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临床分离铜绿假单胞菌株的临床分布特征及Quorum Sensing系统编码基因的研究

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临床分离铜绿假单胞菌株的临床分布特征及Quorum Sensing系统编码...

作者：王姝云山西医科大学

学位级别：硕士

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginoisa, PA)为条件致病菌,也是引起医院内感染的主要致病菌之一。由于其极强的环境适应能力而分布广泛。PA主要侵袭免疫力低下或免疫功能受到抑制的患者,进而导致呼吸道感染、血液感染和尿路感染。近些... 详细信息

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginoisa, PA)为条件致病菌,也是引起医院内感染的主要致病菌之一。由于其极强的环境适应能力而分布广泛。PA主要侵袭免疫力低下或免疫功能受到抑制的患者,进而导致呼吸道感染、血液感染和尿路感染。近些年来随着抗菌药物的乱用、滥用使得抗菌药物的耐药率只升不降,再加上临床治疗中各种侵入性操作的增加,更是使得铜绿假单胞菌的耐药率上升情况雪上加霜,甚至出现多药耐药,给临床抗菌治疗带来许多困难。铜绿假单胞菌耐药机制复杂,其中之一就是细菌生物膜的形成。目前,生物被膜研究成为当前的研究热点,大量文献显示,生物被膜是细菌形成感染的必备条件。密度感应(Quorum Sensing,QS)系统与生物膜的分化和成熟之间的关系非常亲密。铜绿假单胞菌的QS系统的缺失对细菌生物膜是否有影响?从分子生物学的角度来说是如何影响?本课题通过对铜绿假单胞菌QS系统缺陷株QS编码基因进行检测,探讨QS系统调控机制。试图从基因层面、配体分子层面等分子生物学方面对QS系统进行干扰,为临床抗感染寻求新的途径。 1、临床分离铜绿假单胞菌的多药耐药情况及临床分布特征目的：从临床的角度出发,对某院临床分离铜绿假单胞菌主要标本类型及易感染科室的规律有个初步的了解,并检测PA的多药耐药情况。方法：连续收集某院住院及门诊患者的痰、咽拭子、分泌物及血液等临床标本。所有菌株均经生物梅里埃公司VITEK-2重新鉴定;采用琼脂倍比稀释法测定菌株的MIC值,依据2012年版美国实验室标准化委员会(CLSI)推荐的铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的MIC值判定耐药性;将同时对≥3种抗菌药物耐药的菌株判定为多药耐药菌株;用WHONET5.5版本软件进行统计分析标本临床分布特征。结果：(1)66株铜绿假单胞菌标本中检出率最高的是痰液64.94%(43/66),其次为分泌物14.29%(9/66),无菌体液中尿占到7.79%(5/66)、血液占到6.49%(4/66)、腹水占到1.3%(1/66)。(2)在临床科室中检出率居首位的是ICU和呼吸科,均为15.15%(10/66),居第二和第三的分别是血液科12.12%(8/66)和神经科、骨科9.09(6/66),风湿科、消化科、肾内科和普外科很相近,均在5%左右;(3)在MIC值得测定中,耐药率最高的抗菌药物为氨曲南(45.45%),其次为头孢哌酮/舒巴坦(39.39%),耐药率最低的为哌拉西林/他唑巴坦(9.1%),多药耐药菌株占到27.27%(18/66)。其中同时对丁胺卡那、美罗培南和氨曲南耐药的有9株,占到多药耐药菌株的50%;同时对左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南耐药的有6株,占到多药耐药菌株的33.3%;同时对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南耐药的有5株,占到多药耐药的菌株的27.8%。 2.、临床分离铜绿假单胞菌QS系统缺陷株的筛选及生物被膜形成能力的分析目的：探讨铜绿假单胞菌QS系统是否影响生物膜的形成。方法：依据铜绿假单胞菌弹性蛋白酶的产生严格依赖QS系统,弹性蛋白酶缺失的则为QS系统缺陷株。利用平板结合结晶紫染色法建立PA生物膜,并定量分析临床分离的铜绿假单胞菌生物被膜形成能力。结果：66株菌中检测出有6株(27号、33号、38号、42号、62号、66号)QS缺陷株,检出率为9.09%(6/66),QS系统非缺陷株高达90.91%。缺陷株A570平均值=0.434,非缺陷株A570平均值=1.113,在非缺陷菌株中Amax=2.285, Amin=0.679。 3、临床分离铜绿假单胞菌QS系统编码基因分析目的：从分子生物学出发,探索铜绿假单胞菌QS系统的编码基因是否存在异常,为临床治疗铜绿假单胞菌的感染寻求新的途径。方法：用由宝生物(大连)有限公司提供的DNA提取试剂盒提取出铜绿假单胞菌染色体DNA,利用PCR试剂盒进行扩增,扩增产物做琼脂糖电泳实验初步判断铜绿假单胞菌QS缺陷株所缺的基因,然后进行DNA序列检测,用Bioedit软件将分离铜绿假单胞菌QS缺陷株与野生株PAO1的基因标准序列进行比对并转换成蛋白质的氨基酸序列与野生株PAO1进行比对。结果：①电泳结果显示：27号菌株的rhlR、lasI基因缺失;42号菌株的lasI、 lasR、rhlI、rhlR四个基因均缺失;33、38、62、66号菌株的lasR基因均缺失。②基因比对和蛋白质的氨基酸序列比对结果显示：27号、33号、38号菌株的rhlR基因序列多个位点发生碱基替换突变,其中第402位、第597位的碱基突变使得编码蛋白氨基酸序列第130个、第195个氨基酸由异亮氨酸、苯丙氨酸分别变为苏氨酸、丝氨酸,此外38号菌株的rhlR基因序列在第696位发生碱基缺失(移码)突变、697位发生碱基替换突变使得第113个氨基酸由络氨酸变为丝氨酸。33号、38号菌株的rh1I基因发生多位点突变,其中第11

关键词：铜绿假单胞菌耐药性生物膜密度感应系统基因突变

256层螺旋CT血管成像技术在腹腔镜胆囊切除术前评估胆囊动脉的临床意义

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第12期 8-10页

作者：王姝云刘晓玉罗书华赵玉立赣州市人民医院江西赣州341000

用256层螺旋CT血管成像技术观察胆囊癌、胆囊炎患者胆囊动脉。方法选择2022年1月至2022年10月我院腹部增强扫描检查确认胆囊炎,胆囊癌,胆囊无异常各40例,通过256层螺旋CT血管成像技术观察胆囊动脉,分析评估结果。结果胆囊炎组、胆囊... 详细信息

用256层螺旋CT血管成像技术观察胆囊癌、胆囊炎患者胆囊动脉。方法选择2022年1月至2022年10月我院腹部增强扫描检查确认胆囊炎,胆囊癌,胆囊无异常各40例,通过256层螺旋CT血管成像技术观察胆囊动脉,分析评估结果。结果胆囊炎组、胆囊癌组、胆囊无异常组胆囊动脉显示率无明显差异(P>0.05);胆囊炎组、胆囊癌组胆囊动脉显示评分相近(P>0.05),胆囊炎组,胆囊癌组胆囊动脉显示评分比胆囊无异常组高(P0.05);三组胆囊动脉直径,横截面积测量结果对比,胆囊癌组>胆囊炎组>胆囊无异常组(P<0.05)。结论 256层螺旋CT血管成像技术在胆囊动脉评估中准确率高,在腹腔镜胆囊切除术前可以通过该技术评估患者胆囊动脉。

关键词： 256层螺旋CT 血管成像技术腹腔镜胆囊切除术胆囊动脉

联合应用DWI及PWI对脑内肿瘤及瘤周水肿的比较研究

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临床放射学杂志 2017年第7期36卷 928-933页

作者：刘晓玉肖道雄何艳枚王姝云彭吉东江西省赣州市人民医院影像科 341000

目的应用DWI及PWI的各项相关参数对低级别胶质瘤、高级别胶质瘤、淋巴瘤及转移瘤的生长趋势,血管生成及瘤周侵犯的情况进行评价。方法应用DWI及PWI检查脑内占位病例54例。分别以肿瘤瘤体实质、肿瘤外水肿内1 cm、肿瘤外水肿内2 cm、水肿... 详细信息

目的应用DWI及PWI的各项相关参数对低级别胶质瘤、高级别胶质瘤、淋巴瘤及转移瘤的生长趋势,血管生成及瘤周侵犯的情况进行评价。方法应用DWI及PWI检查脑内占位病例54例。分别以肿瘤瘤体实质、肿瘤外水肿内1 cm、肿瘤外水肿内2 cm、水肿外1 cm、水肿区域以外1 cm的白质区域为感兴趣区,以正常脑白质为对照感兴趣区,分别测量各个感兴趣区的ADC、rCBV、rCBF值。将感兴趣区与对照感兴趣区的量化指标进行比值计算,得到相对ADC、相对r CBV、相对rCBF值。并对各项参数进行统计分析。结果不同肿瘤实质ADC值之间(P=0.003)以及瘤周水肿内2 cm处ADC值之间差异具有统计学意义(P=0.012)。HGG瘤体、水肿内1 cm处、水肿内2 cm处的rCBV、rrCBV、rCBF及rrCBF值均高于其他类型肿瘤,差异均存在统计学意义(P<0.05)。结论通过DWI及PWI对低级别胶质瘤、高级别胶质瘤、淋巴瘤及转移瘤这四种类型的瘤体、瘤周水肿区、水肿外区域的ADC、rCBV、rCBF值及其相对值的分析,能提高肿瘤的诊断准确率并指导临床手术切除范围。

关键词：低级别胶质瘤高级别胶质瘤淋巴瘤转移瘤

2例利多卡因硬膜外持续镇痛导致排尿困难的病例分析

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中国临床药理学杂志 2018年第7期34卷 881-882页

作者：王姝云张月丽邓昂山西医科大学第二医院药学部太原030001 中日友好医院药学部北京100020 郑州大学附属郑州中心医院药学部郑州450000

目的探讨临床药师参与利用利多卡因硬膜外持续镇痛治疗神经病理性疼痛的作用。方法临床药师参与2例利用利多卡因硬膜外持续镇痛治疗神经病理性疼痛的治疗过程,优化用药方案,减少药物不良反应的发生。针对出现类似不良反应患者的药物治... 详细信息

目的探讨临床药师参与利用利多卡因硬膜外持续镇痛治疗神经病理性疼痛的作用。方法临床药师参与2例利用利多卡因硬膜外持续镇痛治疗神经病理性疼痛的治疗过程,优化用药方案,减少药物不良反应的发生。针对出现类似不良反应患者的药物治疗问题,临床药师通过文献检索获取相关药学信息,结合患者个体情况,为临床治疗提供循证药学支持,同时优化个体给药方案。结果与结论临床药师参与临床工作,从药学的角度提供治疗建议,提高药物治疗疗效,减少药物不良反应的发生。

关键词：利多卡因排尿困难

2005—2012年某院铜绿假单胞菌耐药率与抗菌药使用的相关性分析

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中国抗生素杂志 2014年第7期39卷 539-543页

作者：韩婷王海霞李晓霞王姝云段金菊山西医科大学药学院太原030001 山西医科大学第二医院太原030001

目的分析2005—2012年某院抗菌药的使用与铜绿假单胞菌的耐药性水平变化之间的相关关系。方法调取本院2005—2012年的抗菌药物使用量并计算用药频度(DDDs),并用统计软件SPSS16.0对抗菌药物使用量与耐药率进行相关性分析。结果趋势图显... 详细信息

目的分析2005—2012年某院抗菌药的使用与铜绿假单胞菌的耐药性水平变化之间的相关关系。方法调取本院2005—2012年的抗菌药物使用量并计算用药频度(DDDs),并用统计软件SPSS16.0对抗菌药物使用量与耐药率进行相关性分析。结果趋势图显示美罗培南、头孢噻肟、头孢他啶、亚胺培南的耐药率与DDDS之间趋势相关性较好(P>0.05),Spearman相关性统计结果不具有统计学意义。铜绿假单胞菌耐药率与不同类抗菌药物累计DDDs之间相关性分析,偏相关性统计结果显示:头孢类抗生素的使用与对亚胺培南的耐药率之间存在正相关关系,相关性具有统计学意义(P=0.002);复合制剂的使用与对阿米卡星、美罗培南的耐药率存在正相关,相关性具有统计学意义(P=0.03,P=0.04);喹诺酮类抗生素的使用与对美罗培南的耐药率之间存在正相关性,相关性具有统计学意义(P=0.03);碳青霉烯类抗生素的使用与对美罗培南和亚胺培南的耐药率存在正相关关系,相关性具有统计学意义(P=0.02,P=0.01)。结论抗生素的使用频度在一定程度上会影响细菌的耐药性。

关键词：铜绿假单胞菌用药频度耐药率

抗菌药物药代动力学-药效学模型用于优化五水头孢唑林钠的给药方案

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中国临床药理学杂志 2016年第8期32卷 730-732页

作者：崔晓红李德强王姝云初阳河北医科大学第二医院药学部石家庄050000 山西医科大学第二医院药学部太原030001 中国医科大学附属第一医院药学部沈阳110001

目的探讨五水头孢唑林钠在临床治疗感染疾病中给药剂量的合理性。方法根据静脉滴注五水头孢唑林钠每次0.25-3.0 g,qd、bid、tid、qid等多种给药方案治疗常见致病菌感染的体外抗菌活性实验与Ⅰ期临床药代动力学研究数据进行Monte Carlo... 详细信息

目的探讨五水头孢唑林钠在临床治疗感染疾病中给药剂量的合理性。方法根据静脉滴注五水头孢唑林钠每次0.25-3.0 g,qd、bid、tid、qid等多种给药方案治疗常见致病菌感染的体外抗菌活性实验与Ⅰ期临床药代动力学研究数据进行Monte Carlo模拟（10 000例）,获得的累积反应分数（CFR）,并进行给药方案的比较（以CFR≥90%的给药方案为最佳给药方案）。结果以CFR≥90%的给药方案为最佳给药方案。按bid、tid和qid等不同频率给药,治疗常见致病菌感染所需的每次最低给药剂量分别为1.0 g、0.75 g和0.5 g。结论从注射用五水头孢唑林钠安全性、临床疗效、依从性等方面考虑,针对轻、中度感染患者,给药方案可用1.5-2.0 g,bid,重度感染可增至每次3.0 g或遵医嘱。

关键词：五水头孢唑林钠蒙特卡洛模拟给药方案

不同浓度葡萄糖对多药耐药鲍氏不动杆菌生物膜形成能力的影响

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中华医院感染学杂志 2016年第3期26卷 498-501页

作者：杨虹药飞李晓霞王姝云段金菊山西医科大学药学院药学系山西太原030001 晋煤集团总医院药学部山西晋城048000 山西医科大学第二医院药学部山西太原030001

目的探索多药耐药鲍氏不动杆菌在不同浓度葡萄糖环境中其生物膜形成能力的变化,为糖尿病患者预防与治疗感染提供理论依据。方法用测定MIC方法筛选2012年4月-2013年10月临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌,用含有不同葡萄糖浓度的胰蛋白胨... 详细信息

目的探索多药耐药鲍氏不动杆菌在不同浓度葡萄糖环境中其生物膜形成能力的变化,为糖尿病患者预防与治疗感染提供理论依据。方法用测定MIC方法筛选2012年4月-2013年10月临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌,用含有不同葡萄糖浓度的胰蛋白胨大豆肉汤培养,分别测定其570nm处吸光度值,采用激光共聚焦显微镜（CLSM）观察和测定生物膜在不同浓度、不同时间形成的形态及厚度,不同浓度下膜生成能力采用Kruskal-Wallis H检验及t检验法进行统计。结果 30株多药耐药鲍氏不动杆菌对头孢他啶、哌拉西林、阿米卡星的耐药率均为96.7%;葡萄糖浓度为11.1~30.0mmol/L时膜形成能力与无糖培养比较吸光度值差异有统计学意义（P〈0.05）,但≥11.1mmol/L的各浓度吸光度值比较差异无统计学意义;CLSM观察显示,多药耐药鲍氏不动杆菌葡萄糖浓度在11.1~30.0mmol/L时菌株荧光强度均在大约24h基本达到最强,48h有一个强度维持,比无糖环境提前24h;生物膜厚度数据统计显示,加糖培养12~36h膜厚度达到最大,加糖培养膜厚度最大值与无糖培养膜厚度最大值相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论多药耐药鲍氏不动杆菌在环境中葡萄糖浓度≥11.1mmol/L时,形成生物膜的能力明显增强,形成生物膜的厚度增加,形成生物膜的周期明显缩短。

关键词：多药耐药鲍氏不动杆菌生物膜葡萄糖

格列齐特致药物性中性粒细胞减少1例并文献复习

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世界最新医学信息文摘 2018年第53期 92-92页

作者：刘洁邓昂王姝云乌海市人民医院卫生部中日医院药学部山西医科大学第二医院药学部

目的探讨临床药师对2型糖尿病患者的药学监护和处理。方法临床药师参与1例服用格列齐特降糖治疗的2型糖尿病患者的治疗实践,提出格列齐特有导致中性粒细胞减少的可能,并查阅文献协助临床医师制定出针对该患者的治疗方案,为患者合理用药... 详细信息

目的探讨临床药师对2型糖尿病患者的药学监护和处理。方法临床药师参与1例服用格列齐特降糖治疗的2型糖尿病患者的治疗实践,提出格列齐特有导致中性粒细胞减少的可能,并查阅文献协助临床医师制定出针对该患者的治疗方案,为患者合理用药提供建议。结果将格列齐特停药,换为格列美脲后,患者的中性粒细胞恢复。结论临床药师参与患者降糖治疗的过程中,积极开展药学监护,提高了患者用药的安全性和有效性。

关键词：格列齐特磺脲类药物药品不良反应中性粒细胞减少

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多药耐药鲍氏不动杆菌生物膜形成能力的研究

中华医院感染学杂志 2014年第8期24卷 1843-1845页

作者：王姝云药飞张瑞琴赵生芳段金菊山西医科大学药学院山西太原030001 山西医科大学第二医院药学部山西太原030001

目的研究几种药物对临床分离的鲍氏不动杆菌最低抑菌浓度(MIC)及其生物被膜形成能力,为临床资料提供参考依据。方法 2012年4月-2012年6月收集医院临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌30株,用琼脂倍比稀释法定量分析多药耐药鲍氏不动杆菌生... 详细信息

目的研究几种药物对临床分离的鲍氏不动杆菌最低抑菌浓度(MIC)及其生物被膜形成能力,为临床资料提供参考依据。方法 2012年4月-2012年6月收集医院临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌30株,用琼脂倍比稀释法定量分析多药耐药鲍氏不动杆菌生物被膜形成能力。结果 30株鲍氏不动杆菌临床分离株对头孢他啶、哌拉西林、阿米卡星的耐药株数为29株,耐药率均为96.6%,对头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南的耐药株数为26株,耐药率均为86.7%,对哌拉西林/舒巴坦的耐药株数为28株,耐药率为93.9%;对左氧氟沙星的耐药株数为19株,耐药率为63.6%;30株鲍氏不动杆菌临床分离株均具有生物被膜形成能力且形成试验均为强阳性。结论该30株鲍氏不动杆菌均为多药耐药菌,且均具有较强的生物膜形成能力。

关键词：鲍氏不动杆菌最低抑菌浓度生物膜耐药性