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脂蟾毒配基对人白血病HL-60及宫颈癌Hela的作用及其机制的研究

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脂蟾毒配基对人白血病HL-60及宫颈癌Hela的作用及其机制的研究

作者：王传社北京中医药大学

学位级别：硕士

肿瘤作为危害人类健康、导致人类死亡的主要原因，与病毒性疾病、老年性疾病并称为现代医学的三大挑战。人类一直在寻找治疗癌症的有效手段，经过不懈地努力，已有30％以上的癌症有可能得到根治。药物治疗是癌症治疗的三大疗法之一，经... 详细信息

肿瘤作为危害人类健康、导致人类死亡的主要原因，与病毒性疾病、老年性疾病并称为现代医学的三大挑战。人类一直在寻找治疗癌症的有效手段，经过不懈地努力，已有30％以上的癌症有可能得到根治。药物治疗是癌症治疗的三大疗法之一，经过四十余年的努力，已发现几十种有效的抗肿瘤药物，使多种肿瘤的治疗获得显著疗效。但是，多数常见实体瘤如肺癌、肝癌、结肠癌、胰腺癌等还缺乏有效药物，不少抗肿瘤药在临床应用过程中产生耐药性，因此，新型抗肿瘤药物研究势在必行。中医药学对肿瘤有大量的论述及记载，对肿瘤之成因有多种不同的观点，但多数认为与癌毒瘀积有关，癌毒与正气相搏，表现为癌症患者的各种证侯，因此，癌毒是肿瘤病理的关键环节之一。在历代医学及民间流传下来的许多治疗癌症的方法和药物中，以攻毒为目的的占有重要的地位，蟾酥是其中常用的药物之一。现代临床研究证实，蟾酥用于多种恶性肿瘤的治疗，均获得满意疗效。蟾毒配基类化合物是蟾酥中的主要化学物质，包括为蟾蜍灵(bufalin)、脂蟾毒配基(resibufogenin)、华蟾毒配基(cinobufagin)等。已有的研究结果表明，蟾蜍灵是蟾酥抗肿瘤的主要有效成分之一，体外对多种肿瘤细胞均有显著的生长抑制作用，其机制与诱导肿瘤细胞分化及凋亡有关，华蟾毒配基（华蟾毒精）亦有一定的体外抗癌作用。而作为药典规定的中药材蟾酥两种鉴别成分之一的脂蟾毒配基，在抗肿瘤方面仅有Kamano等观察到脂蟾毒配基对肝癌细胞PLC/PRF/5有明显的细胞毒活性。为了证实脂蟾毒配基的抗癌作用，本实验观察了脂蟾毒配基体外对人白血病HL－60及宫颈癌Hela细胞以及整体给药对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长抑制作用，并初步探讨了脂蟾毒配基抗癌的机制。体外实验结果表明，脂蟾毒配基对人白血病HL－60及宫颈癌Hela细胞生长均有显著的抑制作用，该种作用存在时间依赖关系和剂量依赖关系，IC50约在10－1.00(mol/L。流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳结果显示，脂蟾毒配基对两者癌细胞的细胞毒作用机制与诱导癌细胞凋亡有关。体内实验证实，高剂量脂蟾毒配基（15mg/kg）对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长有明显的抑制作用，停药后没有明显的后续抑制作用;15mg/kg的脂蟾毒配基与5mg/kg平阳霉素对肿瘤增长的抑瘤强度相当;脂蟾毒配基对荷瘤鼠体重无明显影响，但高剂量脂蟾毒配基（15mg/kg）有较强的急性神经毒性，未发现明显的近期毒性。

关键词：蟾酥脂蟾毒配基宫颈癌Hela 白血病HL-60 裸鼠凋亡

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形成虚寒证的中枢抑制物研究

中医杂志 1989年第5期30卷 47-49页

作者：梁月华王传社北京医科大学基础医学院中西医结合研究室

本文重点研究虚寒证大鼠中枢抑制物对甲状腺释放激素(TSH)和多巴胺-β-羟化酶(DβH)活性的影响。用虚寒证鼠脑各提取物经腹腔分别注入大鼠后,取血测定,证明有一类物质使鼠血清TSH含量下降、DβH活性降低,该提取物与垂体细胞和鼠血清孵... 详细信息

本文重点研究虚寒证大鼠中枢抑制物对甲状腺释放激素(TSH)和多巴胺-β-羟化酶(DβH)活性的影响。用虚寒证鼠脑各提取物经腹腔分别注入大鼠后,取血测定,证明有一类物质使鼠血清TSH含量下降、DβH活性降低,该提取物与垂体细胞和鼠血清孵育后也使TSH的释放和DβH活性降低,证明虚寒证鼠脑内确实含有某种抑制物参预虚寒证的形成。此外,用单味中药知母或石膏与知母所制咸的虚寒证动物改进模型,与由知母、石膏、黄柏、龙胆草所制咸的原虚寒证动物模型相比较,它们在临床表现和各项有关指标的检验上,均相一致。

关键词：虚寒证中枢抑制物 TSH DβH

不同补肾健脾化瘀方药对老年小鼠免疫功能及自由基代谢影响的对比研究

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北京大学学报（医学版） 2001年第6期33卷 548-551页

作者：李志新王传社李顺成北京大学中医药现代研究中心中西医结合教研室北京100083

目的 :从自由基代谢、免疫衰老两方面来验证“正虚挟瘀”是中医衰老的重要原因 /机制。方法 :两组老年小鼠连续 4周分别灌服不同的补肾健脾化瘀方药后 ,检测腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素 1(Interleukin 1,IL 1)、脾淋巴细胞产生的白细... 详细信息

目的 :从自由基代谢、免疫衰老两方面来验证“正虚挟瘀”是中医衰老的重要原因 /机制。方法 :两组老年小鼠连续 4周分别灌服不同的补肾健脾化瘀方药后 ,检测腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素 1(Interleukin 1,IL 1)、脾淋巴细胞产生的白细胞介素 2 (interleukin 2 ,IL 2 )的活性 ,肝脑的脂质过氧化物 (lipidperoxides,LPO)含量以及红细胞清除自由基酶的活性 [如超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase,SOD)、过氧化氢酶 (catalase ,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (glutathioneperoxidase ,GSH Px) ]。结果 :老年小鼠IL 1、IL 2的产生以及SOD、CAT、GSH Px均明显低于青年小鼠 ,而肝脑产生的脂质过氧化物则明显增加。给药后 ,两方均可明显调整 /恢复上述指标 ,虽然其作用强度有所不同 ,但基本上是一致的。结论 :老年机体确实存在脾肾两虚兼瘀血停滞 (正虚挟瘀 )的体质。

关键词：免疫功能中药动物实验药理学自由基代谢补肾健脾化瘀方药5

苁蓉总苷对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响及机制研究

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中草药 2005年第12期36卷 1852-1855页

作者：皋聪王传社巫冠中胡梅屠鹏飞中国药科大学药理教研室江苏南京210009 北京大学中医药现代研究中心

人口的老龄化已使寻找安全有效的防治老年痴呆症药物成为药物研究的热点。近年来，中医学使用以补肾益髓为主、兼补心脾的方法治疗老年痴呆症取得了较大的进展。肉苁蓉始载于《神农本草经》，具有补肾阳、益精血、润肠通便之功效，现广... 详细信息

人口的老龄化已使寻找安全有效的防治老年痴呆症药物成为药物研究的热点。近年来，中医学使用以补肾益髓为主、兼补心脾的方法治疗老年痴呆症取得了较大的进展。肉苁蓉始载于《神农本草经》，具有补肾阳、益精血、润肠通便之功效，现广泛用于治疗老年性痴呆、阳痿、习惯性便秘等病症。研究表明其具有抗痴呆、抗氧化、抗缺氧、抗辐射、[第一段]

关键词：机制研究学习记忆痴呆大鼠老年痴呆症药物血管性《神农本草经》总苷老年性痴呆习惯性便秘药物研究

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补肾阴与补肾阳法延缓衰老的对比研究

北京医科大学学报 1997年第6期29卷 559-562页

作者：王传社李顺成北京医科大学中西医结合教研室 100083

脂蟾毒配基通过线粒体途径诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的研究

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中国肿瘤临床 2006年第20期33卷 1141-1145页

作者：黄应申肖军军孟书聪董晓敏王传社果德安北京大学医学部细胞生物学系北京市100083 北京大学医学部中医药现代研究中心

目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡... 详细信息

目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位(△ψm)变化;WesternBlot检测与细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果:RG显著抑制细胞增殖,其作用24、48、72h的IC50分别为3.8、1.8、1.2"mol/L;经10"mol/LRG处理24h后,癌细胞出现凋亡的形态变化,其凋亡率明显高于对照组细胞;RG引起△ψm下降,释放入胞质中的细胞色素c(cytochromec,CytC)增多,促进Caspase-3蛋白活化,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导细胞凋亡。结论:RG诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡,其诱导凋亡作用可能通过线粒体通路实现。

关键词：脂蟾毒配基细胞凋亡人肝癌Bel-7402细胞线粒体跨膜电位(△ψm)

六味地黄汤及八味地黄汤延缓老年小鼠皮肤衰老的研究

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中国中西医结合杂志 1995年第S1期15卷 185-187,388-389页

作者：陈东明李顺成王传社朱洪荫北京医科大学第三医院成形外科研究中心北京10083 北京医科大学基础医学院中西医结合教研室

为观察六味及八味地黄汤对延缓皮肤衰老的作用,本实验用不同的染色方法显示老年小鼠皮肤表皮 DNA,真皮蛋白质、多糖、胶原纤维及弹性纤维变化。结果表明:用六味地黄汤及八味地黄汤后,老年小鼠表皮增厚、DNA 含量增加,真皮乳头增高、成... 详细信息

为观察六味及八味地黄汤对延缓皮肤衰老的作用,本实验用不同的染色方法显示老年小鼠皮肤表皮 DNA,真皮蛋白质、多糖、胶原纤维及弹性纤维变化。结果表明:用六味地黄汤及八味地黄汤后,老年小鼠表皮增厚、DNA 含量增加,真皮乳头增高、成纤维细胞增多,胶原纤维、蛋白质、多糖及弹性纤维呈恢复状态。说明六味及八味地黄汤均有改善老年小鼠皮肤组织结构,延缓皮肤老化的作用。八味地黄汤的作用明显优于六味地黄汤。

关键词：六味地黄汤八味地黄汤皮肤老化