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温差对铁皮石斛松柏苷、紫丁香苷影响及相关基因表达分析

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温差对铁皮石斛松柏苷、紫丁香苷影响及相关基因表达分析

作者：王丛巧福建农林大学

学位级别：硕士

铁皮石斛(Dendrobium catenatum)是兰科石斛属植物,九大仙草之首,富含多糖、黄酮、生物碱、松柏苷、紫丁香苷、丁香醛等次生代谢产物。使用原球茎代替成苗进行次生代谢产物生产,是实现野生石斛资源可持续利用的有效方式之一。温度是植... 详细信息

铁皮石斛(Dendrobium catenatum)是兰科石斛属植物,九大仙草之首,富含多糖、黄酮、生物碱、松柏苷、紫丁香苷、丁香醛等次生代谢产物。使用原球茎代替成苗进行次生代谢产物生产,是实现野生石斛资源可持续利用的有效方式之一。温度是植物体内物质积累的重要影响因子,昼夜温差对作物光合、生理特性、花芽分化、物质积累及产量品质等方面均有显著影响。本文以铁皮石斛原球茎为材料,优化了铁皮石斛原球茎增殖体系;建立了同时测定铁皮石斛中松柏苷、紫丁香苷的方法;分离了DcF5H、DcCOMT、DcCAD基因cDNA序列及DcCAD基因启动子序列;通过定量PCR分析了DcF5H、DcCOMT、DcCAD表达量的变化与松柏苷、紫丁香苷含量在不同温差处理下的相互关系。主要研究结果如下:1铁皮石斛原球茎增殖条件优化以铁皮石斛原球茎为材料,1/2 MS+50 g/L土豆泥为基础培养基,研究碳源、氨基酸以及不同培养方式对其增殖的影响。结果表明:添加葡萄糖为碳源,原球茎团块细小,颜色呈绿色,无分化,30 d时增殖系数为3.75,利于原球茎增殖;基础培养基添加氨基酸不利于原球茎增殖;悬浮培养铁皮石斛原球茎30 d时,原球茎增殖系数为固体培养的2倍,故悬浮培养可以作为提高其增殖系数的手段;25/21℃昼夜温差能够推迟分化有利于铁皮石斛原球茎的增殖。综上可得,在4℃昼夜温差条件下,使用1/2 MS+50 g/L土豆泥+25 g/L葡萄糖的培养基进行悬浮培养,最适合铁皮石斛原球茎增殖。2 UPLC法测定铁皮石斛原球茎中松柏苷、紫丁香苷建立超高效液相色谱同时测定铁皮石斛中松柏苷、紫丁香苷的方法,为探究昼夜温差对铁皮石斛影响的后续研究提供技术支持。液相色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为1%乙酸水溶液(A)/甲醇(C),流速:0.20 mL/min,柱温35℃;进样量为5.0μL。梯度洗脱条件为起始0%A;0 min,80%A;3 min,80%A;80 min,95%A。定量波长为283 nm。两种物质在10 min内完全分离。正交试验研究表明用纯水提取,料液比1:40,提取1 h(每0.5 h震荡一次),两种物质提取率最高。采用以上方法测定四个昼夜温差处理的原球茎样品,结果表明,最利于松柏苷积累的温差是25/21℃,处理15 d,松柏苷含量最高为204.78mg/kg,是对照的1.33倍。最利于紫丁香苷积累的温差是25/17℃,处理10 d,紫丁香苷含量最高为27.04 mg/kg,是对照的2.02倍。昼夜温差影响铁皮石斛原球茎松柏苷、紫丁香苷含量,温差适当起促进作用,温差过大则抑制。3铁皮石斛DcF5H、DcCOMT、DcCAD基因克隆及生物信息学分析本研究以铁皮石斛原球茎为材料,采用PCR技术对DcF5H、DcCOMT、DcCAD进行全长克隆。结果表明:DcF5H的ORF长1 536bp,编码511个氨基酸,亚细胞定位预测其定位于细胞基质。DcF5H有细胞色素P450蛋白保守结构域,属于氧化酶系蛋白。DcCOMT的ORF长1 086 bp,编码361个氨基酸,亚细胞定位预测DcCOMT位于细胞质,DcCOMT有7个保守结构域,这些保守结构域可能具有甲基转移的功能。DcCAD的ORF长641 bp,编码216个氨基酸,亚细胞定位预测DcCAD位于线粒体,含有典型的乙醇脱氢酶保守结构域和NAD(P)结合保守结构域,可以推测该蛋白质具有还原酶的特性。进一步对DcCOMT密码子偏好性进行分析。结果显示,铁皮石斛DcCOMT的ENC值、GC含量以及GC3分别为49、0.452和0.396,表明其密码子偏好性较弱,偏好使用A或T结尾的密码子;突变压力是DcCOMT密码子偏好性形成的主要作用力;铁皮石斛DcCOMT基因和同为兰科植物的香味蝴蝶兰(Phalaenopsis bellina)亲缘关系最近,两者的GC1s、GC2s、GC3s、GC、CAI和ENC也较为相近,表明物种进化关系上越相近其密码子偏好性也较为相似。此外,从密码子使用频率分析得出酵母菌真核表达系统适合铁皮石斛DcCOMT基因的异源表达,模式植物烟草、番茄可以作为其遗传转化受体。获得铁皮石斛DcCAD基因启动子序列。扩增得到该基因的启动子序列2 003 bp,DcCAD的启动子分析表明:该基因转录起始区域位于-147197,转录起始位点为位于-156 bp的G,该启动子含有多个光响应元件、激素应答元件、生长与代谢调控元件以及昼夜调控相关的元件,推测DcCAD可能参与铁皮石斛体内多种激素信号转导、防卫反应及其他生长代谢过程。4铁皮石斛DcF5H、DcCOMT、DcCAD基因的定量表达分析在25/25℃、25/21℃、25/17℃、25/13℃处

关键词：铁皮石斛原球茎 UPLC DcF5H DcCOMT DcCAD

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温差对铁皮石斛原球茎生长及药用成分的影响

园艺与种苗 2022年第2期42卷 20-23页

作者：陈青青王丛巧赖钟雄福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建福州350002 福建农林大学园艺学院福建福州350002

[目的]探讨温差对铁皮石斛原球茎生长及药用成分的影响。[方法]以25℃/13℃为处理温差,恒温25℃/25℃(培养室最常用温度)为对照,昼夜温度设置各12 h,观察和测定铁皮石斛原球茎在0~50 d内的生长情况、生物量、多糖含量、多糖总量、生物... 详细信息

[目的]探讨温差对铁皮石斛原球茎生长及药用成分的影响。[方法]以25℃/13℃为处理温差,恒温25℃/25℃(培养室最常用温度)为对照,昼夜温度设置各12 h,观察和测定铁皮石斛原球茎在0~50 d内的生长情况、生物量、多糖含量、多糖总量、生物碱的变化。[结果]温差有利于铁皮石斛PLBs的增殖、促进生物量增加和多糖积累,长时间的恒温处理则有利于生物碱积累。[结论]该研究为原球茎替代野生植株进行工厂化生产提供了依据。

关键词：铁皮石斛原球茎温差多糖生物碱

现代佛教文学的契理契机——以佛教小说真实观的建构为例

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宗教学研究 2024年第2期 113-119页

作者：王丛阳河南大学文学院

现代佛教小说是佛教文学中最为特殊的一部分,它是僧尼、信众的作家意识与信徒意识相博弈的结果。20世纪初,作为宣传工具的现代小说进入僧尼、信众视野,成为宣扬佛法、革新佛教的全新手段。然而小说尚虚构、佛教戒妄语,创作小说有悖于戒... 详细信息

现代佛教小说是佛教文学中最为特殊的一部分,它是僧尼、信众的作家意识与信徒意识相博弈的结果。20世纪初,作为宣传工具的现代小说进入僧尼、信众视野,成为宣扬佛法、革新佛教的全新手段。然而小说尚虚构、佛教戒妄语,创作小说有悖于戒律。于是僧尼、信众在教义范畴内进行主动调适,建构起独特的小说真实观,以此来消除破戒所招致的指责及内心的惶恐。佛教小说在20世纪初的发展很好地体现了中国佛教“契理契机”的原则。

关键词：佛教小说真实观契理契机

交易费用政治学的反思与发展:交易价值理论的阐述

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北京行政学院学报 2024年第3期 44-51页

作者：王丛虎侯宝柱中国人民大学公共管理学院北京100872 延安大学政法与公共管理学院陕西延安716000

交易费用理论试图用单一的经济指标“成本”来解释纷繁复杂的政治社会现象,这一思路本身就具有局限性。对于更加复杂的公共领域而言,试图仅仅应用成本最小化的单一经济价值目标来解释说明,不仅片面、狭隘,甚至根本无法逻辑自洽,更谈不... 详细信息

交易费用理论试图用单一的经济指标“成本”来解释纷繁复杂的政治社会现象,这一思路本身就具有局限性。对于更加复杂的公共领域而言,试图仅仅应用成本最小化的单一经济价值目标来解释说明,不仅片面、狭隘,甚至根本无法逻辑自洽,更谈不上能够指引公共领域的实践。公共领域的政治和行政问题需要回归到价值理性层面,应该适用公共价值的解释体系。交易价值理论认为公共领域交易行为应该是公共价值调和、公共价值排序、公共价值认同的过程,其最终目的是实现与交易行为相适配的最优公共价值。公共治理其实是一个公共价值交易与达成的过程。

关键词：交易费用交易费用政治学交易价值理论公共价值

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思想政治教育学科政策演进40年:历程、特征与发展趋势

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学校党建与思想教育 2024年第9期 43-50页

作者：王丛丛巩红新哈尔滨工程大学马克思主义学院黑龙江哈尔滨150006 鲁东大学马克思主义学院山东烟台264025

学科政策在思想政治教育学科建设中发挥着重要的导向与保障作用。思想政治教育学科政策经过40年的发展,呈现出政策制定主体良性互动、政策价值取向逐渐保持适度张力、政策内容趋向系统建构、政策执行机制不断健全等演进特征。新的发展阶... 详细信息

学科政策在思想政治教育学科建设中发挥着重要的导向与保障作用。思想政治教育学科政策经过40年的发展,呈现出政策制定主体良性互动、政策价值取向逐渐保持适度张力、政策内容趋向系统建构、政策执行机制不断健全等演进特征。新的发展阶段,推动思想政治教育学科政策创新发展,要从深入开展学科政策调研、完善学科政策评估制度、优化学科政策环境、构建中国特色自主学科政策体系四个维度用力。

关键词：思想政治教育学科政策演进发展趋势

基于环境DNA技术的南极欺骗岛海域鱼类物种多样性

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水产学报 2024年第08期 114-124页

作者：俞晔伟刘洋朱国平王丛丛上海海洋大学海洋科学学院上海海洋大学大洋渔业资源可持续开发教育部重点实验室上海海洋大学国家远洋渔业工程技术研究中心上海海洋大学农业农村部大洋渔业开发重点实验室上海海洋大学农业农村部大洋渔业资源环境科学观测实验站

欺骗岛是位于南极南设得兰群岛西南方向的火山岛，该岛附近海域受岛上活火山的影响显著，生物资源丰富。为探究该海域内鱼类物种组成，本实验通过对欺骗岛海域环境DNA (eDNA)样本采集、高通量测序开展鱼类物种多样性研究。结果显示，从... 详细信息

欺骗岛是位于南极南设得兰群岛西南方向的火山岛，该岛附近海域受岛上活火山的影响显著，生物资源丰富。为探究该海域内鱼类物种组成，本实验通过对欺骗岛海域环境DNA (eDNA)样本采集、高通量测序开展鱼类物种多样性研究。结果显示，从欺骗岛海域5个采样站点的环境样本中共检测出南极鱼类1目6科23属31种，调查得到的大部分鱼类物种均在以往南极传统渔业资源调查中出现。eDNA序列相对丰度最高的鱼类物种为裘氏鳄头冰鱼和花纹南极鱼，分别占鱼类总丰度的53.52%和28.27%。近岸站点和远岸站点间的α和β多样性的各项指数差异较大，但远岸站点间鱼类物种组成相差不大。研究表明，环境DNA技术作为传统渔业调查方法的补充，对环境干扰小，可以对欺骗岛海域鱼类物种多样性进行快速检测。本研究结果可为欺骗岛海域的鱼类多样性监测和渔业资源管理与保护提供数据支持。

关键词：鱼类环境DNA (eDNA) 渔业资源物种多样性欺骗岛

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中医“治未病”干预糖尿病高危足的临床研究

辽宁中医杂志 2024年

作者：李秀贞王丛香王猛河北省沧州中西医结合医院内分泌糖尿病一科河北省沧州中西医结合医院骨科院区糖尿病科

目的分析中医“治未病”干预糖尿病高危足的效果。方法 2020年1月～2022年3月河北省沧州中西医结合医院糖尿病一科收治的糖尿病高危足患者120例，通过随机数字表法分为对照组（60例）与联合组（60例）。对照组在常规降糖治疗的基础上... 详细信息

目的分析中医“治未病”干预糖尿病高危足的效果。方法 2020年1月～2022年3月河北省沧州中西医结合医院糖尿病一科收治的糖尿病高危足患者120例，通过随机数字表法分为对照组（60例）与联合组（60例）。对照组在常规降糖治疗的基础上，给予胰激肽原酶肠溶片、甲钴胺片治疗，联合组在对照组基础上给予中医“治未病”（低频脉冲、足浴）治疗，两组均治疗32周。比较两组治疗32周后临床疗效，治疗前、治疗32周后症状评分、足部血流指标、感觉及神经功能、疾病相关血清指标，治疗期间安全性。结果治疗32周后，联合组在两组中总有效率更高（95.00%vs80.00%，P<0.05）。与治疗前比较，治疗32周后两组中医症状评分（主症、次症、舌象、脉象）、多伦多临床神经病变评分（TCSS）评分，震动感觉阈值，血清C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平降低，且联合组更低（P<0.05）。与治疗前比较，治疗32周后，两组踝肱指数（ABI）、足背动脉血流量、足部皮温、腓总神经传导速度、腓肠神经传导速度，血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平升高，且联合组更高（P<0.05）。治疗过程中均无血常规、尿常规、肝功能、肾功能及心电图的异常等不良反应发生。结论中医“治未病”干预糖尿病高危足的效果较好，可改善临床症状，改善足部血流指标、感觉及神经功能，调节疾病相关血清指标表达，安全性良好。

关键词：糖尿病高危足治未病血流指标感觉功能神经功能血清指标

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公共资源交易平台组织的类型化及发展趋势

中国高校社会科学 2024年第4期 106-115,158页

作者：王丛虎门钰璐中国人民大学公共管理学院中国人民大学公共资源交易研究中心北京100872 清华大学社会科学学院北京100084

公共资源交易平台伴随着中国市场经济和数字政府的兴起而发展,且具有鲜明的中国特色。公共资源交易平台有效运行既是公共资源市场化配置体制改革的重要标志,也是实现公共资源有效配置的重要抓手。在公共资源市场化改革过程中,公共资源... 详细信息

公共资源交易平台伴随着中国市场经济和数字政府的兴起而发展,且具有鲜明的中国特色。公共资源交易平台有效运行既是公共资源市场化配置体制改革的重要标志,也是实现公共资源有效配置的重要抓手。在公共资源市场化改革过程中,公共资源交易平台组织呈现同质异构的包容性、多样性发展格局。基于中国实践可以将公共资源交易平台组织类型化,从政府主导和市场主导两个维度出发,公共资源交易平台组织存在行政性、公益性、混合性以及市场性四种类型。不同类型的公共资源交易平台组织,由于其所在地方的资源禀赋不同,其发展趋势也不尽相同。鉴于当下建设全国统一大市场和进一步优化营商环境的要求,应强化发挥公共资源交易平台组织的中枢纽带作用,并为事业单位改革乃至公共组织改革提供理论指引和实践参考。

关键词：公共资源交易平台公共资源交易中心公共组织中国特色组织类型

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照护的手艺:医方情感支持如何促成患方信任

社会科学 2024年第3期 141-152页

作者：吕小康王丛汪新建南开大学社会学院社会心理学系天津商业大学法学院心理学系福州大学人文社会科学学院

虽然调查数据显示近些年来中国民众对就医或住院过程的评价已出现好转趋势,但公众自身的实际感受并不一定与此同步。这与现代医学强调医疗体制和技能提升以改善医患关系的医患信任塑造模式有关,这一模式未能充分满足患方就医时的多种情... 详细信息

虽然调查数据显示近些年来中国民众对就医或住院过程的评价已出现好转趋势,但公众自身的实际感受并不一定与此同步。这与现代医学强调医疗体制和技能提升以改善医患关系的医患信任塑造模式有关,这一模式未能充分满足患方就医时的多种情感诉求,也未能充分彰显医方的情感照护技艺对患方情感信任的促成作用。基于A市某医院儿童血液病中心的参与观察研究发现,医方常在医院的制度化安排之外为患儿家长提供情感支持,以助其减少消沉情绪、缓解治疗恐惧和歧视感知、宣泄负面情绪,或是帮助无法治愈的患儿家庭以更少的痛苦走过生命的最终阶段。这些情感支持可直接提升患方对医方的情感信任,进而促进其对医务人员及其所在医院的认知信任和制度信任,也使医务人员自身获得情感的慰藉和职业的成长,从而形成一种良性的循环。但是,医方情感支持的实现具有高度的人格化特征,是一种需要长期习得且难以标准化施展和迁移的“手艺”。在现有医疗体系下培养一种不完全基于治疗效果、充分尊重治疗过程中情感付出的治疗文化,还需要持久不断的反思与努力。

关键词：照护情感支持情感信任认知信任医患信任