检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转录因子HBP1抑制骨肉瘤细胞增殖

中国生物化学与分子生物学报 2012年第4期28卷 359-364页

作者：董威王文恭河北医科大学第一医院石家庄050031 北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100191

转录因子HBP1(HMG-box containing protein 1,HBP1)属HMG家族,是1个含有513个氨基酸残基的多肽,可与RB蛋白结合,抑制许多癌基因的表达,从而抑制细胞的增殖.本工作构建了HBP1慢病毒表达载体,病毒包装后感染骨肉瘤细胞U2OS细胞.Western印... 详细信息

转录因子HBP1(HMG-box containing protein 1,HBP1)属HMG家族,是1个含有513个氨基酸残基的多肽,可与RB蛋白结合,抑制许多癌基因的表达,从而抑制细胞的增殖.本工作构建了HBP1慢病毒表达载体,病毒包装后感染骨肉瘤细胞U2OS细胞.Western印迹结果显示,感染细胞cyclin D1、c-Myc蛋白质水平降低,而p53蛋白质水平增加;Real-time PCR检测cyclin D1、c-Myc及p53 mRNA水平与蛋白质检测结果一致.HBP1表达载体(pEFBOS-HBP1)和报告基因载体(含cyclin D1、c-Myc或p53 promoter)共转染U2OS细胞后的荧光素酶分析发现,HBP1可抑制cyclinD1、c-Myc启动子转录激活,促进p53启动子转录激活,并且这种抑制或激活作用具有HBP1剂量依赖性.以细胞代龄群体倍增值PD(population doubling)为指标测试细胞生长结合软琼脂集落形成实验证明,HBP1慢病毒感染的U2OS细胞生长速度减缓、集落形成能力下降.上述结果提示,HBP1可能通过调控细胞增殖相关基因的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖.

关键词： HBP1 骨肉瘤细胞基因表达增殖

氧化应激诱导的细胞衰老过程中细胞生长相关基因的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 2012年第2期28卷 164-168页

作者：余明蔚王文恭武汉大学医学院第一临床学院武汉430060 北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100191

应激诱导的细胞早衰与复制性细胞衰老有相似的细胞表型,但其机制不尽相同.分析二者的衰老相关基因表达特点对了解应激因素诱导细胞衰老的机制有重要意义.本文对过氧化氢诱导的HeLa细胞早衰过程中的关键衰老相关基因及其转录后调控因子... 详细信息

应激诱导的细胞早衰与复制性细胞衰老有相似的细胞表型,但其机制不尽相同.分析二者的衰老相关基因表达特点对了解应激因素诱导细胞衰老的机制有重要意义.本文对过氧化氢诱导的HeLa细胞早衰过程中的关键衰老相关基因及其转录后调控因子的表达做了分析.结果发现,在复制性衰老过程中明显降低的cyclin A、cyclin B1c、-fos及HuR,在温和过氧化氢诱导的细胞早衰过程中并无明显改变;在氧化应激诱导的细胞早衰过程中,p21与p16表达升高,AUF1则降低,与复制性衰老过程一致;p21 mRNA半衰期在复制性衰老过程中无明显变化,但在氧化应激诱导的细胞早衰过程中则显著延长.上述结果提示,尽管氧化应激诱导的细胞早衰与复制性衰老存在相似基因表达变化,调控机制则不尽相同.

关键词：氧化应激细胞衰老细胞生长基因表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠成纤维细胞凋亡与bcl-2结合蛋白

生物化学与生物物理进展 1999年第6期26卷 563-566页

作者：王文恭童坦君北京医科大学生物化学与分子生物学系北京100083

为检测细胞凋亡过程中ｂｃｌ２基因的结合蛋白，用ＰＣＲ技术扩增小鼠ｂｃｌ２基因（ｍｂｃｌ２）调控区，经亚克隆后的序列分析证实其准确性．用５氟尿嘧啶（５Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞（Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２Ｃｌ... 详细信息

为检测细胞凋亡过程中ｂｃｌ２基因的结合蛋白，用ＰＣＲ技术扩增小鼠ｂｃｌ２基因（ｍｂｃｌ２）调控区，经亚克隆后的序列分析证实其准确性．用５氟尿嘧啶（５Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞（Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２Ｃｌ８）凋亡，以此ＰＣＲ产物作探针，对上述细胞的核蛋白质粗提物进行迁移位移法（ＥＭＳＡ）与ＤＮＡ蛋白质印迹分析．结果表明，细胞核内一分子质量为５３ｋｕ的结合蛋白与ｍｂｃｌ２调控区的结合信号在５Ｆｕ刺激１２ｈ后明显增强，而一种１００ｋｕ的ＤＮＡ结合蛋白与该区的结合信号在５Ｆｕ刺激１２ｈ后明显减弱．因而，ｐ５３蛋白有可能是ｂｃｌ２的负转录因子，１００ｋｕ的ＤＮＡ结合蛋白有可能是ｂｃｌ２的正转录因子．

关键词：细胞凋亡 bcl-2 转录因子 p53 结合蛋白

细胞内蛋白质转运及其在医学中的应用——1999年诺贝尔生理学或医学奖介绍及其相关研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生理科学进展 2009年第4期40卷 378-382页

作者：郭改娥王文恭长治医学院生物化学与分子生物学教研室山西长治046000 北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100191

细胞表达出大量的蛋白质,分布到细胞不同的部位执行相应的功能,其中多数被转运到细胞外和细胞核,或定位于细胞内不同的细胞器.新合成的蛋白质是如何跨过膜性结构被转运到相应正确位置的呢? 细胞生物学家Günter Blobel对此给出了答案.

关键词：诺贝尔生理学或医学奖蛋白质转运细胞内应用细胞表达生物学家细胞核细胞外

人乳腺癌MCF-7细胞系凋亡过程中bcl-2基因的结合蛋白

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 1999年第4期15卷 655-657页

作者：王文恭童坦君北京医科大学生物化学与分子生物学系北京100083

ＭＣＦ７是ｐ５３为野生型的人乳腺癌细胞系．为探讨该细胞系凋亡过程中ｂｃｌ２基因的下调机制，以５氟尿嘧啶（５ Ｆｕ）诱导凋亡，用ＰＣＲ技术扩增出人ｂｃｌ２（ｈｂｃｌ２）基因调控区长度为５５８ｂ... 详细信息

ＭＣＦ７是ｐ５３为野生型的人乳腺癌细胞系．为探讨该细胞系凋亡过程中ｂｃｌ２基因的下调机制，以５氟尿嘧啶（５ Ｆｕ）诱导凋亡，用ＰＣＲ技术扩增出人ｂｃｌ２（ｈｂｃｌ２）基因调控区长度为５５８ｂｐ的片段，经亚克隆后的序列分析证实其准确性．用此ＰＣＲ产物作为探针与５ Ｆｕ刺激１２ｈ后的ＭＣＦ７核内蛋白质粗提物进行Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹及凝胶阻滞（ＥＭＳＡ）分析．以未用５ Ｆｕ刺激者为对照．结果显示，细胞核内一分子量为５３ｋＤ的结合蛋白与ｂｃｌ２调控区的结合信号明显增强，而一种２０ｋＤ的ＤＮＡ结合蛋白与该区的结合信号明显减弱．这些结果提示ｐ５３蛋白有可能是ｂｃｌ２的负转录因子，２０ｋＤ的ＤＮＡ结合蛋白有可能是ｂｃｌ２的正转录因子．

关键词：细胞凋亡 bcl-2 转录因子乳腺癌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞凋亡过程中c-erbB-2基因的表达

中国生物化学与分子生物学报 1998年第3期14卷 314-317页

作者：王文恭童坦君北京医科大学生物化学与分子生物学系

据文献报道ｃ－ｅｒｂＢ－２可以介导细胞凋亡，为检验这一结论是否具有普遍性，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０，ＴＣ３Ｈ１０及人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７的凋亡．用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法检测ｃ－ｅｒｂＢ... 详细信息

据文献报道ｃ－ｅｒｂＢ－２可以介导细胞凋亡，为检验这一结论是否具有普遍性，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０，ＴＣ３Ｈ１０及人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７的凋亡．用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法检测ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达状况．结果显示：ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达在５－Ｆｕ作用６ｈ开始降低，１２ｈ降低更为明显．作用２４～４８ｈ出现细胞存活率下降，ＤＮＡ梯状断裂及细胞周期凋亡峰等凋亡典型现象．实验结果并不支持ｃ－ｅｒｂＢ－２可介导细胞凋亡的观点．该基因在细胞凋亡过程中有何作用尚待探讨．

关键词：细胞凋亡 neu erbB-2 基因表达

小鼠成纤维细胞凋亡过程中P53与bcl-2表达的时序性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 1998年第3期14卷 318-321页

作者：王文恭童坦君北京医科大学生物化学与分子生物学系

为探讨细胞凋亡过程中，ｂｃｌ－２与Ｐ５３，这两种凋亡关键性基因的相互关系，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠正常与恶性转化的成纤维细胞的凋亡，观察了这两种基因在凋亡过程中表达变化的时序．经流式细胞计检测，这两种细胞在... 详细信息

为探讨细胞凋亡过程中，ｂｃｌ－２与Ｐ５３，这两种凋亡关键性基因的相互关系，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠正常与恶性转化的成纤维细胞的凋亡，观察了这两种基因在凋亡过程中表达变化的时序．经流式细胞计检测，这两种细胞在５－Ｆｕ作用２４ｈ均出现了凋亡峰，细胞存活率随之下降，ＤＮＡ电泳显现梯状断裂．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果显示，在５－Ｆｕ作用６ｈ后两种细胞Ｐ５３ｍＲＮＡ水平已明显增高，而ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ水平则在作用１２ｈ方明显降低．Ｐ５３上调与ｂｃｌ－２下调的明显时序性，说明Ｐ５３具备作为ｂｃｌ－２基因负调控转录因子的条件．由此。

关键词：细胞凋亡 P53 基因表达成纤维细胞时序性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞凋亡过程中bcl-2基因的甲基化

中国生物化学与分子生物学报 1998年第3期14卷 309-313页

作者：王文恭童坦君北京医科大学生物化学与分子生物学系

为探讨凋亡过程中，ｂｃｌ－２基因下调与该基因甲基化状态的关系，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０，ＴＣ３Ｈ１０及人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７的凋亡，分别检测了这三种细胞凋亡过程中ｂｃｌ－２的表达变化，... 详细信息

为探讨凋亡过程中，ｂｃｌ－２基因下调与该基因甲基化状态的关系，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０，ＴＣ３Ｈ１０及人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７的凋亡，分别检测了这三种细胞凋亡过程中ｂｃｌ－２的表达变化，与其调控区及编码区的甲基化状况．我们曾观察到５－Ｆｕ作用２４～４８ｈ出现细胞存活率下降，ＤＮＡ梯状断裂及细胞周期凋亡峰显现等典型凋亡现象．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交显示，在５－Ｆｕ作用１２ｈ时ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ水平已明显降低．由此，我们用小鼠ｂｃｌ－２（ｍｂｃｌ－２）及人ｂｃｌ－２（ｈｂｃｌ－２）基因调控区ＰＣＲ扩增片段及ｂｃｌ－２编码区（ｃＤＮＡ）片段作为探针，与５－Ｆｕ作用１２ｈ的细胞ＤＮＡ的ＭｓｐⅠ／ＨｐａⅡ酶切产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，以未作用的细胞ＤＮＡ同样酶切杂交为对照．通过杂交带谱的变化，分析ｂｃｌ－２基因的甲基化状况．结果显示：ｍｂｃｌ－２及ｈｂｃｌ－２在５－Ｆｕ作用１２ｈ后调控区甲基化水平增高，但其编码区甲基化状态皆未出现可检出的变化．

关键词：细胞凋亡 bcl-2 甲基化

人乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中p53与bcl-2表达的时序性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

北京医科大学学报 1997年第6期29卷 490-492页

作者：王文恭窦亚丽童坦君北京医科大学生物化学与分子生物学系 100083

研究细胞凋亡过程中p53与bcl－2基因表达变化的时序关系，以探索p53调控bcl－2的可能性。方法：选择具有野生型p53的人乳腺癌MCF-7细胞系，用5－Fu为诱导剂诱导细胞凋亡；用Northern杂交及Western印迹法检测细胞凋亡过程中p53与bcl－2... 详细信息

研究细胞凋亡过程中p53与bcl－2基因表达变化的时序关系，以探索p53调控bcl－2的可能性。方法：选择具有野生型p53的人乳腺癌MCF-7细胞系，用5－Fu为诱导剂诱导细胞凋亡；用Northern杂交及Western印迹法检测细胞凋亡过程中p53与bcl－2表达变化的时序性。结果：p53表达增高出现在bcl－2表达降低之前。结论：p53在时序上具有作为bcl－2基因负调控转录因子的可能性。

关键词：乳腺癌 MCF-7 细胞凋亡 P53基因