检索结果-南通市图书馆

中国人兽共患病学报 2010年第4期26卷 299-303页

作者：张强丰锋左斌巩天祥李婉宜王保宁李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物室成都610041 四川省遂宁市第一人民医院内一科遂宁629000

目的构建mBD1与M2e融合基因的真核表达载体,并检测其在MDCK细胞中的表达情况,初步探讨其免疫特性。方法利用PCR方法分别扩增mBD1与M2e基因片段,再通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)将mBD1与M2e通过一段多肽接头Gly4Ser连接为融合基因mBD1-M2... 详细信息

目的构建mBD1与M2e融合基因的真核表达载体,并检测其在MDCK细胞中的表达情况,初步探讨其免疫特性。方法利用PCR方法分别扩增mBD1与M2e基因片段,再通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)将mBD1与M2e通过一段多肽接头Gly4Ser连接为融合基因mBD1-M2e。将该融合基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)获得重组质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,用脂质体转染MDCK细胞,通过免疫荧光、RT-PCR产物序列分析检测融合蛋白表达情况,最后采用MTT法检测mBD1-M2e融合蛋白刺激淋巴细胞增殖能力。结果经鉴定后证实构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e正确,该重组质粒能在MDCK细胞中稳定表达,该细胞培养上清液能刺激淋巴细胞增殖。结论本研究成功构建mBD1-M2e融合基因的真核表达质粒,并证实其融合蛋白能在MDCK细胞中稳定表达,这一结果为进一步研究新型高效通用的流感病毒核酸疫苗奠定了坚实的基础。

关键词：甲型流感病毒 β防御素融合基因重叠延伸PCR 免疫荧光

人类基因组计划与人类疾病动物模型—跨世纪实验动物模型的展望

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青海医药杂志 2000年第9期30卷 64-64,F004页

作者：王保宁宁磊兰州生物制品研究所 730046

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基于扎根理论的跨境电商品牌形象塑造研究

丝绸 2024年第5期61卷 16-24页

作者：王保鲁赵思卓北京服装学院服装艺术与工程学院北京100029

为指导跨境电商企业更好地在海外市场塑造品牌形象,提升品牌的国际竞争力,文章基于扎根理论,以跨境电商代表性品牌SHEIN为例,对其在社交平台Instagram上发布的956张宣传图片进行内容分析。借助NVivo 11.0软件,完成201个节点编码,并以此... 详细信息

为指导跨境电商企业更好地在海外市场塑造品牌形象,提升品牌的国际竞争力,文章基于扎根理论,以跨境电商代表性品牌SHEIN为例,对其在社交平台Instagram上发布的956张宣传图片进行内容分析。借助NVivo 11.0软件,完成201个节点编码,并以此生成34个初始范畴、11个主范畴和5个核心范畴。研究发现,基于社交媒体渠道的跨境电商品牌形象塑造,围绕产品特性、消费者形象、品牌价值表达、营销活动、服务互动五个维度展开,其中产品特性与消费者形象传播最为主要,而采用符号化语言的内容输出进一步丰富了品牌跨文化背景下的个性表达。

关键词：跨境电商品牌形象形象塑造社会媒体国际贸易扎根理论

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ctB和ure I双基因融合表达及其免疫特性分析

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第3期22卷 276-279页

作者：王保宁杨晓芳施桥发李明远陈翠萍曹康李虹四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室兰州生物制品研究所甘肃兰州730046 四川大学人类疾病生物治疗国家重点实验室四川成都610041 中国药品生物制品检定所

目的构建霍乱毒素B亚单位(CtB)和幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreI)融合的原核表达质粒pET32a(+)ctB/ureI,并初步研究融合蛋白CtB/UreI的表达特性和免疫特性。方法PCR从pUC18ctB中克隆ctB基因,定向在pET32a(+)/ureI的ureI基因5′端插入ct... 详细信息

目的构建霍乱毒素B亚单位(CtB)和幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreI)融合的原核表达质粒pET32a(+)ctB/ureI,并初步研究融合蛋白CtB/UreI的表达特性和免疫特性。方法PCR从pUC18ctB中克隆ctB基因,定向在pET32a(+)/ureI的ureI基因5′端插入ctB基因,构建ctB和ureI双基因原核表达质粒pET32a(+)ctB/ureI,转该质粒于E.coliBL-21(DE3),经酶切和序列分析鉴定工程菌。IPTG诱导表达,HP-His亲和层析纯化,SDS-PAGE和Gel-ProAnalizer4分析,重组蛋白免疫BALB/c小鼠。用Westernblot和ELISA分析重组蛋白的免疫特性。结果工程菌含完整的ctB和ureI基因,与相对应基因的序列同源性分别为100%。在22℃,1mmol/LIPTG诱导4h后,重组蛋白的表达占菌体总蛋白12%,亲和层析纯化后蛋白纯度为94.3%。Westernblot表明重组蛋白分别能与相应的抗体反应,该蛋白免疫小鼠后能产生相应的IgG抗体。结论成功构建了能表达CtB/UreI蛋白的大肠杆菌表达菌株。对融合蛋白表达和纯化后,初步证明了该重组蛋白有CtB和UreI的双特异反应原性和免疫原性,为研究新型幽门螺杆菌疫苗奠定了坚实的基础。

关键词：幽门螺杆菌霍乱毒素B亚单位尿素膜通道蛋白融合表达免疫特性

基因组计划与人类疾病动物模型——跨世纪实验动物模型的展望

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基因组计划与人类疾病动物模型——跨世纪实验动物模型的展望

中国实验动物学会青年科技协会第二届学术研讨会

作者：王保宁宁磊兰州生物制品研究所

继英国科学家克隆羊“多利”诞生的惊喜及美国科学家宣布克隆人造成的恐慌后,生命科学领域紧接着又一项令人振奋的伟大工程紧锣密鼓的拉开了竞争帷幕——确定人类整个基因的结构和功能,表达和调控的“人类基因组计划”(HGP)正在各大国...

继英国科学家克隆羊“多利”诞生的惊喜及美国科学家宣布克隆人造成的恐慌后,生命科学领域紧接着又一项令人振奋的伟大工程紧锣密鼓的拉开了竞争帷幕——确定人类整个基因的结构和功能,表达和调控的“人类基因组计划”(HGP)正在各大国如火如荼地展开.今天人类 3×10个核苷酸全序列中约有5,000个基因已被测序,同时随着技术及测序仪器的更新,每年测序完成的速度正在加快,美国科学家宣布,今年底将完成约90%以上的人DNA测序工作,预计2001年全部完成人DNA测序,由此而产生的一

关键词：

来源： cnki会议评论

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狐胃肠炎的诊断及防治

中国兽医杂志 1999年第10期25卷 53-54页

作者：王保宁宁磊左谦益王有祥卫生部兰州生物制品研究所动物室甘肃兰州730046 兰州市城关区检疫站甘肃兰州730000

固溶处理对选区激光融化316L不锈钢晶间腐蚀性能行为的影响机制

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工程科学学报 2024年第6期46卷 1077-1088页

作者：王保山商强满成中国海洋大学材料科学与工程学院青岛266100

选区激光融化316L不锈钢(SLM-316L不锈钢)常采用固溶处理进行组织优化、消减残余应力,以获得优异综合性能.奥氏体不锈钢的晶间腐蚀行为与其组织结构有较高的依赖性,因此固溶处理会提高SLM-316L不锈钢的晶间腐蚀性能.然而,固溶处理对SLM-... 详细信息

选区激光融化316L不锈钢(SLM-316L不锈钢)常采用固溶处理进行组织优化、消减残余应力,以获得优异综合性能.奥氏体不锈钢的晶间腐蚀行为与其组织结构有较高的依赖性,因此固溶处理会提高SLM-316L不锈钢的晶间腐蚀性能.然而,固溶处理对SLM-316L不锈钢晶间腐蚀行为的影响规律和机制目前尚不清晰.基于此,本文首先对SLM-316L不锈钢进行1150℃固溶处理,随后采用SEM、EBSD、TEM等分析其组织结构特征和纳米氧化物颗粒形貌,最后采用双环电化学再活化和过硫酸铵电解试验研究其晶间腐蚀行为.主要结论如下:固溶处理后SLM-316L不锈钢发生再结晶,形成规则形状等轴晶粒及退火孪晶;纳米氧化物颗粒粗化,晶界处最大尺寸能够达到微米级,同时氧化物颗粒的类型也从菱矿石结构的MnSiO_(3)转变为尖晶石结构CrMn_(2)O_(4);固溶处理导致SLM-316L不锈钢晶间腐蚀性能下降,伴随着敏化时间的延长,晶间腐蚀类型从台阶状转变为沟状.

关键词：晶间腐蚀选区激光融化 316L不锈钢热处理组织结构

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关于肺支原体及其相关抗原的研究

生物制品年刊 1997年 69-71页

作者：王保宁宁磊兰州卫生部兰州生物研究所

用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印迹技术（Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ）对肺支原体，关节炎支原体的抗原进行比较研究，结果表明肺支原体的抗原较关节炎支原体复杂，前者有１５条蛋白带而后者仅... 详细信息

用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印迹技术（Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ）对肺支原体，关节炎支原体的抗原进行比较研究，结果表明肺支原体的抗原较关节炎支原体复杂，前者有１５条蛋白带而后者仅有４条，印迹实验证实９４ＫＤ蛋白为肺支原的反应抗原成分，６７．６ＫＤ蛋白为关节炎支原体与肺支原体的共有蛋白成分。

关键词：肺支原体 94KD蛋白关节炎支原体抗原

重组幽门螺杆菌多表位疫苗工程菌株的构建及其微生物学特性研究

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四川大学学报（医学版） 2015年第3期46卷 354-358页

作者：王保宁潘兴黄筱钧周永君祝捷高礼珍牛晓娟李婉宜李明远王红仁四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 四川万可泰生物技术有限责任公司成都610041

目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(ureI、ureB)及霍乱毒素B亚单位(ctB)融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内... 详细信息

目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(ureI、ureB)及霍乱毒素B亚单位(ctB)融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内佐剂序列ctB,按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,即为BIB序列。人工合成之后,插入原核表达质粒pET28a(+)中,构建pET28a(+)/ctB-ureI-ureB〔pET28a(+)/BIB〕重组质粒。经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序鉴定正确后,将质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。BIB工程菌经乳糖诱导表达后,SDS-PAGE检测重组蛋白BIB的表达情况,并对其N端氨基酸序列和相对分子质量进行测定,Western blot对其进行抗原性鉴定。结果原核表达质粒pET28a(+)/BIB经双酶切和测序鉴定构建正确,SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量33×103处有一条明显条带,其N端氨基酸序列和相对分子质量与设计序列100%一致,Western blot结果显示BIB可以与抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)小鼠血清及鼠抗CTB单抗产生特异性反应。结论成功构建了幽门螺杆菌多表位重组原核表达工程菌,该工程菌表达的BIB蛋白抗原性良好。

关键词：幽门螺杆菌多表位疫苗尿素酶B亚单位尿素酶I亚单位霍乱毒素B亚单位