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水稻OsERF96应答病原菌的表达及启动子的功能分析

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植物遗传资源学报 2017年第1期18卷 133-138页

作者：牟少亮申磊石星辰官德义何水林福建农林大学生命科学学院/作物遗传改良与综合利用教育部重点实验室福州350002 福建农林大学作物科学学院福州350002

前人研究发现水稻Os ERF96(ethylene responsive factor 96)可应答白叶枯病病原菌的侵染,但其功能及表达调控机制仍不清楚,本研究进一步分析了该基因在水稻应答稻瘟病病原菌侵染及外源激素(SA和Me JA)处理下的转录情况,并分析了其启动... 详细信息

前人研究发现水稻Os ERF96(ethylene responsive factor 96)可应答白叶枯病病原菌的侵染,但其功能及表达调控机制仍不清楚,本研究进一步分析了该基因在水稻应答稻瘟病病原菌侵染及外源激素(SA和Me JA)处理下的转录情况,并分析了其启动子的诱导表达活性。结果表明:相对于对照组,Os ERF96在接种稻瘟病后1~4 d表达量显著上调,以第1天最高,此后逐渐下降,外源SA处理后Os ERF96表达量持续上调;利用Os ERF96启动子驱动GUS的转基因株系分析了Os ERF96启动子的诱导活性,结果表明GUS在根、茎和叶均有不同程度组成型表达,稻瘟病菌接种后4~7 d GUS活性持续升高。GUS活性定量表明,稻瘟病菌和SA处理条件下均出现了升高。综上所述,Os ERF96可应答白叶枯病或稻瘟病病原菌的浸染,其启动子是一个对病原菌侵染产生应答的诱导性启动子。

关键词：水稻 OsERF96 启动子稻瘟病菌

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水稻Pi-ta启动子的克隆及其功能分析

核农学报 2013年第12期27卷 1803-1808页

作者：牟少亮蔡金森严雁邱爱连官德义何水林福建农林大学生命科学学院福建福州350002 作物遗传改良与综合利用教育部重点实验室福建福州350002 福建农林大学作物科学学院福建福州350002

本研究分离了水稻品种日本晴Pi-ta基因的启动子,并构建其GUS融合表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化获得了其转基因植株。以获得的转基因水稻为材料进行GUS组织染色和GUS(β-葡萄糖苷酸酶)酶活性分析,结果表明,GUS基因在根、茎和叶中都... 详细信息

本研究分离了水稻品种日本晴Pi-ta基因的启动子,并构建其GUS融合表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化获得了其转基因植株。以获得的转基因水稻为材料进行GUS组织染色和GUS(β-葡萄糖苷酸酶)酶活性分析,结果表明,GUS基因在根、茎和叶中都有表达,转基因植株在接种稻瘟病菌后GUS活性显著增加。用抗病信号分子水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理后,Pi-ta启动子驱动的GUS活性也显著增加。以上结果表明,Pi-ta启动子是一个对稻瘟病菌应答的诱导型启动子,同时Pi-ta启动子还受到SA和MeJA的诱导表达。

关键词： Pi-ta 启动子 GUS 转基因水稻

线粒体ND4-ND4L基因在黑腹果蝇种组中的进化特征

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实验生物学报 2004年第6期37卷 456-460页

作者：牟少亮曾庆韬钱远槐湖北大学生命科学院武汉430062

本实验对黑腹果蝇种组(melanogaster species group)中8个种亚组33个样品两个线粒体基因ND4和ND4L进行了测序,并分析了ND4基因的序列差异和碱基替换特点,发现近缘物种中存在很明显的转换倾向,而在远缘物种中由于重复替换导致转换数处于... 详细信息

本实验对黑腹果蝇种组(melanogaster species group)中8个种亚组33个样品两个线粒体基因ND4和ND4L进行了测序,并分析了ND4基因的序列差异和碱基替换特点,发现近缘物种中存在很明显的转换倾向,而在远缘物种中由于重复替换导致转换数处于饱和状态,我们的实验数据证实了线粒体基因较核基因有较快的进化速度。最后根据D.melanogaster与D.yakuba的遗传距离推算了8个种亚组的分化时间,ananassae种亚组最先分化,然后依次是montium,melanogaster,fic-sphila,eugracilis,elegans,suzukii和takahashii最后分化。

关键词：线粒体遗传 ND4基因 ND4L基因黑腹果蝇种组进化特征碱基转换倾向

以ND4L和ND4基因为标记探讨黑腹果蝇种组的系统发育关系(英文)

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Zoological Research 2005年第4期26卷 344-349页

作者：牟少亮曾庆韬杨勇钱远槐胡广安湖北大学生命科学学院

多年来的形态学、染色体组学以及DNA序列几个方面的研究均没有很好地阐明黑腹果蝇种组内的系统发育关系。本实验测定了33个样品的ND4和31个样品的ND4L基因序列,以D.obscuroides为外群,用最大简约法和Bayesian法分别构建进化树。结果表... 详细信息

多年来的形态学、染色体组学以及DNA序列几个方面的研究均没有很好地阐明黑腹果蝇种组内的系统发育关系。本实验测定了33个样品的ND4和31个样品的ND4L基因序列,以D.obscuroides为外群,用最大简约法和Bayesian法分别构建进化树。结果表明两种方法构建的拓扑结构一致,而且大部分支系的支持率较高。整个黑腹果蝇种组分成三大谱系:1)montium种亚组;2)ananassae种亚组;3)Oriental种亚组(melanogaster、ficsphila、eugracilis、elegans、suzukii、takahashii),montium是最早分化的种亚组。在第三谱系中,melanogaster分化得最早;然后依次是ficsphila,eugracilis,elegans;suzukii与takahashii为姐妹种亚组,最后分化。

关键词：系统发育关系黑腹果蝇种组线粒体 ND4L-ND4

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水稻Xa1基因启动子的克隆及功能分析

植物遗传资源学报 2012年第5期13卷 865-869页

作者：牟少亮官德义林琳赖燕何水林福建农林大学生命科学学院福州350002 作物遗传改良与综合利用教育部重点实验室福州350002 福建农林大学作物科学学院福州350002

Xa1是一个能对日本白叶枯病优势小种(小种1号)产生专化性抗性的R基因,虽已有该基因克隆、表达和功能方面的研究,但对其表达调控分子机制还不很清楚。本研究利用Xa1启动子与GUS报告基因的转基因T1株系,研究了Xa1启动子的时空表达及对不... 详细信息

Xa1是一个能对日本白叶枯病优势小种(小种1号)产生专化性抗性的R基因,虽已有该基因克隆、表达和功能方面的研究,但对其表达调控分子机制还不很清楚。本研究利用Xa1启动子与GUS报告基因的转基因T1株系,研究了Xa1启动子的时空表达及对不同外源激素的应答特征。结果表明,Xa1启动子驱动的GUS基因在水稻根中的表达量明显高于茎和叶,且在根部的中柱区GUS的表达量明显高于周围组织;在外源MeJA作用下GUS的表达显著增强,在SA和ABA处理下也有一定程度的增强,这些结果暗示Xa1的抗病作用与其在根系中柱的组织特异性表达存在一定的相关性,MeJA对Xa1启动子的活性起重要的调控作用。

关键词：水稻 Xa1 启动子功能分析

含有多个应答逆境元件的合成启动子在水稻中的表达分析

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植物病理学报 2013年第6期43卷 630-635页

作者：牟少亮蔡汉阳赖燕马洪丽何水林福建农林大学生命科学学院福州350002 作物遗传改良与综合利用教育部重点实验室福州350002 福建农林大学作物科学学院福州350002

存在于启动子中的各种顺式作用元件在基因应答逆境的过程中起重要的作用,对这些元件进行适当组合是构建诱导型合成启动子的重要可行途径之一。本研究利用多个逆境应答元件(S盒、D盒、Gst1盒、TCA盒和LURP1基因启动子的-85^-46区)和CaMV... 详细信息

存在于启动子中的各种顺式作用元件在基因应答逆境的过程中起重要的作用,对这些元件进行适当组合是构建诱导型合成启动子的重要可行途径之一。本研究利用多个逆境应答元件(S盒、D盒、Gst1盒、TCA盒和LURP1基因启动子的-85^-46区)和CaMV35S核心(-46-+8)序列相连,组成一个人工合成启动子PRBS,并构建了GUS为报告基因的转化载体,通过农杆菌介导的遗传转化方法获得其水稻转基因植株。利用T1代转基因水稻株系,通过检测GUS酶活性,研究了PRBS在不同逆境及外源激素作用下的表达特征。结果发现PRBS组成型表达水平低,可不同程度地应答稻瘟病病原菌侵染,机械损伤和外源激素(ABA、SA和MeJA)处理,表明PRBS可作为诱导型启动子用于水稻抗逆基因工程遗传改良。

关键词：诱导型启动子生物胁迫 GUS 转基因水稻

水稻Xa21基因启动子序列分析及其在不同条件下的表达特征

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植物资源与环境学报 2012年第4期21卷 10-15页

作者：牟少亮刘志钦赖燕蔡汉阳何水林福建农林大学生命科学学院福建福州350002 福建农林大学作物遗传改良与综合利用教育部重点实验室福建福州350002 福建农林大学作物科学学院福建福州350002

以水稻品种‘日本晴’(Oryza sativa‘Nipponbare’)为实验材料,根据GenBank上公布的同品种水稻的基因组DNA序列设计1对引物,对水稻Xa21基因启动子进行克隆并测序,通过PCR扩增获得的Xa21基因启动子序列长1 982 bp,其中除包含启动子基本... 详细信息

以水稻品种‘日本晴’(Oryza sativa‘Nipponbare’)为实验材料,根据GenBank上公布的同品种水稻的基因组DNA序列设计1对引物,对水稻Xa21基因启动子进行克隆并测序,通过PCR扩增获得的Xa21基因启动子序列长1 982 bp,其中除包含启动子基本元件外,还包含一些与逆境信号相关的元件(GCC-box、A-box、TC-rich repeats、MBS、LTR和W-box等)。利用GUS组织化学染色和定量分析方法,研究了转基因水稻T1代株系不同器官和发育阶段Xa21基因启动子的表达特异性及其在不同逆境和激素处理条件下的表达特征,结果显示:在转基因水稻的叶、茎和根部均能检测到GUS活性,但根部GUS活性最高,特别是在根尖的中柱区活性最强;随苗龄增长(3叶期、5叶期和8至9叶期)叶片中GUS活性逐渐增加,8至9叶期GUS活性最高;机械损伤和100μmol.L-1茉莉酸甲酯(MeJA)处理可使叶片中GUS活性显著或极显著提高,而干旱、500μmol.L-1水杨酸(SA)和100μmol.L-1脱落酸(ABA)处理则对叶片中GUS活性无明显影响。研究结果表明:外界逆境胁迫对水稻Xa21基因启动子的表达有诱导作用;该启动子的表达受水稻发育阶段的调控并具有一定的器官组织特异性,在根中的表达量最高;其介导的抗病反应依赖于茉莉酸(JA)信号通路。

关键词：水稻 Xa21基因启动子序列分析 GUS活性表达特性茉莉酸甲酯(MeJA)

水稻PHD锌指蛋白cDNA的克隆及其表达分析

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福建农林大学学报（自然科学版） 2011年第2期40卷 161-164页

作者：牟少亮曹蕾官德义方开星何水林福建农林大学生命科学学院福建福州350002 漳州农业学校福建漳州363000 福建农林大学作物科学学院福建福州350002

利用cDNA-AFLP分析籼稻明恢86应答稻纵卷叶螟取食基因差异表达,发现1个与植物同源结构域(PHD)锌指蛋白高度同源的TDF,分离获得该TDF对应的粳稻全长cDNA.该全长cDNA与籼稻、玉米、蓖麻、葡萄、拟南芥和大豆等作物PHD锌指蛋白推定氨基酸... 详细信息

利用cDNA-AFLP分析籼稻明恢86应答稻纵卷叶螟取食基因差异表达,发现1个与植物同源结构域(PHD)锌指蛋白高度同源的TDF,分离获得该TDF对应的粳稻全长cDNA.该全长cDNA与籼稻、玉米、蓖麻、葡萄、拟南芥和大豆等作物PHD锌指蛋白推定氨基酸序列的同源性分别为98.43%、86.01%、54.58%、57.02%、57.51%和55.88%.荧光定量PCR研究表明,日本晴(粳稻)叶片中该基因的表达也受稻纵卷叶螟取食的诱导,推测该基因与籼稻和粳稻应答稻纵卷叶螟取食密切相关.

关键词：稻纵卷叶螟 PHD锌指蛋白表达分析

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科研实践与生物化学教学相长的体会

生命的化学 2020年第12期40卷 2303-2306页

作者：张灵玲牟少亮艾育芳马洪丽福建农林大学生命科学学院福州350002

生物化学是生命科学领域一门重要的专业基础课,但因其知识点多、理论性强、且知识点与相关技术更新较快,如何打破传统教学的框架,开展有效的教学改革具有较大的现实意义。本文探讨了科研实践在教学改革中的作用,并深入分析了科研实践如... 详细信息

生物化学是生命科学领域一门重要的专业基础课,但因其知识点多、理论性强、且知识点与相关技术更新较快,如何打破传统教学的框架,开展有效的教学改革具有较大的现实意义。本文探讨了科研实践在教学改革中的作用,并深入分析了科研实践如何与教学相互促进,有助于提高生物化学的教学效率。

关键词：生物化学教学改革科研实践