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银屑病皮损区IL-8、HLA-DR、PLA_2、ANAE、EGFR mRNA、c-fos mRNA的定位研究

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中华皮肤科杂志 1999年第2期32卷 82-84页

作者：李红文吴景兰丁一王一菱时建业王诗淇付世珍河南医科大学第一附属医院皮肤科郑州450052 河南医科大学细胞分子生物学中心河南禹州禹灵集团

目的探讨银屑病患者白介素8(IL 8)、人类白细胞抗原DR(HLA DR)、磷脂酶A2(PLA2)、酸性α 乙酸萘酯酶(ANAE)、表皮生长因子受体基因(EGFRmRNA)、c fos基因(c fosmRNA)在皮损的表达定位。方法对20例银屑病患者皮损和10例正常人的皮肤标本... 详细信息

目的探讨银屑病患者白介素8(IL 8)、人类白细胞抗原DR(HLA DR)、磷脂酶A2(PLA2)、酸性α 乙酸萘酯酶(ANAE)、表皮生长因子受体基因(EGFRmRNA)、c fos基因(c fosmRNA)在皮损的表达定位。方法对20例银屑病患者皮损和10例正常人的皮肤标本进行了免疫组化、组化和原位杂交技术检测。结果IL 8免疫反应主要定位于表皮的基层、棘细胞层和颗粒层、血管内皮细胞及间质细胞 ;人类白细胞抗原DR免疫反应及ANAE分型染色主要定位于浸润细胞[包括单核巨噬细胞及T辅助淋巴细胞(TH细胞)]和血管内皮细胞 ;PLA2 活性主要定位于表皮细胞的胞膜及角层和间质细胞 ;以上观察指标在皮损区反应均较强或反应细胞较多 ;c fosmRNA的杂交信号皮损区弱于对照区 ;EGFRmRNA在皮损区杂交信号虽较强 ,但与对照组相比差异不显著。结论IL 8及其介导的免疫炎症反应在银屑病发病中起着十分重要的作用 ,并使PLA2活性增强 ,淋巴细胞激活。c fos原癌基因在增殖的角质形成细胞中呈弱表达 ,提示其终末分化较差。而EGFRmRNA的表达强度则与银屑病无显著相关关系。而IL 8与HLA DR和TH细胞之间呈明显正相关(P<0.01)。

关键词：银屑病 HLA-DR 磷脂酶A类 fos基因 IL-8

维生素C和烟酰胺对原代培养人角质形成细胞的影响

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中华皮肤科杂志 2008年第12期41卷 821-823页

作者：王菲菲李红文吴景兰郑乃刚王一菱郑州大学第一附属医院皮肤科 450052 郑州大学基础医学院分子细胞生物学研究中心

目的探讨维生素C和烟酰胺对原代培养人表皮细胞的增殖和分化的影响，为临床应用提供实验基础。方法取正常人手术切除的包皮，应用热溶素分离表皮与真皮，以胰蛋白酶及EDTA分离表皮细胞为单个细胞。以NIH-3T3作为饲养细胞，单个表皮细胞... 详细信息

目的探讨维生素C和烟酰胺对原代培养人表皮细胞的增殖和分化的影响，为临床应用提供实验基础。方法取正常人手术切除的包皮，应用热溶素分离表皮与真皮，以胰蛋白酶及EDTA分离表皮细胞为单个细胞。以NIH-3T3作为饲养细胞，单个表皮细胞培养于表皮完全培养基内。将培养的人表皮细胞等分为三份；一份加维生素C，一份加烟酰胺，另一份为完全培养液对照组。应用免疫组化和蛋白质免疫斑点印迹阵列技术检测C—myc、细胞周期蛋白D1、丝聚合蛋白及内披蛋白的表达情况。结果各组集落数不同，维生素c组〉对照组〉烟酰胺组，维生素C组的集落形态与对照组近似，而与烟酰胺组差异较大。与对照组相比，维生素C组C—myc、细胞周期蛋白D1、丝聚合蛋白及内披蛋白的表达均上调（P值均〈0．05）；烟酰胺组丝聚合蛋白表达显著上调（P〈0．01），内披蛋白表达变动不明显（P〉0．05），而C—myc表达下调（P〈0．05）。结论维生素C对人角质形成细胞的增殖和分化均有促进作用。烟酰胺对人角质形成细胞的分化有促进作用，但对其增殖却有抑制作用。

关键词：角蛋白细胞抗坏血酸烟酰胺细胞,培养的

野生型DNA聚合酶β转染Eca-109细胞后增变基因表型变化

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1085-1090页

作者：郑乃刚高涵昌吴景兰裴迎新王一菱董子明郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院分子细胞生物学研究中心郑州450052 郑州大学公共卫生学院营养卫生学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:探讨野生型DNA聚合酶β(polbeta)转染人食管癌Eca-109细胞后对其增变基因表型的效应。方法:将经过鉴定的重组pcDNA3.1质粒(插入野生型,wt)-polbeta转染培养的人食管癌Eca-109细胞。将Eca-109细胞分为3组:转染实验组(E)、空质粒转... 详细信息

目的:探讨野生型DNA聚合酶β(polbeta)转染人食管癌Eca-109细胞后对其增变基因表型的效应。方法:将经过鉴定的重组pcDNA3.1质粒(插入野生型,wt)-polbeta转染培养的人食管癌Eca-109细胞。将Eca-109细胞分为3组:转染实验组(E)、空质粒转染对照组(C1)和未转染对照组(C2)。应用原位杂交技术显示wt-polbeta和wt-p53的杂交信号,免疫细胞化学染色显示POLB-免疫反应性(IR)和多药耐受(MDR1)-IR,免疫印迹显示wt-polbeta和突变(mt)-polbeta的带型,细胞化学技术检测各组细胞的增殖与分化细胞的比率。结果:polbeta免疫印迹结果显示E组呈现增强的wt-polbeta主带,C1、C2组呈现很弱wt-polbeta主带和显著突变的(mt)-polbeta主带(P<0.01);polbeta免疫细胞化学结果显示E组的强信号定位于细胞核内,C1、C2组信号皆很弱(P<0.01)。E组的wt-polbeta及wt-p53原位杂交的信号强于C1、C2组(P<0.01)。E组MDR1的免疫反应性和增殖与分化细胞的比率低于C1、C2组(P<0.01)。结论:wt-polbeta转染的Eca-109细胞呈现wt-polbeta及wt-p53表达上调而mt-polbeta及MDR1表达下调的增变基因表型减弱。

关键词：野生型DNA聚合酶β 转染 DNA聚合酶β-p53-MDR1表达亚群增变基因表型 Eca-109细胞

板层状鱼鳞病患者指甲和鳞屑内皮蛋白及鳞屑类脂的变化

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郑州大学学报（医学版） 2008年第1期43卷 79-81页

作者：张晨阳李红文郑乃刚王一菱吴景兰郑州大学第一附属医院皮肤科郑州大学基础医学院分子细胞生物学研究中心

目的：探讨板层状鱼鳞病（RLI）患者的指甲和鳞屑内皮蛋白和鳞屑类脂的表型改变情况。方法：取5例RLI患者和10例正常人修剪的指甲和表皮鳞屑，行指甲内皮蛋白的免疫印迹、指甲和鳞屑内皮蛋白的免疫组化染色和鳞屑类脂的组织化学染色，... 详细信息

目的：探讨板层状鱼鳞病（RLI）患者的指甲和鳞屑内皮蛋白和鳞屑类脂的表型改变情况。方法：取5例RLI患者和10例正常人修剪的指甲和表皮鳞屑，行指甲内皮蛋白的免疫印迹、指甲和鳞屑内皮蛋白的免疫组化染色和鳞屑类脂的组织化学染色，利用在图像分析仪对所染色图像进行分析。结果：指甲总蛋白电泳图显示正常人呈现4条主带，RLI呈现5条主带（69000、63000、54000、48000、38000）；免疫印迹显示指甲内皮蛋白表达的相对分子质量主要位于63000～158000范围，其中RLI患者指甲内皮蛋白69000呈过高表达。免疫组化显示RLI患者指甲和鳞屑内皮蛋白表达下凋，组织化学染色显示鳞屑类脂中鳞脂、胆固醇和不饱和脂肪酸含量均降低。结论：RLI患者指甲和鳞屑内皮蛋自和鳞屑类脂分化不良。

关键词：鱼鳞病内皮蛋白膜套类脂转谷氨酰胺酶1

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耳针对生长因子及ACTH的效应

河南医科大学学报 1996年第1期31卷 1-6页

作者：吴景兰丰艳张晋平丁一王一菱河南医科大学分子细胞生物学研究中心长治医学院组织学胚胎学教研室

大鼠颌下腺为表皮生长因子（ＥＧＦ）的主要来源之一。ＥＧＦ可刺激垂体分泌ＡＣＴＨ。将大鼠分组为针刺与唾腺相关之“腮腺”耳穴组，针刺与垂体相关之“脑点”耳穴组和不施加针刺的对照组。测定痛阈并分别以原位杂交和免疫组织化学技... 详细信息

大鼠颌下腺为表皮生长因子（ＥＧＦ）的主要来源之一。ＥＧＦ可刺激垂体分泌ＡＣＴＨ。将大鼠分组为针刺与唾腺相关之“腮腺”耳穴组，针刺与垂体相关之“脑点”耳穴组和不施加针刺的对照组。测定痛阈并分别以原位杂交和免疫组织化学技术探测颗粒曲管（ＧＣＴ）细胞的ＥＧＦｍＲＮＡ、ＥＧＦ受体（ＥＧＦＲ）－免疫反应性（ＩＲ）及ＥＧＦ－ＩＲ和垂体ＡＣＴＨ－ＩＲ。结果显示针刺后ＥＧＦｍＲＮＡ及ＥＧＦＲ－ＩＲ提高；而ＥＧＦ－ＩＲ在两个耳针组变动均不显著；垂体ＡＣＴＨＩＲ仅在“脑点”组减弱，并且在ＡＣＴＨ变动与镇痛效应之间呈负相关。

关键词：耳针表皮生长因子 ACTH mRNA

睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡与丝裂素活化蛋白激酶表达的变化(英文)

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中国临床康复 2006年第42期10卷 205-207页

作者：朱涵章茜王书春白凌王一菱吴景兰王雨若郑州大学医学院生理学教研室河南省郑州市450052 郑州大学医学院河南省分子医学重点开放实验室河南省郑州市450052 郑州大学医学院组织胚胎学教研室河南省郑州市450052

背景:丝裂素活化蛋白激酶是一组与神经元的存活凋亡有关的蛋白激酶,睡眠剥夺可以引起神经元凋亡。目的:观察睡眠剥夺大鼠丝裂素活化蛋白激酶表达的变化并分析其可能的意义。设计:完全随机分组的前瞻性研究。单位:郑州大学生理学教研室... 详细信息

背景:丝裂素活化蛋白激酶是一组与神经元的存活凋亡有关的蛋白激酶,睡眠剥夺可以引起神经元凋亡。目的:观察睡眠剥夺大鼠丝裂素活化蛋白激酶表达的变化并分析其可能的意义。设计:完全随机分组的前瞻性研究。单位:郑州大学生理学教研室神经研究室。材料:实验于2000-06/2002-10在郑州大学完成。选取成年健康SD大鼠24只。方法:24只大鼠随机分为快眼动睡眠剥夺组、快眼动睡眠剥夺对照组和正常对照组3组,每组8只。睡眠剥夺组从早晨8点始,连续剥夺睡眠72h。正常对照组则置饲养笼中饲养,维持正常的睡眠-觉醒周期。观察其形态学变化。另取24只大鼠分组同上用于丝裂素活化蛋白激酶的检测。采用TUNEL染色法观察睡眠剥夺大鼠的海马神经元形态学变化,观察细胞外信号调节激酶活性的变化和c-Jun氨基末端激酶蛋白表达量的变化。主要观察指标:①观察睡眠剥夺大鼠海马神经元的形态学变化。②观察海马神经元细胞外信号调节激酶和c-Jun氨基末端激酶表达的变化。结果:①海马神经元形态学变化:快眼动睡眠剥夺组大鼠CA1和CA3区可见较多的凋亡阳性细胞,主要分布在海马的锥体细胞层。CA2区仅见极少量凋亡细胞,CA4区偶见凋亡细胞。正常对照组和快眼动睡眠剥夺对照组海马组织切片中未见明显阳性细胞。②细胞外信号调节激酶活性的变化:快眼动睡眠剥夺组明显低于快眼动睡眠剥夺对照组和对照组(1764.00±941.56,6139.67±2863.62,566.700±2763.41,t=3.2111,0.9863,P<0.05)。③c-Jun氨基末端激酶的阳性表达:快眼动睡眠剥夺组明显高于快眼动睡眠剥夺对照组和对照组(87.5%,25%,75%,t=3.4121,P<0.05)。结论:睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元丝裂素活化蛋白激酶活性的变化,可能与神经元的凋亡有关。

关键词：睡眠剥夺海马/病理学神经元/病理学蛋白激酶类/代谢

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软组织非霍奇金恶性淋巴瘤5例及文献分析

河南肿瘤学杂志 2005年第4期18卷 286-287页

作者：张秋红赵培荣王一菱郑州大学护理学院郑州大学肿瘤中心医学院河南郑州450052 郑州大学基础医学院河南郑州450052

目的研究软组织非霍奇金恶性淋巴瘤病理诊断。方法应用光镜和免疫组化方法对5例软组织非霍奇金恶性淋巴瘤手术标本进行组织学观察。结果免疫组化染色LCA阳性5例,CD20阳性4例,CD45阳性1例,NSE、desmin、CK均为阴性。结论发生在软组织的... 详细信息

目的研究软组织非霍奇金恶性淋巴瘤病理诊断。方法应用光镜和免疫组化方法对5例软组织非霍奇金恶性淋巴瘤手术标本进行组织学观察。结果免疫组化染色LCA阳性5例,CD20阳性4例,CD45阳性1例,NSE、desmin、CK均为阴性。结论发生在软组织的非霍奇金淋巴瘤并非罕见,免疫组织化学技术对软组织非霍奇金淋巴瘤的病理诊断起到关键性作用。

关键词：软组织非霍奇金淋巴瘤免疫组织化学

免疫组织化学与完整细胞原位蛋白质斑点印迹联合应用的探讨

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河南医科大学学报 1997年第3期32卷 118-119页

作者：郑乃刚吴景兰陈奎生丁一王一菱河南省临床检验中心河南医科大学分子细胞生物学研究中心

免疫组织化学与完整细胞原位蛋白质斑点印迹联合应用的探讨郑乃刚１）吴景兰２）陈奎生２）丁一２）王一菱２）１）河南省临床检验中心郑州４５００５２２）河南医科大学分子细胞生物学研究中心郑州４５００５２关键词斑点印迹；免疫组... 详细信息

免疫组织化学与完整细胞原位蛋白质斑点印迹联合应用的探讨郑乃刚１）吴景兰２）陈奎生２）丁一２）王一菱２）１）河南省临床检验中心郑州４５００５２２）河南医科大学分子细胞生物学研究中心郑州４５００５２关键词斑点印迹；免疫组织化学；技术与方法玻片上细胞标本的...

关键词：斑点印迹免疫组织化学完整细胞原位蛋白质

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淋巴细胞转化与酸性酯酶活性相关性研究

河南医科大学学报 1992年第4期27卷 298-300页

作者：郑乃刚刘长江吴景兰王一菱河南医科大学省临床检验中心郑州市第一人民医院河南医科大学组织胚胎学教研室

对20例健康成人微量周血(0.1ml)标本同时进行PHA刺激淋巴细胞转化试验和酸性非特异性酯酶(ANAE)分型的细胞化学染色。结果显示淋巴细胞转化率与ANAE点型细胞百分率之间呈显著正相关。17%的转化T淋巴母细胞ANAE阳性反应呈局灶性点样型,而... 详细信息

对20例健康成人微量周血(0.1ml)标本同时进行PHA刺激淋巴细胞转化试验和酸性非特异性酯酶(ANAE)分型的细胞化学染色。结果显示淋巴细胞转化率与ANAE点型细胞百分率之间呈显著正相关。17%的转化T淋巴母细胞ANAE阳性反应呈局灶性点样型,而83%的转化T淋巴母细胞ANAE阳性反应显著增强,呈弥散样型。提示ANAE总阳性反应是T淋巴母细胞的可靠标志。

关键词：淋巴细胞转化 ANAE 细胞免疫活性