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富血小板血浆预防骨感染的实验研究

中国修复重建外科杂志 2010年第7期24卷 864-870页

作者：贾伟涛张长青王坚镪陈佳蒋燕群上海交通大学附属第六人民医院骨科上海200233 上海交通大学附属第六人民医院检验科上海200233

目的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)含有高浓度血小板和白细胞,这些细胞成分在机体先天性免疫防御反应中发挥着重要作用,通过评估PRP在体内外的抑菌活性,探讨其作用机制,为临床骨感染的预防和治疗提供实验依据。方法取15例健... 详细信息

目的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)含有高浓度血小板和白细胞,这些细胞成分在机体先天性免疫防御反应中发挥着重要作用,通过评估PRP在体内外的抑菌活性,探讨其作用机制,为临床骨感染的预防和治疗提供实验依据。方法取15例健康成年志愿者外周血35mL,采用两次离心法制备PRP,检测全血、PRP以及离心后的上清液,即贫血小板血浆(platelet-poor plasma,PPP)中血小板和白细胞含量。PRP经凝血酶激活后获得血小板-白细胞凝胶(platelet-leukocyte gel,PLG),将其与终浓度为1×106cfu/mL的金黄色葡萄球菌孵育,分别于2、4、6、8、12、24h取样行菌落计数,并与PRP、PPP及PBS比较。取36只成年雌性新西兰大白兔,体重(2.85±0.11)kg,随机分为4组,PLG组(n=10)、抗生素组(n=10)、感染组(n=10)于兔右后肢胫骨髓腔内注入0.1mL金黄色葡萄球菌悬液(1×106cfu/mL)制备骨髓炎模型,PBS组(n=6)单纯注入PBS代替细菌悬液作为对照。术后PLG组即刻注入1mL PLG;抗生素组于注入细菌悬液前1h静脉注射头孢唑啉至术后72h(30mg/kg),每8小时1次;感染组及PBS组不予处理。术后观察动物一般情况,于28d观察期内通过X线片、组织学和微生物学对骨感染情况进行评估。结果人PRP中血小板及白细胞含量分别达全血的6.2倍和5.5倍,差异有统计学意义(P0.05)。术后28d PLG组、抗生素组、感染组和PBS组的X线骨髓炎评分分别为(2.78±1.39)、(1.55±1.48)、(4.17±1.25)和0分,感染组显著高于其他各组(P0.05);组织学骨髓炎评分分别为(5.89±3.92)、(3.00±2.31)、(10.33±4.03)和0分,感染组高于其他各组(P<0.05),抗生素组低于PLG组(P<0.05)。细菌培养显示PLG组(44.4%)和抗生素组(20.0%)的感染发生率显著低于感染组(88.9%),细菌定量分析显示PLG组和抗生素组显著低于感染组,以上两指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PRP被激活后形成PLG,可在体外抑制金黄色葡萄球菌的繁殖,并可有效预防兔体内骨感染的发生。

关键词：富血小板血浆血小板-白细胞凝胶生物抗菌剂骨髓炎兔

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益生菌对大鼠肠道菌群紊乱和细菌易位的影响

上海交通大学学报（医学版） 2006年第2期26卷 163-165页

作者：王坚镪汤瑾蒋燕群上海交通大学第六人民医院检验科上海200233

目的探讨经肠道补充益生菌对腹腔感染大鼠肠道微生态的改变、细菌易位及肠屏障功能的影响。方法大鼠经盲肠结扎穿孔法及颈静脉空肠置管制成腹腔感染模型后,单独给予肠外营养或加用益生菌,持续5 d。第6天处死,取盲肠内粪便做厌氧菌培养,... 详细信息

目的探讨经肠道补充益生菌对腹腔感染大鼠肠道微生态的改变、细菌易位及肠屏障功能的影响。方法大鼠经盲肠结扎穿孔法及颈静脉空肠置管制成腹腔感染模型后,单独给予肠外营养或加用益生菌,持续5 d。第6天处死,取盲肠内粪便做厌氧菌培养,取腔静脉血及匀浆后的肺、肝、肠系膜淋巴组织作细菌培养,检测细菌易位率。结果加用益生菌的大鼠,肠道内的正常菌群除肠杆菌无明显差异外,乳酸杆菌和双歧杆菌数量都较单纯给予肠外营养的大鼠多;肠道内的潜在致病菌产气荚膜梭菌较单纯给予肠外营养的大鼠少(P<0.05)。单纯给予肠外营养的大鼠血、肺、肝和肠系膜淋巴组织的细菌易位率也明显高于加用益生菌的大鼠(P<0.05)。结论益生菌能纠正腹腔感染大鼠的肠道菌群紊乱,减少细菌易位,从而保护肠黏膜。

关键词：益生菌细菌易位肠道菌群大鼠肠道菌群紊乱

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优菌多颗粒对人体肠道益生菌影响的初步研究

检验医学 2005年第6期20卷 581-583页

作者：蒋燕群张和春王坚镪汤瑾上海交通大学附属第六人民医院检验科上海200233 上海交大昂立生物研究院上海200030

目的探讨服用微生态制剂对人体肠道益生菌的影响.方法通过优菌多颗粒人群试食,对服用前后胃肠道症状、代谢、排便情况和食欲表现及菌群变化等指标进行统计分析,并结合肠道菌群DNA指纹图谱分析,评价优菌多颗粒对人体肠道菌群的调节功能.... 详细信息

目的探讨服用微生态制剂对人体肠道益生菌的影响.方法通过优菌多颗粒人群试食,对服用前后胃肠道症状、代谢、排便情况和食欲表现及菌群变化等指标进行统计分析,并结合肠道菌群DNA指纹图谱分析,评价优菌多颗粒对人体肠道菌群的调节功能.结果试食人群食欲表现和胃肠道症状在服用优菌多颗粒4～8 d后得到显著改善,12 d后极显著改善;在服用优菌多颗粒20 d后,人体肠道菌群中双歧杆菌和乳酸杆菌与服用前相比有极显著提高,而肠道致病菌产气荚膜梭菌却极显著下降;在服用20 d优菌多颗粒后,人体肠道菌群比服用前更具多样性.结论优菌多颗粒具有调节人体肠道菌群的作用,使人体肠道细菌种群更具多样性.

关键词：益生菌优菌多颗粒 DNA指纹图谱分析

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葡萄球菌对克林霉素诱导耐药的检测和分析

中国感染与化疗杂志 2008年第1期8卷 50-52页

作者：汤瑾王坚镪蒋燕群上海交通大学附属第六人民医院检验科 200233

目的调查临床分离的葡萄球菌对克林霉素诱导耐药状况和基因型特征。方法收集我院2004年分离到的70株红霉素耐药、克林霉素敏感和中介葡萄球菌临床分离株,双纸片法做克林霉素诱导耐药(D试验),PCR检测细菌的ermA、ermB、ermC和msrA基因。... 详细信息

目的调查临床分离的葡萄球菌对克林霉素诱导耐药状况和基因型特征。方法收集我院2004年分离到的70株红霉素耐药、克林霉素敏感和中介葡萄球菌临床分离株,双纸片法做克林霉素诱导耐药(D试验),PCR检测细菌的ermA、ermB、ermC和msrA基因。结果70株葡萄球菌中克林霉素诱导耐药32株(45.7%)。基因型分别是ermA1株,ermC33株,msrA18株,ermC+msrA5株,全部阴性的13株。结论我院葡萄球菌克林霉素诱导耐药率较高,且存在多种基因型,应提高对诱导耐药葡萄球菌的监测和控制。

关键词：克林霉素葡萄球菌 D试验 erm基因 msrA基因

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71株葡萄球菌克林霉素诱导耐药分析

中国感染与化疗杂志 2006年第2期6卷 110-112页

作者：汤瑾王坚镪蒋燕群上海交通大学附属第六人民医院检验科 200233

目的了解我院2004年葡萄球菌临床分离株的克林霉素诱导耐药分布情况以及纸片距离对试验结果的影响。方法收集我院2004年分离到的红霉素耐药、克林霉素敏感和中介的葡萄球菌临床株71株，其中金葡菌16株，凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）55株... 详细信息

目的了解我院2004年葡萄球菌临床分离株的克林霉素诱导耐药分布情况以及纸片距离对试验结果的影响。方法收集我院2004年分离到的红霉素耐药、克林霉素敏感和中介的葡萄球菌临床株71株，其中金葡菌16株，凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）55株。双纸片法检测克林霉素诱导耐药（D试验），对D试验阳性菌株再次用纸片边缘距离分别为10～15mm，16～20mm，21～25mm，26-28mm4组测定D试验结果，了解纸片距离对D试验结果的影响。结果克林霉素的诱导耐药比例为45．1％，其中金葡菌组68．8％，CNS组38．2％，P〈0。05，差异具有非常显著性，纸片距离大于26mm会对D试验结果造成影响。结论实验室必须加强对葡萄球菌诱导耐药检测。

关键词：克林霉素葡萄球菌诱导耐药 D试验

双套血培养对提高血流感染检出率和鉴别污染的评价

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中国感染与化疗杂志 2012年第6期12卷 440-442页

作者：王坚镪汤瑾庄亦晖陈瑜高锋上海交通大学附属第六人民医院检验科上海200233

目的评价双套血培养在提高血流感染检出率及鉴别污染的临床价值。方法统计2010—2011年上海交通大学附属第六人民医院双套血培养的双次阳性率和单次阳性率,评价双次阳性和单次阳性在鉴别血培养污染中的差异。结果我院2010—2011年共送... 详细信息

目的评价双套血培养在提高血流感染检出率及鉴别污染的临床价值。方法统计2010—2011年上海交通大学附属第六人民医院双套血培养的双次阳性率和单次阳性率,评价双次阳性和单次阳性在鉴别血培养污染中的差异。结果我院2010—2011年共送检双套血培养3 151例,占全年送检病例数的71.2%。共检出483例阳性,阳性率15.33%。其中双次阳性192例,阳性率6.09%;单次阳性291例,阳性率9.23%。结论双套血培养能够提高血流感染检出率并能鉴别分离菌的定植或污染,建议临床在诊断血流感染时送检双套血培养。

关键词：双套血培养血流感染检出率

一例碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌耐药机制研究

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检验医学 2009年第5期24卷 343-346页

作者：汤瑾蒋燕群李卿王坚镪上海交通大学附属第六人民医院检验科上海200233

目的研究1株碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500的耐药机制。方法采用浓度梯度法(E-test)测定细菌的抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),采用接合实验、聚合酶链反应(PCR)、质粒抽提、探针杂交印迹试验(Southern blot)、等电聚焦电泳及... 详细信息

目的研究1株碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500的耐药机制。方法采用浓度梯度法(E-test)测定细菌的抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),采用接合实验、聚合酶链反应(PCR)、质粒抽提、探针杂交印迹试验(Southern blot)、等电聚焦电泳及耐药基因克隆测序分析细菌的耐药机制。结果接合实验、质粒电泳和Southern blot结果显示耐药基因位于一个50 kb的可转移质粒上;等电聚焦电泳显示3条β-内酰胺酶条带,等电点(PI)分别为9.0、6.7(KPC-2)、5.4。PCR产物克隆分析比对为blaKPC-2型。结论碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500携带由质粒介导的KPC-2酶。

关键词： KPC-2基因碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌

益生菌对炎症性肠病小鼠肠道菌群紊乱及细菌移位的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第2期30卷 186-190页

作者：王坚镪丁在咸张旻陈红旗秦环龙蒋燕群上海交通大学第六人民医院检验科上海200233 上海交通大学第六人民医院动物实验中心上海200233 上海交大昂立医药研究院上海200233 上海交通大学第六人民医院普外科上海200233

目的探讨植物乳杆菌(LP)对炎症性肠病(IBD)小鼠肠道菌群及细菌移位的影响。方法采用白介素10基因敲除(IL-10^(-/-))小鼠作为IBD动物模型,将8周龄雌性小鼠随机分成空白对照组、IL-10^(-/-)组和IL-10^(-/-)+LP组三组。IL-10^(-/-)+LP组每... 详细信息

目的探讨植物乳杆菌(LP)对炎症性肠病(IBD)小鼠肠道菌群及细菌移位的影响。方法采用白介素10基因敲除(IL-10^(-/-))小鼠作为IBD动物模型,将8周龄雌性小鼠随机分成空白对照组、IL-10^(-/-)组和IL-10^(-/-)+LP组三组。IL-10^(-/-)+LP组每日灌胃0.5 mL LP菌液(1.0×10~9CFU/mL),其余两组灌胃Ringer缓冲液0.5 mL,持续4周。以小鼠粪便中的双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌和产气荚膜梭菌数量及肠系膜淋巴结、脾脏细菌移位为检测指标。结果IL-10^(-/-)小鼠肠内双歧杆菌、乳酸杆菌含量明显下降,肠球菌、产气荚膜梭菌含量升高,且肠道细菌移位明显增加;而连续灌胃LP菌液4周后,益生菌发挥了对肠道的调节作用,纠正了肠道菌群失衡,并降低了肠道细菌移位。结论LP能纠正炎症性肠病小鼠肠道菌群紊乱,减少细菌移位,从而增强了肠道屏障功能。

关键词：益生菌植物乳杆菌CGMCC 1258 菌群紊乱细菌移位

大肠埃希菌、克雷伯菌中质粒AmpC酶的流行分布

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检验医学 2006年第5期21卷 517-520页

作者：李轶蒋燕群汤瑾王坚镪李桂兰上海交通大学附属第六人民医院检验科上海200233

目的了解我院大肠埃希菌、克雷伯菌中质粒AmpC酶的流行分布及其基因型特征。方法对1 935株大肠埃希菌、克雷伯菌进行了AmpC酶纸片扩散法筛选试验(头孢西丁≤18),对筛选阳性株分别进行三维试验、多重聚合酶链反应(PCR)、等电聚焦电泳(IEF... 详细信息

目的了解我院大肠埃希菌、克雷伯菌中质粒AmpC酶的流行分布及其基因型特征。方法对1 935株大肠埃希菌、克雷伯菌进行了AmpC酶纸片扩散法筛选试验(头孢西丁≤18),对筛选阳性株分别进行三维试验、多重聚合酶链反应(PCR)、等电聚焦电泳(IEF)、接合试验、PCR及测序,以确定表型及基因型。结果1 935株细菌中,纸片筛选、三维试验、多重PCR的阳性数分别为327、85、54株;13株产C IT群质粒AmpC酶细菌有4株接合试验阳性;IEF证实这4株细菌均产生等电点为9.0、可以被氯唑西林抑制而不能被克拉维酸抑制的β-内酰胺酶。结论我院大肠埃希菌、克雷伯菌中质粒AmpC酶的阳性率为2.79%(54/1 935)。基因型为DHA群和C IT群2类。

关键词：质粒 AmpC酶 CIT群 DHA群