检索结果-南通市图书馆

埃博拉病毒四种亚型核蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

埃博拉病毒四种亚型核蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：王仁霞南华大学

学位级别：硕士

目的:本研究以埃博拉病毒(EBOV)的扎伊尔型(ZEBOV)、苏丹型(SUDV)、塔伊森林型(TAFV)及莱斯顿型(RESTV)等四种亚型核蛋白(NP)的合成多肽为免疫原,利用杂交瘤细胞技术制备特异性单克隆抗体,为建立EBOV快速检测方法奠定基础。方法:利用DNA... 详细信息

目的:本研究以埃博拉病毒(EBOV)的扎伊尔型(ZEBOV)、苏丹型(SUDV)、塔伊森林型(TAFV)及莱斯顿型(RESTV)等四种亚型核蛋白(NP)的合成多肽为免疫原,利用杂交瘤细胞技术制备特异性单克隆抗体,为建立EBOV快速检测方法奠定基础。方法:利用DNAstar protean和BLAST等软件筛选埃博拉病毒四种亚型核蛋白优势抗原表位,人工合成抗原多肽与KLH偶联后免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,间接ELISA法筛选阳性克隆,有限稀释法克隆得到特异性杂交瘤细胞。分别构建埃博拉病毒四种亚型核蛋白的重组质粒(pFlag-CMV-Z-NP、pFlag-CMV-R-NP、pFlag-CMV-T-NP、pFlag-CMV-S-NP),并转染到HEK293细胞,用Western blot检测四种带Flag标签的融合蛋白表达。最后以真核表达的埃博拉病毒核蛋白为抗原,用Western blot方法鉴定单克隆抗体的特异性。结果:通过DNAstar protean和BLAST筛选得到埃博拉病毒四种亚型核蛋白优势抗原表位(ZEBOV-NP,aa611-630:YRDHSEKKELP QDEQQDQDH;SUDV-NP,aa631-644:QGSESEALPINSKK;RESTV-NP,aa630-643:TSQLNEDPDIGQSK以及TAFV-NP,aa630-643:NQV SGSENTDNKPH)。人工合成抗原多肽后免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤细胞技术最终获得了12株抗ZNP阳性杂交瘤细胞、6株抗RNP阳性杂交瘤细胞、6株抗TNP阳性杂交瘤细胞以及9株抗SNP阳性杂交瘤细胞。对33株单克隆抗体进行亚类测定,其中IgM型有4株,IgG2a型有3株,IgG2b型有5株,IgG1亚型有22株。间接ELISA测定各单抗腹水效价分别介于1:10:10。构建埃博拉病毒四种亚型核蛋白的重组质粒(pFlag-CMV-Z-NP、pFlag-CMV-R-NP、pFlag-CMV-T-NP、pFlag-CMV-S-NP),双酶切验证结果显示,得到了与目的片段长度相同的条带,序列测定结果与目的基因一致。将四种质粒转染HEK293细胞后,真核表达得到四种亚型的NP融合蛋白(Flag-ZEBOV-NP、Flag-RESTV-NP、Flag-TAFV-NP、Flag-SUDV-NP),经Western blot鉴定四种亚型的NP融合蛋白分子量大小介于10020KDa。以真核表达的埃博拉病毒四种亚型核蛋白为抗原检测所制备单抗的特异性,Western blot结果显示,抗ZNP单抗(ZNP3F10、ZNP15F11、ZNP14E2)、抗RNP单抗(RNP9E5、RNP10C12、RNP15B12、RNP2A10、RNP7E7、RNP10F9)、抗TNP单抗(TNP1H3、TNP4B10、TNP10C1、TNP2A10、TNP8D3、TNP8G9)和抗SNP单抗(SNP11G9、SNP1G3、SNP12F12、SNP3F12)能够分别与Flag-ZEBOV-NP、Flag-RESTV-NP、Flag-TAFV-NP、Flag-SUDV-NP产生特异性反应,且与其它3种亚型NP无交叉反应。结论:本研究成功制备得到了抗ZNP,抗RNP,抗TNP及抗SNP的特异性单克隆抗体,为EBOV的监测、诊断提供了科学依据。

关键词：埃博拉病毒核蛋白单克隆抗体真核表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

法洛四联症患者术后的护理

大家健康(学术版) 2016年第10期 273-274页

作者：王仁霞六盘水市人民医院ICU科

目的:对法洛四联症患者术后的护理方法及效果进行探讨。方法:随机抽取我院收治的20例法洛四联症患者作为本次研究对象。将所有患者随机分为观察组与对照组,对比两组的护理效果。结果:观察组的总有效率明显高于对照组,并发症发生率显著... 详细信息

目的:对法洛四联症患者术后的护理方法及效果进行探讨。方法:随机抽取我院收治的20例法洛四联症患者作为本次研究对象。将所有患者随机分为观察组与对照组,对比两组的护理效果。结果:观察组的总有效率明显高于对照组,并发症发生率显著低于对照组,相比有统计学差异(P<0.05)。结论:对法洛四联症术后患者进行有效的护理干预,有利于提高康复疗效,降低并发症发生率。

关键词：法洛四联症根治术护理

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

礼服局部抽褶造型的实践与运用

科技创新导报 2009年第34期6卷 177-178页

作者：王仁霞台州市路桥中等职业技术学校浙江台州318050

抽褶是礼服应用立裁法中最常见的重要技术手法之一,应用非常广泛,通过不同部位抽褶产生不同的立体造型和艺术效果,恰当地掌握和运用这些技术手法对熟练构思艺术造型是极重要。

关键词：立裁抽褶技术要领运用

浅析事业单位档案管理信息化建设中的问题及完善对策

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

襄阳职业技术学院学报 2021年第4期20卷 87-89,119页

作者：王仁霞襄阳市中小企业发展服务中心湖北襄阳441000

社会经济的迅猛发展,信息技术不断提升,事业单位的档案数量规模随之增加,管理难度随之变大;事业单位如果仍旧采用传统的档案管理方式,将无法与时俱进。文章着重探讨事业单位档案管理信息化建设的优势,研究信息化建设进程中存在的问题,... 详细信息

社会经济的迅猛发展,信息技术不断提升,事业单位的档案数量规模随之增加,管理难度随之变大;事业单位如果仍旧采用传统的档案管理方式,将无法与时俱进。文章着重探讨事业单位档案管理信息化建设的优势,研究信息化建设进程中存在的问题,并给予相应的完善对策,促进事业单位档案管理信息化建设工作顺利运行。

关键词：事业单位档案管理信息化

新时期高校档案管理工作存在的问题及完善对策

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

襄阳职业技术学院学报 2021年第6期20卷 119-122页

作者：王仁霞襄阳市中小企业发展服务中心办公室湖北襄阳441000

文章分析了在高校日常的档案管理工作中,高校领导普遍缺乏对档案管理工作的重视;高校档案管理体系较为落后,档案管理制度有待完善;档案管理人员缺乏专业素养;档案管理信息化水平、工作效率明显低下等相关问题。针对以上问题,有针对性地... 详细信息

文章分析了在高校日常的档案管理工作中,高校领导普遍缺乏对档案管理工作的重视;高校档案管理体系较为落后,档案管理制度有待完善;档案管理人员缺乏专业素养;档案管理信息化水平、工作效率明显低下等相关问题。针对以上问题,有针对性地给予了相应的解决对策。通过积极转变高校领导观念,让其重视档案管理工作;创建完善的档案管理制度;结合专业化的理论知识与实操技能培训,综合提升档案管理人员的专业素养;创建信息化档案服务,提高档案管理工作效率,从而进一步加快高校档案管理工作前进的步伐。

关键词：高校档案管理问题完善对策

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

职业学校如何抓住机遇办好服装中短期培训

职业教育研究 2010年第1期 42-43页

作者：王仁霞台州路桥中等职业技术学校浙江台州318050

农民工培训工作对当前我国经济发展和新农村建设都具有十分重要的意义,职业教育应为农村劳动力转移服务,这将为办好中短期服装培训创造良好的机遇。服装培训要有现代教学设施,专业设置、课程内容、教学方法应符合学员的特点,培训形式要... 详细信息

农民工培训工作对当前我国经济发展和新农村建设都具有十分重要的意义,职业教育应为农村劳动力转移服务,这将为办好中短期服装培训创造良好的机遇。服装培训要有现代教学设施,专业设置、课程内容、教学方法应符合学员的特点,培训形式要多样化,培训对象要层次化,培训方法要多元化,培训内容要实用化。

关键词：职业学校服装中短期培训农民工

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

护理服务价格形成及其影响因素分析

西部医学 2010年第12期22卷 2375-2377页

作者：王仁红曹新群王仁霞泰兴市人民医院江苏泰兴225400

目的探讨护理服务价格合理调整的必要性和可行性。方法调查分析护理服务价格形成及其影响因素;服务成本与社会效益的关系;服务成本与服务质量的关系;构建合理的护理成本核算体系,以此制定护理服务单项价格。结果合理调整和完善护理服务... 详细信息

目的探讨护理服务价格合理调整的必要性和可行性。方法调查分析护理服务价格形成及其影响因素;服务成本与社会效益的关系;服务成本与服务质量的关系;构建合理的护理成本核算体系,以此制定护理服务单项价格。结果合理调整和完善护理服务价格,补充完善单项护理操作价格,将病情观察和生活护理分开核算计费,能更好地体现护理人员的劳动价值,调动护理人员的积极性,提高护理质量和水平,也能让患者明明白白消费。结论结合我国国情把病情观察和生活护理分开,由医生决定病情观察频数,护士根据日常生活自理能力(ADL)评分决定单项生活护理项目,根据护理服务项目收取合理费用,使护理服务价格真正体现护理过程中劳动消耗发生的实际情况,体现护理服务的真实价值,同时为管理者制定护理收费标准、评价效益、合理补偿、降低医疗成本提供理论依据。

关键词：成本及成本分析护理工作日常生活活动可行性研究