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Metastin和MMP-9在裸鼠子宫内膜异位症模型中的表达及意义

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Metastin和MMP-9在裸鼠子宫内膜异位症模型中的表达及意义

作者：牛慧彦中国医科大学

学位级别：硕士

目的子宫内膜异位症是生育期妇女常见的疾病，其发生率呈上升趋势，严重影响患者的生活质量。内异症的病因复杂、机制不清，经血返流致病学说虽然被广泛接受，但经血逆流在生育年龄妇女中非常普遍，说明经血逆流只是诱因，阐明异位子... 详细信息

目的子宫内膜异位症是生育期妇女常见的疾病，其发生率呈上升趋势，严重影响患者的生活质量。内异症的病因复杂、机制不清，经血返流致病学说虽然被广泛接受，但经血逆流在生育年龄妇女中非常普遍，说明经血逆流只是诱因，阐明异位子宫内膜的转移侵袭能力和在腹腔内种植生长的机理可能是认识内异症发病的关键。本研究目的是在核酸和蛋白水平，通过建立裸鼠子宫内膜异位症模型，获得不同发展阶段的异位病灶，检测Metastin与MMP-9在异位内膜组织中的表达，探讨两者在内异症发生和发展中的作用及其相互关系。方法将非内异症生育年龄妇女的分泌晚期子宫内膜组织种植入裸鼠的盆腹腔，建立裸鼠子宫内膜异位症模型。分别于5d、10d、15d、30d随机处死裸鼠，取异位生长的内膜组织作为研究组，以非内异症生育年龄妇女的子宫内膜组织作为对照组。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法，检测5d、10d、15d、30d异位病灶组织和对照组人子宫内膜组织中Metastin及MMP-9 mRNA表达特性。采用免疫组织化学(SP)方法，检测进展期病变组(5d、10d、15d)和晚期病变组(30d)的异位病灶组织和对照组人正常子宫内膜组织中Metastin及MMP-9蛋白的表达特性。结果人子宫内膜置入裸鼠盆腹腔后，全部自然种植生长。种植部位以腹壁、膀胱旁脂肪，肠管表面为主。第5天处死的裸鼠，剖检见种植内膜与裸鼠组织牢固粘附，病灶隆起明显，质地稍硬，用眼科镊子可牵拉取下。第10天处死者，病灶变硬，与裸鼠组织连接致密。第巧天处死者，病灶与裸鼠组织呈融合状态，不易剥离，裸鼠肠管僵硬，盆腹腔组织粘连。第30天处死者，粘连较重，病灶仍存在，但萎缩变小。 Metastin基因在sd、10d和巧d组和对照组比较，表达降低，差异显著(P0.05)。MMP一基因在sd、10d、巧d和30d组的表达与对照组比较，表达增强，差异显著(P<0.05);且15d组表达最强，与sd、10d、30d组比较差异显著(P<0.05)。Metastin和MMP一两者mRNA表达比较成负相关(r二一0.575，P<0.01)。 Metas血蛋白在进展期病变组(sd、10d和巧d)和晚期病变组(30d)表达率分别29 .2%和75%低于对照组人正常子宫内膜的表达率100%;MMP-9蛋白在在进展期病变组(sd、rod和巧d)和晚期病变组(30d)表达率分别为87.5%和75%高于对照组人正常子宫内膜的表达率30%。结论 l、利用裸鼠建立内异症动物模型，可以获得确定的、不同生长时间和发展阶段的异位病灶，为我们系统深人研究内异症的发生、发展机制提供了有利条件。 2、通过裸鼠内异症动物模型发现，Metastin基因和蛋白在不同生长时间的异位内膜组织中表达都降低，尤其是在sd、10d、15d组的异位病灶中。 3、通过裸鼠内异症动物模型发现，无论在mRNA水平还是蛋白质水平，MMP一在异位病灶组中的表达都高于正常内膜组织。 4、Metas血和MMP一共同参与了内异症的发生和发展，而且两者的作用具有一定相关性。

关键词：子宫内膜异位症裸鼠基质金属蛋白酶 Metastin KISS-1 免疫组织化学

基于DEA的我国医疗机构护理效率的综合评价

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中国卫生统计 2020年第4期37卷 595-598页

作者：兰艳燕阚亮牛慧彦中国医科大学附属盛京医院 110004

目的对我国31个省市医疗机构护理效率进行评价,为医疗机构改善护理效率、优化护理资源配置提供参考依据。方法运用数据包络分析法(data envelopment analysis,DEA)进行综合评价。结果我国31个省市医疗机构护理综合效率均值为0.966,DEA值... 详细信息

目的对我国31个省市医疗机构护理效率进行评价,为医疗机构改善护理效率、优化护理资源配置提供参考依据。方法运用数据包络分析法(data envelopment analysis,DEA)进行综合评价。结果我国31个省市医疗机构护理综合效率均值为0.966,DEA值为1的有19个省市,占总体评价单元的61.29%,剩余12个省市护理综合效率DEA<1,存在护理效率不高的问题。结论我国31个省市总体护理效率不高,非DEA有效的医疗机构护理效率存在投入冗余或产出不足现象,建议医疗机构通过护理流程再造,改善护理人员绩效,加强护理信息化建设等措施,优化护理资源配置,提高护理效率。

关键词： DEA 医疗机构护理效率综合评价

PLT、CRP变化及SIRS评分对老年感染中毒症患者预后的影响

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山东医药 2009年第47期49卷 21-22页

作者：牛慧彦何平中国医科大学附属盛京医院沈阳110004

目的探讨血小板计数(PLT)、C反应蛋白(CRP)的变化及SIRS评分对老年感染中毒症患者预后的影响。方法将126例老年感染患者按照国际感染中毒症会议制定的诊断标准分为感染中毒症患者96例(观察组)和单纯感染患者30例(对照组),比较两组血清PL... 详细信息

目的探讨血小板计数(PLT)、C反应蛋白(CRP)的变化及SIRS评分对老年感染中毒症患者预后的影响。方法将126例老年感染患者按照国际感染中毒症会议制定的诊断标准分为感染中毒症患者96例(观察组)和单纯感染患者30例(对照组),比较两组血清PLT、CRP的变化及SIRS评分。结果观察组PLT明显低于对照组,CRP明显高于对照组。观察组死亡者(36例)PLT明显低于生存者(60例),随SIRS评分分值增高,病死率有增加趋势。结论PLT、CRP及SIRS评分可用于评估老年感染中毒症预后并指导治疗。

关键词：感染中毒症老年全身炎症反应综合征预后

人子宫内膜异位症裸鼠模型组织形态学变化及血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶9基因表达的研究

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中华妇产科杂志 2004年第11期39卷 759-762,i004页

作者：王丹波张淑兰牛慧彦陆景明中国医科大学附属第二医院妇产科沈阳110004

目的　建立子宫内膜异位症 (内异症 )裸鼠模型 ,并对其相关生物学行为进行研究。方法　取人分泌晚期子宫内膜 ,剪碎 ,置入裸鼠盆、腹腔不同部位 ,内异症 (EM组 )和非内异症 (NEM组 )裸鼠各 2 4只 ;对照组 :3只裸鼠 ,同法将人大网膜组织... 详细信息

目的　建立子宫内膜异位症 (内异症 )裸鼠模型 ,并对其相关生物学行为进行研究。方法　取人分泌晚期子宫内膜 ,剪碎 ,置入裸鼠盆、腹腔不同部位 ,内异症 (EM组 )和非内异症 (NEM组 )裸鼠各 2 4只 ;对照组 :3只裸鼠 ,同法将人大网膜组织置入裸鼠盆、腹腔不同部位。各组裸鼠分别于置入后第 5、15、30天随机脱颈椎处死 ,观察异位病灶生长情况 ,并留取异位病灶 ,在光镜及透射电镜下观察其形态学变化。RT PCR法检测在位内膜及异位病灶血管内皮生长因子 (VEGF)、基质金属蛋白酶 9(MMP 9)mRNA表达 ,免疫组化链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶连接法检测异位病灶雌、孕激素受体表达。结果　内膜置入 5d ,即见异位病灶牢固黏附 ,血液供应丰富。光镜下见腺体细胞及散在间质细胞 ,且随时间延长 ,异位病灶与裸鼠组织融合越明显。 15d时 ,电镜下可见异位病灶内炎性细胞增生、浸润最明显 ,30d时腺细胞中细胞器消失 ,但仍可见分泌颗粒 ,核染色质聚集 ,并有凋亡趋势。与在位内膜比较 ,异位病灶VEGF、MMP 9mRNA表达增强 (P <0 0 5 ) ,异位内膜置入第 15天时表达最强 (VEGF :EM组为 1 11± 0 13、NEM组为 1 10± 0 11;MMP 9:EM组为 1 0 0± 0 11、NEM组为 0 99± 0 0 8) ,第 30天时有所下降 (VEGF :EM组为 0 85± 0

关键词：异位病灶表达置入裸鼠孕激素受体体表细胞器腺细胞分泌

KISS-1和MMP-9在裸鼠子宫内膜异位症模型中的表达及意义

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中国医科大学学报 2004年第6期33卷 487-489页

作者：牛慧彦王丹波张淑兰甘淑君中国医科大学附属第二医院妇产科辽宁沈阳110004 赤峰市元宝山区医院妇产科

目的探讨KISS1和基质金属蛋白酶9(MMP9)在子宫不同生长阶段异位内膜组织中的表达及两者之间的相互作用。方法将生育年龄妇女的分泌晚期子宫内膜组织种植入裸鼠的盆腹腔,建立裸鼠子宫内膜异位症(EM)模型。采用RTPCR方法,检测不同生长阶... 详细信息

目的探讨KISS1和基质金属蛋白酶9(MMP9)在子宫不同生长阶段异位内膜组织中的表达及两者之间的相互作用。方法将生育年龄妇女的分泌晚期子宫内膜组织种植入裸鼠的盆腹腔,建立裸鼠子宫内膜异位症(EM)模型。采用RTPCR方法,检测不同生长阶段异位内膜中KISS1mRNA及MMP9mRNA的表达相对强度。结果KISS1在5,10,15d组和对照组比较,表达降低,差异显著(P0.05)。MMP9在5,10,15,30d组与对照组比较表达增强,差异显著(P<0.05);且15d组表达最强,与5,10,30d组比较差异显著(P<0.05)。KISS1和MMP9两者表达比较呈负相关(r=-0.575,P<0.01)。结论KISS1表达减弱和MMP9表达增强可能与EM的侵袭过程有关,两者在EM发生发展中发挥重要作用。

关键词：子宫内膜异位症裸鼠基质金属蛋白酶基因 KISS-1基因

Metastin和基质金属蛋白酶-9在裸鼠子宫内膜异位症模型中的表达及意义

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生殖与避孕 2005年第10期25卷 593-598页

作者：牛慧彦张淑兰王丹波中国医科大学第二临床学院妇产科沈阳110004

目的:通过建立裸鼠子宫内膜异位症模型,探讨Metastin和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在不同生长阶段的异位内膜组织中的表达及两者之间的相互作用。方法:将生育年龄妇女的分泌晚期子宫内膜组织种植入裸鼠的盆腹腔,建立裸鼠子宫内膜异位症(EMs... 详细信息

目的:通过建立裸鼠子宫内膜异位症模型,探讨Metastin和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在不同生长阶段的异位内膜组织中的表达及两者之间的相互作用。方法:将生育年龄妇女的分泌晚期子宫内膜组织种植入裸鼠的盆腹腔,建立裸鼠子宫内膜异位症(EMs)模型,分别于5d、10d、15d、30d随机处死裸鼠,取异位生长的内膜组织作为研究组,以非EMs生育年龄妇女的子宫内膜组织作为对照组。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法(SP法),检测不同生长阶段异位内膜中Metastin及MMP-9mRNA和蛋白的表达特性。结果:Metastin基因在5d、10d和15d组与对照组比较,表达降低,差异显著(P0．05)。MMP-9基因在5d、10d、15d和30d组的表达与对照组比较,表达增强,差异显著(P<0．05);且15d组表达最强,与5d、10d、30d组比较差异显著(P<0．05)。Metastin和MMP-9两者mRNA表达比较成负相关(r=-0．575,P<0．01)。Metastin蛋白在进展期病灶组(5d、10d和15d)和晚期病灶(30d组)表达率分别为29．2%和75．0％,低于对照组人正常子宫内膜的表达率(100％);MMP-9蛋白在进展期病灶组(5d、10d和15d)和晚期病灶(30d组)表达率分别为87．5％和75．0％,高于对照组人正常子宫内膜的表达率(30．O％)。结论:Metastin表达减弱和MMP-9表达增强可能与内异症的侵袭过程有关,两者在。EMs发生发展中发挥重要作用。

关键词：子宫内膜异位症裸鼠基质金属蛋白酶 Metastin 免疫组织化学

肝细胞生长因子对肺癌95D细胞系增殖和侵袭的影响

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中国医学工程 2009年第3期17卷 164-166页

作者：牛慧彦李慧何平中国医科大学附属盛京医院老年病科辽宁沈阳11004

目的探讨人类重组肝细胞生长因子(rhHGF)对人肺癌95D细胞系侵袭、增殖的影响及其机制。方法应用细胞培养技术培养95D细胞,分别用10,30,50μg/L不同浓度rhHGF作用95D细胞48h,以MTT法检测rhHGF对95D细胞增殖的影响;以过河实验、Transwell... 详细信息

目的探讨人类重组肝细胞生长因子(rhHGF)对人肺癌95D细胞系侵袭、增殖的影响及其机制。方法应用细胞培养技术培养95D细胞,分别用10,30,50μg/L不同浓度rhHGF作用95D细胞48h,以MTT法检测rhHGF对95D细胞增殖的影响;以过河实验、Transwell方法及RT-PCR方法检测rhHGF对95D细胞的运动侵袭能力和对MMP-9基因表达的影响。结果rhHGF可明显增加95D细胞的增殖和生长,且随浓度提高作用增强,呈剂量效应关系。过河实验、Transwell方法显示rhHGF能增强95D细胞的体外侵袭和运动能力,随浓度提高,过河时间缩短,细胞侵袭力增加(P<0.05);RT-PCR测定显示rhHGF作用48h后,95D细胞中MMP-9基因表达上升。结论rhHGF可促进人肺癌95D细胞的生长和增加其体外侵袭能力,其机制与直接增加95D细胞迁移运动,及MMP-9表达增加有关。

关键词：肺癌肝细胞生长因子增殖侵袭

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RhoGDI2在肺鳞癌、腺癌组织和肺癌细胞系中的表达及其临床意义

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中国组织化学与细胞化学杂志 2010年第1期19卷 32-37页

作者：牛慧彦王佳贺徐灿李慧何平中国医科大学附属盛京医院老年病科沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院病理科沈阳110004

目的本研究探讨RhoGDI2在肺鳞癌和腺癌组织及肺癌细胞系中的作用及其临床意义。方法采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测112例肺癌组织标本中RhoGDI2蛋白和20例新鲜肺癌组织中RhoGDI2 mRNA的表达,结合肺癌的临床病理特点进行分析。同时应... 详细信息

目的本研究探讨RhoGDI2在肺鳞癌和腺癌组织及肺癌细胞系中的作用及其临床意义。方法采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测112例肺癌组织标本中RhoGDI2蛋白和20例新鲜肺癌组织中RhoGDI2 mRNA的表达,结合肺癌的临床病理特点进行分析。同时应用Western blot和RT-PCR方法检测肺癌细胞系中RhoGDI2蛋白和mRNA水平的表达情况。结果肺鳞癌和腺癌组织中RhoGDI2的表达与组织分级有关,随着分化程度的降低,RhoGDI2蛋白表达降低(P<0.01);与TNM分期有关,随着分期级别的升高,RhoGDI2蛋白表达降低(P<0.01);与是否淋巴结转移有关,存在淋巴结转移的标本,RhoGDI2蛋白表达降低(P<0.01)。RhoGDI2蛋白的表达与组织类型、患者的年龄和性别无关。在选取的肺癌细胞系A549、95D、SPC-A-1和NCI-H446中,无论mRNA水平还是蛋白水平RhoGDI2都有表达,但表达水平不尽相同,在A549、NCI-H446细胞系中表达较低,在SPC-A-1、95D细胞系中表达相对较高。结论RhoGDI2与肺癌的发生发展和转移过程有关,进一步研究RhoGDI2与其作用因子之间的相互作用,将有助于进一步揭示肺癌发生发展及转移过程。

关键词：鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2 肺鳞癌肺腺癌细胞系转移

人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立及雌、孕激素受体的表达

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中国实验动物学报 2004年第1期12卷 10-13页

作者：王丹波张淑兰牛慧彦陆景明中国医科大学附属二院妇产科沈阳110004

目的　为子宫内膜异位症 (EM)的临床研究提供实验动物模型。方法　实验组 :取EM和正常育龄妇女分泌晚期子宫内膜 ,剪碎 ,随机置入裸鼠盆腹腔 ,实验Ⅰ组切除卵巢 ,实验Ⅱ组不切除卵巢 ;对照组 :同法置入人大网膜。术后给雌激素支持。各... 详细信息

目的　为子宫内膜异位症 (EM)的临床研究提供实验动物模型。方法　实验组 :取EM和正常育龄妇女分泌晚期子宫内膜 ,剪碎 ,随机置入裸鼠盆腹腔 ,实验Ⅰ组切除卵巢 ,实验Ⅱ组不切除卵巢 ;对照组 :同法置入人大网膜。术后给雌激素支持。各组裸鼠分别于 5、10、15、2 0、2 5、3 0d脱颈椎处死 ,观察异位病灶生长情况。免疫组化SP法检测异位病灶雌、孕激素受体表达。结果　子宫内膜种植 5d即见异位病灶牢固粘附 ,主要发生在腹壁(56% )、膀胱旁脂肪 (2 1% )等部位 ,可见腺体细胞及散在间质细胞 ,时间越长 ,病灶与裸鼠组织融合越明显 ,盆腹腔粘连越重。用EM患者和正常育龄妇女内膜移植的异位病灶无差别 ,实验Ⅰ组和实验Ⅱ组的裸鼠所形成的异位病灶亦无差别 ,它们的雌、孕激素受体表达未显示差别 ,多数呈弱表达。结论　裸鼠做为EM早期动物模型科学、简便、可行。

关键词：子宫内膜异位症 EM 实验动物模型裸鼠雌激素孕激素受体