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黑曲霉组蛋白乙酰转移酶基因功能的研究

黑曲霉组蛋白乙酰转移酶基因功能的研究

作者：王云爽天津科技大学

学位级别：硕士

黑曲霉（Aspergillus niger）是重要的工业发酵微生物,是目前发酵生产柠檬酸的主要工业菌。组蛋白的乙酰化是染色质具有转录活性的标志之一。组蛋白乙酰化使染色质结构由紧密变松散,转录因子更易于与基因DNA序列结合,基因得以转录,相关... 详细信息

黑曲霉（Aspergillus niger）是重要的工业发酵微生物,是目前发酵生产柠檬酸的主要工业菌。组蛋白的乙酰化是染色质具有转录活性的标志之一。组蛋白乙酰化使染色质结构由紧密变松散,转录因子更易于与基因DNA序列结合,基因得以转录,相关蛋白得以表达。组蛋白赖氨酸残基的乙酰化过程是由组蛋白乙酰转移酶（Histone acetyltransferase, HAT）催化产生,其乙酰基的供体为乙酰辅酶A。在黑曲霉中,乙酰CoA和草酰乙酸在柠檬酸合成酶催化下生成柠檬酸。因此,本文通过敲除黑曲霉组蛋白乙酰转移酶基因,研究组蛋白乙酰化对黑曲霉生长与柠檬酸发酵产生的影响。本论文以A. niger ATCC1015为研究对象。主要研究结果如下：1.选用课题组改造的质粒pFGL59Ble作为出发质粒,分别构建黑曲霉HAT家族中GNAT, MOZ/SAS与HATb基因的敲除载体。将敲除载体电转到根瘤农杆菌后,利用农杆菌介导的A. niger转化技术,携带有同源臂的外源基因片段进入A. niger中,发生同源重组。通过筛选转化子,成功获得了组蛋白乙酰转移酶单基因敲除菌株△GNAT、△/SAS、△HATb。2.利用显微镜技术对突变株及野生型进行表型分析,发现突变株△GNAT、△HATb与野生株在菌体生长和表型上没有明显的差异,但产孢量略低于野生株;突变株△MOZ/SAS菌体在PDA培养基上能够生长正常,但产孢迟缓,产孢量明显低于野生株,孢子量降低了约60%。3.野生株与三株突变株分别进行摇瓶发酵,采用HPLC定量检测柠檬酸产量。结果表明突变株△HATb与野生株的柠檬酸产量基本一致,约为79g/L;而突变株△GNAT与△MOZ/SAS的柠檬酸产量均低于野生株,分别约为72.38g/L、65.24 g/L,突变株△MOZ/SAS的柠檬酸产量降低了14.6%。结果表明MOZ/SA S基因对于黑曲霉产孢、柠檬酸产量的影响较显著。

关键词：黑曲霉组蛋白乙酰转移酶基因敲除柠檬酸

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植物乳杆菌FJR分离鉴定及益生特性研究

中国畜牧杂志 2023年第2期59卷 274-278,285页

作者：汪攀易敢峰朱胜男李香平王丹玉王云爽兰文鑫鄢庆枇孙云章集美大学水产学院福建厦门361021 福建大北农华有水产科技集团有限公司福建省水产功能性饲料及养殖环境调控重点实验室福建诏安363500

试验旨在从野生海鲈鱼肠道分离筛选具有益生功能的乳酸菌,重点考察其降糖益生特性。从野生海鲈鱼样品中共分离到15株乳酸菌,通过评价其产酸、抑菌和还原糖利用能力,筛选出1株植物乳杆菌FJR(保藏号CGMCC No.23798)。该菌株产酸能力强,对... 详细信息

试验旨在从野生海鲈鱼肠道分离筛选具有益生功能的乳酸菌,重点考察其降糖益生特性。从野生海鲈鱼样品中共分离到15株乳酸菌,通过评价其产酸、抑菌和还原糖利用能力,筛选出1株植物乳杆菌FJR(保藏号CGMCC No.23798)。该菌株产酸能力强,对嗜水气单孢菌、副溶血弧菌等病原菌均有显著抑制效果,且可以快速利用还原糖。利用对糖特别敏感的大口黑鲈作为研究对象,评价植物乳杆菌FJR的降糖效果。试验选用150尾体重(150±5)g的大口黑鲈,随机分为2个处理,每个处理3个重复,每个重复25尾,对照组饲喂基础饲料,试验组在基础饲粮中添加1.0×106 CFU/g植物乳杆菌FJR。在投喂饲料后0、1、2、3 h,取肠道内容物和血液,测定还原糖和血糖含量。结果表明:饲喂植物乳杆菌FJR后,大口黑鲈肠道还原糖和血糖含量均低于对照组(P<0.05),证明植物乳杆菌能够能调节大口黑鲈糖代谢。

关键词：植物乳杆菌大口黑鲈血糖益生菌分离鉴定

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基于组合云发生器的配电系统负荷模糊建模

系统仿真学报 2008年第2期20卷 341-344页

作者：孙秋野张化光王云爽东北大学信息科学与工程学院沈阳110004

基于云理论的知识表示,首次将云理论与电力系统有效结合来解决配电系统原始数据不足的问题。在对原始数据进行模糊聚类的基础上,提出了一种组合云发生器,将正向云发生器和逆向云发生器有效组合成一种闭环结构。结合配电网负荷数据的实... 详细信息

基于云理论的知识表示,首次将云理论与电力系统有效结合来解决配电系统原始数据不足的问题。在对原始数据进行模糊聚类的基础上,提出了一种组合云发生器,将正向云发生器和逆向云发生器有效组合成一种闭环结构。结合配电网负荷数据的实际特点,在组合云发生器中加入了约束方程组和系统工况数据补充两个单元,保证了生成的负荷数据既能够包含系统的大部分情况,又不会出现实际不会发生的不可能数据,生成的云滴很好的反映了负荷数据所具有的模糊性和随机性。并在此基础上进行了基于T-S模糊模型的负荷辨识,将辨识结果与当前通用的几类模型对比显示了所提出方法的有效性和实用性。

关键词：云模型组合云发生器配电系统负荷建模模糊T-S模型

基于神经网络的MEMS陀螺仪温漂补偿方法研究

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微电子学与计算机 2023年第1期40卷 147-155页

作者：郭刚强柴波王云爽赵建涛西安微电子技术研究所陕西西安710054

针对MEMS惯性传感器对温度变化非常敏感问题,提出了一种MEMS陀螺仪实时温度补偿方法,并比较了此方法与传统使用的分段线性拟合方法的补偿效果.首先,使用一个标定过的MEMS-IMU进行温度试验,并在试验过程中采集MEMS陀螺仪的输出;其次,提... 详细信息

针对MEMS惯性传感器对温度变化非常敏感问题,提出了一种MEMS陀螺仪实时温度补偿方法,并比较了此方法与传统使用的分段线性拟合方法的补偿效果.首先,使用一个标定过的MEMS-IMU进行温度试验,并在试验过程中采集MEMS陀螺仪的输出;其次,提出了一个基于MEMS陀螺仪前一时刻温漂输出的实时补偿模型,并引入虚假最近邻算法来确定神经网络隐藏层的神经元个数;然后,采用了一种普通循环神经网络的变体,门循环单元循环神经网络,来辨识所提出模型的输入与输出之间的关系,从而得到完整的MEMS陀螺仪温漂实时补偿模型;最后,比较了所提出的方法和分段线性拟合方法的补偿效果.为了得到定量的比较结果,分别在相同试验条件下和不同升温速率条件下比较了以上两种方法补偿前后MEMS陀螺仪的艾伦方差和零偏稳定性.根据比较结果可知,在以上两种试验条件下,采用所提出的方法补偿后,MEMS陀螺仪的艾伦方差系数和零偏稳定性均显著降低,并且补偿效果均优于分段线性拟合方法.

关键词： MEMS陀螺仪温漂补偿神经网络虚假最近邻

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一种基于频域的雷达信号预处理方法

微电子学与计算机 2019年第11期36卷 95-98页

作者：王云爽贺占庄西安微电子技术研究所

雷达信号预处理过程是雷达系统中的必要环节.根据现有的雷达信号预处理方法,本文提出了一种基于频域的联合滤波器的实现方法,通过理论推导验证了方法的等效性,并通过仿真与原方法进行对比说明该联合滤波器处理结果的有效性.该方法对雷... 详细信息

雷达信号预处理过程是雷达系统中的必要环节.根据现有的雷达信号预处理方法,本文提出了一种基于频域的联合滤波器的实现方法,通过理论推导验证了方法的等效性,并通过仿真与原方法进行对比说明该联合滤波器处理结果的有效性.该方法对雷达信号预处理的工程化应用有帮助作用.

关键词：频域雷达信号预处理

体外培养法探讨不同蛋白源对大菱鲆肠道菌群的影响

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浙江农业学报 2016年第7期28卷 1128-1134页

作者：王云爽皮雄娥王欣何艮中国海洋大学农业部水产动物营养与饲料重点实验室山东青岛266003 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021

肠道菌群是动物正常生长发育中必不可少的重要组成部分,与动物健康密切相关,高比例的豆粕替代鱼粉作为鱼类饲料蛋白源严重影响了鱼类健康。采用3种不同种类的平板培养基对大菱鲆肠道不同部位菌群数量进行了体外模拟培养,证实了大菱鲆肠... 详细信息

肠道菌群是动物正常生长发育中必不可少的重要组成部分,与动物健康密切相关,高比例的豆粕替代鱼粉作为鱼类饲料蛋白源严重影响了鱼类健康。采用3种不同种类的平板培养基对大菱鲆肠道不同部位菌群数量进行了体外模拟培养,证实了大菱鲆肠道各部位间均存在大量的微生物,且大菱鲆肠道可培养的需氧菌数量高于厌氧菌,前肠可培养的微生物数量也相对较多。采用DGGE指纹图谱检测和Bio-rad的Quantity One分析软件研究了蛋白源体外发酵对大菱鲆肠道菌群结构差异的影响。结果表明,大菱鲆肠道菌群受不同蛋白源的影响,且厌氧发酵条件下,发酵豆粕和鱼粉有着相似的主菌群结构。通过对内容物及发酵液的PCR-DGGE指纹图谱进行聚类分析和切胶回收,发现有氧条件下,菌群种类亲缘关系受蛋白源影响较大,且变形菌门为大菱鲆肠道利用蛋白的优势菌群。

关键词：大菱鲆蛋白源肠道细菌体外培养

匿名写作、漂泊体验与女性主体——论塞壬的散文书写

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当代文坛 2024年第3期 128-134页

作者：何心爽厦门大学中文系

塞壬的散文记叙了城市化进程中个体多样的生存体验,作为一名专攻散文的女作家,塞壬的散文创作以叙事见长,这使她与女性散文的抒情主流不同。匿名式写作既是塞壬主观追求的书写风格,也是一种与书写对象保持冷静距离的叙事立场。这种“在... 详细信息

塞壬的散文记叙了城市化进程中个体多样的生存体验,作为一名专攻散文的女作家,塞壬的散文创作以叙事见长,这使她与女性散文的抒情主流不同。匿名式写作既是塞壬主观追求的书写风格,也是一种与书写对象保持冷静距离的叙事立场。这种“在场又离场”的叙事立场使得塞壬的散文既具有现实感,又能以细腻而客观的视角观照现实中的普通人。同时,漂泊体验是塞壬散文中不断触及的主题,有别于其他书写漂泊生涯的作品所附带的苦难色彩和悲情论述,塞壬将漂泊体验视为城市化进程中女性敞开身心、适应环境、重塑自我的契机,进城务工给了中国女性主体发育成长的空间,在这个过程中,女性能摆脱思想束缚,重新评估自我与他人的关系,并完成身份的转换,形成新的女性主体经验。

关键词：塞壬漂泊体验女性主体

mA去甲基化酶在胃癌发生发展中的作用机制研究进展

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上海交通大学学报(医学版) 2024年

作者：江爽俞继卫上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，多数患者发现时已处于晚期，预后不佳。外科手术及化学治疗(化疗仍是目前胃癌的主要治疗方式。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是近年来肿瘤研究的热点。m6A作为真核生物中最常见的RNA修饰... 详细信息

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，多数患者发现时已处于晚期，预后不佳。外科手术及化学治疗(化疗仍是目前胃癌的主要治疗方式。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是近年来肿瘤研究的热点。m6A作为真核生物中最常见的RNA修饰形式，可以调控RNA循环的各个阶段，包括RNA剪接、加工、降解和翻译等，从而调控RNA的表达和功能，在细胞分化、发育和代谢等各个环节中发挥关键作用。m6A去甲基化酶可去除RNA上的甲基基团，确保m6A甲基化是一个动态的可逆的过程。作为m6A甲基化过程的关键酶，m6A去甲基化酶——脂肪和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)、AlkB同系物5 (AlkB homolog 5,ALKBH5)、ALKBH3的失调能通过多种机制调控胃癌的演进过程，与胃癌的发生发展密切相关。m6A去甲基化酶通过调节信号通路，改变胃癌细胞的增殖和侵袭能力，影响胃癌对化疗药物的耐药性，参与调控胃癌的免疫应答及线粒体代谢，从而影响胃癌细胞的生长，有望成为一个全新的治疗靶点。该文综述了m6A去甲基化酶参与胃癌发生发展的分子机制，以及其表达和功能与胃癌生物学特性的关系，旨在为胃癌的早期诊断和靶向治疗提供新的研究思路。

关键词： N -甲基腺嘌呤脂肪和肥胖相关蛋白 ALKBH5 ALKBH3 胃癌

m^(6)A去甲基化酶在胃癌发生发展中的作用机制研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第2期44卷 271-277页

作者：江爽俞继卫上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科上海200011

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,多数患者发现时已处于晚期,预后不佳。外科手术及化学治疗(化疗仍是目前胃癌的主要治疗方式。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)是近年来肿瘤研究的热点。m^(6)A作为真核生物中最常见的RNA... 详细信息

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,多数患者发现时已处于晚期,预后不佳。外科手术及化学治疗(化疗仍是目前胃癌的主要治疗方式。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)是近年来肿瘤研究的热点。m^(6)A作为真核生物中最常见的RNA修饰形式,可以调控RNA循环的各个阶段,包括RNA剪接、加工、降解和翻译等,从而调控RNA的表达和功能,在细胞分化、发育和代谢等各个环节中发挥关键作用。m^(6)A去甲基化酶可去除RNA上的甲基基团,确保m^(6)A甲基化是一个动态的可逆的过程。作为m^(6)A甲基化过程的关键酶,m^(6)A去甲基化酶——脂肪和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)、AlkB同系物5(AlkB homolog 5,ALKBH5)、ALKBH3的失调能通过多种机制调控胃癌的演进过程,与胃癌的发生发展密切相关。m^(6)A去甲基化酶通过调节信号通路,改变胃癌细胞的增殖和侵袭能力,影响胃癌对化疗药物的耐药性,参与调控胃癌的免疫应答及线粒体代谢,从而影响胃癌细胞的生长,有望成为一个全新的治疗靶点。该文综述了m^(6)A去甲基化酶参与胃癌发生发展的分子机制,以及其表达和功能与胃癌生物学特性的关系,旨在为胃癌的早期诊断和靶向治疗提供新的研究思路。

关键词： N6-甲基腺嘌呤脂肪和肥胖相关蛋白 ALKBH5 ALKBH3 胃癌