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基于Ypt1靶标的非洲菊隐地疫霉TaqMan探针实时荧光定量PCR检测

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微生物学通报 2024年

作者：王丽花孙爱青张艺萍许凤杨秀梅云南省农业科学院花卉研究所云南省花卉育种重点实验室国家观赏园艺工程技术研究中心云南大学资源植物研究院.农学院

【背景】隐地疫霉(Phytophthora cryptogea P.)是一种可危害多种植物且危害症状较为严重的检疫性病原卵菌，在世界范围内危害严重。【目的】建立一种特异性强、灵敏度高且能定量分析P. cryptogea携带情况的高效检测方法。【方法】根据... 详细信息

【背景】隐地疫霉(Phytophthora cryptogea P.)是一种可危害多种植物且危害症状较为严重的检疫性病原卵菌，在世界范围内危害严重。【目的】建立一种特异性强、灵敏度高且能定量分析P. cryptogea携带情况的高效检测方法。【方法】根据隐地疫霉Ypt1基因的保守序列设计并筛选实时荧光定量PCR的特异性引物和探针，在优化引物浓度、探针浓度和退火温度的基础上获得最优反应体系和条件，利用最优反应条件构建标准曲线及检测体系，并对构建的检测体系特异性、灵敏性和重复性进行验证。【结果】综合考虑Cq值、最终荧光信号值(relative fluorescence units， RFU)和经济角度，优化后的隐地疫霉荧光定量PCR最佳退火温度为60 ℃、上下游引物浓度为20 μmol/L、探针浓度为10 μmol/L；所建立的标准曲线线性方程y=-3.323x+40.767相关系数(R2)为0.998，扩增效率(E)为99.9%，相关性好、扩增效率高；对其他8种常见卵菌及真菌均无扩增曲线，表明所设计的引物探针组合特异性强；灵敏度检测结果显示最低检出限为1 copy，最低稳定检出限为10 copies，相较于常规PCR技术灵敏度提高了10-100倍；同浓度批组内和批组间重复性试验Cq值标准差为0.04-0.13，变异系数(coefficient of variation， CV)为0.20%-0.58%，重复性及稳定性好，可靠性高。【结论】本研究基于Ypt1靶标建立了非洲菊隐地疫霉TaqMan实时荧光定量PCR检测技术体系，可高效特异地鉴别出疫霉属中广泛侵染非洲菊的隐地疫霉病菌，对于口岸通关和田间隐地疫霉的快速高效检测，尤其是原原种、原种等核心材料的痕量病原菌的检测鉴定和病害早期精准诊断及有效防控意义重大，应用前景广阔。

关键词：非洲菊隐地疫霉 Ypt1基因实时荧光定量PCR TaqMan探针

欧美发达国家城镇化发展和投融资模式的经验性做法及其借鉴

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商业经济研究 2017年第6期 181-182页

作者：王丽青邹柏松大同大学山西大同037009 交通银行湖北省分行投资银行部武汉430000

城镇化水平是衡量一个国家发展进程的重要指标,我国的城镇化建设正进入一个全新的发展阶段。本文通过对欧美等发达国家城镇化发展模式的分析,尤其是其城镇化过程中投融资模式的解读,总结出欧美等发达国家在城镇化发展中的一些经验,为我... 详细信息

城镇化水平是衡量一个国家发展进程的重要指标,我国的城镇化建设正进入一个全新的发展阶段。本文通过对欧美等发达国家城镇化发展模式的分析,尤其是其城镇化过程中投融资模式的解读,总结出欧美等发达国家在城镇化发展中的一些经验,为我国下一阶段的城镇化发展提供可以借鉴的方式方法。我国的城镇化较之发达国家存在着明显的时间上的落后,故本文还重点分析了发达国家城镇化发展过程中的几个关键的转折点,避免在我国的城镇化发展过程中重蹈发达国家覆辙。

关键词：城镇化经济水平多元化投融资

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眼眶内脓肿的误诊

实用眼科杂志 1989年第5期7卷 313-313,316页

作者：王丽青童蟾素浙江省中医院眼科

绊××男16岁1985年2月6日初诊。右眼球突出1个多月。在外地诊断右眼眶肿瘤,曾用抗菌素、激素治疗无效。视力右眼1.0,左眼1.5。右眼球正前突出,突出度右11mm,左14mm,眶距89mm。右眼外展轻度受限。眼前节正常。视神经乳头边界清,静脉轻... 详细信息

绊××男16岁1985年2月6日初诊。右眼球突出1个多月。在外地诊断右眼眶肿瘤,曾用抗菌素、激素治疗无效。视力右眼1.0,左眼1.5。右眼球正前突出,突出度右11mm,左14mm,眶距89mm。右眼外展轻度受限。眼前节正常。视神经乳头边界清,静脉轻度扩张,后极部视网膜反光强,黄斑部中心反光(+)。左眼正常。X 线眼眶正侧位及付鼻突片均无异常发现。

关键词：眼眶脓肿眼眶病

全球入侵物种马铃薯块茎蛾生态位转移及适生区扩展

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应用生态学报 2024年第3期35卷 797-805页

作者：王丽丽杨采青王瑛李欣海万方浩张爱兵首都师范大学生命科学学院北京100048 中国科学院动物研究所北京100101 中国农业科学院深圳基因组研究所广东深圳518120

马铃薯块茎蛾是一种全球性检疫害虫,也是马铃薯的主要害虫,对其进行早期预警和检测非常重要。本研究从3个维度,即原产地南美洲与整个入侵地(以除南美洲以外的所有分布地为整体)之间、原产地南美洲与5个入侵大洲(北美洲、大洋洲、亚洲、... 详细信息

马铃薯块茎蛾是一种全球性检疫害虫,也是马铃薯的主要害虫,对其进行早期预警和检测非常重要。本研究从3个维度,即原产地南美洲与整个入侵地(以除南美洲以外的所有分布地为整体)之间、原产地南美洲与5个入侵大洲(北美洲、大洋洲、亚洲、非洲和欧洲)之间、原产地南美洲与入侵地中国之间的气候生态位变化,分析了马铃薯块茎蛾在入侵期间的气候生态位保守性,并构建了该害虫在当前和未来气候情景下在其原产地和入侵地(中国)的生态位模型。结果表明:该害虫的气候生态位在上述地区均发生了不同程度的扩张,说明该害虫在入侵过程中能适应新的入侵地环境。马铃薯块茎蛾的适生区几乎遍布整个南美州;在中国,其适生区主要集中在山东、河北、天津、北京、河南、湖北、云南、贵州、四川、海南、广西北部、湖南南部、安徽、广东、江苏、山西和陕西的南部,随着温室气体排放浓度增加,全球气温升高,其适生区将在低纬度地区减少,逐渐向高纬度地区扩展,具体表现为:北部向辽宁、吉林、内蒙古东南部扩展,西部向四川及青藏高原东南部延伸,而云贵高原东南部、海南岛及长江以南等地区的适生区逐渐减少。与当前气候条件相比,未来气候条件下我国马铃薯块茎蛾适生区总面积呈增加趋势,在2081—2100年,在ssp126、ssp370和ssp5853种温室气体排放情景下,其适生区面积分别增加27.78、165.54、140.41 hm^(2)。因此,迫切需要提高警惕,严防马铃薯块茎蛾危害的进一步扩展。

关键词：马铃薯块茎蛾马铃薯生态位转移生物入侵适生区

基于凸壳技术的Delaunay三角网生成算法

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计算机工程与应用 2006年第6期42卷 27-29页

作者：陈学工陈树强王丽青中南大学信息科学与工程学院长沙410083 中南大学信息物理工程学院长沙410083

该文提出了一种针对散乱点集的快速构建Delaunay的算法。该算法首先对散乱点按有向角进行排序,以排序后的点顺序为基础,利用凸壳特性快速将散乱点联结成三角网,最后利用拓扑结构快速将其优化为Delaunay三角网。在联网过程中,充分利用有... 详细信息

该文提出了一种针对散乱点集的快速构建Delaunay的算法。该算法首先对散乱点按有向角进行排序,以排序后的点顺序为基础,利用凸壳特性快速将散乱点联结成三角网,最后利用拓扑结构快速将其优化为Delaunay三角网。在联网过程中,充分利用有序点子集的凸壳特性,避免了所有的交点测试,从而保证了对散乱点集生成Delaunay三角网的效率。

关键词： Delaunay三角剖分凸壳计算几何

布拉酵母菌散辅助治疗婴儿胆汁淤积性肝病疗效观察

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药物流行病学杂志 2014年第3期23卷 145-147页

作者：王丽青义乌市妇幼保健院儿科

目的:观察布拉酵母菌散治疗婴儿胆汁淤积性肝病的临床疗效。方法:126例胆汁淤积性肝病患儿分为观察组和对照组各63例。对照组给予护肝、利胆退黄等基础治疗,观察组在对照组治疗基础上加用布拉酵母菌散,疗程均为4周。比较两组患儿黄疽消... 详细信息

目的:观察布拉酵母菌散治疗婴儿胆汁淤积性肝病的临床疗效。方法:126例胆汁淤积性肝病患儿分为观察组和对照组各63例。对照组给予护肝、利胆退黄等基础治疗,观察组在对照组治疗基础上加用布拉酵母菌散,疗程均为4周。比较两组患儿黄疽消退、肝脾回缩时间以及肝功能指标的变化,总体评价其临床疗效。结果:治疗后两组惠儿在黄疸消退、肝脾回缩等均有明显好转,观察组好转时间较对照组明显缩短(P<0.05);治疗后,观察组血清肝功能TBIL、DBIL、TBA、ALP、GGT等指标均明显下降,除ALT,其他肝功能指标均优于对照组(P<0.05和P<0.01);观察组显效率、总有效率均明显高于对照组(P<0.01);巨细胞病毒感染引起的胆汁淤积性肝病患儿中,观察组不良反应发生率明显少于对照组(P<0.01)。结论:布拉酵母菌散联合基础治疗能改善胆汁淤积性肝病婴儿肝脏功能,加速黄疸消退,同时还能减轻治疗过程中的不良反应。

关键词：布拉酵母菌散胆汁淤积性肝病巨细胞病毒疗效

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AS/RS中的移动供电解决方案

物流技术与应用 2009年第2期14卷 99-101页

作者：王丽青法勒移动供电贸易(上海)有限公司

在AS/RS系统中,应用VAHLE公司的移动供电解决方案、移动通讯系统及绝对定位系统,实现了集成供电、通讯及定位三大功能,简化了控制系统和整体的机械结构设计。

关键词： AS/RS 移动供电移动通讯

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从崇拜学角度浅论教堂建筑

天风 2010年第10期 52-55页

作者：王丽青

如雨后春笋般在各地拔地而起的教堂,见证了神的荣耀和中国教会的蒙福。但让教堂真正能成为一个崇拜神的地方还需要各地教会的加倍努力。而今的一些教堂建筑过于注重其功能性,过多地为了各个不同的聚会活动考虑,

关键词：教堂建筑崇拜中国教会

高龄脑卒中患者安全预见性护理的方法及效果观察

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高龄脑卒中患者安全预见性护理的方法及效果观察