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水中病毒膜吸附洗脱和免疫磁珠吸附法研究

水中病毒膜吸附洗脱和免疫磁珠吸附法研究

作者：王四全华中科技大学

学位级别：硕士

目的:(1)优化滤膜吸附-洗脱法富集水体病毒的反应条件,以便有效富集水体病毒(2)制备脊髓灰质炎病毒多克隆抗体,构建免疫磁珠,探讨免疫磁珠捕获法富集水体病毒的可行性。方法:(1)采用膜吸附洗脱法初次浓缩水体病毒,调节水样pH值和Al3+浓... 详细信息

目的:(1)优化滤膜吸附-洗脱法富集水体病毒的反应条件,以便有效富集水体病毒(2)制备脊髓灰质炎病毒多克隆抗体,构建免疫磁珠,探讨免疫磁珠捕获法富集水体病毒的可行性。方法:(1)采用膜吸附洗脱法初次浓缩水体病毒,调节水样pH值和Al3+浓度,比较不同pH值、有无金属阳离子情况下,水体中病毒的回收率,根据回收率高低选择最佳条件进行病毒富集。(2)采用聚乙二醇(PEG)6000沉淀法二次浓缩水体病毒,配制不同浓度的PEG6000溶液,比较各浓度下病毒回收率的高低,选择合适浓度进行病毒二次浓缩。(3)将不同滤膜和不同洗脱液组合进行序贯试验,比较各组合回收率,选择最佳组合进行病毒富集。(4)用纯化的脊髓灰质炎病毒抗原免疫日本大白兔,皮下多点注射,制备脊髓灰质炎病毒多克隆抗体,间接ELISA法测定抗体效价,核酸蛋白仪测定抗体浓度。将制备的脊髓灰质炎病毒多克隆抗体与微磁珠偶联构建免疫磁珠,富集水体病毒,实时定量PCR法检测病毒回收量,计算病毒回收率,评价免疫磁珠捕获法对病毒的吸附效果。结果:(1)pH=4.0时,病毒回收率为70.81%,较其他pH值高;加AlCl3的病毒回收率76.73%较不加AlCl3的55.51%高;病毒回收率随PEG6000浓度增加而增大,PEG6000浓度在120g/l时,病毒回收率可达85.90%,继续增加PEG6000浓度,病毒回收率变化不明显;将混合纤维素酯滤膜和H2SO4/NaOH洗脱液组合,病毒回收率为75.17%,病毒富集效果较其他组合好。(2)纯化后抗体效价为1:8000,抗体浓度12.87mg/ml,用纯化的抗体包被空白磁珠,空白磁珠对脊髓灰质炎病毒多克隆抗体的饱和吸附量为143.5μg/mg,将制备的免疫磁珠加入到不同浓度脊髓灰质炎病毒液中,在100倍稀释的病毒液中可回收63.67%。结论:(1)水体中加入多价金属阳离子可增加病毒回收率;不同pH条件下,病毒回收率不同,pH=4.0时,病毒回收率最高;混合纤维素酯滤膜吸附,H2SO4/NaOH洗脱液洗脱,病毒富集效果好;增加PEG6000浓度可提高病毒回收率,当PEG6000浓度在120g/l时,病毒回收率可达85%以上,效果较好。(2)成功制备脊髓灰质炎病毒多克隆抗体,效价较高;抗体包被磁珠效果并不理想,尚不清楚是由磁珠氨基化修饰或抗体偶联哪一过程引起。最后将免疫磁珠应用到水体病毒富集中,虽然效果不及膜吸附洗脱法,但回收率尚可,本过程未考虑磁珠浓度、病毒浓度、水体pH值、水中有机干扰物等对病毒回收率的影响,有待进一步研究。

关键词：脊髓灰质炎病毒膜吸附-洗脱免疫磁珠病毒回收率实时定量PCR TCID50

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试论如何提高政工师的自身修养

环渤海经济瞭望 2014年第6期28卷 67-69页

作者：王四全天津市河东区中山门影剧院

随着我国社会主义现代化建设进入一个新的发展时期,科学发展观、可持续发展、构建社会主义和谐社会、党的群众路线教育实践活动等等已成为十八大后新时期企事业单位政治思想工作的主旋律.如今人们的生产和生活关系、思维方式、精神和物... 详细信息

随着我国社会主义现代化建设进入一个新的发展时期,科学发展观、可持续发展、构建社会主义和谐社会、党的群众路线教育实践活动等等已成为十八大后新时期企事业单位政治思想工作的主旋律.如今人们的生产和生活关系、思维方式、精神和物质消费形式日趋多样化、多元化,企事业单位思想政治工作的环境、条件、内容、形式等等较过去也都发生了较大的变化.对单位而言,思想政治工作尤为重要,是具体改造和转化人的思想观念的工作,所以必然需要政工队伍具有更高的综合素质.而坚持“以人为本”,更要不断推进和加强企事业单位思想政治工作,根据思想政治工作内在规律,促进政工人员素质全面提升,加强新时期政工队伍素质与建设,拓展企事业单位政工人员在生产经营和改革发展过程中的具体工作.新时期的政工队伍,不仅要面对国内外迅速多变的经济形势,同时还要面对国际日趋复杂多变的政治环境对企事业单位思想政治工作的影响,因此要建立一支高素质的企事业单位政工队伍,就必然要求加强多方位的自身素质与建设.

关键词：政工队伍素质自身修养构建社会主义和谐社会思想政治工作社会主义现代化建设企事业单位政治思想工作后新时期

2017-2019年湖北省免疫规划疫苗预防接种异常反应基础保险补偿试点效果评估

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中国疫苗和免疫 2021年第4期27卷 468-473页

作者：骆金俊王四全王雷吕凸湖北省疾病预防控制中心湖北武汉430079

目的评估湖北省免疫规划(EPI)疫苗预防接种异常反应基础保险补偿试点效果。方法收集2017-2019年获得预防接种异常反应基础保险补偿的病例信息,描述性分析补偿金额、补偿支付时间、补偿服务满意率等指标。结果2017-2019年湖北省预防接种... 详细信息

目的评估湖北省免疫规划(EPI)疫苗预防接种异常反应基础保险补偿试点效果。方法收集2017-2019年获得预防接种异常反应基础保险补偿的病例信息,描述性分析补偿金额、补偿支付时间、补偿服务满意率等指标。结果2017-2019年湖北省预防接种异常反应基础保险共补偿病例216例,总补偿费为616.50万元,平均每例补偿2.85万元。异常反应(195例)、不排除异常反应(8例)、偶合症(4例)、未分类病例(9例)的平均每例补偿费分别为2.80万元、5.84万元、3.25万元、1.30万元。卡介苗淋巴结核的补偿例数(80例)和总金额(216.10万元)最多。病例的平均补偿支付时间为3.94d。病例或其监护人对保险补偿服务的满意率为89.39%(320/358)。结论预防接种异常反应基础保险补偿试点使补偿范围、标准、效率和满意度明显提高;需持续推进湖北省预防接种异常反应保险补偿工作。

关键词：免疫规划疫苗预防接种异常反应保险补偿试点

湖北省2-35月龄儿童国产口服轮状病毒减毒活疫苗与部分免疫规划疫苗联合接种不良反应的真实世界研究

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中国疫苗和免疫 2023年第5期29卷 569-577页

作者：杨帆孙芯蕊王四全王雷王齐魏晟华中科技大学同济医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学系湖北武汉430030 湖北省疾病预防控制中心湖北武汉430079

目的评价国产口服轮状病毒减毒活疫苗(ORV)与部分免疫规划疫苗联合接种的不良反应。方法通过湖北省免疫规划信息管理系统和中国疾病预防控制信息系统收集2018-2021年2-35月龄儿童ORV与A群脑膜炎球菌多糖疫苗(MPV-A)、无细胞百白破联合疫... 详细信息

目的评价国产口服轮状病毒减毒活疫苗(ORV)与部分免疫规划疫苗联合接种的不良反应。方法通过湖北省免疫规划信息管理系统和中国疾病预防控制信息系统收集2018-2021年2-35月龄儿童ORV与A群脑膜炎球菌多糖疫苗(MPV-A)、无细胞百白破联合疫苗(DTaP)和乙型脑炎减毒活疫苗(JE-L)联合接种和单独接种的接种剂次数和不良反应个案,分析报告发生率;采用泊松回归模型计算联合接种与单独接种报告发生率的调整后率比(Adjusted rates ratio,aRR)。结果ORV与MPV-A、DTaP、JE-L联合接种一般反应报告发生率(/10万剂)(95%CI)分别为75.71(48.84-117.34)、59.85(33.99-105.39)、27.58(15.28-49.81),异常反应分别为0.00、4.99(0.70-35.41)、2.51(0.35-17.80)。各联合接种与ORV单独接种相比的一般反应报告发生率aRR(95%CI)分别为5.52(3.45-8.83)、5.93(3.29-10.68)、2.06(1.11-3.80),与相应MPV-A、DTaP、JE-L单独接种相比分别为2.07(1.33-3.23)、0.92(0.52-1.63)、0.65(0.36-1.18)。各联合接种与ORV单独接种相比的异常反应报告发生率aRR(95%CI)分别为0.00、7.47(0.94-59.07)、2.91(0.37-23.00),与相应MPV-A、DTaP、JE-L单独接种相比分别为0.00、6.48(0.90-46.90)、1.36(0.19-9.80)。结论2-35月龄ORV与MPV-A、DTaP、JE-L联合接种的不良反应报告发生率在预期范围内;ORV与MPV-A联合接种的一般反应发生率可能高于单独接种。

关键词：口服轮状病毒减毒活疫苗联合接种不良反应真实世界研究

2020-2022年湖北省免疫规划疫苗预防接种异常反应保险补偿分析

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中国疫苗和免疫 2023年第2期29卷 186-190页

作者：骆金俊王四全吕凸唐险峰王雷黄娟湖北省疾病预防控制中心湖北武汉430079 武汉市疾病预防控制中心湖北武汉430040

目的分析湖北省免疫规划(Expanded Program on Immunization,EPI)疫苗预防接种异常反应保险补偿实施情况。方法收集2020-2022年湖北省EPI疫苗预防接种异常反应保险补偿病例和补偿金额信息,进行描述性分析。结果2020-2022年共补偿病例119... 详细信息

目的分析湖北省免疫规划(Expanded Program on Immunization,EPI)疫苗预防接种异常反应保险补偿实施情况。方法收集2020-2022年湖北省EPI疫苗预防接种异常反应保险补偿病例和补偿金额信息,进行描述性分析。结果2020-2022年共补偿病例119例,补偿总金额为650.01万元,平均每例补偿5.46万元(范围:0.03万元-163.08万元)。<1岁补偿例数和补偿金额均最多,分别为87例(73.11%)和410.97万元(63.23%)。涉及卡介苗接种的补偿例数和补偿金额最多,分别为50例(42.02%)和302.26万元(46.50%)。不明原因死亡病例的补偿总金额最高(439.84万元,67.67%)。在作出调查诊断或鉴定结论30d内支付补偿款的病例占82.35%,平均支付时间为23.11d。结论湖北省EPI疫苗预防接种异常反应保险补偿工作持续、稳步和良好推进,需进一步完善保险补偿机制。

关键词：免疫规划疫苗预防接种异常反应保险补偿

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水体中病毒富集方法研究进展

中国公共卫生 2009年第11期25卷 1287-1289页

作者：王四全吴俊曹玉广华中科技大学同济医学院公共卫生学院武汉430030

近年来,由于水污染的加剧,在多种水体中均发现了致病病毒。水传播病毒导致人体感染的病例时有报道,已经引起了人们的广泛关注[1-2]。对水体中的病毒进行快速有效的检测,是阻断病原体传播,减少疾病流行的首要条件。水体中的病毒含量较少... 详细信息

近年来,由于水污染的加剧,在多种水体中均发现了致病病毒。水传播病毒导致人体感染的病例时有报道,已经引起了人们的广泛关注[1-2]。对水体中的病毒进行快速有效的检测,是阻断病原体传播,减少疾病流行的首要条件。水体中的病毒含量较少,浓度较低,一般很难直接检测,常需要预先富集才能检测。病毒的富集方法多种多样,主要包括絮凝沉淀法、吸附洗脱法、免疫学方法、超滤法等。病毒富集方法的选择和待测水样体积的确定与水中病毒的密度、水样类型以及水中干扰物质的影响有关。合适的病毒富集方法不仅可以提高病毒的回收率,而且对提高后续病毒检测的灵敏度大有帮助。现对不同的水体病毒富集方法综述如下。1絮凝沉淀法1·1絮凝沉淀法种类通过调节pH值并向水中加入化学物质,形成絮凝沉淀,病毒通过与絮凝沉淀结合而浓缩。絮凝沉淀法按照絮凝剂组成、性质的不同,

关键词：水体病毒富集方法

2015—2017年湖北省脊髓灰质炎疫苗疑似预防接种异常反应监测分析

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中国公共卫生 2018年第5期34卷 736-740页

作者：王四全张迟王雷赵明江湖北省疾病预防控制中心

目的比较分析2015—2017年湖北省脊髓灰质炎(脊灰)疫苗接种后疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,评价脊灰疫苗安全性。方法采用描述流行病学方法对湖北省2015—2017年AEFI信息管理系统三价脊灰减毒活疫苗(Tt OPV)、Salk株脊灰灭活疫... 详细信息

目的比较分析2015—2017年湖北省脊髓灰质炎(脊灰)疫苗接种后疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,评价脊灰疫苗安全性。方法采用描述流行病学方法对湖北省2015—2017年AEFI信息管理系统三价脊灰减毒活疫苗(Tt OPV)、Salk株脊灰灭活疫苗(IPV-Salk)、Sabin株脊灰灭活疫苗(IPV-Sabin)、二价脊灰减毒活疫苗(b OPV)AEFI个案数据进行统计分析。结果湖北省2015—2017年t OPV、b OPV、IPV-Salk、IPV-Sabin接种后AEFI报告发生率4.78/10万剂~26.94/10万剂。4种脊灰疫苗接种后AEFI中,一般反应均占80%以上,异常反应占11.6%~20.56%,男童均多于女童,发生年龄均以全性良好,但仍需关注罕见异常反应病例的发生。

关键词：疑似预防接种异常反应监测脊髓灰质炎减毒活疫苗脊髓灰质炎灭活疫苗

2011年度慈溪市儿童手足口病病原学特征分析

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中国儿童保健杂志 2012年第12期20卷 1109-1112页

作者：岑迪吴建根罗莹王四全浙江大学公共卫生学院浙江杭州310058 慈溪市疾病预防控制中心浙江慈溪315300

【目的】研究2011年慈溪市儿童手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)病原学特征,了解本地区HFMD流行趋势。【方法】收集监测哨点医院上送的临床诊断为HFMD病例标本,应用实时荧光(Real-time)RT-PCR法检测标本中的人肠道病毒(HEV)、肠... 详细信息

【目的】研究2011年慈溪市儿童手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)病原学特征,了解本地区HFMD流行趋势。【方法】收集监测哨点医院上送的临床诊断为HFMD病例标本,应用实时荧光(Real-time)RT-PCR法检测标本中的人肠道病毒(HEV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CVA16)特异性核酸。【结果】289例标本中检出总肠道病毒阳性病例260例(89.97%),其中EV71占总阳性率的58.46%,CVA16占总阳性率的22.31%,肠道其他型19.23%;病例年龄集中在1～5岁;男女性阳性比例为1.49∶1;住院病例EV71阳性率为68.97%。【结论】EV71和CVA16为本地手足口病的主要病原体,EV71是引起重症和住院病例的优势毒株型,在局部区域内CVA16型占主导。

关键词：手足口病病原学肠道病毒71型柯萨奇A16型儿童

2016—2021年湖北省百日咳流行病学特征分析

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公共卫生与预防医学 2024年第2期35卷 87-90页

作者：向泉刘娟王雷王四全刘娜湖北省一线人员现场流行病学培训项目湖北武汉430079 湖北省荆州市疾病预防控制中心湖北荆州434000 湖北省通城县疾病预防控制中心湖北咸宁437000 湖北省疾病预防控制中心湖北武汉430079

目的了解湖北省2016—2021年百日咳的流行病学特征及现状。方法收集2016—2021年湖北省百日咳发病资料和病例免疫史资料并开展描述性流行病学分析。结果湖北省2016—2021年共报告百日咳病例1 236例,年均报告发病率为0.35/10万;其中≤... 详细信息

目的了解湖北省2016—2021年百日咳的流行病学特征及现状。方法收集2016—2021年湖北省百日咳发病资料和病例免疫史资料并开展描述性流行病学分析。结果湖北省2016—2021年共报告百日咳病例1 236例,年均报告发病率为0.35/10万;其中≤5岁年龄组百日咳年均报告发病率为6.22/10万,全程接种者占17.46%。结论 2016年以来湖北省百日咳发病呈上升态势,未到疫苗接种年龄和达到接种年龄后,未按照免疫程序及时接种的婴幼儿发病风险高。应提高适龄儿童接种百白破疫苗的及时性及接种率,降低婴幼儿的百日咳发病风险,此外对幼托儿童和学生群体中的百日咳流行情况予以更多关注。

关键词：疫苗百日咳发病率流行特征