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湖北巴东县野生茶树种质资源遗传多样性及种群结构亲缘关系分析

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茶叶科学 2024年第2期44卷 193-206页

作者：崔清梅梁金波马会杰胡双玲陈清华吴立赟何梦迪王留彬谭立才张强王丽鸳恩施土家族苗族自治州农业科学院湖北恩施445000 中国农业科学院茶叶研究所浙江杭州310008 湖北正山堂巴东红茶业有限责任公司湖北巴东444300

野生茶树种质资源具有较高的遗传多样性,是开展茶树品种选育的优质基因库。收集了来自湖北省巴东县的26份野生茶树资源,利用简单重复序列(Simple sequence repeat,SSR)分子标记并结合对照栽培型茶树品种对野生茶树资源的遗传多样性及种... 详细信息

野生茶树种质资源具有较高的遗传多样性,是开展茶树品种选育的优质基因库。收集了来自湖北省巴东县的26份野生茶树资源,利用简单重复序列(Simple sequence repeat,SSR)分子标记并结合对照栽培型茶树品种对野生茶树资源的遗传多样性及种群结构等进行分析。结果如下:(1)16对引物在供试材料中共扩增得到82个等位位点,每对引物扩增所得的等位基因范围为3~8个,平均检测出等位位点5.12个,有效位点数量3.65个,香农多样性指数平均值1.378。(2)从16对引物中筛选出6个核心引物位点,可对26份野生茶树进行有效检测并鉴别。(3)UPGMA进化树将48份材料分为7个类别,野生茶树与栽培型茶树能通过SSR标记进行有效划分;进一步种群遗传结构分析发现26份野生茶树可分为2个亚群。(4)依据生化成分含量,筛选得出2份高EGCG含量的茶树种质资源及2份适制红茶的茶树种质资源。研究结果显示,巴东野生茶树多样性丰富,种群内部遗传变异高,为进一步保护、开发和利用巴东野生茶树种质资源奠定了基础。

关键词：野生茶树多样性简单重复序列亲缘关系

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基于近红外的PLS量化模型鉴定西湖龙井真伪的研究

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光谱学与光谱分析 2009年第5期29卷 1251-1254页

作者：周健成浩贺巍王丽鸳吴迪农业部茶叶化学工程重点开放实验室中国农业科学院茶叶研究所浙江杭州310008 南京农业大学江苏南京210095

对西湖龙井进行原产地精确鉴定是规范市场,打击假冒伪劣的迫切需求。文章利用近红外技术对西湖龙井的真伪鉴定进行了研究,提出了一种模型以进行西湖龙井鉴别的新方法。结果表明,利用西湖龙井茶和其他地区以龙井加工工艺制成的扁形茶全... 详细信息

对西湖龙井进行原产地精确鉴定是规范市场,打击假冒伪劣的迫切需求。文章利用近红外技术对西湖龙井的真伪鉴定进行了研究,提出了一种模型以进行西湖龙井鉴别的新方法。结果表明,利用西湖龙井茶和其他地区以龙井加工工艺制成的扁形茶全区域的近红外原始光谱,分别对其进行赋值,采用PLS法建立了西湖龙井的预测模型(主成分数为15),通过预测值和西湖龙井的临界值进行比对实现了对西湖龙井的真伪的准确鉴定。对70份定标样品和24份外部验证未知样品鉴定结果的准确率都达到了100%,证明利用定量分析的PLS法建立的模型能有效准确地进行西湖龙井的真伪鉴定。

关键词：近红外光谱鉴定偏最小二乘法西湖龙井

低分子量尿激酶与Annexin V融合基因在家蚕杆状病毒表达载体系统中的表达研究

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低分子量尿激酶与Annexin V融合基因在家蚕杆状病毒表达载体系统...

作者：王丽鸳浙江大学

学位级别：硕士

低分子量尿激酶[prourokinase (144-411), pro-UK (144-411)]是尿激酶原(prourokinase, pro-UK) 的一种衍生物，由pro-UK的144-411位氨基酸残基组成，与pro-UK具有相似的溶栓性质。膜联蛋白 V (Annexin V) 是从人胎盘及脐动脉内皮细胞... 详细信息

低分子量尿激酶[prourokinase (144-411), pro-UK (144-411)]是尿激酶原(prourokinase, pro-UK) 的一种衍生物，由pro-UK的144-411位氨基酸残基组成，与pro-UK具有相似的溶栓性质。膜联蛋白 V (Annexin V) 是从人胎盘及脐动脉内皮细胞提取的一种分子量为36kD的钙结合蛋白，具有很好的抗栓作用，用于血栓治疗有一定的发展前景。为了获得具有靶向性的抗凝和溶栓双功能分子，利用基因工程方法，对低分子量尿激酶和 Annexin V 进行融合表达。为了使低分子量尿激酶和 Annexin V在融合蛋白中保持正确的构象，用抗凝物质水蛭素的功能片段——水蛭素12肽作为连接片段，N端是低分子量尿激酶，C端是Annexin V，并在家蚕杆状病毒载体表达系统中进行了表达。首先将低分子量尿激酶与 Annexin V 融合基因重组到家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中，获得重组转移载体 pBacPAK-UKAV，并与线性化的病毒 Bm-PAK6 DNA共转染家蚕细胞，获得重组病毒 BacPAK-UKAV。将重组病毒 BacPAK-UKAV 以10pfu／细胞感染家蚕家蚕培养细胞和幼虫，Western印迹方法表明表达产物大小约为70kD。用纤维蛋白平板溶圈法测定表达产物的纤溶活性，结果显示：家蚕培养细胞的胞内表达产物具有明显的纤溶活性，约为100 U／2×10～6细胞;重组病毒感染 BacPAK-UKAV 家蚕培养细胞第48 h 的胞外表达产物没有纤溶活性;BacPAK-UKAV 感染的家蚕幼虫的蚕血淋巴也具有明显的纤溶活性，约为100U／ml。用APTT法测定表达产物的抗凝活性，家蚕细胞中的表达产物使APTT时间延长了40秒，幼虫表达产物使APTT时间延长了15秒，比野生病毒Bm-PAK6感染表达产物的 APTT 时间延长了一倍以上，表现出明显的抗凝活性。体外实验表明家蚕培养细胞和幼虫表达的重组低分子量尿激酶与 Annexin V 融合蛋白具有溶栓与抗凝双功能。

关键词：低分子量尿激酶膜联蛋白V 家蚕杆状病毒载体表达系统靶向溶栓

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茶树DNA分子标记及基因工程研究进展

茶叶科学 2004年第1期24卷 12-17页

作者：王丽鸳成浩周健农业部茶叶化学工程重点实验室中国农业科学院茶叶研究所浙江杭州310008

综述了近年来DNA分子标记在茶树品种(系)鉴定和分类、茶树遗传图谱构建、茶树遗传多样性分析等方面的应用,以及茶树目的基因(片断)的分离克隆、茶树遗传转化等基因工程方面的研究状况,并对茶树DNA分子标记及基因工程研究中存在的问题进... 详细信息

综述了近年来DNA分子标记在茶树品种(系)鉴定和分类、茶树遗传图谱构建、茶树遗传多样性分析等方面的应用,以及茶树目的基因(片断)的分离克隆、茶树遗传转化等基因工程方面的研究状况,并对茶树DNA分子标记及基因工程研究中存在的问题进行了总结,分析了今后的发展趋势。

关键词：茶树 DNA分子标记基因工程种质资源遗传图谱遗传多样性

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近红外技术在茶叶上的研究进展

茶叶科学 2008年第4期28卷 294-300页

作者：周健成浩王丽鸳国家茶树改良中心中国农业科学院茶叶研究所浙江杭州310008

主要介绍了国内外近红外检测分析技术在茶叶上的研究的进展情况,分析了目前近红外技术与其他检测分析相比存在的优缺点及限制其发展的主要原因,对近红外技术在茶叶上的应用前景和方向作出了展望,为近红外技术在茶叶上的应用和发展提供... 详细信息

主要介绍了国内外近红外检测分析技术在茶叶上的研究的进展情况,分析了目前近红外技术与其他检测分析相比存在的优缺点及限制其发展的主要原因,对近红外技术在茶叶上的应用前景和方向作出了展望,为近红外技术在茶叶上的应用和发展提供参考依据。

关键词：近红外定量分析判别茶叶

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茶树春季发芽期的QTL定位及候选基因分析

茶叶科学 2023年第6期43卷 747-756页

作者：王留彬吴立赟韦康王丽鸳中国农业科学院茶叶研究所国家茶树改良中心浙江杭州310008

春季发芽期(Timing of spring bud flush,TBF)是茶树重要的农艺性状,对茶叶的风味品质和经济效益均具有重要的影响。为了挖掘调控茶树TBF性状的关键候选基因,以龙井43×白毫早杂交的F1群体327株子代为材料,利用基于该群体构建的茶树高... 详细信息

春季发芽期(Timing of spring bud flush,TBF)是茶树重要的农艺性状,对茶叶的风味品质和经济效益均具有重要的影响。为了挖掘调控茶树TBF性状的关键候选基因,以龙井43×白毫早杂交的F1群体327株子代为材料,利用基于该群体构建的茶树高密度遗传图谱,采用MapQTL 6.0和GACD 1.2软件对茶树春季发芽指数(Sprouting indexs,SPI)进行数量性状基因座(QTL)定位。连续两年(2022、2023年)对群体子代的春季SPI进行观测,结果显示,SPI在F1群体内存在明显的性状分离,表现出数量性状的特征。利用MapQTL6.0软件定位到1个主效的QTL(qSPI-5-1),分别可解释18.30%(2022年)和7.60%(2023年)的表型变异;利用GACD1.2软件定位到2个稳定的QTL位点(qSPI-1,qSPI-5-2),解释2.75%~18.40%的表型变异,且qSPI-5-2与qSPI-5-1位点基本重合。进一步将上述3个位点的置信区间与茶树参考基因组进行比对,通过基因功能注释分析共筛选到23个与调控茶树春季发芽期相关的候选基因。研究结果为进一步探究茶树春季萌发的调控基因和分子机理提供了理论参考。

关键词：茶树春季发芽期数量性状基因座候选基因

沙门菌属外膜蛋白(OMP)的分子免疫学研究进展

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中国人兽共患病杂志 2003年第4期19卷 106-108,114页

作者：王丽鸳朱成钢张耀洲浙江大学生物化学研究所杭州310029

沙门菌属隶属于肠杆菌科，是当前研究得较为深入的一类革兰氏阴性细菌。1880年由Eberth提出，1884年Gaffky率先培养成功。其特性和大肠埃希菌相似，是具有周鞭毛的革兰阴性杆菌。主要可引起人类热肠病、食物中毒和败血症类等疾病。近几... 详细信息

沙门菌属隶属于肠杆菌科，是当前研究得较为深入的一类革兰氏阴性细菌。1880年由Eberth提出，1884年Gaffky率先培养成功。其特性和大肠埃希菌相似，是具有周鞭毛的革兰阴性杆菌。主要可引起人类热肠病、食物中毒和败血症类等疾病。近几年，随着分子免疫学技术和基因检测手段的发展，对沙门菌属的外膜蛋白（outer membrane protein,以下简称为OMP）的研究也趋于热门。

关键词：沙门菌属外膜蛋白 OMP 分子免疫学研究进展

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茶树组培快繁技术的优化研究

茶叶科学 2005年第3期25卷 172-176页

作者：周健成浩王丽鸳农业部茶叶化学工程重点实验室中国农业科学院茶叶研究所浙江杭州310008

本文试验分析了激素对茶树组培快繁中芽增殖和生长的影响,优化得到适宜的茶树组培苗增殖条件是:MS+BA2.0+NAA0.1+GA33.0mg/L。该条件下培养30d,茶树组培苗的增殖率可达2.75倍左右,高度大于5cm的小苗成苗率在20%以上。

关键词：茶树组织培养增殖成苗

激素处理对茶树组培苗温室内直接诱导生根的影响

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茶叶科学 2005年第4期25卷 265-269页

作者：周健成浩王丽鸳农业部茶叶化学工程重点开放实验室中国农业科学院茶叶研究所浙江杭州310008

采用不同的激素种类、浓度和浸蘸时间诱导茶树组培苗在温室内生根,观察不同激素强度作用下生根率的动态变化,通过优化技术参数,建立组培苗的温室直接生根技术体系。结果表明,在100mg/L的IBA短时浸蘸处理70天后,小苗的成活率为66.7%,生... 详细信息

采用不同的激素种类、浓度和浸蘸时间诱导茶树组培苗在温室内生根,观察不同激素强度作用下生根率的动态变化,通过优化技术参数,建立组培苗的温室直接生根技术体系。结果表明,在100mg/L的IBA短时浸蘸处理70天后,小苗的成活率为66.7%,生根率达到60%,约为成活小苗的90%左右,平均发根数为9.4条,根长为3.64cm。该技术的建立有助于实现茶树组织培养快速繁殖工厂化育苗技术的商业化推广。

关键词：茶树组织培养生根生长素