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纳米粒子介导特异基因转染的实验研究

中华医学杂志 2002年第5期82卷 341-344页

作者：李拥军管珩刘昌伟郑曰宏赵三妹王宗立杨菁宋存先中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基本外科 100730 中国医学科学院基础医学研究所病理室中国医学科学院生物医学工程研究所第七研究室

目的　观察纳米粒子携带特异性基因转染的可行性及其效率。方法　应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物和聚乙烯醇包载特异性反义单核细胞趋化蛋白 1基因 ,制备纳米级粒子混合物。检测其包埋率、体外释放情况及粒度。以阳离子脂质体为对照 ,利用... 详细信息

目的　观察纳米粒子携带特异性基因转染的可行性及其效率。方法　应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物和聚乙烯醇包载特异性反义单核细胞趋化蛋白 1基因 ,制备纳米级粒子混合物。检测其包埋率、体外释放情况及粒度。以阳离子脂质体为对照 ,利用培养的平滑肌细胞 ,应用聚合酶链反应(PCR)观察其为真核细胞传递基因的可能性 ;采用移植静脉内膜增生动物模型 ,应用RNA斑点杂交和病理形态学分析 ,观察其在体内的基因转染、表达及生物学效应。结果　制备的纳米粒子 DNA粒度为 1 50～ 30 0nm ,包埋率为 :0 .9% ,体外释放时间为 2周左右。PCR结果提示 :纳米粒子可将目的基因转移至平滑肌细胞中。体内实验显示 :纳米粒子可实现体内局部基因转染、表达 ,发挥相应的效应。

关键词：基因治疗载体纳米粒子反义单核细胞趋化因子血管再狭窄基因转染实验研究

反义单核细胞趋化蛋白-1转基因表达对单核细胞在动脉内膜粘附的影响

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中华病理学杂志 2000年第2期29卷 107-110页

作者：吴强乔绘红王宗立张华刘佩毛许漫任国锋赵三妹佘铭鹏中国协和医科大学

目的　了解动脉粥样硬化发病过程中单核细胞粘附并进入动脉内膜的机制 ,分析单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)基因表达对单核细胞粘附动脉内膜的作用。方法　以实验性高脂血及轻度氧化LDL(MM LDL)局部保留灌注的家兔股动脉为模型 ,采用DOTAP... 详细信息

目的　了解动脉粥样硬化发病过程中单核细胞粘附并进入动脉内膜的机制 ,分析单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)基因表达对单核细胞粘附动脉内膜的作用。方法　以实验性高脂血及轻度氧化LDL(MM LDL)局部保留灌注的家兔股动脉为模型 ,采用DOTAP阳离子脂质体包裹LNCX anti MCP 1质粒 ,将反义MCP 1cDNA定位导入家兔股动脉鞘及周围组织 ,以原位杂交、Northern杂交及狭缝杂交法观察反义MCP 1基因的表达 ,应用扫描电镜观察单核细胞在动脉内膜粘附的情况。结果　PCR检测发现重组基因的整合 ,RNA水平的检测发现实验组有反义MCP 1mRNA的表达 ,且实验组正义MCP 1mRNA的表达量比对照组减少 ,对照组可见明显的单核细胞粘附 ,实验组则未见此现象。结论　用逆转录病毒表达载体阳离子脂质体介导的反义MCP 1转基因表达能减少靶基因表达并抑制单核细胞在动脉内膜粘附。

关键词：动脉粥样硬化 MCP-1 转基因表达 cDNA

癌胚抗原和CA19-9联合检测对Ⅳ期胃癌腹膜转移的诊断价值

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中国现代医生 2011年第23期49卷 43-45页

作者：王宗立湖州市第一人民医院浙江湖州313000

目的探讨癌胚抗原和CA19-9联合检测对Ⅳ期胃癌腹膜转移的诊断价值,方法分别测定2008年1月～2010年1月我院收治的119例Ⅳ期胃癌腹膜转移患者和151例同期Ⅳ期胃癌无腹膜转移患者的癌胚抗原和CA19-9水平,比较两组患者癌胚抗原和CA19-9水平... 详细信息

目的探讨癌胚抗原和CA19-9联合检测对Ⅳ期胃癌腹膜转移的诊断价值,方法分别测定2008年1月～2010年1月我院收治的119例Ⅳ期胃癌腹膜转移患者和151例同期Ⅳ期胃癌无腹膜转移患者的癌胚抗原和CA19-9水平,比较两组患者癌胚抗原和CA19-9水平与150例正常志愿者的检测结果的差异,并比较两组患者之间癌胚抗原和CA19-9水平的差异。结果Ⅳ期胃癌组的癌胚抗原水平[(39.63±12.86)ng/mL]和CA19-9水平[(41.95±13.62)U/mL]明显高于健康对照组(P<0.01),Ⅳ期胃癌腹膜转移患者组的癌胚抗原水平[(57.34±9.71)ng/mL]和CA19-9水平[(71.95±14.69)U/mL]明显高于Ⅳ期胃癌无腹膜转移患者组(P<0.05)。肿瘤直径越大、淋巴结转移越多,癌胚抗原水平及CA19-9水平越高。结论癌胚抗原和CA19-9联合检测可作为识别Ⅳ期胃癌有无腹膜转移及其严重性的重要指标,对Ⅳ期胃癌的诊断与估计预后有重要意义。

关键词：癌胚抗原 CA19—9 胃癌腹膜转移

树鼩高密度脂蛋白亚类及其载脂蛋白构成与抗动脉粥样硬化的关系

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中国循环杂志 1993年第2期8卷 95-97页

作者：梁平谷素敏王宗立夏人仪佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所病理室

树鼩HDL_3和HDL_2共占血浆总脂蛋白的90%以上,是转运血浆胆固醇的主要脂蛋白,其HDL_2中载脂蛋白构成独特,琼脂糖电泳显示为β脂蛋白,可能在转运脂质中起特殊作用。喂高胆固醇饲料后,血浆HDL_3及HDL_2浓度明显增加,HDL_2中的apo E比例也... 详细信息

树鼩HDL_3和HDL_2共占血浆总脂蛋白的90%以上,是转运血浆胆固醇的主要脂蛋白,其HDL_2中载脂蛋白构成独特,琼脂糖电泳显示为β脂蛋白,可能在转运脂质中起特殊作用。喂高胆固醇饲料后,血浆HDL_3及HDL_2浓度明显增加,HDL_2中的apo E比例也显著增加,高酪蛋白饲料则能抑制高胆固醇对HDL的作用,并使HDL_3中出现一新的MW22.4kD蛋白成分。这些改变有利于HDL加快转运胆固醇至肝脏分解代谢。

关键词：高密度脂蛋白胆固醇动脉粥样硬化

高职院校研究性学习评价机制研究——构建“三方联动”的多维评价体系

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考试周刊 2010年第19期 193-194页

作者：王仙婷王宗立烟台职业学院对外经贸系交通银行烟台开发区泰山路支行

研究性学习评价是研究性学习的重要组成部分,是实现学习目标、发展教育评价导向和进行质量监控的有效手段,也是高职院校教学改革面临的一个新课题。本文依据现代教育有关理论,结合高职院校研究性学习的教学实践,对研究性学习评价的特点... 详细信息

研究性学习评价是研究性学习的重要组成部分,是实现学习目标、发展教育评价导向和进行质量监控的有效手段,也是高职院校教学改革面临的一个新课题。本文依据现代教育有关理论,结合高职院校研究性学习的教学实践,对研究性学习评价的特点等方面的内容进行研究,探索适合高职院校研究性学习评价的有效方法。

关键词：高职院校研究性学习评价机制 “三方联动”

大鼠脑缺血再灌注损伤后Survivin和Caspase-3表达与细胞凋亡的关系

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中国现代医学杂志 2010年第20期20卷 3065-3068,3073页

作者：范红杰王宗立何志义中国医科大学附属盛京医院神经内科辽宁沈阳110004 中国医科大学附属第一医院神经内科辽宁沈阳110001

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后Survivin和Caspase-3表达与细胞凋亡的关系。方法将42只成年雄性SD大鼠,体重250～280g,随机分成对照组(n=3)、假手术组(n=3)和缺血再灌注6h、12h、1d、2d、3d和6d组(n=6)。采用栓线法制备大脑中动脉缺血9... 详细信息

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后Survivin和Caspase-3表达与细胞凋亡的关系。方法将42只成年雄性SD大鼠,体重250～280g,随机分成对照组(n=3)、假手术组(n=3)和缺血再灌注6h、12h、1d、2d、3d和6d组(n=6)。采用栓线法制备大脑中动脉缺血90min再灌注模型,应用免疫组织化学方法观察Survivin和Caspase-3表达,TUNEL方法检测细胞凋亡。结果对照组及假手术组未见Survivin和Caspase-3表达,仅见凋亡细胞0～2个,缺血再灌注6h,显示在缺血侧皮层、皮层下纹状体和海马区Survivin和Caspase-3表达增多,凋亡细胞增多,12h～1d三者均持续增多,2d Caspase-3表达及凋亡细胞达到高峰,3～6d呈下降趋势,而Sur-vivin的表达3d达高峰,持续至6d有下降趋势(P<0.05)。结论大鼠局灶脑缺血再灌注损伤后诱发Survivin和Caspase-3异常表达,并与细胞凋亡有密切联系。

关键词：脑缺血再灌注 Survivin Caspase-3 细胞凋亡

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脑分水岭梗死60例临床分析

中国伤残医学 2011年第2期19卷 59-60页

作者：邵海云王宗立齐齐哈尔市第一医院神经内科黑龙江齐齐哈尔161006

目的:探讨脑分水岭梗塞(CWI)的病因、类型及临床特点。方法:分析60例经头颅MRI证实的幕上CWI患者的临床及影像学资料。结果:CWI的病因为体循环低血压、脑的大动脉狭窄或闭塞、心脏疾患、血流变学异常等。皮层前型21例(35%),在大脑前动... 详细信息

目的:探讨脑分水岭梗塞(CWI)的病因、类型及临床特点。方法:分析60例经头颅MRI证实的幕上CWI患者的临床及影像学资料。结果:CWI的病因为体循环低血压、脑的大动脉狭窄或闭塞、心脏疾患、血流变学异常等。皮层前型21例(35%),在大脑前动脉与大脑中动脉皮层支的边缘带,呈楔形,临床表现为偏瘫、偏身感觉障碍、经皮层运动性失语等;皮层后型24例(40%),在大脑中动脉与大脑后动脉皮层支边缘带,表现为视野缺损、经皮层感觉性失语、皮层型感觉障碍、轻瘫等;皮层下型15例(25%),在大脑中动脉皮层支与深穿支边缘带,表现为偏瘫、偏身感觉障碍,优势半球病变可有言语障碍等。结论:CWI的主要病因为体循环低血压、颈动脉狭窄或闭塞及心脏疾患,多数预后良好。

关键词：脑分水岭梗死病因临床特点

骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及survivin、caspase-3蛋白表达的影响

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中国医科大学学报 2009年第11期38卷 834-837页

作者：王宗立范红杰庞超健马玉朝中国医科大学附属盛京医院神经内科沈阳110004 中国医科大学基础医学院解剖学教研室沈阳110001

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSC)移植对缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞凋亡及存活蛋白(survivin)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达的影响。方法健康SD大鼠42只,随机分为假手术组(n=6)、磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=18)和MSC组(n=18)。PBS组和... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSC)移植对缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞凋亡及存活蛋白(survivin)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达的影响。方法健康SD大鼠42只,随机分为假手术组(n=6)、磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=18)和MSC组(n=18)。PBS组和MSC组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,假手术组除不插入尼龙线外,其余步骤相同。PBS组和MSC组分别于建模成功后3h分别经尾静脉注射等体积的PBS液和已制备好的同种异体MSC悬液。每组于脑缺血90min再灌注1d、3d、6d时分别采用Western blot及免疫组化方法检测缺血侧脑组织survivin和caspase-3蛋白的表达,运用TUNEL方法检测细胞凋亡。结果假手术组无神经功能缺损,未见细胞凋亡及未见survivin和caspase-3蛋白表达。与PBS组比较,MSC组于脑缺血90min再灌注1d开始,caspase-3蛋白表达减少,再灌注3d开始,神经细胞凋亡数较少,神经功能缺损评分较低,survivin蛋白表达较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞移植能改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能,上调survivin蛋白表达,下调caspase-3蛋白表达,减少神经细胞凋亡,推测可能是其作用机制之一。

关键词：骨髓间充质干细胞缺血再灌注凋亡存活蛋白胱天蛋白酶-3

Suppression of induced atherosclerosis in h-apo AI transgenic mice by overexpression of human apo AI in the aortic wall

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Chinese Medical Journal 2000年第7期113卷 81-85页

作者：李汇华谷素敏曹心宜王宗立佘铭鹏 China 100005

To investigate the inhibitory effect of expressed human apolipoprotein AI (h apo AI) and high density lipoprotein (HDL) on atherosclerosis development in transgenic mice, and cultivation of smooth muscle cells isolated from the aortic wall of transgenic mice that are able to produce human apo AI in vitro Methods Both h apo AI transgenic mice and normal C57 mice were fed with either a regular chow or a high fat diet containing 5% pork lard, 1 25% cholesterol and 0 25% sodium cholate for 14 or 24 weeks respectively Human apo AI mRNA were detected by Northern blot Plasma apo AI levels were measured using a radio immuno diffusion assay, and plasma lipid levels were measured using a colorimetric assay Image analysis was performed in order to quantify the fatty streak areas stained with oil red O In addition, smooth muscle cells isolated from the media layer of the aortic wall of h apo AI transgenic mice were cultured for the detection of human apo AI produced Results Higher levels of h apo AI mRNA were found in liver, small intestine, kidneys and aortae in transgenic mice than in the controls all on a high fat diet The transgenic mice had an increased level of serum apo AI and HDL cholesterol and the fatty streak area counted at the aortic sinus was approximately 5 fold less in the transgenic mice after feeding with a high fat ration, particularly after 24 weeks SMC isolated from the transgenic mice aortae were cultivated and able to express h apo AI mRNA and its related protein Conclusion Elevation of h apo AI and HDL in serum and aortic wall of the transgenic mice has a remarkably inhibitory effect on the development of experimental atherosclerosis

关键词： transgenic mice human apolipoprotein AI atherosclerosis