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无机磷溶解菌RW8的筛选、鉴定及对白三叶促生效果研究

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草业学报 2017年第5期26卷 181-188页

作者：蔡璐王小利陈莹王子苑李小冬贵州省草业研究所贵州贵阳550006 贵州省生物技术研究所贵州贵阳550006

从白三叶根际分离筛选9株溶磷微生物,并对挑选菌株进行形态、细胞以及种属鉴定,并分析其对白三叶的促生效果。通过分析溶磷圈与溶磷菌落直径的大小与比值获得溶磷量与持续溶磷能力较强的RW8菌株。通过形态与扫描电镜观察发现RW8是具有... 详细信息

从白三叶根际分离筛选9株溶磷微生物,并对挑选菌株进行形态、细胞以及种属鉴定,并分析其对白三叶的促生效果。通过分析溶磷圈与溶磷菌落直径的大小与比值获得溶磷量与持续溶磷能力较强的RW8菌株。通过形态与扫描电镜观察发现RW8是具有鞭毛的短杆菌,其菌落形态表面光滑,不透明;将RW8 16SrDNA序列比对NCBI数据库发现其与阴沟肠杆菌属(Enterobacter sp.)的同源性高达99.5%,Biolog鉴定其与阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae ss dissolvens)的相似性为0.610。RW8溶磷量达424.85μg/mL,溶磷能力可能与RW8的产酸性能(12.30μg/mL)密切相关。RW8对白三叶根系与幼苗的生物产量的分配有显著影响,接种RW8后能抑制白三叶根系伸长,根系鲜重与干重有下降趋势,但差异不显著;而幼苗的生物产量(干重与鲜重)均显著高于对照(P<0.05),并且该现象与植物生长激素IAA无关,其具体的作用机制还有待于进一步研究。

关键词：溶磷菌白三叶阴沟肠杆菌有机酸

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低磷胁迫下高羊茅蛋白组学分析

中国草地学报 2023年第7期45卷 6-14页

作者：马培杰李亚娇王子苑王小利贵州省农业科学院草业研究所贵州贵阳550006

对低磷胁迫下高羊茅叶片中蛋白差异化表达和生理指标进行研究,可为高羊茅低磷胁迫响应的关键基因和重要蛋白挖掘奠定基础。采用TMT标记、基于质谱的定量蛋白质组学技术、高效液相色谱分级技术分析低磷胁迫下高羊茅叶片蛋白组学,结果共... 详细信息

对低磷胁迫下高羊茅叶片中蛋白差异化表达和生理指标进行研究,可为高羊茅低磷胁迫响应的关键基因和重要蛋白挖掘奠定基础。采用TMT标记、基于质谱的定量蛋白质组学技术、高效液相色谱分级技术分析低磷胁迫下高羊茅叶片蛋白组学,结果共筛选到差异表达蛋白432个(上调表达127个,下调表达305个);其中,氧化还原反应以及磷代谢、胁迫相关代谢等多个途径的基因上调表达。对差异蛋白的蛋白结构域进行富集,共富集到106个结构域,包括丙酮酸盐/磷酸烯醇式丙酮酸激酶样结构域、谷胱甘肽S-转移酶C-末端样、谷胱甘肽S-转移酶N-末端、天冬氨酸肽酶结构域。差异表达蛋白亚细胞结构定位显示,其主要定位于叶绿体和细胞质。差异蛋白总共富集到了99个通路,其中只有核糖体通路上调,其余都下调,下调通路集中在糖酵解/糖异生、丙酮酸代谢、谷胱甘肽代谢中。低磷胁迫处理后,高羊茅叶绿素总量下降,可溶性蛋白含量显著下降,谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性均较对照显著下降。

关键词：高羊茅低磷胁迫蛋白组学表达分析

不同石漠化程度对灌丛草地土壤细菌遗传多样性的影响

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草地学报 2017年第4期25卷 756-761页

作者：陈莹王茜王子苑王小利贵州省草业研究所贵州贵阳550006

为探讨石漠化对灌丛草地土壤细菌遗传多样性的影响,在贵州省普定县石漠化治理区采集潜在(A)、轻度(B)、中度(C)和重度石漠化(D)4种不同类型的灌丛草地土样,并以石缝玉米耕作地为对照(E),应用PCR-DGGE技术对土壤细菌群落结构进行了研究... 详细信息

为探讨石漠化对灌丛草地土壤细菌遗传多样性的影响,在贵州省普定县石漠化治理区采集潜在(A)、轻度(B)、中度(C)和重度石漠化(D)4种不同类型的灌丛草地土样,并以石缝玉米耕作地为对照(E),应用PCR-DGGE技术对土壤细菌群落结构进行了研究。结果表明:样地A的香农指数与丰富度指数均高于样地B,C,D,说明随着石漠化的加剧,细菌群落的复杂度与丰富度呈下降趋势,而对照组(E)最低,这表明耕作后土壤中细菌的复杂度与丰富度显著下降。通过聚类分析发现对照组E为一个族,A,B,C,D为一个大族,其中样地A与B,样地C与D土壤细菌PCR-DGGE图谱相似度较高。在系统发育树分析中发现13个序列片段聚成了10个分支,土壤细菌在不同程度石漠化灌丛草地土壤中会形成不同的群落结构,并具高度的遗传多样性。

关键词：石漠化灌丛草地土壤细菌遗传多样性

高羊茅生物钟基因FaLHY的克隆及功能分析

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植物生理学报 2023年第8期59卷 1596-1606页

作者：陈莹王茜陈锡王子苑杨春燕王小利贵州省农业科学院贵州省草业研究所贵阳550006

生物钟可以促进植物的生长和对环境的适应性,并为植物在黎明和黄昏进行光合作用做好准备。为研究生物钟基因LHY在高羊茅中的昼夜表达模式,采用cDNA末端快速扩增技术从高羊茅叶片中克隆LHY基因,命名为FaLHY。结果表明,FaLHY全长为2558 bp... 详细信息

生物钟可以促进植物的生长和对环境的适应性,并为植物在黎明和黄昏进行光合作用做好准备。为研究生物钟基因LHY在高羊茅中的昼夜表达模式,采用cDNA末端快速扩增技术从高羊茅叶片中克隆LHY基因,命名为FaLHY。结果表明,FaLHY全长为2558 bp,含2145 bp的开放阅读框,共编码714个氨基酸,分子量约为77.59 kDa,pI为6.04,定位于细胞质,经系统进化树分析,FaLHY蛋白与禾本科粳稻的LHY蛋白亲缘关系最近。荧光定量PCR表明,FaLHY在长日照与短日照均有明显的昼夜震荡节律,即使FaLHY基因在昼夜颠倒与连续光照/黑暗条件下,短期内还是能维持昼夜震荡节律。构建过表达载体P35S::FaLHY转入拟南芥,结果显示FaLHY基因过表达会导致拟南芥晚花,且在一定程度上影响着拟南芥生物钟基因CCA1与开花基因FT节律振幅的变化,对光周期基因CO表达节律影响不大。

关键词： FaLHY 克隆生物钟昼夜节律高羊茅

添加双乙酸钠对发酵全混合日粮发酵品质和霉菌毒素含量的影响

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动物营养学报 2020年第12期32卷 5958-5966页

作者：王子苑舒健虹陈光吉王小利李世歌贵州省农业科学院草业研究所贵阳550006

本试验旨在研究添加双乙酸钠对发酵全混合日粮(FTMR)发酵品质和霉菌毒素含量的影响,以期为双乙酸钠在FTMR生产中的应用提供理论依据。采用完全随机试验设计,在全混合日粮(TMR)中分别添加0(对照组)、0.2%、0.4%和0.8%的双乙酸钠,混合均... 详细信息

本试验旨在研究添加双乙酸钠对发酵全混合日粮(FTMR)发酵品质和霉菌毒素含量的影响,以期为双乙酸钠在FTMR生产中的应用提供理论依据。采用完全随机试验设计,在全混合日粮(TMR)中分别添加0(对照组)、0.2%、0.4%和0.8%的双乙酸钠,混合均匀后装袋密封发酵第7、21、35、49和70天时取样,对FTMR进行感官评定、常规成分含量、发酵参数以及霉菌毒素含量的测定。结果表明:1)各组FTMR感官评定等级均为“优良”,双乙酸钠添加量对FTMR中粗蛋白质含量无显著影响(P>0.05),0.4%组FTMR中中性洗涤纤维含量在发酵第21和49天时显著高于其余组(P<0.05),各双乙酸钠添加组FTMR中酸性洗涤纤维含量在发酵第49和70天时均显著低于对照组(P<0.05)。2)0.2%组FTMR具有较低的pH和较高的乳酸含量;FTMR中氨态氮/总氮随双乙酸钠添加量的增加而逐渐降低,0.8%组和对照组之间在除发酵第35天外的各发酵时间点均存在显著差异(P<0.05);FTMR中乙酸含量在0.8%组有最大值。3)FTMR中霉菌毒素含量随双乙酸钠添加量的增加而降低,其中0.8%组的黄曲霉毒素含量在发酵第70天时几乎检测不出。4)随着发酵时间的延长,FTMR的pH以及常规养分和霉菌毒素含量均有不同程度下降,乳酸和乙酸含量出现上下波动,各组均在发酵第35天时有较低的pH。由此可见,添加双乙酸钠能改善FTMR的发酵品质,抑制霉菌毒素的大量繁殖,减少干物质的损失;本试验条件下,双乙酸钠的适宜添加量在0.2%~0.4%。

关键词：发酵全混合日粮双乙酸钠发酵品质霉菌毒素

低磷胁迫下高羊茅生理响应及基因组DNA甲基化多态性分析

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中国草地学报 2020年第3期42卷 7-14页

作者：王子苑舒健虹吴佳海陈莹王小利贵州省草业研究所贵州贵阳550006

用KH2PO4浓度为0.005mmol/L的Hoagland全营养液模拟低磷胁迫,对低磷环境下高羊茅的生长特性、生理响应以及基因组DNA甲基化进行分析,探讨高羊茅对低磷胁迫的响应。结果表明:低磷胁迫15d后高羊茅的植株生长受到抑制,分蘖数明显降低;地上... 详细信息

用KH2PO4浓度为0.005mmol/L的Hoagland全营养液模拟低磷胁迫,对低磷环境下高羊茅的生长特性、生理响应以及基因组DNA甲基化进行分析,探讨高羊茅对低磷胁迫的响应。结果表明:低磷胁迫15d后高羊茅的植株生长受到抑制,分蘖数明显降低;地上部、地下部的鲜重和干重受低磷胁迫影响较大,生物量的分配更倾向于地下部;低磷胁迫对高羊茅叶片生理生化指标的影响不一致,叶片中可溶性蛋白(SP)含量显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性显著降低(P<0.05),而过氧化物酶(POD)活性显著升高(P<0.05);低磷环境下玉米素(ZA)含量较对照无显著差异,而脱落酸(ABA)含量显著下降(P<0.05),赤霉素(GA3)和植物生长素(IAA)含量则显著升高(P<0.05),其中IAA相对变化率最大。甲基化敏感扩增多态性(MSAP)分析发现,与对照相比,低磷组总甲基化率下降2.46%,低磷组甲基化模式的变化主要以甲基化为主,磷胁迫诱导的高羊茅DNA甲基化变化可能参与了对环境的适应性调节。

关键词：高羊茅低磷胁迫生理响应 DNA甲基化

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影响畜禽肉质的主要因素及其作用机制

西南大学学报（自然科学版） 2014年第11期36卷 26-33页

作者：宋代军王子苑杨游姚焰础西南大学动物科技学院重庆400715 重庆市畜牧科学院动物营养研究所重庆402460

随着生活水平的提高,人们对肉类的要求已经逐渐从数量向质量转变,因此肉类品质越来越受到关注.影响肉质的因素很多,主要归纳为遗传和环境两方面,其中基因和饲养管理分别是影响肉质的重要因素.因此,本文就肉质的评定指标、肉质的影响因... 详细信息

随着生活水平的提高,人们对肉类的要求已经逐渐从数量向质量转变,因此肉类品质越来越受到关注.影响肉质的因素很多,主要归纳为遗传和环境两方面,其中基因和饲养管理分别是影响肉质的重要因素.因此,本文就肉质的评定指标、肉质的影响因素以及这些因素对肉质的调控作用机制进行探讨,为今后肉质的研究提供参考依据.

关键词：肉质评定指标营养素基因饲养管理

不同氮磷条件下施加促生菌对多花黑麦草生长的影响

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中国草地学报 2021年第2期43卷 28-36页

作者：舒健虹刘晓霞王子苑曾庆飞王小利贵州省农业科学院草业研究所贵州贵阳550006

为进一步筛选适于田间条件的根际促生菌(PGPR),从豆科和禾本科植物根际分离出活性较强的3株固氮菌(C1、C2、C3)和3株溶磷菌(P1、P2、P3),经16S rRNA基因序列分析后,接种于多花黑麦草品种邦德,并探讨在单一固氮菌替代50%氮肥、单一溶磷... 详细信息

为进一步筛选适于田间条件的根际促生菌(PGPR),从豆科和禾本科植物根际分离出活性较强的3株固氮菌(C1、C2、C3)和3株溶磷菌(P1、P2、P3),经16S rRNA基因序列分析后,接种于多花黑麦草品种邦德,并探讨在单一固氮菌替代50%氮肥、单一溶磷菌替代全磷以及固氮菌和溶磷菌的不同组合替代50%氮肥+无磷三种条件下多花黑麦草生物量、氮磷含量的变化。结果表明:分离的溶磷菌为肠杆菌属和假单胞菌,固氮菌为伯克霍尔德氏菌和芽孢杆菌,都是较好的益生菌种,固氮酶活性在131.20~135.48IU/L之间,溶磷量在239.84~287.44μg/mL之间。施入单一菌剂的多花黑麦草生物产量、氮磷含量以C2和P2表现最佳;施组合菌肥的多花黑麦草生物量、全N及全P含量比无菌肥组对照显著提高(P<0.05),比施单一菌肥效果好,综合分析表明P3+C1和P1+C1促生效应最佳,应用潜力最大。

关键词：黑麦草植物根际促生菌生物量氮磷含量

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低磷胁迫下高羊茅转录组学分析

分子植物育种 2022年

作者：马培杰李亚娇舒健虹王子苑罗维龙忠富王小利贵州省农业科学院草业研究所

对高羊茅(Festuca arundinacea)叶片进行转录组测序分析，挖掘响应低磷胁迫的相关基因，探讨高羊茅抵御逆境胁迫的分子机制。用KH2PO4浓度为0.005 mmol/L的Hoagland全营养液模拟低磷胁迫处理下的高羊茅作为研究材料，应用HiSeq4000 PE-... 详细信息

对高羊茅(Festuca arundinacea)叶片进行转录组测序分析，挖掘响应低磷胁迫的相关基因，探讨高羊茅抵御逆境胁迫的分子机制。用KH2PO4浓度为0.005 mmol/L的Hoagland全营养液模拟低磷胁迫处理下的高羊茅作为研究材料，应用HiSeq4000 PE-250测序平台对叶片进行转录组测序，对测序结果进行基因功能注释分析和差异表达基因(DEGs)筛选。获得低磷胁迫处理下高羊茅叶片中2 269个DEGs。GO富集结果表明，低磷胁迫下高羊茅中的DEGs均显著富集到叶绿体被膜、叶绿体基质、酸性磷酸酶活性、去磷酸化、蔗糖-1F果糖基转移酶活性等过程中；KEGG途径富集分析表明，高羊茅低磷胁迫处理下的DEGs显著富集的代谢途径主要涉及甘油磷脂代谢、甘油脂类代谢、类胡萝卜素生物合成、苯丙氨酸代谢等。转录因子鉴定结果显示高羊毛低磷胁迫处理下差异表达数量最多的转录因子主要来自C3H、NAC、C2H2、WRKY、bHLH等转录因子家族；通过高通量转录组测序，初步获取了高羊茅响应低磷胁迫的基因表达特征，为深入研究高羊茅抗逆机制提供理论依据。

关键词：高羊茅低磷胁迫转录组分析转录因子