,将结肠癌荷瘤小鼠随机分为模型组(n=20)、对照组(n=20)、实验组(n=20)... 详细信息

目的研究大黄素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对结肠癌荷瘤小鼠免疫功能及移植瘤生长的影响。方法采用小鼠右侧背部皮下接种结肠癌细胞株CT26的方法建立结肠癌荷瘤小鼠模型,将结肠癌荷瘤小鼠随机分为模型组(n=20)、对照组(n=20)、实验组(n=20)及联合组(n=20)。对照组小鼠腹腔注射5-Fu(20 mg·kg^-1·d^-1),实验组腹腔注射大黄素(100 mg·kg^-1·d^-1),联合组腹腔注射5-Fu(20 mg·kg^-1·d^-1)+大黄素(100 mg·kg^-1·d^-1),模型组腹腔注射等量生理盐水,每天1次,连续干预14 d。用流式细胞仪检测各组小鼠外周血免疫性T细胞亚群分布;测定各组的抑瘤率及胸腺(脾)指数;用TdT介导的脱氧尿嘧啶缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡;用免疫组化法检测移植瘤组织P53、Ki-67蛋白表达。结果对照组、实验组与联合组小鼠抑瘤率分别为(57.21±3.94)%,(48.65±4.07)%,(69.73±4.86)%;模型组、对照组、实验组与联合组小鼠外周血CD3+百分比分别为(72.93±2.41)%,(61.32±2.13)%,(83.62±2.98)%,(76.03±3.11)%;CD4+/CD8+分别为1.74±1.19,0.68±0.45,4.19±1.52,2.83±1.31;移植瘤组织P53蛋白阳性细胞百分比分别为(21.43±2.84)%,(47.65±4.12)%,(39.86±3.73)%,(56.34±5.02)%;Ki-67蛋白阳性细胞百分比分别为(50.32±4.08)%,(28.21±3.23)%,(35.73±2.94)%,(15.02±4.56)%。联合组的抑瘤率显著高于对照组与实验组,且对照组高于实验组;与模型组比较,对照组小鼠外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+与胸腺指数、脾指数均降低,而联合组高于模型组,实验组高于联合组;与模型组比较,对照组小鼠外周血CD8+百分比升高,而联合组低于模型组,实验组低于联合组;与模型组比较,其他3组小鼠移植瘤细胞AI与移植瘤组织P53蛋白阳性细胞百分比均升高,联合组高于对照组与实验组,且除移植瘤细胞AI外,其他指标对照组高于实验组,同时Ki-67蛋白阳性细胞百分比降低,且联合组低于实验组,对照组低于实验组(均P<0.05)。结论大黄素联合5-Fu可通过上调移植瘤组织P53蛋白表达,下调Ki-67蛋白表达有效抑制结肠癌荷瘤小鼠移植瘤生长,同时改善结肠癌荷瘤小鼠的免疫功能。

关键词：结肠癌 5-氟尿嘧啶大黄素免疫功能抑瘤率凋亡

腹腔镜下远端胃癌D2根治术淋巴结清扫技术的研究

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实用医学杂志 2018年第20期34卷 3434-3436页

作者：鲍新民万焱华王日玮刘军九江市第一人民医院普外科江西九江332000

目的探讨腹腔镜远端胃癌淋巴结清扫入路的近期临床效果。方法回顾性分析我院2014年1月至2017年12月所收治的130例远端胃癌患者的临床资料,分为腹腔镜组及开腹组,腹腔镜组淋巴结清扫顺序为6组→4sb组、4d组→8a组、11p组、7组、9组→12a... 详细信息

目的探讨腹腔镜远端胃癌淋巴结清扫入路的近期临床效果。方法回顾性分析我院2014年1月至2017年12月所收治的130例远端胃癌患者的临床资料,分为腹腔镜组及开腹组,腹腔镜组淋巴结清扫顺序为6组→4sb组、4d组→8a组、11p组、7组、9组→12a组、5组、1组、3组,比较两组间手术时长、淋巴结清扫数目、术中出血量、住院费用、术后恢复情况及近期并发症,并进行统计分析。结果腹腔镜组在手术时间(191.21±24.90)min、淋巴结清扫数目(21.44±5.22)枚、住院费用(4.90±0.47)万元方面,与开腹组差异无统计学意义(P <0.05)。腹腔镜组在术中出血量(81.77±33.27)mL、切口长度(5.34±1.21)cm、术后下床活动时间(34.77±11.51)h、使用止痛药物次数(3.03±1.07)次及住院时间(23.19±5.91)d方面均低于开腹组且差异均具有统计学意义(P <0.05)。结论本研究的腹腔镜远端胃癌淋巴结清扫顺序,在根治效果方面完全能达到开腹手术水平,手术时间与开腹相近,近期效果显著,在充分掌握适应证的前提下,应提倡应用。

关键词：腹腔镜远端胃癌淋巴结清扫

多层螺旋CT与动态增强磁共振成像在乳腺癌腋窝淋巴结转移术前评估中的应用价值

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微创医学 2022年第5期17卷 564-568页

作者：夏云王日玮九江市第一人民医院江西省九江市332000

目的探讨多层螺旋CT(MSCT)与动态增强磁共振成像(DCE-MRI)在乳腺癌腋窝淋巴结转移术前评估中的应用价值。方法选择92例乳腺癌患者,均进行MSCT与DCE-MRI检查。将病理检查结果作为“金标准”,分析MSCT、DCE-MRI诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移... 详细信息

目的探讨多层螺旋CT(MSCT)与动态增强磁共振成像(DCE-MRI)在乳腺癌腋窝淋巴结转移术前评估中的应用价值。方法选择92例乳腺癌患者,均进行MSCT与DCE-MRI检查。将病理检查结果作为“金标准”,分析MSCT、DCE-MRI诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移的应用价值,并计算MSCT、DCE-MRI诊断结果与病理检查结果的一致性。结果术后病理检查结果显示,92例乳腺癌患者中检出58例腋窝淋巴结转移,占比63.04%(58/92);DCE-MRI诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移的特异度(91.18%)、准确度(92.39%)、阳性预测值(94.74%)均高于MSCT(61.76%、76.09%、79.03%,均P0.05)。DCE-MRI诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移与病理检查结果的一致性极好(Kappa值=0.838),MSCT诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移与病理检查结果的一致性较理想(Kappa值=0.474)。结论乳腺癌腋窝淋巴结转移术前评估中使用MSCT、DCE-MRI诊断灵敏度均较高,可清晰显示病变情况,而DCE-MRI准确度及特异度均高于MSCT,与病理检查结果具有极高的一致性,应用价值更高。

关键词：乳腺癌腋窝淋巴结转移术前评估多层螺旋CT 动态增强磁共振成像应用价值

beclin 1过表达对三阴性乳腺癌BT-549细胞生长抑制作用观察

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中华肿瘤防治杂志 2014年第15期21卷 1148-1152页

作者：吴爱国王梦川王日玮原红军纪术峰邵国利郑临海范旭龙焦庆丽南方医科大学附属珠江医院普通外科广东广州510282

目的:观察自噬调控基因beclin 1过表达对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)BT-549细胞的体外生长影响。方法:应用荧光显微镜观察细胞转染效率,采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞beclin 1mRNA和蛋白表达水平,采用吖啶... 详细信息

目的:观察自噬调控基因beclin 1过表达对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)BT-549细胞的体外生长影响。方法:应用荧光显微镜观察细胞转染效率,采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞beclin 1mRNA和蛋白表达水平,采用吖啶橙染色观察细胞自噬情况,采用MTT检测细胞的增殖率,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况。结果:细胞转染48h实验组和对照组的细胞转染效率均>45%,qRT-PCR提示实验组细胞beclin 1mRNA 2-ΔΔCt值为16.806±2.920,较空白组(0.853±0.025)显著升高,F=88.733,P<0.001;蛋白质印迹法提示实验组细胞beclin 1/GAPDH灰度值比为1.050±0.056,较空白组(0.640±0.006)显著升高,F=137.213,P<0.001;吖啶橙染色提示实验组细胞发生自噬的比例为33%,显著高于空白组(15%),χ2=8.985,P=0.011;MTT法提示实验组细胞增殖率在24h(0.152±0.019)、48h(0.254±0.029)、72h(0.322±0.027)和96h(0.357±0.035)均显著低于空白组24h(0.202±0.023)、48h(0.308±0.030)、72h(0.446±0.032)和96h(0.851±0.014),P值均<0.05;72h实验组细胞凋亡率为(6.560±0.593)%,显著高于空白组(2.533±0.216)%,F=107.085,P<0.001;实验组G0/G1期为(63.267±3.650)%,显著高于空白组(51.533±5.152)%,F=6.566,P=0.027。结论:自噬调节基因beclin 1过表达可显著抑制BT-549细胞的体外增殖水平。

关键词：乳腺肿瘤自噬 beclin 1基因 BT-549细胞