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杨树MXC3基因RNAi载体构建及遗传转化研究

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杨树MXC3基因RNAi载体构建及遗传转化研究

作者：熊瑞婷华中农业大学

学位级别：硕士

近年来,杨树叶锈病发生十分严重,导致杨树人工林的生长受到制约,因此培育速生抗病新品种是目前面临的十分紧迫的问题之一。杨树是多年生植物,生长期较长,短时间内很难利用常规育种手段培育出具有目标性状的优良品种。现代基因工程手段... 详细信息

近年来,杨树叶锈病发生十分严重,导致杨树人工林的生长受到制约,因此培育速生抗病新品种是目前面临的十分紧迫的问题之一。杨树是多年生植物,生长期较长,短时间内很难利用常规育种手段培育出具有目标性状的优良品种。现代基因工程手段可对现有优良品种进行抗病性的特异改造,在较短时间内培育出所需的抗病良种。MXC3基因含有Thaumatin family和Protein kinase domain两个功能域,可能在杨树抗叶锈病中起着重要的作用。RNAi(RNA interference)是一种重要的基因沉默技术,广泛应用于植物基因功能和遗传改良研究中。本文以杨树抗锈病MXC3基因为对象,构建其RNAi载体,以南林895杨(Populus×euramericana cv.‘Nanlin895’)作为受体材料,开展了农杆菌介导的杨树遗传转化研究,以期为MXC3基因的功能研究奠定一定理论基础。本研究获得的主要结果如下:1、利用Gateway技术构建了杨树MXC3基因的RNAi表达载体,并成功将其导入农杆菌C58中;2、优化了南林895杨茎段初代培养基:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+0.25%MES+0.2%肌醇;3、以南林895杨的组培苗叶片作为抗锈病基因MXC3转化的受体材料,建立了高效、稳定的遗传转化体系:(1)本试验用卡那霉素(Kan)作为筛选抗生素,筛选出卡那霉素(Kan)的适宜浓度为20mg/L;(2)用农杆菌介导法转化MXC3基因,对影响转化效率的菌液浓度、侵染时间和筛选方式等因子进行研究,得出最优转化条件:去除叶片边缘和主脉,采用远轴面接触培养基的方式,将叶片接种于分化培养基中暗处预培养3d,然后将叶片浸入到OD600值为0.8的菌液里侵染20min,暗处共培养4d,再延迟筛选10d。利用此转化体系,南林895杨抗性芽诱导率最高达到19.39%;(3)用CTAB法提取本试验获得的28株抗性植株的DNA,并进行PCR检测,结果表明有22株呈阳性,初步证明杨树MXC3 RNAi载体整合到南林895杨树基因组中,阳性率达到78.57%;(4)CTAB法提取转基因植株的m RNA,RT-PCR检测结果表明,22株转基因植株的MXC3基因的表达量与对照(未转化植株)相比均有所降低,表明外源基因影响了杨树内源MXC3基因的表达4、采用炼苗移栽的方法进行转基因阳性组培苗移栽,共移栽转基因阳性植株22株,移栽成活19株,成活率达到86.36%。

关键词： MXC3基因 Gateway克隆 RNA干扰南林895杨遗传转化

ASPECTS不同梗死区域与前循环大血管闭塞性急性缺血性卒中机械取栓术后的预后分析

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临床放射学杂志 2024年第10期43卷 1649-1654页

作者：邹宇涂江龙胡鹏鑫朱涵婷熊瑞芳李承毅唐小平南昌大学第二附属医院医学影像中心 330006 南昌大学第二附属医院神经内科 330006 清华大学国家卓越工程师学院生物医学工程学院北京100084

目的探讨ASPECTS不同梗死区域及其体积与急性前循环大血管闭塞性急性缺血性卒中(LVO-AIS)机械取栓(MT)术后的预后的关系。方法搜集南昌大学第二附属医院2021年1月至2023年10月经CTA或DSA检查证实为单侧急性前循环大血管(颈内动脉、大脑... 详细信息

目的探讨ASPECTS不同梗死区域及其体积与急性前循环大血管闭塞性急性缺血性卒中(LVO-AIS)机械取栓(MT)术后的预后的关系。方法搜集南昌大学第二附属医院2021年1月至2023年10月经CTA或DSA检查证实为单侧急性前循环大血管(颈内动脉、大脑中动脉M1段和M2段近端)闭塞且接受MT治疗后再通的缺血性脑卒中患者的临床及影像资料。临床数据包括一般资料、基线美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和改良Rankin量表(mRS)评分等。影像资料包括颅脑CT平扫、颅脑CT血管成像、颅脑CT灌注成像。根据术后3个月mRS评分将患者分为预后良好组(mRS≤2)和预后不良组(mRS≥3),通过软件评估术前核心梗死体积、缺血半暗带体积、Mismatch比值、ASPECTS总分、梗死部位及核心梗死体积占比。采用单因素及多因素Logistic回归分析影响患者预后的独立危险因素。通过相关性分析,绘制核心梗死体积占比与预后不良概率之间的关系曲线。最后采用ROC曲线评估相关指标的预测效能。结果共纳入97例患者,其中预后良好组61例,预后不良组36例。单因素分析显示,在临床指标中,预后良好组与预后不良组基线NIHSS评分、穿刺至再通时间及术后症状性脑出血有统计学意义。在影像指标中,两组之间核心梗死体积、Mismatch比值、ASPECTS总分及M1、M5、M6、内囊、尾状核梗死具有统计学意义。术前多因素分析显示,基线NIHSS评分及内囊、M6区域梗死是影响患者预后的独立危险因素。线性关系表明,内囊或M6区域核心梗死体积占比与预后不良成正相关。非线性关系表明,内囊和M6区域共同作用下核心梗死体积占比大于58.1%,预后与核心梗死体积占比相关性近乎线性增加。将基线NIHSS评分、梗死部位及其核心梗死体积占比联合评估预后的ROC曲线下面积(AUC)为0.88,敏感度75.0%,特异度93.4%。结论ASPECTS的不同区域对功能结局的贡献并不相同,其中M6区域及内囊核心梗死体积占比是MT术后不良预后独立危险因素,结合基线NIHSS评分能可靠地预测患者预后情况。决定是否进行MT之前,应该充分考虑患者NIHSS评分、核心梗死区域及占比。

关键词： Alberta卒中项目早期CT评分大血管闭塞核心梗死部位机械取栓急性缺血性脑卒中

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失眠症患者类淋巴循环障碍的磁共振成像研究

失眠症患者类淋巴循环障碍的磁共振成像研究

作者：熊瑞芳南昌大学

学位级别：硕士

温度和老化影响下的锂离子电池荷电状态和健康状态联合估计方法研究

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机械工程学报 2024年

作者：蒋帅陈铖段砚州熊瑞北京理工大学机械与车辆学院

锂离子电池被广泛应用于电动汽车、储能电站和电子产品，精确的荷电状态(State of charge, SOC)和健康状态(State of health,SOH)是其安全和高效应用的基础。然而，由于温度和老化状态变化引起的电池非线性动力学特性严重影响了状态估... 详细信息

锂离子电池被广泛应用于电动汽车、储能电站和电子产品，精确的荷电状态(State of charge, SOC)和健康状态(State of health,SOH)是其安全和高效应用的基础。然而，由于温度和老化状态变化引起的电池非线性动力学特性严重影响了状态估计的准确性。以三元锂离子电池为例开展研究：(1)分析了电池在不同老化阶段、温度和SOC区间下的开路电压行为特性，提出了一种考虑老化、温度和SOC的开路电压模型；(2)建立了等效电路模型，提出了一种基于多时间尺度扩展卡尔曼滤波算法(Multi-scaleextendedKalmanfilter,MEKF)和衰减记忆的近似加权总体最小二乘算法(Fadingmemory approximate weighted total least squares, FMAWTLS)的电池SOC和SOH联合估计方法，其中，使用MEKF的宏观尺度估计模型参数、微观尺度估计SOC，使用FMAWTLS估计SOH；(3)应用不同老化状态和温度的电池数据开展算法验证，结果表明SOC和SOH的最大估计误差均小于3%。建立的开路电压模型和联合估计方法为温度和老化影响下的SOC和SOH估计提供了新的思路。

关键词：锂离子电池荷电状态健康状态扩展卡尔曼滤波最小二乘法

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应用支持向量机的锂电池不可逆析锂检测研究

电工技术学报 2024年

作者：陈猛王军王雯雯熊瑞北京理工大学机械与车辆学院

锂离子电池被广泛应用于电动汽车、电化学储能和移动终端产品等，快充需求强烈伴随着析锂及由此引发的安全事故屡有发生。然而，析锂是发生在石墨负极表面的电化学副反应，电池充电析锂难以避免，因此，实时精确的在线析锂检测非常重要... 详细信息

锂离子电池被广泛应用于电动汽车、电化学储能和移动终端产品等，快充需求强烈伴随着析锂及由此引发的安全事故屡有发生。然而，析锂是发生在石墨负极表面的电化学副反应，电池充电析锂难以避免，因此，实时精确的在线析锂检测非常重要。本文以商用钴酸锂电池为研究对象：分析了电池不同老化状态、工况条件下的小倍率放电容量增量曲线，提出了一种人工特征提取和筛选方法；应用非线性支持向量机算法，提出了针对不可逆析锂在线无损检测的电池析锂状态分类方法；采用已有析锂分类标签开展检测精度验证，结果表明析锂检出率≥95%、误检率＜10%。

关键词：锂离子电池支持向量机容量增量曲线析锂检测

脑缺血再灌注后补体C3高迁移率族蛋白B1及谷胱甘肽过氧化物酶4表达变化

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第6期26卷 699-703页

作者：朱涵婷熊瑞芳李承毅赵锡海唐小平南昌大学第二附属医院医学影像中心 330006 清华大学医学院生物医学影像研究中心

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间点脑组织补体C3、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达的变化。方法选择SPF级健康雄性SD大鼠72只,按数字随机法分为假手术组36只和模型组36只,线栓法制备大脑中动脉闭塞模型... 详细信息

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间点脑组织补体C3、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达的变化。方法选择SPF级健康雄性SD大鼠72只,按数字随机法分为假手术组36只和模型组36只,线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,根据再灌注时间分为3、6、24 h及3 d共4个时间点,每个时间点9只。参照Zea Longa评分法行神经功能学评分。每组行R2StarMap成像、弥散加权成像(DWI)、T_1加权成像、T_2加权成像扫描。测量DWI异常信号体积,检测脑梗死体积。R2StarMap原始图经后处理生成R2^(*)伪彩图,测量双侧大脑中动脉供血区R2^(*)值,检测脑铁沉积含量。采用蛋白免疫印迹法检测C3、HMGB1、GPX4表达。结果假手术组大鼠无神经功能损伤,模型组大鼠3、6、24 h及3 d神经功能评分较假手术组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠3、6、24 h及3 d右侧脑梗死体积较假手术组明显增大,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组3、6、24 h及3 d右侧大脑中动脉供血区R2^(*)值明显高于左侧(P<0.05,P<0.01)。模型组3、6、24 h及3 d右侧大脑中动脉供血区R2^(*)值明显高于假手术组右侧(P<0.05,P<0.01)。模型组3、6、24 h及3 d的R2^(*)比值明显高于假手术组(1.82±0.82 vs 1.12±0.31,P<0.05;1.31±0.26 vs 1.04±0.14,P<0.05;1.94±0.74 vs 1.06±0.10,P<0.01;1.99±0.39 vs 1.02±0.11,P<0.01)。与假手术组比较,模型组3、6、24 h及3 d补体C3和HMGB1表达明显升高,GPX4表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能对脑组织中补体C3、HMGB1、GPX4表达有显著影响。

关键词：再灌注损伤补体C3 高迁移率族蛋白质类谷胱甘肽过氧化酶

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温度和老化影响下的锂离子电池荷电状态和健康状态联合估计方法研究

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机械工程学报 2024年

作者：蒋帅陈铖段砚州熊瑞北京理工大学机械与车辆学院

锂离子电池被广泛应用于电动汽车、储能电站和电子产品，精确的荷电状态(State of charge， SOC)和健康状态(State of health， SOH)是其安全和高效应用的基础。然而，由于温度和老化状态变化引起的电池非线性动力学特性严重影响了状态... 详细信息

锂离子电池被广泛应用于电动汽车、储能电站和电子产品，精确的荷电状态(State of charge， SOC)和健康状态(State of health， SOH)是其安全和高效应用的基础。然而，由于温度和老化状态变化引起的电池非线性动力学特性严重影响了状态估计的准确性。以三元锂离子电池为例开展研究：(1)分析了电池在不同老化阶段、温度和SOC区间下的开路电压行为特性，提出了一种考虑老化、温度和SOC的开路电压模型；(2)建立了等效电路模型，提出了一种基于多时间尺度扩展卡尔曼滤波算法(Multi-scale extended Kalman filter， MEKF)和衰减记忆的近似加权总体最小二乘算法(Fading memory approximate weighted total least squares， FMAWTLS)的电池SOC和SOH联合估计方法，其中，使用MEKF的宏观尺度估计模型参数、微观尺度估计SOC，使用FMAWTLS估计SOH；(3)应用不同老化状态和温度的电池数据开展算法验证，结果表明SOC和SOH的最大估计误差均小于3%。建立的开路电压模型和联合估计方法为温度和老化影响下的SOC和SOH估计提供了新的思路。

关键词：锂离子电池荷电状态健康状态扩展卡尔曼滤波最小二乘法

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锂离子电池热-电特性耦合建模与可视化研究

机械工程学报 2024年

作者：熊瑞张凯旋李海龙北京理工大学机械与车辆学院梅拉达伦大学能源学院

锂离子电池电化学反应和产热过程复杂，影响因素繁多，其精确的数学建模和内部状态可视化是动力电池系统管理的基础。考虑电池外形特点和微观几何结构，建立了动力电池电化学和热特性的耦合机理模型；分析模型参数体系，提出了拆解测量... 详细信息

锂离子电池电化学反应和产热过程复杂，影响因素繁多，其精确的数学建模和内部状态可视化是动力电池系统管理的基础。考虑电池外形特点和微观几何结构，建立了动力电池电化学和热特性的耦合机理模型；分析模型参数体系，提出了拆解测量和测试数据驱动辨识相结合的耦合机理模型参数获取方法；建立锂离子电池电化学反应过程的数值解析方程，应用颗粒内部锂离子扩散机理实现了固相锂离子浓度可视化，解释了温度和倍率对容量的耦合影响。完善扩展了动力电池系统的测试平台，开展了模型验证和评价实验，结果表明，端电压预测误差低于50 mV，温度估计误差低于2℃。

关键词：锂离子电池联合仿真可视化分析拆解测量电化学-热耦合模型

涉农高职院校培育农村创新创业青年人才路径探索——以广东省为例

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农村.农业.农民(B版) 2024年第6期 52-54页

作者：樊晶艳潘慧婷熊瑞权陆璃广东科贸职业学院

培养一批高素质的农村创新创业青年人才，对乡村产业兴旺、经济发展、农民增收及城乡融合发展等都具有重大意义。当前广东省积极支持农村创新创业青年人才培育，涉农高职院校在服务此类培训中发挥了重要作用。但在培训的前期需求调研、... 详细信息

培养一批高素质的农村创新创业青年人才，对乡村产业兴旺、经济发展、农民增收及城乡融合发展等都具有重大意义。当前广东省积极支持农村创新创业青年人才培育，涉农高职院校在服务此类培训中发挥了重要作用。但在培训的前期需求调研、课程体系设计、培训组织模式及培训后跟踪服务等方面存在一些问题。为此，应深入了解农村创新创业青年人才的实际需求，构建符合实际需求的课程体系，优化人才培育组织模式，健全跟踪服务指导体系，为乡村振兴输送更多高素质创新创业人才。

关键词：高职院校农村创新创业青年人才优化路径