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PTEN和p27Kip1共表达对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

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中华外科杂志 2004年第10期42卷 600-603页

作者：邱镇孙颖浩许传亮王元天顾正勤刘毅第二军医大学长海医院泌尿外科上海200433

目的　通过腺病毒介导转染前列腺癌PC 3细胞 ,探讨人 10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白类似物 (PTEN)和p2 7Kip1对肿瘤细胞增殖和凋亡等方面的影响及二者的协同作用。方法　构建携带人PTEN和p2 7Kip1基因的腺病毒载体 ,体外转染PC ... 详细信息

目的　通过腺病毒介导转染前列腺癌PC 3细胞 ,探讨人 10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白类似物 (PTEN)和p2 7Kip1对肿瘤细胞增殖和凋亡等方面的影响及二者的协同作用。方法　构建携带人PTEN和p2 7Kip1基因的腺病毒载体 ,体外转染PC 3细胞 ,通过RT PCR、Westernblot检测目的基因不同水平的表达。采用细胞生长试验、流式细胞仪检测PC 3转染前后细胞增殖、细胞周期和早期凋亡率的变化。结果　病毒滴度Ad PTEN为 1 8× 10 7pfu ml、Ad p2 7Kip1为 1 2× 10 9pfu ml,RT PCR检测有PTEN mRNA(46 2bp)和p2 7Kip1 mRNA (32 0bp) ,Westernblot检测有PTEN蛋白 (6 0KD)和P2 7蛋白 (2 7KD)特异表达 ,可明显抑制PC 3细胞的增殖 ,诱导细胞凋亡 ,联合基因治疗组与单基因组相比差异有显著意义。结论　成功构建携带人PTEN和p2 7Kip1的重组腺病毒载体 ,在前列腺癌细胞株PC 3得到了稳定、特异的高表达 ,联合基因疗法有望成为治疗前列腺癌的有效方法。

关键词： PTEN p27Kip1 表达前列腺癌 PC-3细胞增殖细胞凋亡

微血管密度、血管内皮生长因子和内皮抑素在肾癌诊断和预后判断中的价值

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上海医学 2004年第5期27卷 289-291页

作者：黄翼然王元天范晓东王晶钉上海第二医科大学附属仁济医院泌尿外科 200127

目的　研究与血管生成有关的调控因子血管内皮生长因子 (VEGF)和内皮抑素 (Endostatin)以及微血管密度 (MVD)在肾脏透明细胞癌的诊断及判断预后中的价值。方法　早期肾癌患者 16例 ,8名健康志愿者作为正常对照。组织切片行冯·威利布兰... 详细信息

目的　研究与血管生成有关的调控因子血管内皮生长因子 (VEGF)和内皮抑素 (Endostatin)以及微血管密度 (MVD)在肾脏透明细胞癌的诊断及判断预后中的价值。方法　早期肾癌患者 16例 ,8名健康志愿者作为正常对照。组织切片行冯·威利布兰德因子 (vWF)免疫组织化学染色 ,Fuhrman病理核分级 ,光镜下“热点”法计数肿瘤MVD。采用ELISA法检测血清VEGF ,竞争性酶免疫法检测血清Endostatin。结果　所有患者均为RobsonⅠ期肾透明细胞癌。MVD与病理分级及肿瘤体积不相关。肾癌患者与对照组间血清VEGF和Endostatin浓度的差异均有显著性。肾癌患者血清VEGF与Endostatin浓度成正相关 (r =0 .5 5 0 ,P =0 .0 2 7) ,而对照组中两者不相关。血清VEGF水平与肿瘤MVD及肿瘤体积密切相关。结论　早期肾透明细胞癌患者的血清Endostatin和VEGF表达水平升高 ,且与肿瘤大小密切相关 ,在辅助诊断和预后判断方面有潜在的价值。MVD对早期肾癌预后的判断价值不大。

关键词：微血管密度血管内皮生长因子内皮抑素肾癌诊断预后

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人类前列腺癌裸鼠原位移植模型的建立

中华泌尿外科杂志 2005年第3期26卷 208-209页

作者：王元天孙颖浩邱镇顾正勤许传亮第二军医大学附属长海医院泌尿外科上海200433

目的建立人类前列腺癌裸鼠原位肿瘤模型,为前列腺癌的研究提供有用的工具.方法将2×106PC-3细胞注射于10只BALB/c裸小鼠背部靠近腋窝处.8周后,取出背部肿瘤,剪成小块,种植于20只裸鼠前列腺背侧叶被膜下,缝合包埋固定.9～12周后处死裸鼠... 详细信息

目的建立人类前列腺癌裸鼠原位肿瘤模型,为前列腺癌的研究提供有用的工具.方法将2×106PC-3细胞注射于10只BALB/c裸小鼠背部靠近腋窝处.8周后,取出背部肿瘤,剪成小块,种植于20只裸鼠前列腺背侧叶被膜下,缝合包埋固定.9～12周后处死裸鼠,对前列腺和相关器官进行检测,确定肿瘤生长和转移情况.结果18只(90%)裸鼠前列腺生长出肿瘤,17只肿瘤直径＞1.5 cm.12只因梗阻出现膀胱扩张和肾积水,10只出现腹膜后主动脉旁淋巴结转移,4只出现肺转移,1只肝转移,无骨转移.病理切片可见大部分腺体被肿瘤细胞破坏,细胞胞核浓染,呈多形性,可见异常分裂相;转移淋巴结的皮质和髓质被肿瘤细胞占据.结论外科原位移植技术建立的前列腺癌模型,较好地保留了肿瘤细胞的生物学习性,生长快,局部侵犯范围较广,有较高的淋巴转移和肺转移率,是较理想的前列腺癌异种移植模型.

关键词：前列腺癌裸鼠肿瘤细胞肺转移原位移植模型背部腹膜后髓质人类腺体

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近代英国土地私有与公用需求矛盾发展略论

世界史 2016年第8期 168-174页

作者：王元天

土地所有制的不同，是我国与资本主义国家一项重要的经济制度差异。在我国，公共用途的土地都是由国有土地来承担的；在历史上的英国，则由公用地承担。中世纪的英国，公用地是个人享有土地公权的私人地产。到17世纪的中后期，随着私人... 详细信息

土地所有制的不同，是我国与资本主义国家一项重要的经济制度差异。在我国，公共用途的土地都是由国有土地来承担的；在历史上的英国，则由公用地承担。中世纪的英国，公用地是个人享有土地公权的私人地产。到17世纪的中后期，随着私人地产权的确立和私人地产面积的扩张，长期存在的公用地逐渐消失，土地“私有”与人们对土地的公用需求之间冲突不断加剧。针对这一问题，地方民众率先通过实践尝试，成功地利用土地信托，创设了新型的公用地，即信托制下以公众为受益人的私有地产。这是在私有制框架下，为公私冲突提供合法解决的先例。地方上的成功，推动了国家对公私冲突态度的转变，并且相关法律进行有针对性的改变，尤其是对土地私有制的完善起到了重要作用。通过信托制度来管理土地，对于我国今后的土地使用改革，具有积极的借鉴意义。

关键词：英国土地制度公用地土地公权土地私有制土地信托

来源：人大复印报刊资料评论

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黄河古渡大河之滨，传奇据点

博物 2015年第5期 64-69页

作者：王元天

“君不见，黄河之水天上来”——如今站在黄河岸边，仍能见识到它源远流长、奔腾不息的气势，可想而知，对古人而言黄河是天堑一般的存在，想要涉水渡河得靠船，而“渡口”就是渡船停靠的河港码头。在黄河两岸，古人曾修建了很多座渡口... 详细信息

“君不见，黄河之水天上来”——如今站在黄河岸边，仍能见识到它源远流长、奔腾不息的气势，可想而知，对古人而言黄河是天堑一般的存在，想要涉水渡河得靠船，而“渡口”就是渡船停靠的河港码头。在黄河两岸，古人曾修建了很多座渡口，不光方便往来出行，还带动了城镇商业发展，或者成为军事要冲。其中，最具传奇色彩的便是扎陵湖渡、碛口渡和风陵渡——只可惜，它们都已成为过去时。

关键词：黄河传奇大河河港码头商业发展扎陵湖古人渡船

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天地日月坛国礼祭祀地

博物 2014年第10期 66-71页

作者：王元天

天坛、地坛、日坛、月坛……这些名字是今天北京市民非常熟悉的公园和地名，但在几百年前，它们却都是“神秘的存在”——因为这些地方属于国家级的祭祀圣地，只有皇帝才能亲临拜祭。

关键词：祭祀国家级北京故宫

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膀胱移行上皮细胞的体外培养研究

中华实验外科杂志 2003年第4期20卷 341-342页

作者：许传亮孙颖浩顾正勤王元天邱镇第二军医大学长海医院泌尿外科上海200433

目的　探索并建立大鼠膀胱移行上皮细胞的体外培养方法 ,为膀胱癌相关研究提供实验依据。方法　获取Wistar大鼠膀胱粘膜 ,采用Dispase酶消化法收集上皮细胞。动态观察细胞形态变化、生长增殖情况 ;对培养细胞进行细胞周期检测及超微结... 详细信息

目的　探索并建立大鼠膀胱移行上皮细胞的体外培养方法 ,为膀胱癌相关研究提供实验依据。方法　获取Wistar大鼠膀胱粘膜 ,采用Dispase酶消化法收集上皮细胞。动态观察细胞形态变化、生长增殖情况 ;对培养细胞进行细胞周期检测及超微结构观察 ,并行免疫组织化学鉴定。结果　培养细胞为二倍体移行上皮细胞 ,无成纤维细胞混杂生长。免疫组织化学证实角蛋白染色阳性。结论　膀胱移行上皮细胞体外培养为体外研究提供了理想的模型。

关键词：膀胱移行上皮细胞体外培养细胞培养原代培养膀胱癌

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人前列腺干细胞抗原的克隆及表达

中华实验外科杂志 2003年第12期20卷 1100-1101页

作者：顾正勤孙颖浩许传亮邱镇王元天沈茜第二军医大学长海医院泌尿外科上海200433 第二军医大学长海医院检验科上海200433

目的克隆人前列腺干细胞抗原(PSCA)编码基因,并在大肠杆菌中表达PSCA蛋白.方法从培养的人前列腺癌细胞株中提取总RNA,反转录成cDNA,通过聚合酶链反应(PCR)方法扩增PSCA编码基因,克隆至pMD18-T载体,经DNA测序证实后亚克隆至谷胱甘肽巯基... 详细信息

目的克隆人前列腺干细胞抗原(PSCA)编码基因,并在大肠杆菌中表达PSCA蛋白.方法从培养的人前列腺癌细胞株中提取总RNA,反转录成cDNA,通过聚合酶链反应(PCR)方法扩增PSCA编码基因,克隆至pMD18-T载体,经DNA测序证实后亚克隆至谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合表达载体pGEX-5X-1,重组质粒转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达PSCA/GST融合蛋白.结果从培养的人前列腺癌细胞株中扩增出编码PSCA的cDNA(241 bp),序列测定证实与Genebank上登录的序列一致;成功构建了GST融合表达载体pGEX-5X-1/PSCA;表达了PSCA/GST融合蛋白(34.5×103).结论成功克隆了人PSCA基因,构建了GST融合表达载体并表达了PSCA/GST蛋白.

关键词：人前列腺干细胞抗原基因克隆基因表达编码基因前列腺癌

托特罗定治疗前列腺术后留置导尿致膀胱痉挛临床疗效分析

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中华男科学杂志 2004年第5期10卷 374-375页

作者：陈奇薛蔚王元天吕坚伟黄翼然上海第二医科大学附属仁济医院泌尿外科上海200127

目的 :评价托特罗定 (tolterodine)治疗前列腺术后留置导尿致膀胱痉挛的疗效。　方法 :对 82例前列腺术后留置导尿出现膀胱痉挛的患者给于托特罗定治疗 ,2mg/次 ,2次 /d ,至拔除导尿管前 2 4h。评价指标包括痉挛是否发生、发生频率、持... 详细信息

目的 :评价托特罗定 (tolterodine)治疗前列腺术后留置导尿致膀胱痉挛的疗效。　方法 :对 82例前列腺术后留置导尿出现膀胱痉挛的患者给于托特罗定治疗 ,2mg/次 ,2次 /d ,至拔除导尿管前 2 4h。评价指标包括痉挛是否发生、发生频率、持续时间等。　结果 :用药 2 4h后 ,膀胱痉挛完全缓解 2 1例 (2 5 .6 % ) ;部分缓解 4 5例 (5 4 .9% ) ;未缓解 16例 (19.5 % )。 72h后 ,膀胱痉挛完全缓解 4 5例 (5 4 .9% ) ;部分缓解 30例 (36 .6 % ) ;未缓解 7例 (8.5 % )。治疗过程中无严重不良反应发生。　结论 :托特罗定为治疗前列腺术后留置导尿致膀胱痉挛快速、有效、持久、安全的药物。

关键词：托特罗定膀胱痉挛前列腺手术留置导尿