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血液肿瘤靶向治疗进展

四川大学学报（医学版） 2014年第4期45卷 642-646,542页

作者：牛挺刘霆四川大学华西医院血液科血液学研究室成都610041

随着现代生物医学技术如分子生物学、基因组学的快速发展,对血液肿瘤(白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)的发病机制有了深入的认识,血液肿瘤的诊断逐渐进入精细化分层诊断,治疗趋势逐渐演化为将新型靶向药物整合到传统的化疗、放疗、造血干细胞... 详细信息

随着现代生物医学技术如分子生物学、基因组学的快速发展,对血液肿瘤(白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)的发病机制有了深入的认识,血液肿瘤的诊断逐渐进入精细化分层诊断,治疗趋势逐渐演化为将新型靶向药物整合到传统的化疗、放疗、造血干细胞移植治疗中。血液肿瘤靶向治疗的重要进展是酪氨酸激酶抑制剂靶向治疗慢性髓细胞白血病,CD20单克隆抗体靶向治疗B细胞淋巴瘤和CD20阳性白血病,FLT3抑制剂靶向治疗FLT3阳性高危急性髓系白血病。本期专题从上述进展反映了血液肿瘤研究的新成果,以及未来血液肿瘤精细化分层诊断和个体化靶向治疗的趋势。

关键词：血液肿瘤靶向治疗酪氨酸激酶抑制剂 CD20单克隆抗体 FLT3抑制剂

新药时代双表达弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗探索

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临床血液学杂志 2024年第9期37卷 612-617页

作者：王婕牛挺四川大学华西医院血液内科成都610041

双表达MYC和BCL2是弥漫大B细胞淋巴瘤独立的预后因素,双表达淋巴瘤对标准的一线治疗方案R-CHOP反应不佳,5年总体生存率和无进展生存率显著缩短。如何提高和改善双表达淋巴瘤患者生存是临床上弥漫大B细胞淋巴瘤治疗的难点之一,迫切需要... 详细信息

双表达MYC和BCL2是弥漫大B细胞淋巴瘤独立的预后因素,双表达淋巴瘤对标准的一线治疗方案R-CHOP反应不佳,5年总体生存率和无进展生存率显著缩短。如何提高和改善双表达淋巴瘤患者生存是临床上弥漫大B细胞淋巴瘤治疗的难点之一,迫切需要开发新型靶向药物和创新性疗法。在新药时代,针对双表达淋巴瘤的治疗探索正不断深入。本文根据新药的种类,介绍了针对双表达淋巴瘤开展的新药研究和治疗探索。

关键词：双表达弥漫大B细胞淋巴瘤新药治疗临床试验

应用CRISPR—Cas9基因编辑技术实现染色体大片段缺失

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中华血液学杂志 2017年第5期38卷 427-431页

作者：程丽华刘玉牛挺四川大学华西医院血液科及血液病研究室成都610041

目的应用CRISPR-Cas9基因编辑技术来实现同一染色体片段上的多个基因共缺失。方法利用分子克隆技术构建能使小鼠染色体11B3上Aloxe3-Alox12b-Alox8基因簇缺失的CRISPR-Cas9慢病毒质粒；通过转染HEK293T细胞来包装带CRISPR或Cas9 cDNA的... 详细信息

目的应用CRISPR-Cas9基因编辑技术来实现同一染色体片段上的多个基因共缺失。方法利用分子克隆技术构建能使小鼠染色体11B3上Aloxe3-Alox12b-Alox8基因簇缺失的CRISPR-Cas9慢病毒质粒；通过转染HEK293T细胞来包装带CRISPR或Cas9 cDNA的慢病毒，进而感染小鼠NIH3T3细胞，提取这些细胞的全基因组；通过PCR扩增缺失后的片段，TA克隆、Sanger测序等技术手段鉴定Aloxe3-Alox12b-Alox8基因簇缺失的情况。结果成功构建了能使Aloxe3-Alox12b-Alox8基因簇发生缺失的CRISPR-Cas9慢病毒质粒；PCR检测证实了目的染色体片段（Aloxe3-Alox12b-Alox8基因簇）的缺失；TA克隆和Sanger测序明确了Aloxe3-Alox12b-Alox8基因簇发生缺失，并且该CRISPR-Cas9系统介导的切割事件产生的断点被准确地连接在一起，在两个切割位点间没有发生插入突变。结论利用CRISPR-Cas9基因编辑技术可以有效实现小鼠染色体11B3上Aloxe3-Alox12b-Alox8基因簇的大片段缺失。

关键词： CRISPR—Cas9 基因编辑染色体大片段缺失血液系统肿瘤

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血液肿瘤血管生成与抗血管生成的研究进展

临床荟萃 2003年第22期18卷 1316-1318页

作者：牛挺魏于全刘霆教育部人类疾病生物治疗重点实验室

1971年,Folkman[1]提出了实体肿瘤生长和转移依赖于血管生成的假说.随后众多的研究证实了这一假说,但绝大多数的证据来源于实体肿瘤.近年来有越来越多的资料显示,血管生成及其调控因子与血液系统恶性肿瘤的发生、演变和预后密切相关,抗... 详细信息

1971年,Folkman[1]提出了实体肿瘤生长和转移依赖于血管生成的假说.随后众多的研究证实了这一假说,但绝大多数的证据来源于实体肿瘤.近年来有越来越多的资料显示,血管生成及其调控因子与血液系统恶性肿瘤的发生、演变和预后密切相关,抗血管生成治疗可望成为血液系统恶性肿瘤新的治疗手段.现就血液系统恶性肿瘤血管生成与抗血管生成的研究进展作一概述.

关键词：血液肿瘤血管生成诊断治疗

骨髓增生异常综合征患者骨髓血管新生的初步观察

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四川大学学报（医学版） 2005年第1期36卷 69-71页

作者：邹文蓉刘霆孟文彤余江牛挺四川大学华西医院血液科

目的　观察骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓血管新生的变化及其对疾病的影响。方法　采用EL ISA法测定 MDS患者血清血管内皮生长因子 (S- VEGF)的浓度 ,免疫组化法染色骨髓活检标本并计数微血管密度 (MVD) ,并与年龄、病程及其他临床... 详细信息

目的　观察骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓血管新生的变化及其对疾病的影响。方法　采用EL ISA法测定 MDS患者血清血管内皮生长因子 (S- VEGF)的浓度 ,免疫组化法染色骨髓活检标本并计数微血管密度 (MVD) ,并与年龄、病程及其他临床预后因素作统计学分析。结果　 MDS患者的 S- VEGF和 MVD较正常对照组增高 ,两者呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,以 MDS/骨髓增生症 MPD和 RAEB- t亚型为最明显 ;S- VEGF和 MVD与外周血常规、骨髓原始细胞比例密切相关。结论　 MDS患者骨髓基质存在显著的血管新生 ,其 S- VEGF和 MVD较正常对照组高 ,S- VEGF和

关键词：骨髓增生异常综合征血管新生血管内皮生长因子微血管密度

血小板生成素和白细胞介素-11对慢性特发性血小板减少性紫癜巨核细胞的影响

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华西医科大学学报 2001年第4期32卷 572-575页

作者：廖小梅唐雪梅邓承祺牛挺孟文彤华西医科大学附属第一医院血液科成都610041

目的　探讨重组人血小板生成素 (rh TPO)及联用重组人白细胞介素 - 11(rh IL - 11)对慢性特发性血小板减少性紫瘢 (CITP)患者骨髓巨核祖细胞增殖和成熟的影响。方法　采用血浆凝块法对 2 1例 CITP患者骨髓巨核祖细胞进行体外培养 ,培养... 详细信息

目的　探讨重组人血小板生成素 (rh TPO)及联用重组人白细胞介素 - 11(rh IL - 11)对慢性特发性血小板减少性紫瘢 (CITP)患者骨髓巨核祖细胞增殖和成熟的影响。方法　采用血浆凝块法对 2 1例 CITP患者骨髓巨核祖细胞进行体外培养 ,培养体系中加入不同浓度的 rh TPO,或同时加 rh IL - 11两者联用。培养 14天后经 SZ-2 1(GP a)单抗和 ABC试剂盒染色观察集落生长数 ,用 MCDS- 2 0 10型超清晰度骨髓细胞分析系统进行巨核细胞的面积和直径测定。结果　 CITP组骨髓巨核细胞面积及直径明显低于对照组 (P<0 .0 5 )。 rh TPO对 CITP患者的巨核细胞集落形成单位 (CFU - MK)总集落数、巨核细胞直径与面积均有促进作用 ,但无浓度依赖性。体外最适浓度为 10 ng/ ml;rh TPO与 rh IL - 11联用组较单用组的 CFU - MK、总集落数及面积、直径均显著增加。结论　 CITP患者骨髓巨核细胞存在成熟障碍 ,体外 rh TPO单用及与 rh IL - 11联用均可促进 CITP患者巨核祖细胞的增殖与成熟。

关键词：重组人血小板生成素重组人白细胞介素-11 慢性特发性血小板减少性紫癜巨核祖细胞控制

白血病合并活动性结核病44例临床研究——单中心报告

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中华血液学杂志 2013年第7期34卷 572-577页

作者：李军蒋孟羊裔明刘霆牛挺四川大学华西医院血液科、血液学研究室成都610041

目的分析白血病患者合并活动性结核病的患病率、临床特征、诊断、潜在危险因素、抗结核治疗疗效及预后。方法同顾性分析单中心诊治的白血病合并活动性结核病患者的临床特点、相关检查资料、诊断方法及随访资料。结果纳入2006年1月至2011... 详细信息

目的分析白血病患者合并活动性结核病的患病率、临床特征、诊断、潜在危险因素、抗结核治疗疗效及预后。方法同顾性分析单中心诊治的白血病合并活动性结核病患者的临床特点、相关检查资料、诊断方法及随访资料。结果纳入2006年1月至2011年12月诊治的44例白血病合并活动性结核病患者，白血病患者活动性结核病患病率为1．70％（肺结核1．35％，肺外结核0．35％），其中急、慢性白血病各亚组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。患者主要为男性，男：女为2．14：1，发病中位年龄40（16—78）岁，以高热、咳嗽等非特异性临床表现为主。通过病原学确诊18例（40．9％），临床诊断26例（59．1％），肺外结核组结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）皮试阳性率（88．9％）高于肺结核组（42．9％）（P=0．020），胸部CT、结核感染T细胞斑点试验（T—***）有助于诊断。潜在危险因素包括年龄≥40岁、男性、营养不良、粒细胞缺乏、细胞免疫低下、白血病未缓解或进展等。粒细胞缺乏组在年龄、性别、免疫抑制药物给药途径方面与非粒细胞缺乏组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。一线抗结核方案有效率为83．7％，治愈所需抗结核总疗程约为12个月；因肺结核死亡4例，归因病死率为9．1％。结论白血病患者活动性结核病患病率较普通人群高，主要特点为发病潜在危险因素多、临床特征不典型、以临床诊断为主等，一线抗结核方案效果较好，结核病归因病死率较低。

关键词：白血病结核诊断抗结核药临床特征

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恶性组织细胞病的临床、病理及细胞属性分析

华西医科大学学报 2002年第4期33卷 609-612页

作者：廖小梅向兵牛挺黄杰刘卫平陈卉娇邓承祺四川大学华西医院血液科成都610041 四川大学华西医院病理科

目的　探讨恶性组织细胞病 (MH)的临床、病理及细胞属性等特征。方法　对 12例 MH患者临床及实验室有关指标进行分析 ;对其中 6例尸检及活检病理标本采用单克隆抗体免疫组化染色、HE染色和 EB病毒 (EBV)原位杂交 (EBER- ISH)等方法进行... 详细信息

目的　探讨恶性组织细胞病 (MH)的临床、病理及细胞属性等特征。方法　对 12例 MH患者临床及实验室有关指标进行分析 ;对其中 6例尸检及活检病理标本采用单克隆抗体免疫组化染色、HE染色和 EB病毒 (EBV)原位杂交 (EBER- ISH)等方法进行检测。结果　 MH临床上具有起病急、进展快、高热、衰竭等特点。实验室显示全血细胞减少、血清酶学显著增高。尸检示恶性细胞侵袭广泛 ,呈多中心、不均匀散在分布。免疫表型分析(6例 )示 CD4 5RO和 CD3ε阳性 ,CD2 0 和 CD6 8阴性 ,提示恶性细胞属 T细胞来源 ,而非组织细胞来源。同时所作 3例 E-BER- ISH均为阳性反应。结论　 MH具有爆发性的临床过程。恶性细胞多数属于 T细胞性淋巴瘤。EBV感染可能与

关键词：恶性组织细胞病淋巴瘤 EB病毒

小鼠干扰素-γ基因克隆及其腺病毒载体的构建

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四川大学学报（医学版） 2010年第3期41卷 394-397页

作者：薛红利蔺诗佳何东孟文彤牛挺四川大学华西医院血液科血液病研究室成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞生物学研究室成都610041

目的构建含有小鼠干扰素-γ(mIFN-γ)基因的腺病毒载体,为探索IFN-γ在肝纤维化治疗中的作用研究奠定基础。方法从含有mIFN-γ基因的质粒载体pORF5-mIFN-γ中PCR扩增出mIFN-γ基因片段,双酶切将该基因克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV中,限... 详细信息

目的构建含有小鼠干扰素-γ(mIFN-γ)基因的腺病毒载体,为探索IFN-γ在肝纤维化治疗中的作用研究奠定基础。方法从含有mIFN-γ基因的质粒载体pORF5-mIFN-γ中PCR扩增出mIFN-γ基因片段,双酶切将该基因克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV中,限制性内切酶PmeⅠ线性化pAdTrack-CMV-mIFN-γ,转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌株BJ5183细胞,同源重组。卡那霉素及酶切筛选出重组子pAd-mIFN-γ,内切酶PacⅠ线性化重组子,用磷酸钙法转染细胞株AD-293进行包装,收集病毒进行鉴定。结果 PCR后测序获得mIFN-γ基因,全长468 bp,与GenBank中发表的mIFN-γ基因核苷酸序列完全一致。经酶切和PCR证实各中间过程载体均含有目的基因。包装的病毒Ad-mIFN-γ在转染的4～6 d观察到荧光产生,8～11 d荧光逐渐增加,12 d收集病毒液。蛋白酶K裂解重组腺病毒,经PCR和Western blot方法鉴定,证实携带有目的基因mIFN-γ。结论大肠杆菌内同源重组法能有效和较为方便地构建出含有目的基因的腺病毒载体pAd-mIFN-γ,重组子能够在AD-293细胞中进行包装和扩增,病毒包装的成功为进一步研究mIFN-γ基因治疗小鼠肝纤维化提供了一个良好的转导载体。

关键词： mIFN-γ基因腺病毒载体重组