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“一带一路”中国段城市的旅游—经济—公共服务耦合分析

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“一带一路”中国段城市的旅游—经济—公共服务耦合分析

作者：王岩岩山西师范大学

学位级别：硕士

旅游、经济与公共服务三个系统的关系复杂多变,且旅游与经济、旅游与公共服务、经济与公共服务两两系统的各要素间也相互牵制,只有三个系统实现协调,才能促进区域旅游的发展,因此研究三者的关系是必要的。本文通过构建旅游系统、经济系... 详细信息

旅游、经济与公共服务三个系统的关系复杂多变,且旅游与经济、旅游与公共服务、经济与公共服务两两系统的各要素间也相互牵制,只有三个系统实现协调,才能促进区域旅游的发展,因此研究三者的关系是必要的。本文通过构建旅游系统、经济系统、公共服务系统的指标体系,运用熵值法和协调发展度模型对“一带一路”中国段城市2006-2016年的旅游、经济与公共服务系统的综合发展水平、耦合度、协调发展度进行了定量与定性分析,它揭示了“一带一路”中国段城市的旅游-经济-公共服务协调发展时空演变规律,分析该时空演变的内在机制,发现该地区协调发展的问题,并提出了相应的对策,为今后的研究提供参考。本文的结论为:第一,旅游、经济与公共服务这一综合复合系统的各个要素之间既相互促进又相互制约,相互之间既有积极的正面意义又有消极的负面影响。旅游业的发展会带来经济和社会效益,但可能会对公共服务设施造成损害。公共服务的恶化超出其门槛将增加经济活动的成本,并限制旅游业的发展。第二,分析“一带一路”中国段城市的旅游、经济、公共服务发展现状,得出旅游在2006-2016年实现了大幅度增长,但区域差距大,呈现东高西低的特点,与发达国家相比存在一定的差距,旅游服务质量不高;经济规模在2006-2016年得以飞速增长,但经济的地域分布不平衡,省会及直辖市经济发展更具优势;公共服务的投资比重逐年增加,但资源分布不均衡,东西差距大,省会城市、直辖市经济发展有一定的优势。第三,分析“一带一路”中国段城市的旅游-经济-公共服务综合发展水平,从时间上来看,综合发展水平整体呈波浪型变化趋势,2006-2016年旅游-经济-公共服务的综合评价值先上升后下降再上升。从空间上来看,综合发展水平空间差异明显,同级别城市大体呈现东部地区城市综合评价值高于中西部地区城市的规律,在不同级别的城市中,省会城市和直辖市的综合评价值更高。第四,分析“一带一路”中国段城市的旅游-经济-公共服务耦合度,耦合度总体呈现先下降后上升的“V”字型趋势,个别城市除外;从空间上来看,空间上存在明显的地区差异,东部地区城市整体比中西部地区城市耦合度更高,同级别城市也呈现出东部地区城市耦合度更高的规律,不同等级的城市中,呈现省会、直辖市耦合度更高的规律。第五,分析“一带一路”中国段城市的旅游-经济-公共服务协调发展度,协调发展度均属于“失调衰退区”,且整体呈“V”型发展趋势,随着时间推移明显,协调发展度等级从东向西逐渐渗透;从空间上来看,协调发展度地区差异明显,同级别城市大体呈现东部地区城市比中西部地区城市相对协调的规律,不同级别城市呈现省会、直辖市更协调的特征。第六,研究发现“一带一路”中国段城市的旅游-经济-公共服务协调发展中存在问题为旅游服务效率低,地区分布差异大;经济发展效率低下,区域发展不均衡;公共服务水平低,资源配置不均匀;系统耦合度低,时空分布不均匀。针对这些问题,提出相应的解决措施:提高旅游服务效率,缩小地区差距;增强经济发展水平,缩小东西差距;提高公共服务水平,促进配置均匀;促进系统协调发展,推进全域发展。

关键词： “一带一路” 中国段城市旅游经济公共服务耦合分析

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多级孔碳材料的制备与表征

多级孔碳材料的制备与表征

作者：王岩岩河北科技大学

学位级别：硕士

多级孔碳材料结合了不同尺寸孔的结构特点，具有良好大分子通过性、发达孔隙结构和大的比表面积等优势，克服了传统单级孔碳材料孔结构单一的缺陷，使其广泛地应用在催化剂载体、电容器电容、吸附分离等方面。本文以模板法为主导方向，... 详细信息

多级孔碳材料结合了不同尺寸孔的结构特点，具有良好大分子通过性、发达孔隙结构和大的比表面积等优势，克服了传统单级孔碳材料孔结构单一的缺陷，使其广泛地应用在催化剂载体、电容器电容、吸附分离等方面。本文以模板法为主导方向，以离子液体和酚醛树脂为碳前躯体，采用简单的浸渍或包覆的方法，制备出相应的多级孔碳材料，考察不同参数对产品的影响。论文的主要研究如下：1)以溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑的ILs为碳源，250nm单分散硅球为硬模板通过简单浸渍而制得壳/核结构的多级孔碳材料。其形貌规整，大小均一，壳壁较薄（5-12nm），含氮量为3.2%，而且壳壁上存在三种尺寸的介孔（2.4nm，3.6nm及3nm），另外，我们还改变了ILs的碳链长度和硅球模板的粒径同样也能制备出大小均一、壳壁较薄的壳/核结构的多级孔碳材料。2)采用氯化1-乙腈基-3-甲基咪唑的ILs为炭氮源， SBA-15为模板，通过固-固研磨法制备出氮掺杂的多级孔碳材料。随着碳化温度的增加，该碳材料还具有一定的石墨化程度。此外，在上述研磨的过程中，将FeCl3·6H2O加入碳前躯体和模板中，制备含磁性多级孔碳材料。该磁性碳材料内有5-8nm的α-Fe颗粒存在，而且我们还发现了部分大小不均一的中空管的存在，可能的原因是铁对催化碳管结构的形成有一定的影响。另外，我们还用NOMC-0.8-Fe-0.5和CMK-3作为吸附剂来测试了对水溶液中重金属离子（Cu2+）的吸附，发现含磁性N掺杂的多级孔碳材料NOMC-0.8-Fe-0.5具有很大的吸附量而且这种含磁性的多级孔碳材料通过外加磁层的作用进行迅速的回收，这将会对处理水溶液中的重金属离子有着很好的应用前景。3)在水相中以F127和单分散硅球为软硬模板制备出大孔-介孔结构的碳材料或是壳/核结构的多级孔碳材料。而且经过简单的调节硅球与F127的质量比，就可以实现无规则大孔-介孔结构向中空核/介孔壳结构的转变。而且制备出的中空核/介孔壳结构的多级孔碳材料具有均一的孔径，壳壁较薄，大约在5nm左右，而且其壁上还存在大量的类似圆形的介孔（尺寸在6-9nm之间）。值得一提的是，在无搅拌条件下，也成功地制备出了三维有序的整齐排列的大孔碳材料，其粒径在250nm左右，孔与孔之间紧密结合。另外，通过改变硅球的粒径也能制备出不同30nm、50nm和80nm的壳/核结构的多级孔碳材料。

关键词：多级孔碳材料模板法研磨离子液体壳/核结构

不同氧浓度对人早孕绒毛细胞滋养层细胞血管内皮生长因子及其可溶性受体表达的影响

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不同氧浓度对人早孕绒毛细胞滋养层细胞血管内皮生长因子及其可溶...

作者：王岩岩山东大学

学位级别：硕士

目的:探讨原代培养的人早孕绒毛细胞滋养层细胞(CTs)在不同氧浓度下经过不同时间培养后,细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)和可溶性血管内皮生长因子受体—1(sFlt-1)的表达情况。方法:无菌条件下获取正常妊娠6～8周早孕绒毛组织,经... 详细信息

目的:探讨原代培养的人早孕绒毛细胞滋养层细胞(CTs)在不同氧浓度下经过不同时间培养后,细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)和可溶性血管内皮生长因子受体—1(sFlt-1)的表达情况。方法:无菌条件下获取正常妊娠6～8周早孕绒毛组织,经胰蛋白酶/DNA酶Ⅰ联合消化,Percoll密度梯度离心法对得到的细胞进行纯化,将最终获得的CTs应用免疫细胞化学法对其纯度加以鉴定,并同时进行原代培养。将原代培养的CTs分为4组:(1)正常氧浓度组(20%O);(2)低氧1组(8%O);(3)低氧2组(2%O);(4)低氧复氧组(2%O/20%O)。分别在正常氧浓度组、低氧1组、低氧2组CTs培养72h、96h、120h、144h后,低氧复氧组CTs低氧培养72h(2%O培养72h)、复氧24h(总计培养时间96h)、复氧48h(总计培养时间120h)、复氧72h(总计培养时间144h)后,经过台盼蓝排出试验观察CTs的活力、计算细胞存活率并采用competitive ELISA法检测细胞上清液中VEGF和sFlt-1蛋白的表达情况。结果:CTs在不同氧浓度下经过不同时间培养后细胞上清液中VEGF及sFlt-1的浓度表达情况:(1)正常氧浓度组、低氧1组、低氧2组的CTs分别培养72h、96h、120h、144h后细胞上清液中VEGF的浓度分别为:正常氧浓度组223±32 pg/mL,271±33 pg/mL,313±41 pg/mL,361±49 pg/mL;低氧1组347±75 pg/mL,427±65 pg/mL,491±48 pg/mL,544±72 pg/mL;低氧2组382±50 pg/mL,442±49 pg/mL,503±42 pg/mL,556±70 pg/mL。可见正常氧浓度组、低氧1组、低氧2组的CTs细胞上清液中VEGF的浓度随着培养时间的延长均呈增高趋势;低氧1组、低氧2组的CTs细胞上清液中VEGF的浓度于各时间点均明显高于正常氧浓度组(P值均＜0.01);低氧1组与低氧2组各时间点VEGF的浓度相比较均无显著差异(P值均＞0.05)。 (2)正常氧浓度组、低氧1组、低氧2组的CTs分别培养72h、96h、120h、144h后细胞上清液中sFlt-1的浓度分别为:正常氧浓度904±231 pg/mL,1339±321pg/mL,2013±452 pg/mL,2541±577 pg/mL;低氧1组1929±489 pg/mL,2543±785 pg/mL,3365±1004 pg/mL,3861±1151 pg/mL;低氧2组2008±466pg/mL,2687±675 pg/mL,3488±948 pg/mL,4017±1105 pg/mL。可见正常氧浓度组、低氧1组、低氧2组的CTs细胞上清液中sFlt-1的浓度随着培养时间的延长均呈增高趋势;低氧1组、低氧2组的CTs细胞上清液中sFlt-1的浓度于各时间点均明显高于正常氧浓度组(P值均＜0.01);并且低氧1组与低氧2组各时间点sFlt-1的浓度相比较均无显著差异(P值均＞0.05)。 (3)低氧复氧组的CTs低氧培养72h后,细胞上清液中VEGF、sFlt-1的浓度(401±55 pg/mL,2282±419 pg/mL)分别明显高于正常氧浓度组(P值均＜0.01),而与低氧1组和低氧2组相比差别不明显(P值均＞0.05)。 (4)低氧复氧组的CTs复氧24h后,细胞上清液中VEGF的浓度(362±50 pg/mL)高于正常氧浓度组,但与低氧1组和低氧2组相比是降低的,两者均有统计学意义(P值均＜0.01);细胞上清液中sFlt-1的浓度(2086±431 pg/mL)高于正常氧浓度组(P值＜0.01),而与低氧1组和低氧2组相比降低不明显(P值＞0.05)。 (5)低氧复氧组的CTs分别复氧48h、72h后,细胞上清液中VEGF、sFlt-1的浓度(350±57 pg/mL,1932±448 pg/mL;321±35 pg/mL,1831±441 pg/mL)与低氧1组和低氧2组相比较均有明显降低(P值均＜0.01),且48h内持续保持此状态,而与正常氧浓度组相比较差别不明显(P值均＞0.05)。结论:人早孕绒毛组织中的CTs在低氧条件下VEGF、sFlt-1的分泌是持续性增加的,并且在2%O和8%O低氧浓度下无明显区别。CTs在低氧条件下培养72h再分别经过复氧48h、72h后,VEGF、sFlt-1的浓度表达均恢复到正常氧浓度下水平,且48h内与正常氧浓度条件下培养的CTs保持一致。意义:CTs中VEGF、sFlt-1在不同氧浓度条件下的反应有助于进一步理解胎盘血管重铸机制。低氧条件下sFlt-1的增高,竞争性的结合循环中游离的VEGF,拮抗VEGF血管生成作用,有助于理解子痫前期的发生机制。高水平的sFlt-1可能能够预测子痫前期的

关键词：细胞滋养层细胞血管内皮生长因子A 血管内皮生长因子受体-1

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女性教育视角下烟台花边工艺特征探究

女性教育视角下烟台花边工艺特征探究

作者：王岩岩山东艺术学院

学位级别：硕士

一座城市厚重的文化积淀往往源自它深厚的历史,历史从来不是包袱,而是宝贵的财富,是这座城市的根基。作为“舶来品”的烟台花边被誉为“花边之王”。在传入烟台的百年历史中,经过一代代手艺人的传承与创新,这门源于欧洲的编织技艺不仅... 详细信息

一座城市厚重的文化积淀往往源自它深厚的历史,历史从来不是包袱,而是宝贵的财富,是这座城市的根基。作为“舶来品”的烟台花边被誉为“花边之王”。在传入烟台的百年历史中,经过一代代手艺人的传承与创新,这门源于欧洲的编织技艺不仅找到了适于自己生存的土壤,更是扎根于烟台,融入了更多本土民俗文化的元素,成为具有独特魅力的烟台民间手工艺。史料记载:“历年以来,借此艺生活之妇女,烟台一埠数以千计。”(1)烟台作为山东地区最早的开埠口岸和女性教育起源地,烟台花边工艺除了传统意义上的“非物质文化遗产”技艺传承外,更承载了出口创外汇、推进女性教育发展等众多超越其物性本身的现实历史意义。烟台开埠,西方传教士“传教”办学的同时带来了独具特色的手工花边技艺和自由民主的教育思想。烟台花边工艺的传承,不仅是技艺的传承,更是源自母亲的教育、家庭教育的传承。本文利用资料分析、实地调研及访谈的方法,提出以女性教育为研究视角,结合烟台花边产生的背景,综合分析花边传入烟台后的发展演变的阶段性特点,将其分为初入发展期“以工养学”培真女校、调整创新期“按劳分配”集体生产、重塑振兴期“非遗”语境下的手工文化三个阶段。并对当下烟台花边呈现出的发展现状进行简要阐述。从“原生态”到“市场态”的不同生产组织形式及传承方式带来了关于女性作为烟台花边生产主体和消费主体的思考。在此基础上,总结归纳了烟台花边“女性主导”的工艺业态体现出的朴素之美、中和之美、动感之美。论文的结语部分,基于对烟台花边与女性关系的思考,探究手工艺教育对女性社会化带来的影响。中国传统女性在千百年来“穿针引线”的生活中,不仅锻炼了各种编织刺绣技艺,更是锤炼了心性。手工艺教育对于女性自身角色、家庭角色和社会角色的转变带来了新的内涵,对于女性多元化价值观的建立及女红文化的回归产生的积极影响。

关键词：烟台花边女性教育工艺特征

A23187诱导下GRP78/94的表达与肺癌耐药

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A23187诱导下GRP78/94的表达与肺癌耐药

作者：王岩岩大连医科大学

学位级别：硕士

目的:采用RT-PCR、Western印迹等分子生物学技术,检测在Ca2+拮抗剂A23187诱导下,人小细胞肺癌细胞NCI-H446中GRP78和GRP94的表达水平,并分析其表达在肺癌细胞对VP-16耐药中的作用。方法:将5×10个细胞接种于100ml的培养瓶中培养24小时... 详细信息

目的:采用RT-PCR、Western印迹等分子生物学技术,检测在Ca2+拮抗剂A23187诱导下,人小细胞肺癌细胞NCI-H446中GRP78和GRP94的表达水平,并分析其表达在肺癌细胞对VP-16耐药中的作用。方法:将5×10个细胞接种于100ml的培养瓶中培养24小时后,加入含有不同浓度A23187(0、0.5、1、1.5、2、4、6μM)的新鲜培养液再培养24小时。然后采用RT-PCR、Western印迹分别检测各组细胞中两种糖调节蛋白在核酸和蛋白水平的表达,同时向各组细胞中加入不同浓度的VP-16,利用细胞克隆形成法测定细胞在VP-16作用下的生存率。根据这两种蛋白的表达水平与细胞的生存率,阐明GRP78和GRP94在肺癌耐药中的作用。结果:Ca2+拮抗剂A23187可以明显诱导小细胞肺癌细胞NCI-H446中的GRP78和GRP94的表达,且其表达水平与A23187具有一定的浓度依赖性,但其变化在核酸和蛋白水平并非完全一致。当A23187浓度为1μM时,即分别开始对于GRP78和GRP94核酸出现诱导效应,并且分别在4μM和2μM时达到最大效应(与对照组相比分别提高了3和1倍),当A23187浓度为1.5μM和1μM时,即分别开始对于GRP78和GRP94蛋白出现诱导效应,并且均在6μM时达到最大效应(与对照组相比分别提高了1和3倍),表明核酸比蛋白更容易被诱导。细胞克隆形成法测定显示:诱导组细胞(A23187浓度为1-6μM)对VP-16的IC50值明显高于对照组,而且呈浓度依赖性,最大耐药指数为3.32(A23187浓度为6μM)。根据上述各组细胞的IC50以及两种糖调节蛋白表达的变化趋势,可以推断:GRP78和GRP94能够提高NCI-H446细胞对VP-16的耐药性,并且其耐药性与GRP78及GRP94表达的程度有关。结论:本研究表明,Ca拮抗剂A23187能够诱导小细胞肺癌细胞NCI-H446的GRP78和GRP94的表达,且其表达水平与A23187具有一定的浓度依赖性,但其变化在核酸和蛋白水平并非完全一致,此两种蛋白高表达的细胞对VP-16的IC50值明显高于低表达的细胞,表明这两种蛋白的的表达与肺癌细胞对VP-16的耐药性有关,有针对性地抑制基因表达或抑制其功能可能成为肺癌治疗的新思路、新方法。

关键词：葡萄糖调节蛋白(GRP78) 葡萄糖调节蛋白(GRP94) A23187 VP-16 耐药

代谢工程方法提高大肠杆菌β-胡萝卜素产量的研究

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代谢工程方法提高大肠杆菌β-胡萝卜素产量的研究

作者：王岩岩河南农业大学

学位级别：硕士

β-胡萝卜素具有多种生理功能和生物活性,广泛应用于医药、食品添加剂、化妆品、保健品等领域。随着β-胡萝卜素代谢路径研究的不断深入,构建合成β-胡萝卜素的细胞工厂十分必要。本论文将来自成团泛菌P.agglomerans的基因簇crt EYIB引... 详细信息

β-胡萝卜素具有多种生理功能和生物活性,广泛应用于医药、食品添加剂、化妆品、保健品等领域。随着β-胡萝卜素代谢路径研究的不断深入,构建合成β-胡萝卜素的细胞工厂十分必要。本论文将来自成团泛菌P.agglomerans的基因簇crt EYIB引入大肠杆菌,构建出生产β-胡萝卜素的大肠杆菌基因工程菌,并从提高前体物、减少副产物以及优化代谢路径等方面出发,结合计算工程,获得一系列高产β-胡萝卜素的基因工程菌株,为大量生产β-胡萝卜素提供新的策略,本研究得到的主要结论如下:(1)敲除硫酯酶基因对MEP前体物丙酮酸的影响本文根据实验室已有的敲除合成脂肪酸相关基因(tes A、tes B、tes C)的菌株,即利用大肠杆菌无痕编辑方法——TRAGE(Tandem repeat assisted genome editing),对相关菌株进行单敲除、双敲除、三敲除等操作,减少脂肪酸代谢路径对丙酮酸的消耗,使糖酵解产生的丙酮酸尽可能多地走向β-胡萝卜素合成方向。实验结果证明,MGKC、MGKCB和MGKCBA菌株对丙酮酸的积累量较高且三者相差不多,在此基础上,引入β-胡萝卜素外源基因——crt EYIB,WY006相比于出发菌株WY001提高了7倍,同时,WY006的乙酸含量最低。(2)敲除副产物乙酸合成基因在WY006的基础上,敲除副产物乙酸合成相关基因——磷酸乙酰转移酶基因(pta)和乙酸激酶基因(ack A)、丙酮酸氧化酶基因(pox B),获得MGL1和WY010,后者乙酸含量明显低于前者为1.28 g/L,所得到的菌株WY011β-胡萝卜素产量为4.46 mg/L,相比于WY001提高11倍。(3)利用RBS Calculator对MEP途径和β-胡萝卜素合成路径相关基因进行RBS优化在菌株WY010的基础上重点对2-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(MEP)途经以及β-胡萝卜素合成途径进行基因改造。本文利用生物物理模型RBS Calculator辅助设计该代谢路径上相关基因的核糖体结合位点序列,同时结合TRAGE的方法完成了对MEP途径上限速基因dxs、idi,关键基因isp E、isp A、isp H的RBS改造,发酵结果显示Isp H的增强对β-胡萝卜素的产量造成不利影响。发酵得到β-胡萝卜素最高产量的菌株WY076为31.24 mg/L,随后对β-胡萝卜素合成路径上各基因crt E、crt Y、crt I、crt B分别进行RBS优化,获得WY077产量为38.18 mg/L,优化发酵条件得到最终产量为38.85 mg/L,而只含有β-胡萝卜素外源基因而没有作任何基因改造的原始工程菌株WY001β-胡萝卜素的含量仅为0.4 mg/L。补料分批发酵73 h得到β-胡萝卜素439.26 mg/L。

关键词： β-胡萝卜素大肠杆菌副产物 MEP途径系统代谢工程 RBS

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西拉普利的立体选择性合成

西拉普利的立体选择性合成

作者：王岩岩沈阳药科大学

学位级别：硕士

本文简述了各种抗高血压药物的作用机制和研究进展,重点介绍了血管紧张素转化酶抑制剂（ACEⅠ）的分类、临床药理及构效关系。西拉普利（Cilazapril）,作为无巯基的ACE抑制剂,主要用于治疗原发性高血压与心力衰竭,1990年在瑞士上市... 详细信息

本文简述了各种抗高血压药物的作用机制和研究进展,重点介绍了血管紧张素转化酶抑制剂（ACEⅠ）的分类、临床药理及构效关系。西拉普利（Cilazapril）,作为无巯基的ACE抑制剂,主要用于治疗原发性高血压与心力衰竭,1990年在瑞士上市。它不仅具有其他ACE抑制剂的优点,且作用时间长,副作用小,耐受性好,具有良好的市场前景。本文综合文献报道,以5-溴戊酸为起始原料,经溴代、酯化后与N，N’-二苄氧羰基肼成六元环,脱保护后与N-Pht-L-谷氨酸酐（6）进行酰化,然后分子内环合构建七元环,再依次经差向异构、脱邻苯二甲酰保护后与手性侧链连接,最后选择性水解叔丁酯等10步反应得到单一构型目标化合物,总收率18.46%。终产物化学结构经1H NMR及MS确证。三个手性中心的构建是合成目标化合物的关键,在论文中通过L-谷氨酸引入七元环的手性中心,然后七元环合产物通过差向异构转化为单一异构体,最后母核与侧链通过SN2亲核取代连接成功完成目标化合物的第三个手性中心。

关键词：抗高血压药物 ACE抑制剂西拉普利合成

甘露糖受体及TLR4信号通路在尼古丁增强树突状细胞抗原交叉提呈中的作用

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甘露糖受体及TLR4信号通路在尼古丁增强树突状细胞抗原交叉提呈中...

作者：王岩岩厦门大学

学位级别：硕士

树突状细胞(dendritic cell, DCs)是表达乙酰胆碱N型受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAchR)的抗原提呈细胞(antign presenting cell, APC)。我们前期研究发现,尼古丁可调控小鼠骨髓来源的DCs表面nAchR及CD80/86等分子表达而增强DCs介导的CTL应答,尼古丁刺激DCs所表现的抗肿瘤效应提示尼古丁可调控DCs的交叉提呈能力。甘露糖受体(Mannose receptor, MR)是DCs表面重要的模式识别受体,DCs对抗原的交叉提呈不仅依赖于MR介导的抗原内吞而且也依赖于TLR4通路活化所致的TAP内体转位。但到目前为止,尚不清楚MR及TAP内体转位在尼古丁调控DCs交叉提呈中作用,尼古丁对人DCs是否也有类似的调控作用也有待于进一步验证。为此,本课题先以流式细胞术、Western Blot检测尼古丁对DCs表面MR, TLR4表达的影响;次以通路抑制剂阻遏相应激酶活性,流式细胞术、Western Blot发现尼古丁调控MR、TLR4机制;继以激光共聚焦显微镜结合基因沉默技术观察MR、TLR4信号活化在尼古丁增强DCs交叉提呈中的作用;最后以人外周血单核细胞诱导DCs,进一步验证尼古丁对DCs表面分子的调控作用及其机制,为尼古丁调控DCs的临床应用提供理论基础。结果显示：尼古丁刺激不仅明显增加DCs表面MR和TLR4分子的表达并将DCs的吞噬能力提高约160%,而且也明显上调CD80和4-1BBL分子的表达,而nAchR特异性和非特异性拮抗剂α-银环蛇毒素和筒箭毒碱则明显逆转尼古丁对CD80、4-1BBL的上调作用,提示尼古丁经nAchR上调DCs表面MR、CD80、4-1BBL分子表达;对信号激酶磷酸化的检测显示,尼古丁在5-15分钟明显引起ERK1/2磷酸化,P13K激酶的磷酸化也在尼古丁刺激5-30分钟出现。而以LY294002和Wortmannin抑制相应激酶活性后,尼古丁对TLR4和MR分子的上调作用消失,提示尼古丁经PI3K-Akt通路上调DCs表面TLR4和MR表达;激光共聚焦显微镜观察显示,尼古丁刺激不仅增强OVA与早期内体标志分子EEA1共定位,也促进MR与EEAl的共定位,而MR基因沉默则显著抑制OVA-EEA1的共定位,提示尼古丁经调控MR表达而促进内吞抗原OVA定位于内体;对DCs交叉提呈产物SIINFEKL-H2Kb的激光共聚焦和流式细胞术检测则发现,尼古丁刺激不仅增加SIINFEKL与EEA1、Rab7、MHC I类分子共定位,也促进MHC Ⅰ类分子与EEA、Rab7的共定位和SIINFEKL-H2Kb复合物的形成,而沉默MR表达则SIINFEKL与EEA1、Rab7分子的共定位消失及SIINFEKL-H2Kb复合物的减少,提示尼古丁对DCs交叉提呈的增强作用依赖于MR介导的内吞抗原定位于内体;以LPS活化TLR4信号不仅明显增强TAP与EEA1、TAP与Rab7共定位,而且也显著增强SIINFEKL与EEA1、SIINFEKL与MHC I类分子及MHCⅠ类分子与EEA1的共定位及SIINFEKL-H2Kb复合物的形成,与MHC I类分子相反,MHC II类分子与SIINFEKL、Rab7共定位并不受到LPS影响。当以SiRNA转染沉默MyD88表达时,不仅LPS诱导的TAP内体转位明显降低,而且SIINFEKL与MHC I类分子于内体的共定位、SIINFEKL-H2Kb复合物的形成也明显降低,提示尼古丁对DCs形成SIINFEKL-MHC I类分子复合物的能力依赖于LPS诱导的MyD88介导的TAP内体转位;以人外周血来源的DCs进行的实验发现尼古丁通过nAchR-PI3K-Akt通路调控DCs表面nAchR、MR、TLR4、CD80、 CD86、4-1BBL等分子的表达,尼古丁对DCs交叉提呈能力的增强作用也依赖于MyD88介导的TAP内体转位。综上所述：本课题发现了尼古丁调控DCs表面模式识别受体的规律,初步阐明了尼古丁增强DCs交叉提呈抗原的分子机制,为开展尼古丁刺激DCs的免疫治疗提供了理论依据。

关键词：尼古丁树突状细胞交叉提呈 TLR4 CD206

基于路易斯酸催化酯化/杂环芳基溴化反应的研究

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基于路易斯酸催化酯化/杂环芳基溴化反应的研究

作者：王岩岩河南师范大学

学位级别：硕士

在过去数十年间,新型催化剂和催化体系的研究与应用对化学学科的发展起到了巨大的推进作用,使反应能够在温和的条件下顺利进行。路易斯酸是一类比较常见的酸催化剂,它不仅催化效率高,而且大多能够在空气中稳定存在。近年来,路易斯酸催化... 详细信息

在过去数十年间,新型催化剂和催化体系的研究与应用对化学学科的发展起到了巨大的推进作用,使反应能够在温和的条件下顺利进行。路易斯酸是一类比较常见的酸催化剂,它不仅催化效率高,而且大多能够在空气中稳定存在。近年来,路易斯酸催化/促进有机合成反应的发展十分迅速,并越来越受到人们的重视。到目前为止,已被广泛应用于C-C和C-N键的构建或溴化、C-H的功能化或氢化、C-O的酯化等研究领域,并逐渐成为获取重要精细有机化学品的有效合成手段。但寻找更加简单、安全、有效和环境友好的新合成路线仍是一个重要的研究课题。本论文主要研究基于路易斯催化的酯化反应和杂环芳基溴化反应,包括以下两个部分:1.三氟甲磺酸催化C-O键断裂合成酯类化合物我们提出了一个在1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)存在下三氟甲磺酸(HOTf)催化C-O键断裂制备官能化酯类化合物的新策略。在这一路线中,芳基烷基醚C-O键在HOTf作用下发生断裂,并在氯苯溶剂体系中生成苄基正离子,苄基正离子再在NMP作用下与官能酸发生缩合反应生成官能化酯。在模板反应成功获得目标产物后,我们对催化剂、反应溶剂、NMP用量等反应参数进行了优化,获得了制备官能酯类化合物的最佳反应条件。在此基础上,我们探讨了底物的适用范围,并实现了这一策略在克级规模上的制备。对反应机理研究表明,在该转化过程中NMP起着决定性的作用,不仅能抑制苄基正离子与氯苯的Fridel-Crafts烷基化过程,还能加快官能酸的亲核进攻促进官能化酯的生成。这些结果能够更好的帮助化学工作者致力于开发抑制Fridel-Crafts烷基化过程的方法以及通过NMP的促进作用来制备其它功能化合物。2.氧气促进C-H键断裂合成杂环芳基溴化物我们提出了一个使用二甲基亚砜(DMSO)作溶剂、LiBr作卤化剂、氧气作氧化剂、BF3.Et2O作促进剂通过氧化卤化反应制备溴化芳烃化合物的新策略。在模板反应成功制得目标产物后,我们对催化剂、反应溶剂、卤化试剂等反应条件进行了优化,获得了制备溴化芳烃化合物的最佳反应条件。在此基础上,我们对底物的适用性进行探讨,并实现了杂环芳基溴化物在克级规模上的制备。该合成路线具有原料简单易得、反应条件温和、成本低、底物适应性好等特点。

关键词：路易斯酸 1-甲基-2-吡咯烷酮 C-O键断裂官能化酯杂环芳基溴化物