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白藜芦醇苷对门静脉海绵样变性大鼠体内氧化应激状态的影响

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白藜芦醇苷对门静脉海绵样变性大鼠体内氧化应激状态的影响

作者：王建尧遵义医学院

学位级别：硕士

第一部分门静脉海绵样变性大鼠模型建立方法的探讨及体会目的通过门静脉部分缩窄法建立大鼠门静脉海绵样变性(CTPV)的动物模型,探索适宜的制模条件并且为下一步研究其临床诊断和治疗方法提供可靠、稳定的模型动物。方法采用Sprague-Da... 详细信息

第一部分门静脉海绵样变性大鼠模型建立方法的探讨及体会目的通过门静脉部分缩窄法建立大鼠门静脉海绵样变性(CTPV)的动物模型,探索适宜的制模条件并且为下一步研究其临床诊断和治疗方法提供可靠、稳定的模型动物。方法采用Sprague-Dawley(SD)大鼠80只,根据使用的不同钝头针均分为4组：假手术组、19G组、21G组和23G组,除假手术组外,其余3组分别用19G、21G和23G口径的钝头针行大鼠门静脉部分缩窄术以建立CTPV动物模型。术后6周,同时采用门静脉测压、门静脉造影、门静脉及其周围组织病理学检查评估门静脉高压及海绵样变性形成情况。结果假手术组无大鼠死亡,19G组、21G组和23G组在术后48 h死亡的大鼠分别为2、4和16只。假手术组和19G组大鼠术后6周未形成门脉高压;门静脉造影显示门静脉通畅,无曲张与扩张;病理学检查显示门静脉管腔无增大、内皮细胞光滑、中膜平滑肌层无增厚、外膜完整。21G和23G组术后6周门静脉压力均升高,CTPV形成;门静脉造影显示门静脉周围侧支循环形成;病理检查显示多个管腔大小不一、外形不规则血管腔,管腔之间为较狭窄的纤维性间隔,其内可见脂肪细胞、散在的淋巴细胞及肥大细胞等,门静脉管腔增大、血管内膜受损、内皮细胞脱落、中膜平滑肌增厚和血栓形成。结论门静脉部分缩窄法可以复制出类似CTPV的大鼠模型。21G钝针头更适宜CTPV大鼠模型的制作,该模型动物死亡率低,且成模率较高,比较稳定。第二部分白藜芦醇苷对CTPV大鼠氧化应激损伤保护作用的研究目的观察门静脉海绵样变性大鼠体内氧化应激状态,以及白藜芦醇苷(Polydatin, PD对其的潜在影响,并探讨其可能的机理。方法将大鼠按随机抓取的方式分为3组,即Sham(假手术)组、CTPV(门静脉海绵样变性)模型组与PD(白藜芦醇苷)给药组。采用门脉部分缩窄法复制CTPV大鼠动物模型;Sham组大鼠只是开腹游离门静脉后关腹。术后,Sham组以及CTPV模型组给予相同体积的生理盐水2ml灌胃6周。PD给药组给予生理盐水2ml+PD(40mg-kg-1·d-1)持续灌胃6周。6周后,通过测定门静脉血浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力来分析机体抗氧化能力,测定丙二醛(MDA)含量分析机体氧化能力;测定门静脉组织一氧化氮(NO)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的含量来评价门静脉内皮功能的情况;采用实时荧光定量RT-PCR法以及免疫蛋白印迹法测定门静脉组织NADPH氧化酶亚基p22phox以及gp91phox的表达。结果与Sham组大鼠相比,CTPV模型组大鼠SOD、GSH-Px活性降低(77.29±4.61μU/LVs 103.05±8.07μU/L,P<0.01;157.44±26.46酶活力单位Vs 709.09±83.21酶活力单位,P<0.01),而MDA含量增加(5.33±0.35μmol/L Vs 3.59±0.44μmol/L, P<0.01),并且PD给药组大鼠SOD、GSH-Px活性均降低(93.7918.87μU/L Vs 103.05±8.07uU/L,P<0.05;442.14±74.67酶活力单位Vs 709.09±83.21酶活力单位,P<0.01),而MDA含量增加(4.45±0.36μmol/L Vs 3.59±0.44μmol/L, P<0.05);与CTPV模型组大鼠相比,PD给药组大鼠静脉血浆SOD和GSH-Px活性升高(93.79±8.87μU/L Vs 77.29±4.61μU/L, P<0.01;442.14±74.67酶活力单位Vs 157.44±26.46酶活力单位,P<0.01),而MDA含量降低(4.45±0.36μmol/L Vs 5.33±0.35μmol/L, P<0.05)。实时荧光定量RT-PCR显示,与Sham组大鼠相比,CTPV模型组大鼠门静脉NADPH氧化酶亚基gp91phox以及p22phox的mRNA表达增强(16.77±3.27 Vs1.31±0.95,P<0.01;11.64±7.34 Vs 1.93±0.86,P<0.01),并且PD给药组大鼠门静脉NADPH氧化酶亚基gp91phox以及p22phox的mRNA表达增强(6.72±2.09 Vs1.31±0.95,P<0.01;7.01±0.94 Vs 1.93±0.86,P<0.01);与CTPV模型组大鼠相比,PD给药组大鼠门静脉NADPH氧化酶亚基gp91phox以及p22phox的mRNA表达降低(6.72±2.09 Vs 16.77±3.27,P<0.01;7.01±0.94 Vs 11.64±7.34,P<0.01)。 Western-blotting显示,与Sham组大鼠相比,CTPV模型组大鼠门静脉NADPH氧化酶亚基gp91phox以及p22phox的蛋白表达增

关键词：门静脉海绵样变性 Sprague-Dawley大鼠动物模型白藜芦醇苷 NADPH氧化酶氧化应激

单细胞测序技术在儿童肝母细胞瘤中的应用前景

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智慧健康 2022年第34期8卷 48-51页

作者：郭敬杰王建尧王斌中国医科大学深圳市儿童医院广东深圳518026 深圳市儿童医院普外科广东深圳518026

肝母细胞瘤(hepatoblastoma,HB)是儿童期最多见的肝脏恶性肿瘤之一。一般发现较晚,体积较大,切除肿瘤比较困难。目前治疗以新辅助化疗联合手术切除为主。高危患儿预后较差,尚缺乏有效的治疗靶点及免疫治疗方案。单细胞转录组测序(ScRNA-... 详细信息

肝母细胞瘤(hepatoblastoma,HB)是儿童期最多见的肝脏恶性肿瘤之一。一般发现较晚,体积较大,切除肿瘤比较困难。目前治疗以新辅助化疗联合手术切除为主。高危患儿预后较差,尚缺乏有效的治疗靶点及免疫治疗方案。单细胞转录组测序(ScRNA-seq)技术使传统的基因靶点研究进入了单细胞层面,目前在各种实体肿瘤的研究中应用广泛,可以了解肿瘤微环境和肿瘤异质性。这项技术在HB研究中有着极大的前景,目前相关研究较少,文献支持不足。本文介绍ScRNA-seq及其在实体恶性肿瘤中的应用,ScRNA-seq应用于HB研究是可行的,有助于进一步了解HB的发生机制,为HB的治疗提供更多的靶向治疗方案。

关键词：恶性肿瘤 ScRNA-seq 肿瘤异质性肿瘤微环境

10例儿童遗传性球形红细胞增多症伴胆道系统并发症的临床诊疗特点分析

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2022年第7期 61-64页

作者：劳京王焕生宋欣平罗玉王建尧中国医科大学深圳儿童医院广东深圳518000 遵义医科大学深圳儿童医院普外科广东深圳518000 深圳市儿童医院普外二科广东深圳518000

探讨儿童遗传性球形红细胞增多症(HS)伴胆道系统并发症患儿的临床病例特点。方法选取2013年8月至2021年5月本中心普外科收治的10例HS患儿临床资料;并对患儿的临床表现、实验室检查结果及诊疗情况进行分析。结果在10例HS患儿中;男5例;... 详细信息

探讨儿童遗传性球形红细胞增多症(HS)伴胆道系统并发症患儿的临床病例特点。方法选取2013年8月至2021年5月本中心普外科收治的10例HS患儿临床资料;并对患儿的临床表现、实验室检查结果及诊疗情况进行分析。结果在10例HS患儿中;男5例;女5例;男;女为1:1。10例HS合并胆道系统并发症的患儿主要症状包括:腹痛、呕吐、发热及黄疸。主要体征包括:右上腹压痛、反跳痛、murphy征、腹肌紧张、肝脾增大。入院后行急诊超声或CT检查;4例怀疑胆结石伴胆囊炎;6例怀疑胆结石伴胆总管急性梗阻扩张。4例胆结石伴胆囊炎行抗炎保守治疗后1例行LP脾切术、1例行胆囊切除术;6例HS伴急性胆总管梗阻扩张的病人先行保守治疗;3例症状缓解后其中2例行LP脾切除术;3例HS梗阻症状加重先急诊行ERCP手术;待患儿黄疸及感染消退后其中1例行LP脾切术+胆囊切除术。结论 (1)部分并发胆道系统疾病的HS患儿表现为单纯性的结石性胆囊炎;尚未进展至胆管的急性梗阻扩张或(和)感染。首选抗炎、利胆、护肝等对症支持治疗;若患儿有反复性胆囊炎伴胆囊结石史;建议行脾脏切除术时同时行胆囊切除术。(2)部分并发胆道系统疾病的HS患儿会伴有胆道梗阻扩张或(和)感染;其首选的治疗方式不是一期行脾切除手术;而是应该根据具体情况行抗感染、退黄、利胆、护肝等对症支持治疗;经保守治疗无法缓解的患儿;可考虑行经内镜逆行性胰胆管引流手术(ERCP);待患儿胆道梗阻解除、感染缓解后再考虑脾脏切除手术。

关键词：遗传性球形红细胞增多症儿童胆囊结石胆管扩张症

应用直线切割闭合器行腹腔镜原位脾切除术治疗儿童血液病所致脾功能亢进的临床研究

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临床小儿外科杂志 2022年第7期21卷 617-621页

作者：王建尧劳京王焕生罗玉郑粤兰刘冬郭敬杰麻晓鹏王斌深圳市儿童医院普外二病区深圳518026 中国医科大学深圳儿童医院深圳518026 遵义医科大学珠海校区珠海519000

目的探讨应用直线切割闭合器行腹腔镜原位脾切除术治疗儿童血液病所致脾功能亢进的优势、可行性与安全性。方法选取2016年1月至2021年4月在深圳市儿童医院因血液病所致脾功能亢进行腹腔镜脾切除术的患儿作为研究对象,共32例,其中男13例,... 详细信息

目的探讨应用直线切割闭合器行腹腔镜原位脾切除术治疗儿童血液病所致脾功能亢进的优势、可行性与安全性。方法选取2016年1月至2021年4月在深圳市儿童医院因血液病所致脾功能亢进行腹腔镜脾切除术的患儿作为研究对象,共32例,其中男13例,女19例,年龄5~16岁;包括地中海贫血28例,遗传性球形红细胞增多症4例。18例行传统腹腔镜下分束结扎脾蒂脾切除术(传统组),14例应用直线切割闭合器行腹腔镜下原位脾切除术(原位切闭器组)。比较两组患儿围手术期及术后并发症情况。结果32例患儿中,2例遗传性球形红细胞增多症患儿合并胆总管急性梗阻,行禁食、胃肠减压及抑酸抑酶好转,1个月后行脾切除手术治疗;其余30例患儿均顺利完成手术,无一例中转开腹患儿。围手术期,腹腔镜原位脾切除术组术后住院时间[(5.2±1.5)d]较传统组[(7.1±1.3)d]明显缩短(P0.05)。腹腔镜原位脾切除术组较传统组手术时间[(89±13)min比(192±26)min]、术中出血量[(18±2.6)mL比(51±2.8)mL]明显减少,差异有统计学意义(P0.05)。腹腔镜原位脾切除术组血小板术前(435.12±44.86)×10^(9)/L,术后1周(764.27±33.42)×10^(9)/L,术后1个月(531.75±31.48)×10^(9)/L,术后6个月(528.42±21.63)×10^(9)/L;传统组血小板术前(431.28±32.33)×10^(9)/L,术后1周(745.88±25.38)×10^(9)/L,术后1个月(532.89±21.12)×10^(9)/L,术后6个月(512.46±22.67)×10^(9)/L;两组差异无统计学意义(P>0.05)。传统组中2例曾于术中输注0.5 U的红细胞悬液。两组术后均无一例发生严重爆发性感染。传统组有1例形成门静脉血栓,经溶栓治疗后缓解。结论应用直线切割闭合器行腹腔镜原位脾切除术治疗儿童血液系统疾病所致脾功能亢进手术时间短,损伤小,出血少,术后康复快,术后并发症少,住院时间短,较传统腹腔镜手术有一定的应用优势。

关键词：脾切除术/方法腹腔镜检查脾功能亢进/外科学治疗结果儿童

IL-22介导Notch信号通路促进肝星状细胞凋亡的抗纤维化机制研究

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中国优生与遗传杂志 2022年第3期30卷 417-421页

作者：王建尧劳京郭敬杰罗玉王斌深圳市儿童医院普外科广东深圳518026 中国医科大学深圳儿童医院普外科广东深圳518026 遵义医科大学深圳儿童医院普外科广东深圳518026

目的探讨IL-22逆转胆道闭锁肝纤维化的作用及其可能的机制。方法取人的肝星形细胞系LX-2细胞作为研究对象,检测TGF-β1诱导刺激后Notch3信号通路的表达变化及纤维化相关标志物Collagen I和α-SMA的表达水平。加入外源性IL-22进行干扰... 详细信息

目的探讨IL-22逆转胆道闭锁肝纤维化的作用及其可能的机制。方法取人的肝星形细胞系LX-2细胞作为研究对象,检测TGF-β1诱导刺激后Notch3信号通路的表达变化及纤维化相关标志物Collagen I和α-SMA的表达水平。加入外源性IL-22进行干扰,流式细胞术比较干扰前后,Notch3信号通路的表达变化及LX-2细胞的凋亡情况。结果在TGF-β1诱导的肝纤维化中,Notch3信号通路基因Hes-1、Hes-5以及Notch3的表达增高(P<0.05),肝纤维化指标Collagen和α-SMA的蛋白表达增高(P<0.05)。同时加入外源性的IL-22后,Notch3信号通路基因Hes-1、Hes-5以及Notch3的表达降低(P<0.05),流式细胞术检测同时也显示IL-22可以促进肝星状细胞的凋亡。结论 IL-22可能是通过抑制Notch信号通路,来促进肝星状细胞的凋亡,进而抑制肝纤维化的过程。

关键词：胆道闭锁 IL-22 LX-2 凋亡

神经母细胞瘤miRNA的差异表达及其生物信息学分析

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齐齐哈尔医学院学报 2022年第1期43卷 1-5页

作者：罗玉王建尧郭敬杰吴薇芳王斌遵义医科大学珠海校区广东珠海519090 深圳市儿童医院普外科广东深圳518026 汕头大学医学院广东汕头515041

目的利用生物信息学分析神经母细胞瘤差异miRNA,并分析其生物学功能、相关信号通路。方法通过GEO数据库获取神经母细胞瘤miRNA芯片GSE121513,获得95个神经母细胞瘤样本和正常胎儿肾上腺神经母细胞样本数据,筛选差异miRNA。对|logFC|≥4... 详细信息

目的利用生物信息学分析神经母细胞瘤差异miRNA,并分析其生物学功能、相关信号通路。方法通过GEO数据库获取神经母细胞瘤miRNA芯片GSE121513,获得95个神经母细胞瘤样本和正常胎儿肾上腺神经母细胞样本数据,筛选差异miRNA。对|logFC|≥4的差异miRNA进行靶基因预测,并行KEGG和GO分析,构建蛋白互作网络,筛选核心靶基因。结果共筛选得到91个差异miRNA(P<0.05,|logFC|≥1),其中上调52个,下调39个。对差异miRNA(P<0.05,|logFC|≥4)进行靶基因预测,得到602个靶基因,功能分析发现其主要位于蛋白细胞外基质区域,有细胞质翻译的负调控、mRNA 3'-UTR结合、与核酸结合抑制翻译因子活性,主要参与RNA降解、黏着斑通路、PI3K-Akt信号通路。蛋白互作网络筛选得到10个关键靶基因:IL6、IL10、COL3A1、COL1A2、CD44、CCND1、VCAN、THBS1、DICER1、HNRNPC。结论筛选出与神经母细胞瘤发生、发展相关的差异miRNA,并进一步得到10个关键靶向基因,为研究神经母细胞瘤的发病机制、分化转移机制等提供新的思路及理论依据。

关键词：神经母细胞生物信息学差异miRNA

抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2对小鼠溃疡性结肠炎肠黏膜细胞因子表达的影响

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广东医学 2012年第16期33卷 2392-2394页

作者：魏铖王立生王建尧张茹师瑞月姚君暨南大学第二临床医学院、广东省深圳市人民医院消化内科 518020 广东省深圳市儿童医院普外科 518020

目的观察抗小鼠Toll样受体2(Toll-like receptor 2)胞外段单表位抗体TSP-2对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子表达的影响。方法采用硫酸葡聚糖钠(C6H7Na3O14S3,DSS)制备溃疡性结肠炎小鼠模型,将实验小鼠随机分成4组:正常对照(NC)组、模型... 详细信息

目的观察抗小鼠Toll样受体2(Toll-like receptor 2)胞外段单表位抗体TSP-2对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子表达的影响。方法采用硫酸葡聚糖钠(C6H7Na3O14S3,DSS)制备溃疡性结肠炎小鼠模型,将实验小鼠随机分成4组:正常对照(NC)组、模型(MD)组、TSP-2治疗组和正常兔IgG治疗组;除NC组外,其他组均给予5%DSS造模7 d后停用造模药,TSP-2治疗组和正常兔IgG治疗组给予相应药物后续干预治疗7 d。记录分析疾病活动指数(DAI),14 d后处死小鼠,取结肠行HE染色;实时荧光定量RT-PCR法检测白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6和IL-1βmRNA的表达,ELISA法测小鼠肠黏膜IL-10、IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白水平,并进行统计学分析。结果 TSP-2治疗组小鼠第10～14天DAI明显低于MD组(P0.05)。结论 TSP-2可以提高抗炎细胞因子IL-10的水平并降低致炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平,通过抗炎和降低肠道过度的免疫反应,对溃疡性结肠炎发挥治疗作用。

关键词：溃疡性结肠炎 TSP-2 细胞因子

热休克蛋白47在胆道闭锁患儿肝组织中的表达

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中国急救医学 2016年第S2期36卷 94-96页

作者：陈子民王斌叶明冯奇吴宙光叶晓烁王建尧深圳市儿童医院普外科广东深圳518026

目的研究患儿胆道闭锁(BA)儿童肝组织中热休克蛋白47(HSP47) 与肝脏纤维化、手术预后的关系.方法选取深圳市儿童医院小儿肝胆外科行葛西手术的38例胆道闭锁患儿,分别根据肝纤维化Ohkuma's病理分级、手术时年龄分组,采用SP免疫组化法... 详细信息

目的研究患儿胆道闭锁(BA)儿童肝组织中热休克蛋白47(HSP47) 与肝脏纤维化、手术预后的关系.方法选取深圳市儿童医院小儿肝胆外科行葛西手术的38例胆道闭锁患儿,分别根据肝纤维化Ohkuma's病理分级、手术时年龄分组,采用SP免疫组化法测定肝脏组织中HSP47的表达,结合术后随访资料进行统计学分析.结果 38例均获随访,自体肝生存29例,占76.32%;HSP47在肝纤维化程度较重组的表达明显高于较轻组(Z=5.196,P<0.01);随着手术时年龄的增加HSP47表达增强(r=0.598,P<0.01),HSP47表达强度越高,术后胆管炎发作越多(r=0.361,P<0.05);HSP47表达强度较高者其自体肝生存率较低(P<0.05).结论胆道闭锁患儿肝脏组织HSP47的表达与肝组织纤维化程度密切相关,HSP47表达强度可能为胆道闭锁患儿预后的影响因素之一,可作为评价葛西术后疗效的参考指标.

关键词：热休克蛋白47 胆道闭锁肝脏纤维化儿童

基于深度文本聚类的论文与专利数据融合方法研究

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数据分析与知识发现 2024年第4期8卷 112-124页

作者：谢士尧王小梅中国科学院科技战略咨询研究院北京100190 中国科学院大学公共政策与管理学院北京100049

【目的】克服论文与专利之间语言特征差异的障碍,将论文和专利数据按照研究主题集成融合。【方法】以维基百科为基本分类体系,通过半自动方式构建少量标注集,设计半监督深度文本聚类模型,将相似主题的论文与专利聚类融合,设计指标评估... 详细信息

【目的】克服论文与专利之间语言特征差异的障碍,将论文和专利数据按照研究主题集成融合。【方法】以维基百科为基本分类体系,通过半自动方式构建少量标注集,设计半监督深度文本聚类模型,将相似主题的论文与专利聚类融合,设计指标评估数据融合结果的质量。【结果】所提模型在两个数据集上的聚类准确率比其他基线模型提升了2.4~11.9个百分点,数据融合结果的质量评估得分超过0.9,优于基线模型,可以在已知主题的基础上补充研究主题。【局限】未利用融合数据开展实证分析,聚类数目需要人工确定。【结论】所提模型可以从论文和专利差异化的文本中提取与主题相关的特征,有效地实现数据融合。

关键词：深度文本聚类数据融合论文专利研究主题识别