检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠PDIP1β基因的克隆及功能研究

大鼠PDIP1β基因的克隆及功能研究

作者：熊熙文湖南师范大学

学位级别：硕士

肿瘤坏死因子α(TNF-α)是一个多功能的细胞因子，在许多细胞生理过程中起重要作用，比如细胞凋亡，细胞增殖，B细胞激活，肝细胞的再生以及一些急性的细胞炎症反应等。人类的PDIP1(polymerase delta-interacting protein 1)是一种受TNF... 详细信息

肿瘤坏死因子α(TNF-α)是一个多功能的细胞因子，在许多细胞生理过程中起重要作用，比如细胞凋亡，细胞增殖，B细胞激活，肝细胞的再生以及一些急性的细胞炎症反应等。人类的PDIP1(polymerase delta-interacting protein 1)是一种受TNF-α和白介素6(IL-6)诱导的蛋白，并且与增殖细胞核抗原(PCNA)和DNA聚合酶的小亚基δ有相互作用。在大鼠中，也证实了PDIP1基因的存在并且已被克隆。我们用大鼠的PDIP1基因在GeneBank中搜寻到了一组与PDIP1有较大的序列相似性的EST，并且通过RACE扩增出了其cDNA全长，命名为PDIP1β。大鼠的PDIP1与PDIP1β在氨基酸序列上享有65.1％的等同性，并且在结构上也十分保守。在N端区域，都有一个BTB／POZ的结构域;而在C端区域，则有高度保守的PCNA的结合基序(QTKV-EFP)。根据PDIP1能够与PCNA有相互作用，我们用GST pull-down，免疫共沉淀，以及细胞免疫化学等方法确定了大鼠PDIP1β与PCNA之间也有相互作用，因而从功能上证明了PDIP1β与PDIP1之间的同源性。同样，因为TNF-α在肝脏修复过程中的重要性，而PDIP1是受TNF-α诱导的，我们利用大鼠的部分肝切除模型，分析了与PDIP1同源的PDIP1β基因在肝脏修复中的不同时间点的表达差异，为进一步研究PDIP1家族的功能提供了基础。

关键词：大鼠 PDIP1β 基因克隆蛋白质相互作用部分肝切除

B12基因在小鼠部分肝切除后的表达差异分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

湖南师范大学自然科学学报 2004年第1期27卷 71-74页

作者：熊熙文刘鑫胡小晓蒋小云刘云海张健湖南师范大学生命科学学院基因敲除与转基因动物研究室中国长沙410081 南华大学生命科学与技术学院实验动物学部中国衡阳421001

B12是一种受TNF α诱导的蛋白.利用肝脏部分切除小鼠模型以及核酸酶保护反应研究了B12基因在肝脏部分切除后不同时间的表达差异,发现在受损后28h,B12的表达开始增强,到36h表达一直呈上升趋势,推测该基因可能与肝脏修复过程中DNA的复制有... 详细信息

B12是一种受TNF α诱导的蛋白.利用肝脏部分切除小鼠模型以及核酸酶保护反应研究了B12基因在肝脏部分切除后不同时间的表达差异,发现在受损后28h,B12的表达开始增强,到36h表达一直呈上升趋势,推测该基因可能与肝脏修复过程中DNA的复制有关,为B12基因的进一步的功能研究提供了理论基础.

关键词： B12基因小鼠部分肝切除表达差异核酸酶保护反应肝脏修复

小鼠肿瘤致死因子α诱导的TNFAIP1蛋白与DNA聚合酶δ亚单位的相互作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖南师范大学自然科学学报 2004年第3期27卷 70-74页

作者：胡小晓熊熙文周建林张健湖南师范大学生命科学学院生化系中国长沙410081

人类B12蛋白是第一个被鉴定受肿瘤坏死因子α的诱导的蛋白,在小鼠中又称为TNFAIP1,其功能尚未见报导.采用蛋白质pull down、荧光定位和免疫共沉淀分析一系列实验证明小鼠TNFAIP1蛋白与DNA聚合酶δ的亚单位P50发生直接相互作用.由此推测T... 详细信息

人类B12蛋白是第一个被鉴定受肿瘤坏死因子α的诱导的蛋白,在小鼠中又称为TNFAIP1,其功能尚未见报导.采用蛋白质pull down、荧光定位和免疫共沉淀分析一系列实验证明小鼠TNFAIP1蛋白与DNA聚合酶δ的亚单位P50发生直接相互作用.由此推测TNFAIP1蛋白参与DNA复制过程,并为研究人TNFAIP1基因的功能提供参考.

关键词：蛋白亚单位致死因子小鼠肿瘤诱导 DNA聚合酶肿瘤坏死因子a DNA复制相互作用基因

沉默信号调节蛋白6在溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中的表达及意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新乡医学院学报 2021年第9期38卷 806-811页

作者：于佳卉毛光兰王庆志熊熙文新乡医学院法医学院河南新乡453003 新乡医学院第三附属医院康复科河南新乡453003

探讨沉默信号调节蛋白(SIRT)6在溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中的表达及意义。方法将22只14日龄清洁级无病原体C57BL6/J野生型(WT)小鼠分为WT对照组(n=6)和WT-葡聚糖硫酸钠(WT-DSS)组(n=16),将13只肠道上皮细胞敲除SIRT6基因(SIRT6^(IK... 详细信息

探讨沉默信号调节蛋白(SIRT)6在溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中的表达及意义。方法将22只14日龄清洁级无病原体C57BL6/J野生型(WT)小鼠分为WT对照组(n=6)和WT-葡聚糖硫酸钠(WT-DSS)组(n=16),将13只肠道上皮细胞敲除SIRT6基因(SIRT6^(IKO))小鼠分为SIRT6^(IKO)对照组(n=3)和SIRT6^(IKO)-DSS组(n=10)。WT对照组和SIRT6^(IKO)对照组小鼠给予正常蒸馏水喂养,WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠给予25 g·L^(-1) DSS间断性喂养(每日5 mL,连续7 d,然后更换正常饮用水喂养14 d为1个循环,共3个循环)建立UC模型。每天称小鼠体质量,观察小鼠大便性状、肉眼血便,计算小鼠疾病活动度指数(DAI)评分。于造模第3个循环末,将各组小鼠采用颈椎脱臼法处死,取新鲜结肠组织,应用苏木精-伊红(HE)染色观察WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠黏膜损伤的病理学变化并进行评分,Western blot法检测WT对照组,SIRT6^(IKO)对照组和WT-DSS组小鼠结肠组织中SIRT6蛋白表达来判断基因敲除效率,免疫组织化学法检测WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织中巨噬细胞特异性标志物F4/80的表达,实时荧光定量聚合酶链反应法检测WT-DSS组和SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平。结果SIRT6^(IKO)对照组小鼠结肠组织中SIRT6蛋白相对表达量显著高于WT对照组(P0.05);造模第1、2个循环末,SIRT6^(IKO)-DSS组与WT-DSS组小鼠体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);造模第3个循环末,SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠体质量显著低于WT-DSS组(P0.05);造模第2个循环末,SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠DAI评分显著高于第1个循环末(P<0.05);造模第2、3个循环末,SIRT6IKO-DSS组小鼠DAI评分显著高于WT-DSS组(P<0.05)。SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织组织学损伤指数显著低于WT-DSS组(P<0.05)。SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织F4/80表达评分显著高于WT-DSS组(P<0.05)。SIRT6^(IKO)-DSS组小鼠结肠组织中IL-6、TNF-αmRNA相对表达量显著高于WT-DSS组(P<0.05)。结论UC小鼠结肠组织中SIRT6呈低表达,结肠组织中SIRT6缺失会加重结肠组织的炎症反应和损伤,增加UC易感性。

关键词：沉默信号调节蛋白6 溃疡性结肠炎葡聚糖硫酸钠黏膜损伤

SIRT6在二乙基亚硝胺诱导小鼠自发肝癌中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新乡医学院学报 2020年第4期37卷 332-336页

作者：朱会生张翠翠范蕊熊熙文千新来新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453003 中国人民解放军陆军第八十三集团军医院普通外科河南新乡453000 新乡医学院法医学院分子代谢实验室河南新乡453003

目的探讨SIRT6在二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠自发肝癌中的作用。方法选取Huh7-sirt6细胞和Huh7-GFP细胞,常规培养,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测过表达SIRT6对肝癌细胞体外增殖的影响。选取Wt小鼠和TgSIRT6小鼠各1只,Western blot法检测Tg... 详细信息

目的探讨SIRT6在二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠自发肝癌中的作用。方法选取Huh7-sirt6细胞和Huh7-GFP细胞,常规培养,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测过表达SIRT6对肝癌细胞体外增殖的影响。选取Wt小鼠和TgSIRT6小鼠各1只,Western blot法检测TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6表达;另选取15日龄清洁级无病原体全身性过表达SIRT6转基因(TgSIRT6)小鼠20只(雄性14只,雌性6只)和C57BL6/J野生型(Wt)小鼠18只(雄性12只,雌性6只)为研究对象,将小鼠分为TgSIRT6-DEN组16只(雄性10只,雌性6只)、Wt-DEN组14只(雄性8只,雌性6只)、TgSIRT6对照组4只(雄性)和Wt对照组4只(雄性)。TgSIRT6-DEN组和Wt-DEN组小鼠腹腔注射DEN25 mg·kg-1;TgSIRT6对照组和Wt对照组小鼠腹腔注射相同剂量的生理盐水。给药后48周颈椎脱臼法处死各组小鼠,取肝脏,观察肝脏颜色、大小、质地及有无癌变结节,记录肝脏肿瘤的大小、数量,并行肝肿瘤组织苏木精-伊红染色。结果细胞培养第4天,Huh-SIRT6细胞增殖速度显著低于Huh-GFP细胞(P<0.05)。Wt小鼠和TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6的表达量分别为0.247±0.055和1.178±0.037,TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6的表达量高于Wt小鼠(P<0.05)。TgSIRT6对照组和Wt对照组小鼠肝脏中未观察到肿瘤;TgSIRT6-DEN组雄鼠和雌鼠的致瘤率分别为80%(8/10)和33%(2/6),Wt-DEN组雄鼠和雌鼠的致瘤率分别为100%(8/8)和83%(5/6);TgSIRT6-DEN组雄鼠和雌鼠肿瘤数量及最大肿瘤直径均小于Wt-DEN组(P<0.05)。HE染色结果显示,肿瘤为肝细胞癌。结论肝细胞中SIRT6过表达能抑制DEN诱发的肝脏肿瘤的形成。

关键词：二乙基亚硝胺肝脏自发肿瘤 SIRT6 转基因小鼠

三磷腺苷合酶抑制因子1基因敲除对小鼠巨噬细胞线粒体功能和三磷腺苷水平的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新乡医学院学报 2019年第6期36卷 501-505页

作者：于晓晴钟根深熊熙文梁银明王辉章小英叶建平新乡医学院医学检验学院河南新乡453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心河南新乡453003 新乡医学院医学法医学院河南新乡453003 上海交通大学第六人民医院中心实验室上海201306

目的探讨三磷腺苷合酶抑制因子1(ATPIF1)基因敲除对小鼠巨噬细胞内三磷腺苷(ATP)水平及线粒体功能的影响。方法选取5只野生型C57BL/6小鼠为WT组,5只ATPIF1基因敲除小鼠为KO组。处死小鼠后,提取小鼠骨髓细胞进行培养,并诱导其分化成熟为... 详细信息

目的探讨三磷腺苷合酶抑制因子1(ATPIF1)基因敲除对小鼠巨噬细胞内三磷腺苷(ATP)水平及线粒体功能的影响。方法选取5只野生型C57BL/6小鼠为WT组,5只ATPIF1基因敲除小鼠为KO组。处死小鼠后,提取小鼠骨髓细胞进行培养,并诱导其分化成熟为骨髓来源巨噬细胞(BMDM)。在未加脂多糖(LPS)的基础状态及LPS刺激2、4h后收集细胞,应用ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平,应用细胞能量代谢分析仪检测细胞氧消耗率,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞内三羧酸循环中关键酶丙酮酸激酶(PKm)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、柠檬酸合酶(CS)、α-酮戊二酸脱氢酶(OGDC)mRNA相对表达量。结果与WT组比较,在基础状态下KO组小鼠BMDM内ATP水平、基础氧耗量、用于ATP合成的氧耗量、最大氧耗量及PKm、IDH、CS、OGDCmRNA相对表达量显著增加(P<0.05,P<0.01);LPS刺激2、4h后,KO组小鼠BMDM内ATP水平、基础氧耗量、用于ATP合成的氧耗量和最大氧耗量及CS、OGDCmRNA相对表达量均显著增加(P<0.05)。结论ATPIF1基因敲除可增加小鼠BMDM内ATP水平,并提高三羧酸循环相关酶mRNA表达和线粒体氧化磷酸化水平。

关键词： ATP合酶抑制因子1 巨噬细胞线粒体三羧酸循环氧耗量

X-连锁低磷酸盐血症Pug小鼠的听力学和耳形态学研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华耳科学杂志 2008年第3期6卷 315-320页

作者：徐琳高下熊熙文高翔陈杰张倩丁小琼麻晓峰范迟东南大学医学院耳鼻咽喉科南京210009 南京大学医学院附属鼓楼医院耳鼻咽喉科南京210008 南京大学模式动物研究所南京210061

目的Phex基因点突变Pug小鼠是典型的人类X-连锁低磷酸盐血症小鼠模型。通过研究Pug小鼠的听力学表型,探讨Phex基因点突变对小鼠听觉功能与内耳形态的影响。方法运用听性脑干诱发电位(ABR)对4月龄Pug小鼠和野生型小鼠进行听功能测试,取... 详细信息

目的Phex基因点突变Pug小鼠是典型的人类X-连锁低磷酸盐血症小鼠模型。通过研究Pug小鼠的听力学表型,探讨Phex基因点突变对小鼠听觉功能与内耳形态的影响。方法运用听性脑干诱发电位(ABR)对4月龄Pug小鼠和野生型小鼠进行听功能测试,取小鼠耳蜗进行大体形态观察,运用石蜡切片观察小鼠耳蜗骨壁、前庭膜、血管纹、螺旋韧带、盖膜、Corti器、螺旋神经节等结构。运用扫描电镜观察小鼠耳蜗Corti器上的内、外毛细胞及其表皮板等结构。结果Pug小鼠的ABR在短声和8kHz、16kHz、32kHz短纯音刺激的反应阈值均有提高,在短声和16kHz、32kHz频率,其差异具有统计学意义(P<0.05)。小鼠耳蜗骨壁增厚,骨质过度增长,有大量骨质矿化不完全区域;耳蜗底转部位螺旋神经节出现明显退化,神经元数目大量减少;耳蜗顶转到底转内、外毛细胞静纤毛散在性缺失,静纤毛形态异常。结论Phex基因点突变引起的基因功能缺失导致了Pug小鼠的听觉功能减退和耳蜗形态异常。

关键词： Phex基因 X-连锁低磷酸盐血症感音神经性耳聋小鼠

肠上皮Depdc5/mTORC1信号轴调控小鼠小肠上皮稳态

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基础医学与临床 2022年第8期42卷 1213-1219页

作者：张新格马洁王庆志辛悦杨晨妍熊熙文新乡医学院法医学院河南新乡453000 新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453000

目的探讨Depdc5敲除介导的mTORC1信号通路持续激活对小鼠肠道上皮稳态的调控作用。方法将小鼠分为4组,Depdc5组(对照组)、Depdc5:Villin-Cre组(IKO组)、rapamycin-Depdc5组(rap-Ctrl组)、rapamycin-Depdc5:Villin-Cre组(rap-IKO组),每组各5只。Western blot检测肠道上皮DEPDC5蛋白表达及mTORC1下游分子S6的磷酸化(PS6)水平。RT-qPCR检测小肠组织中不同类型细胞标记基因Dclk1、Trpm5、Muc2 mRNA的表达。苏木精-伊红染色(HE染色)对组织形态学进行检查。免疫组化染色(IHC)检测簇细胞、潘氏细胞、增殖细胞的数目。阿尔新蓝染色法检测杯状细胞的数目。结果IKO组小鼠小肠和结肠组织中PS6蛋白表达为0.957±0.028高于对照组的0.598±0.041(P<0.05),并且IKO组小鼠小肠上皮不同类型细胞标记基因Dclk1、Trpm5、Muc2的mRNA均低于对照组(P<0.05)。此外,IKO组小鼠小肠中簇细胞、潘氏细胞、杯状细胞的细胞数目显著低于对照组,隐窝深度显著高于对照组(P<0.05),增殖细胞显著高于对照组(P<0.05)。结论mTORC1过度激活抑制肠道上皮细胞(IECs)的分化,破坏小鼠肠上皮细胞稳态。

关键词： Depdc5 mTORC1 肠上皮细胞雷帕霉素

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新型经营主体劳均适度规模及其实现难易程度

西南大学学报（自然科学版） 2024年第1期46卷 144-154页

作者：熊熙张仕超刘竞宇欧云梅邵景安重庆师范大学三峡库区地表过程与环境遥感重庆市重点实验室重庆401331 重庆青年职业技术学院重庆400712

新型经营主体是推动农业现代化进程的重要载体,农户兼业化、农民老龄化、农村空心化使得农村劳动力紧缺,因地制宜地研究新型经营主体劳均适度规模具有重要意义.基于对重庆市江津区石门镇现代农业示范园区新型经营主体调查数据及石门镇... 详细信息

新型经营主体是推动农业现代化进程的重要载体,农户兼业化、农民老龄化、农村空心化使得农村劳动力紧缺,因地制宜地研究新型经营主体劳均适度规模具有重要意义.基于对重庆市江津区石门镇现代农业示范园区新型经营主体调查数据及石门镇各村社会经济统计数据,运用柯布—道格拉斯生产函数,基于利润最大化,从产业异质化视角,以劳均适度规模为出发点,测算出不同产业类型新型经营主体的适度经营规模,并运用熵权法评估石门镇村级适度规模实现难易程度.结果显示:①石门镇新型经营主体大部分未能达到适度规模,只有少部分主体达到或超过适度规模值.劳均适度经营规模中“度”值最大的为果蔬产业(3.42 hm^(2)),最小的为花木产业(0.29 hm^(2)).②石门镇实现适度规模经营难度整体较大,其中李家村为较易,金龙村、白坪村为一般,永安村为较难.测算出不同产业新型经营主体适度经营规模,明确地区实现适度规模难易程度,可认识不同地区、不同产业新型农业发展的差异,有助于推动新型经营主体差别化培育,为丘陵山区实现适度规模经营,推进现代农业发展提供参考.

关键词：现代农业不同产业新型经营主体适度规模经营