检索结果-南通市图书馆

代谢工程改造大肠杆菌生产2’-岩藻糖基乳糖

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

代谢工程改造大肠杆菌生产2’-岩藻糖基乳糖

作者：牛松峰西南大学

学位级别：硕士

2’-岩藻糖基乳糖是一种新型稀有母乳寡糖(HMO),它具有选择性刺激肠道益生菌的生长,保护婴幼儿肠道健康,提高免疫系统等生理功能,具有较高的研究价值。目前2’-岩藻糖基乳糖已经被FDA批准为婴幼儿奶粉添加剂,具有广阔的应用前景。本课... 详细信息

2’-岩藻糖基乳糖是一种新型稀有母乳寡糖(HMO),它具有选择性刺激肠道益生菌的生长,保护婴幼儿肠道健康,提高免疫系统等生理功能,具有较高的研究价值。目前2’-岩藻糖基乳糖已经被FDA批准为婴幼儿奶粉添加剂,具有广阔的应用前景。本课题以一株高产岩藻多糖的菌株Kosakonia sp CCTCCM 2018092为出发点,初步分析了其高产岩藻多糖的原因,鉴定了其GDP-L-岩藻糖的生物合成途径。同时将Kosakonia sp CCTCCM 2018092中的GDP-L-岩藻糖合成基因异源表达到大肠杆菌宿主,构建了生产GDP-L-岩藻糖的工程菌株。通过基因敲除、过表达、辅因子工程等手段进一步提高了GDP-L-岩藻糖下游产物2’-岩藻糖基乳糖的产量。本文主要研究内容及结论如下:1.利用生物信息学的方法初步分析了Kosakonia sp CCTCCM 2018092高产岩藻多糖的原因。分析结果表明,岩藻多糖的合成基因以多拷贝的形式存在,推测基因的多拷贝是Kosakonia sp CCTCCM 2018092菌株高产岩藻多糖的原因。这为该菌株的岩藻多糖高产机制提供了一定理论依据。2.以不同基因型(BL21(DE3),JM109(DE3),Turner(DE3),HMS174(DE3),DH10B(DE3))的大肠杆菌为宿主,异源表达了来自Kosakonia sp CCTCCM2018092的GDP-L-岩藻糖生物合成基因,构建了生产GDP-L-岩藻糖的工程菌株。通过摇瓶发酵,筛选了生产GDP-L-岩藻糖的最佳大肠杆菌宿主。结果显示,工程菌株JM109(DE3)在22°C和25°C均为GDP-L-岩藻糖的最佳生产宿主,在25°C时有最高的GDP-L-岩藻糖产量(7.96 mg/L)。3.以生产GDP-L-岩藻糖的大肠杆菌JM109(DE3)为出发菌株,异源表达了来自幽门螺杆菌(H.pylori)的α-1,2-岩藻糖基转移酶(Fut C),构建了2’-岩藻糖基乳糖从头合成的工程菌株。利用促溶标签-麦芽糖结合蛋白MBP与Fut C进行融合表达,实验结果表明,融合蛋白在体内的表达并未影响Fut C蛋白的功能,反而能够提高Fut C蛋白的可溶性表达。工程菌株摇瓶发酵结果表明,表达了促溶标签MBP的工程菌株成功获得了2’-岩藻糖基乳糖(30.1 mg/L)。而没有表达促溶标签的工程菌株,无法检测到目标产物2’-岩藻糖基乳糖。为了进一步提高2’-岩藻糖基乳糖的产量,分别敲除wca J,ack A,edd,eda基因,构建基因敲除工程菌株。基因敲除工程菌株Δack AΔwca J相比于对照菌株,2’-岩藻糖基乳糖的产量提升了10倍,2’-岩藻糖基乳糖的产量达到302 mg/L。4.为了进一步提高2’-岩藻糖基乳糖的产量,异源表达了来源于脆弱拟杆菌(B.fragile)的L-岩藻糖激酶/GDP-L-岩藻糖焦磷酸化酶双功能酶(FKP),构建了2’-岩藻糖基乳糖补救合成途径的工程菌株。与从头合成途径菌株类似,表达了促溶标签的补救合成途径工程菌株,目标产物2’-岩藻糖基乳糖达到197 mg/L。而没有促溶标签的工程重组菌株,无法检测到目标产物2’-岩藻糖基乳糖。为了进一步提高目标产物2’-岩藻糖基乳糖的产量,连续敲除了能够分解底物L-岩藻糖的两个基因阿拉伯糖异构酶(Ara A)与鼠李糖异构酶(Rha A),摇瓶发酵显示相对于未敲除菌株,敲除菌株2’-岩藻糖基乳糖的产量提高了4.7倍,达到974 mg/L。5.利用生物信息学的方法筛选了新的来源于Kosakonia sp CCTCCM2018092菌株的α-1,2-岩藻糖基转移酶(Fut Cks),将其与L-岩藻糖激酶/GDP-L-岩藻糖焦磷酸化酶双功能酶(FKP)共表达,构建了p ET-Fut Cks-FPK工程菌株。工程菌株摇瓶发酵结果表明,发酵液能够检测到少量的2’-岩藻糖基乳糖,揭示了该Fut Cks为一种新的α-1,2-岩藻糖基转移酶。6.初步构建了能够间接检测2’-岩藻糖基乳糖的生物传感器,通过检测L-岩藻糖的浓度来指示2’-岩藻糖基乳糖的产量。

关键词：大肠杆菌 2’-岩藻糖基乳糖 Kosakonia sp.CCTCCM2018092 促溶标签生物传感器

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

一次性爆炸复合制造新型功能结构的技术

一次性爆炸复合制造新型功能结构的技术

2018年地下工程钻爆技术与安全管理学术研讨会

作者：高庆伟牛松峰陈力北京中科力爆炸技术工程有限公司中国科学院力学研究所

本文设计了一种新型功能多层结构,用爆炸复合技术一次性实现了制造这种新型多层的功能结构。通过力学性能测试表明,该一次性爆炸复合技术制造的多层结构性能良好,可以在实际中使用。

关键词：爆炸复合功能结构一次性爆炸加工

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

告成：建设魅力新市镇 007

郑州日报

作者：李晓光牛松峰

告成镇，原为古阳城，位于登封市东南11公里处，嵩山和箕山之间，颍河横贯腹地。清乾隆县志载：“阳城和太室，都居九州中心，位置非常重要。”自1998年被确定为“全省小城镇改革发展建设综合试点镇”以来，告成镇先后荣获“全国重点镇...

告成镇，原为古阳城，位于登封市东南11公里处，嵩山和箕山之间，颍河横贯腹地。清乾隆县志载：“阳城和太室，都居九州中心，位置非常重要。”自1998年被确定为“全省小城镇改革发展建设综合试点镇”以来，告成镇先后荣获“全国重点镇”“国家卫生镇”“全国特色景观旅游名镇?

关键词：

来源： cnki报纸评论

在线全文

cnki报纸

学校读者我要写书评

暂无评论

含丢包和量化的网络控制系统随机鲁棒稳定

控制工程 2024年第2期31卷 288-294页

作者：王后能牛松梅李自成武汉工程大学电气信息学院湖北武汉430205

针对一类含有随机丢包和考虑信号量化情况下的网络控制系统,通过量化状态反馈控制方法,研究了系统的随机鲁棒稳定性问题。采用满足伯努利分布的随机变量对丢包过程进行建模;同时,采用对数量化器对传感器-控制器通道的信号进行量化,利用... 详细信息

针对一类含有随机丢包和考虑信号量化情况下的网络控制系统,通过量化状态反馈控制方法,研究了系统的随机鲁棒稳定性问题。采用满足伯努利分布的随机变量对丢包过程进行建模;同时,采用对数量化器对传感器-控制器通道的信号进行量化,利用扇形界的方法将产生的量化误差描述为扇形界的不确定性。设计状态反馈控制器,结合所设计的量化器和随机丢包模型,利用Lyapunov函数和线性矩阵不等式方法得到系统稳定和鲁棒稳定的充分条件。最后,利用数值仿真实例验证了所提方法的有效性。

关键词：网络控制系统丢包量化状态反馈

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

碳捕捉系统在超大型气体运输船上的应用

舰船科学技术 2024年第3期46卷 91-96页

作者：周鑫元牛松李珂张道志浙江大学工程师学院浙江杭州310015 江南造船(集团)有限责任公司上海201913 中国船级社上海规范研究所上海200135 上海船用柴油机研究所上海201108

针对LPG双燃料低速机驱动的超大型气体运输船进行配置船用碳捕捉系统可行性研究,完成EEDI计算方法研究、有效二氧化碳捕捉量分析、碳捕捉系统方案设计、装船方案设计以及对船舶设计的影响分析等,并基于碳税价格对于超大型气体运输船配... 详细信息

针对LPG双燃料低速机驱动的超大型气体运输船进行配置船用碳捕捉系统可行性研究,完成EEDI计算方法研究、有效二氧化碳捕捉量分析、碳捕捉系统方案设计、装船方案设计以及对船舶设计的影响分析等,并基于碳税价格对于超大型气体运输船配置碳捕捉系统的经济性进行分析。

关键词：碳捕捉 EEDI 超大型气体运输船经济性

聚丙烯酸钠改性钙基膨润土工程特性及微观结构研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

岩土工程学报 2024年

作者：陈宏信牛松荧冯世进薛钦培李正霏石福江同济大学地下建筑与工程系同济大学岩土及地下工程教育部重点实验室土木工程防灾减灾全国重点实验室

我国钙基膨润土(CaB)资源丰富，近年来作为竖向隔离墙膨润土泥浆的替代材料备受关注。然而，由于天然钙基膨润土膨胀能力与化学相容性较差，对其工程特性的改进成为关键问题。为此，本研究以聚丙烯酸钠(PAAS)为改性剂对钙基膨润土进行... 详细信息

我国钙基膨润土(CaB)资源丰富，近年来作为竖向隔离墙膨润土泥浆的替代材料备受关注。然而，由于天然钙基膨润土膨胀能力与化学相容性较差，对其工程特性的改进成为关键问题。为此，本研究以聚丙烯酸钠(PAAS)为改性剂对钙基膨润土进行改良，确定了制浆-干燥-研磨法制备聚丙烯酸钠改性钙基膨润土(PAAS-CaB)的最佳制备条件。系统测试了改性膨润土的工程特性及微观结构，结果表明，改性剂掺量为8%时，PAAS-CaB膨胀指数可达34.0 mL/2g，聚丙烯酸钠改性显著提高了钙基膨润土吸水膨胀性能及化学相容性，降低膨润土泥饼渗透系数；随PAAS掺量的增加，泥浆马氏黏度增大，滤失量和pH值减小，泥浆密度则主要由膨润土掺量控制；与未改性的Ca B相比，PAAS-CaB在微观上表现出整体性更好的片层结构、更小的蒙脱石晶层间距；聚丙烯酸钠主要通过桥联包覆作用与接枝共聚合作用改善钙基膨润土性能。本研究为优化PAAS-CaB制备工艺提供了可靠依据，为CaB的工程应用提供了可行的技术路径。

关键词：隔离墙钙基膨润土聚丙烯酸钠工程特性微观结构

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

异形纤维及其制造技术进展

高分子材料科学与工程 2024年第3期40卷 172-179页

作者：范春峰何鉴峰王建北京化工大学机电工程学院北京100029

异形纤维是指横截面形状为非圆形的纤维,可弥补圆形纤维在抗扭强度、粗糙度、弹性、表观等性能方面的不足,并具有良好的光泽、染色、抗污、阻燃、隔热、隔音等性能,在纺织、复合材料、建筑、生物医学、汽车、航空航天、光学等领域得到... 详细信息

异形纤维是指横截面形状为非圆形的纤维,可弥补圆形纤维在抗扭强度、粗糙度、弹性、表观等性能方面的不足,并具有良好的光泽、染色、抗污、阻燃、隔热、隔音等性能,在纺织、复合材料、建筑、生物医学、汽车、航空航天、光学等领域得到了广泛应用。文中介绍了异形纤维的类型、特点、应用领域,总结了异形纤维的制造技术及其影响因素,分析了异形纤维横截面形态表征方法及对性能的影响。相关综述可为异形纤维的研究开发提供科学参考和技术借鉴。

关键词：异形纤维制造方法力学性能复合材料

基于注意力机制优化的BiLSTM珠江口水质预测模型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

环境科学 2024年第6期45卷 3205-3213页

作者：陈湛峰李晓芳广东省生态环境监测中心广州510308

为提高珠江口水质预测精度和稳定性,提出了基于时间和特征双注意力机制优化的Bi LSTM水质预测模型,引入特征注意力机制强化模型捕获参数重要特征能力,加入时间注意力机制提高对时间序列相关性信息及水质波动细节信息的挖掘能力.将新模... 详细信息

为提高珠江口水质预测精度和稳定性,提出了基于时间和特征双注意力机制优化的Bi LSTM水质预测模型,引入特征注意力机制强化模型捕获参数重要特征能力,加入时间注意力机制提高对时间序列相关性信息及水质波动细节信息的挖掘能力.将新模型应用于珠江8个入海口水质预测,开展预测性能试验、泛化能力试验和特征参数扩展性试验.结果表明:①新模型在珠海大桥水质预测取得了较高的预测精度,预测值与实测值的均方根误差RMSE为0.0041 mg·L^(-1),决定系数R^(2)为98.3%.与Multi-Bi LSTM、Multi-LSTM、Bi LSTM和LSTM对比,表明新模型预测精度最高,验证了模型的精准性.②训练样本数量和预测步数均对模型预测精度产生影响,模型预测精度随着训练样本的增加而提升,海珠大桥断面总磷预测时,240组以上训练样本可获得较高预测精度;增加预测步数,会使模型预测精度迅速下降,预测步数大于5步时无法保障模型预测的可靠性.③将新模型应用于珠江8个入海口不同水质指标预测,预测结果均取得较高精度,模型具有较强的泛化能力;输入对象断面预测指标相关联的上游来水、降雨量等特征参数,能够提高模型预测精度.通过多方面多次试验,结果表明新模型能够较好地满足珠江口水质预测精度、适用性和扩展性要求,为复杂水动力环境水体水质高精度预测进行了新的探索.

关键词：特征注意力机制时间注意力机制 BiLSTM模型 LSTM模型珠江口水质预测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于改进神经网络的增材制造刀轨优化研究

中国科学：技术科学 2024年第3期54卷 553-566页

作者：董海郭煜峰沈阳大学应用技术学院沈阳110044 沈阳大学机械工程学院沈阳110044

本文针对选择性激光烧结增材制造(selecting laser sintering,SLS)内部质量问题,提出贝叶斯优化BP神经网络(BO-BP神经网络)路径优化模型,提高了SLS成型质量,减少打印过程能源消耗.首先,建立打印件路径规划流程,利用动态规划技术得到给... 详细信息

本文针对选择性激光烧结增材制造(selecting laser sintering,SLS)内部质量问题,提出贝叶斯优化BP神经网络(BO-BP神经网络)路径优化模型,提高了SLS成型质量,减少打印过程能源消耗.首先,建立打印件路径规划流程,利用动态规划技术得到给定激光网格中最终路径并移除冗余路径,针对激光烧结过程建立基于导热微分方程的SLS模型,并对其路径进行数值模拟,利用各网格节点最终温度值计算材料网格内部节点温度梯度值并排名,以此值作为神经网络算法训练并测试数据的数据集;其次,通过对所得激光路径进行数值图像转化,得到相应的平均热梯度分布图,将所得到的激光路径转化成灰度路径图像,采用改进BO-BP神经网络算法进行训练;最后,使用Softmax函数将神经网络输出数字转换为每个图像的概率,选取线性优化、无监督学习神经网络、遗传-反向传播神经网络(GA-BP)和反向传播(BP)神经网络进行预测结果比较,得出BO-BP神经网络算法相较于其他算法具有预测精度高、搜索速度快的优点.

关键词：增材制造选择性激光烧结刀轨路径优化 BO-BP神经网络算法