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生物酶和活性氧荧光探针的研制与应用

生物酶和活性氧荧光探针的研制与应用

作者：王玉成山东师范大学

学位级别：硕士

羧酸酯酶（Carboxylesterase,CE）能够水解含酯或酰胺的底物,在脂质代谢中发挥重要作用。CE与脂肪变性密切相关,是肝脏脂肪堆积的生物标志物之一。过氧亚硝酸盐（Peroxynitrite,ONOO）是由超氧阴离子和一氧化氮反应生成的一种重要的活性... 详细信息

羧酸酯酶（Carboxylesterase,CE）能够水解含酯或酰胺的底物,在脂质代谢中发挥重要作用。CE与脂肪变性密切相关,是肝脏脂肪堆积的生物标志物之一。过氧亚硝酸盐（Peroxynitrite,ONOO）是由超氧阴离子和一氧化氮反应生成的一种重要的活性氧,具有强氧化性,是炎症的生物标志物之一。酪氨酸酶（Tyrosinase,TYR）是一种单酚氧化酶,它能够将酪氨酸氧化为双酚并进一步氧化为邻醌结构,促进黑色素和多巴胺的生成。TYR水平随肝脏纤维化分期的增加而增加,是肝癌的生物标志物之一。非酒精性脂肪肝病（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是全球最主要的慢性肝病,也是肝癌形成的常见原因。NAFLD是一个连续的进程,主要分为非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver,NAFL）、非酒精性脂肪肝炎（Non-alcoholic steatohepatitis,NASH）、肝硬化、肝纤维化以及肝癌。其中NAFL阶段是良性的和可逆的,而NASH阶段是非良性的和不可逆的,并且会逐步发展为肝硬化、肝纤维化甚至肝癌。因此,对可逆的NAFL和不可逆的NASH进行及时检测和治疗就显得尤为重要。目前用于检测NAFLD的金标准是肝活检,但是这种方法极具侵入性。荧光探针具有无创、灵敏度高和选择性好等优点,有望用于NAFLD的早期诊断。基于此,本文针对CE、ONOO和TYR,设计合成了两个双探针体系,分别用于NAFLD模型中NAFL和NASH阶段可视化,以及正常肝细胞和肝癌细胞的有效区分。具体工作如下:（一）设计合成了两种荧光探针CNFCl和DRNO,可视化观测NAFL向NASH的转变。α-氟氯乙酰胺和α-酮酰胺分别作为CNFCl和DRNO的识别基团,用于对CE和ONOO的选择性反应。探针CNFCl与DRNO可用同一双光子波长激发且发射光谱无串扰,且均具有灵敏度高、选择性好和生物相容性高等特点。探针CNFCl和DRNO联合成像能够区分油酸诱导NAFLD细胞模型和高脂饮食诱导NAFLD小鼠模型中NAFL和NASH阶段。生物成像发现,NAFL阶段CE含量显著增加而ONOO含量基本保持不变,NASH阶段CE含量略有下降而ONOO含量显著增加。该体系为研究NAFLD不同阶段,以及探究CE和ONOO水平之间的关系提供了有效的探针工具并为NAFLD早期诊断提供了有效数据。（二）设计合成了特异性检测TYR的荧光探针DRT以及检测CE的荧光探针Con E。探针DRT和Con E均具有灵敏度高、选择性好和生物相容性高等特点。通过探针DRT和Con E的联合成像,证实Hep G2肝癌细胞中TYR和CE含量较HL-7702正常肝细胞高表达。

关键词：羧酸酯酶过氧亚硝酸盐酪氨酸酶非酒精性脂肪肝病荧光探针

脂联素通过AdipoR1/AdipoR2/APPL-1对血管内皮细胞的保护机制研究

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脂联素通过AdipoR1/AdipoR2/APPL-1对血管内皮细胞的保护机制研究

作者：李玉成吉林大学

学位级别：硕士

目的:探讨脂联素(APN)对血管内皮细胞的保护作用,包括血管内皮细胞功能、信号通路活性变化、以及炎症因子表达水平等方面,研究了APN通过Adipo R1、Adipo R2、APPL-1对AKT和NF-κB信号通路的影响,以期为抗动脉粥样硬化提供新的研究思路... 详细信息

目的:探讨脂联素(APN)对血管内皮细胞的保护作用,包括血管内皮细胞功能、信号通路活性变化、以及炎症因子表达水平等方面,研究了APN通过Adipo R1、Adipo R2、APPL-1对AKT和NF-κB信号通路的影响,以期为抗动脉粥样硬化提供新的研究思路。方法:1.采用MTT实验检测ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI混合物和APN对HUVECs细胞活力的影响。2.采用划痕实验评估不同处理组HUVECs的迁移能力。3.应用流式细胞术检测不同刺激物对HUVECs氧化应激水平的影响。4.采用Western Blot检测β2GPI、Adipo R1、Adipo R2、APPL、p-AKT、AKT、p-IKBα、IKBα、p-NF-κB p65及NF-κB p65等相关蛋白的表达。5.应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)从m RNA水平和蛋白水平检测各组TNF-α、IL-1β及ET-1的表达。结果:1.经ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI混合物作用于HUVECs12小时后,观察到细胞活力下降、迁移能力减弱以及活性氧(ROS)水平升高(P<0.01)。APN的预处理能显著减轻这些损伤(P<0.01)。***-LDL/β2GPI/anti-β2GPI混合物能够下调p-AKT的蛋白表达水平(P<0.01),APN预处理可以抑制ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI混合物引发的凋亡信号(P<0.01)。3.处理组接受ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI三元混合物后,p-IKBα及p-NF-κB p65蛋白表达水平上调(P<0.01)。APN能够抑制由该混合物诱发的炎症信号(P<0.01)。4.与APN预处理组相比,通过RNA干扰下调Adipo R1表达的HUVECs显示出活力、p-AKT表达水平及细胞迁移能力的显著下降(P<0.01)。同时,p-IKBα、p-NF-κB p65以及炎症因子(ET-1、IL-1β、TNF-α)的表达水平显著上调(P<0.01),这表明Adipo R1的干预可阻断APN对内皮的保护作用。5.相较于APN预处理组,使用RNA干扰法下调Adipo R2表达的HUVECs展现了活力、p-AKT表达水平和细胞迁移能力的下降(P<0.05)。同时,p-IKBα、p-NF-κB p65以及炎症因子(ET-1、IL-1β、TNF-α)的表达水平增加(P<0.05),这表明Adipo R2的抑制可能部分阻断了APN对内皮的保护作用。6.与APN预处理组相比,通过RNA干扰法下调APPL1表达的HUVECs展现了活力、p-AKT表达水平及细胞迁移能力的显著下降(P<0.01)。同时,p-IKBα、p-NF-κB p65以及炎症因子(ET-1、IL-1β、TNF-α)的表达水平显著增加(P<0.01),这说明APPL1的抑制能够降低APN的内皮保护作用。结论:***能缓和由ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI混合物引起的人HUVECs损害,主要通过提升细胞活性,加速细胞迁移,减少氧化应激反应,以及抑制炎性因子释放来实现。***可以上调p-AKT的表达,激活AKT信号通路从而抑制ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI混合物诱导的HUVECs活力下降;APN还可以抑制NF-κB信号通路的激活,从而抑制HUVECs氧化应激损伤和炎症反应。***对HUVECs的保护作用主要是通过Adipo R1和衔接蛋白APPL1所发挥的。

关键词：动脉粥样硬化 ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI混合物脂联素(APN) sh-RNA 人脐静脉内皮细胞炎性因子

“真实电影”创作理念在志愿者题材纪录片中的应用研究 ——以毕业作品《长江边的守望者》为例

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“真实电影”创作理念在志愿者题材纪录片中的应用研究 ——以毕...

作者：孙玉成武汉体育学院

学位级别：硕士

随着社会公益意识的提升和志愿服务活动的普及,志愿者题材纪录片在近年来呈现出蓬勃发展的态势。然而,志愿者题材纪录片的创作也面临一些弊端,往往容易出现人物形象脸谱化和过度聚焦于苦难与黑暗层面两种极端问题。基于两个方面的问题所... 详细信息

随着社会公益意识的提升和志愿服务活动的普及,志愿者题材纪录片在近年来呈现出蓬勃发展的态势。然而,志愿者题材纪录片的创作也面临一些弊端,往往容易出现人物形象脸谱化和过度聚焦于苦难与黑暗层面两种极端问题。基于两个方面的问题所在,笔者希望用“真实电影”的创作理念去指导,并在毕业作品中进行实践,以期对真实的无限度探索做出尝试。在早期的纪录片研究中,“真实电影”创作理念与“直接电影”、“真理电影”的概念界定尚不明晰。伴随着技术的不断进步,纪录片发展迅猛,真实电影、直接电影和真理电影的概念界定逐步得到完善。自90年代我国新纪录片运动的兴起以来,将直接电影和真理电影两种创作理念相结合的工作方法在各类纪录片中得到推崇。本文主要研究了“真实电影”创作理念的发展脉络,直接电影和真理电影两者的联系和区别,探讨总结出“真实电影”创作理念的特征。同时通过结合毕业作品《长江边的守望者》创作中对“真实电影”创作理念的应用研究,总结出志愿者题材纪录片的创作策略,力求对“真实电影”创作理念下志愿者题材纪录片创作中的应用与创新提供可行性经验。

关键词：真实电影直接电影真理电影志愿者题材纪录片

技术与社会转型互构下的“人工智能+”:新质生产力发展引擎

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浙江工商大学学报 2024年第5期 116-128页

作者：梁玉成张硕辰中山大学社会学与人类学学院

“人工智能+”叠加了更多学科领域的力量，是发展新质生产力的重要影响因素，这一影响不仅是由于技术本身具备高科技含量，而且和技术与社会转型之间的快速互构有关。参照法国哲学家吉尔伯特·西蒙东提出的“技术物”这一概念，“人工智... 详细信息

“人工智能+”叠加了更多学科领域的力量，是发展新质生产力的重要影响因素，这一影响不仅是由于技术本身具备高科技含量，而且和技术与社会转型之间的快速互构有关。参照法国哲学家吉尔伯特·西蒙东提出的“技术物”这一概念，“人工智能+”为现代社会带来了“智能物”。“智能物”比传统意义上的“技术物”更具有能动性，能够快速吸收处理海量数据信息并针对某一领域进行社会化模拟，影响人类的生产活动，人类也因此产生了对更高效、更便捷、更智能的生活和工作方式的追求，这一互构反馈机制对新质生产力的发展形成了必要环境。而随着“人工智能+”覆盖面的增大，智能物对生产效能、产业增长、产业竞争、生产关系等方面也产生了相应的影响。

关键词：智能物人工智能+ 新质生产力技术物

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武术谚语的多维取向、内容归聚与释读之方

成都体育学院学报 2024年第3期50卷 68-76页

作者：刘韬光郭玉成上海体育大学武术学院上海200438 上海体育大学中国体育历史研究院上海200438

武术谚语是中国武术“活的语言”,具有重要的理论意义与应用价值。文章依从武术谚语实际,认为其具有多维取向,即拳种流派之维:拳派个性的言说;地域民俗之维:文化差异的表征;伦理道德之维:尚德崇和的传统;朴素哲思之维:寓理于技的旨趣;... 详细信息

武术谚语是中国武术“活的语言”,具有重要的理论意义与应用价值。文章依从武术谚语实际,认为其具有多维取向,即拳种流派之维:拳派个性的言说;地域民俗之维:文化差异的表征;伦理道德之维:尚德崇和的传统;朴素哲思之维:寓理于技的旨趣;理法窍要之维:练用经验的总结;象形取意之维:天人合一的倾向。在此基础上,从修身、健身、防身、教学、训练、技法等方面析其内容归聚及要义,并提出武术谚语的释读之方及其理据,即文化性与传统性:武术谚语释读的双重面向;科普性和受众性:武术谚语表达的现代取向;理据性和准确性:武术谚语语素的合理释义;学术性和深刻性:武术谚语内涵的挖掘阐发。

关键词：武术谚语多维取向内容归聚释读之方

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毕飞宇小说的文化反思与文化批判

毕飞宇小说的文化反思与文化批判

作者：高玉成吉林大学

学位级别：硕士

毕飞宇小说有着丰富的文化内涵,等级观念、性别文化、看客文化是作家在作品中反思与批判的三个点,也是我们理解毕飞宇与文化的联系的三个点。对于这三方面的讨论,能帮助我们进一步认识毕飞宇作品的思想内涵,理解毕飞宇的创作姿态和创作... 详细信息

毕飞宇小说有着丰富的文化内涵,等级观念、性别文化、看客文化是作家在作品中反思与批判的三个点,也是我们理解毕飞宇与文化的联系的三个点。对于这三方面的讨论,能帮助我们进一步认识毕飞宇作品的思想内涵,理解毕飞宇的创作姿态和创作追求。本论文分引言、正文、结语三部分对毕飞宇小说的文化反思和文化批判进行分析与研究。引言介绍梳理已有的研究成果,并阐述本论文的选题意义和研究思路。第一章围绕毕飞宇对于等级观念的批判以及其中所展现的作家启蒙姿态展开。首先探讨毕飞宇的创作姿态和毕飞宇小说中等级观念表现的多种形式,然后分析作家如何通过表现等级观念下下层人所遭受的创伤来传达启蒙思想。最后讨论小说中等级观念影响下隐忍与反抗这两种选择,以及这两种选择所联系的深层文化心理。第二章围绕毕飞宇对于性别文化的呈现以及其中所展现的作家创作追求展开。首先分析毕飞宇的作品对于新时期前后传统性别文化变化发展的呈现以及思考,然后分别探讨作品中女性与男性所遭遇的性别文化的束缚。第三章围绕毕飞宇对于看客文化的批判以及其中所展现的作家生命体验和文化反思的联系展开。首先分析毕飞宇笔下的看客与作者生命体验的联系以及看客的具体呈现,然后论述看客文化给人造成的伤害及其背后的成因。结语阐释论文选择等级观念、性别文化和看客文化三者作为切入点的原因并对本论文进行总结。

关键词：毕飞宇等级观念性别文化看客文化

央地产业政策协同对农业企业专用性投资的影响

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中国农业大学学报 2024年第7期29卷 259-271页

作者：李子婕何玉成华中农业大学经济管理学院武汉430070

为研究宏观政策环境波动对微观企业行为的影响,对央地产业政策协同与农业企业专用性投资的关系进行探讨。以2008-2022年我国沪深A股上市的农林牧渔行业企业为样本,对中央层面和地方省级层面产业政策进行文本量化,运用熵值法和耦合协调... 详细信息

为研究宏观政策环境波动对微观企业行为的影响,对央地产业政策协同与农业企业专用性投资的关系进行探讨。以2008-2022年我国沪深A股上市的农林牧渔行业企业为样本,对中央层面和地方省级层面产业政策进行文本量化,运用熵值法和耦合协调度模型测度央地产业政策协同水平,结合农业上市企业数据,采用普通最小二乘法进行实证检验。结果表明:1)央地产业政策协同促进了农业企业专用性投资。2)央地产业政策协同通过提高企业风险承担能力、降低现金持有和缓解融资约束,促进了农业企业专用性投资。3)相比于央地选择性产业政策协同,央地功能性产业政策协同对农业企业专用性投资具有更强的促进效果;相比于国有和处在低市场化地区的农业企业,民营和处在高市场化地区的农业企业更容易受到央地产业政策协同对专用性投资的激励作用。因此,产业政策的制定和执行要注重协同性,地方政府应与中央政策保持一致,缓解央地政策间相互冲突、不协调等问题,从而降低企业的不确定性预期,促进企业投资。

关键词：央地产业政策协同专用性投资熵值法耦合协调度模型农业上市企业

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基于程序流程图和图注意力网络的跨语言代码抄袭检测方法

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小型微型计算机系统 2024年

作者：张峰韦友良秦玉成山东科技大学计算机科学与工程学院

跨语言代码抄袭检测在软件知识产权保护和计算机程序设计类课程教学等领域有广泛的应用。然而，不同编程语言的语法差异降低了代码之间的相似度，导致抄袭检测的准确率较低。因此，本文提出一种基于程序流程图和图注意力网络的跨语言代... 详细信息

跨语言代码抄袭检测在软件知识产权保护和计算机程序设计类课程教学等领域有广泛的应用。然而，不同编程语言的语法差异降低了代码之间的相似度，导致抄袭检测的准确率较低。因此，本文提出一种基于程序流程图和图注意力网络的跨语言代码抄袭检测方法。首先，将代码转换为程序流程图，并利用图注意力网络提取程序流程图的特征作为代码的表示；其次，采用交叉匹配方法逐行对比代码的表示，以获得代码的相似特征向量；最后，拼接待检测代码的相似特征向量，并通过全连接神经网络计算抄袭的概率。实验结果表明，与现有的跨语言代码抄袭检测方法相比，本文提出的方法在查准率、查全率和F1值方面均有提高。其中，与基于属性计数的CLCDSA方法、基于抽象语法树的ASTLearner方法相比，F1值分别提高了11%和16%。

关键词：代码抄袭检测跨编程语言程序流程图图注意力网络

文化遗产视域下形意拳传承的三重进路:记忆重塑、价值重构和秩序重建

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体育学刊 2024年第2期31卷 37-43页

作者：侯天媛郭玉成上海体育大学武术学院上海200438 上海体育大学中国体育非物质文化遗产研究院上海200438

基于社会的持续发展和进步,当下的形意拳传承正由“自发性”向“自觉性”转变。研究从文化遗产理论出发,运用比较研究法、实地调研法等从记忆重塑、价值重构和秩序重建3个层面对当下形意拳传承机制进行分析,以探究形意拳传承发展的内在... 详细信息

基于社会的持续发展和进步,当下的形意拳传承正由“自发性”向“自觉性”转变。研究从文化遗产理论出发,运用比较研究法、实地调研法等从记忆重塑、价值重构和秩序重建3个层面对当下形意拳传承机制进行分析,以探究形意拳传承发展的内在逻辑。研究认为形意拳传承通过“见景见情见精神”的记忆重塑增加形意拳时间延续和空间认同的认知维度;通过“见人见拳见生活”的价值重构扩大形意拳功能范围和影响领域;通过“见众见智见和谐”的秩序重建规范形意拳传承中的理念与行为。记忆重塑、价值重构和秩序重建为形意拳搭建起了历史、现实与未来的文化桥梁,为形意拳的传承与保护提供新的思考,为我国体育非物质文化遗产的保护提供重要理论支持和实践借鉴。

关键词：民族传统体育文化遗产形意拳传统武术身体文化

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