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成年干细胞分化为卵母细胞样细胞的研究进展

生殖与避孕 2009年第5期29卷 314-318页

作者：熊明娣杨蓓米美玲邹挺南昌大学医学院生理教研室南昌330006

近年研究表明不仅胚胎干细胞、胚胎性腺和皮肤细胞能分化产生卵母细胞,而且成年骨髓干细胞能表达生殖干细胞的标志基因、移植雌鼠骨髓细胞可使不育的受体卵巢中重新出现卵母细胞和卵泡,卵巢表面上皮细胞能形成生殖细胞样细胞,并分化为... 详细信息

近年研究表明不仅胚胎干细胞、胚胎性腺和皮肤细胞能分化产生卵母细胞,而且成年骨髓干细胞能表达生殖干细胞的标志基因、移植雌鼠骨髓细胞可使不育的受体卵巢中重新出现卵母细胞和卵泡,卵巢表面上皮细胞能形成生殖细胞样细胞,并分化为透明带蛋白阳性的卵母细胞和组装形成新的初级卵泡,以及胰腺干细胞也能诱导出现干细胞标志物、生殖细胞标志物以及减数分裂标志基因表达,产生卵母细胞样细胞,但是这些新产生的卵母细胞是否有正常功能受到质疑,卵母细胞生成调控的分子基础正在进一步探索之中。

关键词：卵母细胞样细胞骨髓干细胞成年干细胞分化

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骨髓间充质干细胞衍生的精原干细胞

解剖学杂志 2008年第1期31卷 122-125页

作者：杨蓓邹挺米美玲熊明娣徐斯凡南昌大学医学院生理学教研室南昌330006 中央民族大学生命与环境科学学院北京100081

近年来精原干细胞（spermatogonial stem cells，SSC）研究有两个具有重要意义的研究进展，一个进展是从新生小鼠和成年小鼠睾丸生殖细胞通过分离、基因分选、培养的SSC在胚胎干细胞（embryonic stem cells，ESC）培养条件下获得ESC特... 详细信息

近年来精原干细胞（spermatogonial stem cells，SSC）研究有两个具有重要意义的研究进展，一个进展是从新生小鼠和成年小鼠睾丸生殖细胞通过分离、基因分选、培养的SSC在胚胎干细胞（embryonic stem cells，ESC）培养条件下获得ESC特征，在离体条件下具有自发形成3个胚层的分化能力，在皮下注射这些细胞至免疫缺损小鼠，可以形成畸胎瘤；另一个进展是从骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)在离体培养条件下，通过基因挑选和改变培养条件可以衍生出具有精原干细胞和精原细胞分子特征的生殖细胞。

关键词：精原干细胞骨髓间充质细胞衍生 cells 睾丸生殖细胞成年小鼠培养条件胚胎干细胞

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脂多糖对小鼠肝脏鞘磷脂合酶2表达的影响

南昌大学学报（理科版） 2014年第6期38卷 605-608页

作者：潘泽政赵红艳熊明娣江瑜颜念龙南昌大学基础医学院江西南昌330006

LPS在细菌性感染所致的全身性炎症反应中具有重要的作用,而鞘磷脂(SM)参与了炎症反应的发生。催化SM从头合成的关键酶是SMS1和SMS2,其中SMS2和炎症反应最为密切。目前,由LPS所致的小鼠全身性炎症反应中,在小鼠肝脏部位SMS2的表达情况未... 详细信息

LPS在细菌性感染所致的全身性炎症反应中具有重要的作用,而鞘磷脂(SM)参与了炎症反应的发生。催化SM从头合成的关键酶是SMS1和SMS2,其中SMS2和炎症反应最为密切。目前,由LPS所致的小鼠全身性炎症反应中,在小鼠肝脏部位SMS2的表达情况未见报道。为了阐明这一情况,本研究利用10mg/kg的LPS处理BABC/L小鼠18h,取小鼠肝脏进行HE染色,并提总RNA和总蛋白,分别利用实时荧光定量PCR和Western blot研究SMS2在mRNA和蛋白水平的表达情况,并利用薄层层析(TLC)测定对其酶活的影响。研究发现,和对照组相比,实验组SMS2的mRNA和蛋白水平均有显著增加(P<0.05,n=6),分别增加了116%和65.8%,而在酶活水平亦有非常显著增加(P<0.001,n=6),增加了64.3%。由此可见SMS2在LPS所致的炎症反应中起到重要作用,其酶活增加是LPS所致炎症反应所必要的,这将对炎症的治疗提供新的靶点,为新的抗炎药物的开发提供理论依据。

关键词：全身性炎症反应内毒素 SMS2

D609增强HT-29细胞对辛伐他汀的敏感性

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南昌大学学报（理科版） 2016年第6期40卷 600-605页

作者：熊明娣夏坤章盼盼阮昭慧李华颜念龙南昌大学基础医学院江西南昌330006

为了探讨D609能否提高HT-29细胞对辛伐他汀的敏感性及其可能的机制,利用不同浓度的辛伐他汀处理人结肠癌细胞(HT-29)24h,利用MTT法测定并计算出IC50。随后根据上述浓度将HT-29细胞随机分为四组:对照组、D609组、辛伐他汀组和D609+辛伐... 详细信息

为了探讨D609能否提高HT-29细胞对辛伐他汀的敏感性及其可能的机制,利用不同浓度的辛伐他汀处理人结肠癌细胞(HT-29)24h,利用MTT法测定并计算出IC50。随后根据上述浓度将HT-29细胞随机分为四组:对照组、D609组、辛伐他汀组和D609+辛伐他汀组,加药处理24h后,采用MTT法检测D609和辛伐他汀对HT-29细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(WB)检测各组RIP140、SMS1、SMS2、BCL-2和BAX的表达。MTT实验结果显示,辛伐他汀可明显抑制HT-29细胞生长,且呈剂量依赖效应,其IC50为:67.98μmol·L-1,而辛伐他汀和D609联用可明显增强辛伐他汀对HT-29的生长抑制作用(P<0.05,n=3)。qRT-PCR和WB实验结果表明D609和辛伐他汀处理均上调了RIP140及BAX的表达,但降低了SMS1、SMS2、BCL-2的表达(P<0.05,n=3),而两者联用可显著增强这些改变(P<0.05,n=3),即D609可提高HT29细胞对辛伐他汀的敏感性,其机制可能与D609通过抑制SMS的活性和增加RIP140的表达有关。

关键词： D609 辛伐他汀 HT-29细胞鞘磷脂合酶

SMS沉默对HepG2细胞炎症和CD14表达的影响

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南昌大学学报（理科版） 2013年第4期37卷 404-408页

作者：张心怡胡时栋罗达亚李华熊明娣丁毅朱伟锋颜念龙南昌大学第二附属医院江西南昌330006 南昌大学基础医学院江西南昌330006 南昌大学医学实验中心江西南昌330006

肝细胞的炎性损伤与全身性炎症引起的多器官功能障碍的发生相关,LPS可致全身性炎症,在炎症发生过程中,CD14是LPS的膜受体,可通过激活NF-κB诱导炎症相关因子的表达,CD14主要分布于细胞膜脂筏部位,脂筏是由鞘磷脂(SM)和胆固醇相互锚定,... 详细信息

肝细胞的炎性损伤与全身性炎症引起的多器官功能障碍的发生相关,LPS可致全身性炎症,在炎症发生过程中,CD14是LPS的膜受体,可通过激活NF-κB诱导炎症相关因子的表达,CD14主要分布于细胞膜脂筏部位,脂筏是由鞘磷脂(SM)和胆固醇相互锚定,并与相关蛋白质组成的一种微空间结构,因此降低SM的合成,会降低SM在脂筏部位的含量,进而改变脂筏结构及CD14在脂筏部位的分布,最终影响炎症的发生。本研究利用干扰载体pSUPER-SMS沉默HepG2细胞鞘磷脂合酶(SMS)的表达,并检测SM在脂筏部位的含量及CD14和TNF-ɑ的表达,结果显示SMS1和SMS2的mRNA水平表达和酶活都有显著下降(P<0.001,n=3),SM在脂筏部位含量和CD14的表达均有显著降低(P<0.001,n=3),导致LPS所致HepG2细胞TNF-ɑmRNA水平的表达下降。可见SMS可通过改变CD14在脂筏部位的含量,最终影响和炎症发生相关分子TNF-ɑ的表达。

关键词：鞘磷脂合酶脂筏 CD14 HepG2细胞

雌性大鼠骨髓干细胞体外从头合成雌二醇的研究

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广东医学 2010年第12期31卷 1508-1511页

作者：卢夏英杨蓓熊明娣倪秀丽邹挺王晶磊喻晓春高俊虹徐斯凡南昌大学基础医学院生理教研室南昌330006 中国中医科学院医学实验中心北京100700 中国中医科学院针灸研究所北京100700 中央民族大学中国少数民族传统医学研究院北京100081

目的研究雌性大鼠骨髓干细胞（BMSCs）在含10%胎牛血清的高糖DMEM体外培养条件下能否分化为产生雌二醇（E2）及表达芳香化酶（aromatase,P450arom）的细胞,为卵巢早衰、老年人骨质疏松症等疾病的治疗提供新的可能途径。方法体外分离成... 详细信息

目的研究雌性大鼠骨髓干细胞（BMSCs）在含10%胎牛血清的高糖DMEM体外培养条件下能否分化为产生雌二醇（E2）及表达芳香化酶（aromatase,P450arom）的细胞,为卵巢早衰、老年人骨质疏松症等疾病的治疗提供新的可能途径。方法体外分离成年雌性SD大鼠的骨髓干细胞,用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养增殖,加或不加全反式视黄酸（all-trans retinoic acid,ATRA）诱导分化,分为对照组（不加ATRA）和ATRA组（加ATRA）,放射性免疫法（RIA）检测两组细胞培养液中E2的浓度;RT-PCR检测两组细胞中芳香化酶基因CYP19 mRNA的表达和FSHR mRNA的表达;免疫细胞化学检测两组细胞中芳香化酶的表达情况。离体培养第3代雌性大鼠骨髓干细胞,RT-PCR示对照组和ATRA组从培养第1天开始均表达CYP19 mRNA和FSHR mRNA,免疫细胞化学示两组细胞从培养第2-4天都有P450arom的阳性细胞表达,从培养24 h开始在两组细胞培养液中都检测到较高水平的E2。结果离体培养第3代雌性大鼠骨髓干细胞,RT-PCR示对照组和ATRA组从培养第1天开始均表达CYP19 mRNA和FSHR mRNA,免疫细胞化学示两组细胞从培养第2-4天都有P450arom的阳性细胞表达,从培养24 h开始在两组细胞培养液中都检测到较高水平的E2。结论雌性大鼠骨髓干细胞在离体培养条件下能从头合成雌二醇及表达芳香化酶。

关键词：骨髓干细胞雌二醇分化

睾丸支持细胞与大鼠海马细胞培养作用的初步研究

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睾丸支持细胞与大鼠海马细胞培养作用的初步研究

雌性大鼠骨髓干细胞表达LHR和FSHR的研究

中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第七届全国学术会议

作者：米美玲邹挺杨蓓熊明娣王晶磊徐斯凡南昌大学医学院生理教研室中央民族大学生命与环境科学学院

海马与学习、情绪、记忆等多种神经活动有关,应激能引起海马细胞受损,慢性应激选择性损害海马CA3区神经元,寻找海马细胞保护方法有重要意义。睾丸支持细胞可分泌多种生长因子,可能可以促进海马细胞的贴壁及生长。方法新生SD乳鼠（出生4... 详细信息

海马与学习、情绪、记忆等多种神经活动有关,应激能引起海马细胞受损,慢性应激选择性损害海马CA3区神经元,寻找海马细胞保护方法有重要意义。睾丸支持细胞可分泌多种生长因子,可能可以促进海马细胞的贴壁及生长。方法新生SD乳鼠（出生48 h以内）的海马细胞分离培养,12-16天SD大鼠支持细胞分离培养,分为单纯DMEM组、支持细胞培养液组（SCM）、支持细胞直接共培养组,分别培养24 h、48 h、72h、96 h、120 h、144 h、168 h、240 h观察神经细胞数量和平均突起个数,对支持细胞共培养组采取甲苯氨兰特殊染色观察。所有结果采用方差分析的多重比较得出。结果培养第一天,SCM组和支持细胞共培养组贴壁率均高于单纯DMEM组（P＜0.01）,树突数量均有明显差异（P＜0.01）;自培养第三天开始,三组中神经细胞数量都较第一天减少,但SCM组存活神经细胞数量及平均树突数量均高于单纯DMEM组（P＜0.01）,经特殊染色观察到支持细胞共培养组亦高于单纯DMEM组（P＜0.01）,支持细胞共培养组与SCM组相比较没有统计学意义;培养第七天,单纯DMEM组神经细胞大量死亡,支持细胞培养液组、支持细胞共培养组存活细胞数量均较单纯DMEM组增多（P＜0.01）,平均树突数量支持细胞共培养组和SCM组均比DMEM组明显增多（P＜0.01）,支持细胞共培养组与SCM组比较没有统计学意义;第十天,支持细胞共培养组和SCM组神经细胞数量明显高于单纯DMEM组,平均树突数量三组比较没有明显统计学意义。随着时间的延长,神经元数量逐渐减少,但神经元的突起均随时间的延长而增多,且同一时间SCM组和支持细胞共培养组平均突起数量均显著高于DMEM组（P＜0.01）。结论支持细胞对体外培养的海马神经元有显著的促生长作用和保护作用,支持细胞与海马细胞共培养在中枢神经系统的疾病的细胞移植治疗中可以发挥重要的作用。

关键词：海马细胞睾丸支持细胞共培养细胞生长

来源： cnki会议评论

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雌性大鼠骨髓干细胞表达LHR和FSHR的研究

中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：倪秀丽杨蓓吴磊张大雷卢夏英熊明娣邹惟莹邹挺南昌大学医学院生理教研室

已有研究表明雌性骨髓干细胞(BMSCs)移植可恢复卵巢早衰不育动物的生育功能和产仔,但产下后代的生殖细胞是来源于受体的,虽然供体来源的卵母细胞数量很低,但受体总未成熟卵泡数明显高于未移植组,表明骨髓来源的供体细胞可保护受体卵母...

已有研究表明雌性骨髓干细胞(BMSCs)移植可恢复卵巢早衰不育动物的生育功能和产仔,但产下后代的生殖细胞是来源于受体的,虽然供体来源的卵母细胞数量很低,但受体总未成熟卵泡数明显高于未移植组,表明骨髓来源的供体细胞可保护受体卵母细胞或重新引起受体卵巢生卵过程,也可能通过释放一些因子改善卵巢微环境有利于卵子发生和发育成熟。卵泡发育微环境主要是由卵泡膜细胞和颗粒细胞构成,这提示骨髓干细胞有可能是通过分化为有功能的卵泡膜细胞和颗粒细胞产生多种因子包括性激素起作用。本研究探讨雌性大鼠BMSCs在体时能否分化为表达黄体生成素受体(LHR)的卵泡膜细胞样细胞和表达卵泡刺激素受体(FSHR)的颗粒细胞样细胞,为干细胞移植治疗不育的机理提供实验基础。方法:用含10%胎牛血清的低糖DMEM冲洗成年雌性SD大鼠的股骨、胫骨骨髓腔获取BMSCs,离心后提取总RNA,RT-PCR检测BMSCs中LHR和FSHR mRNA的表达。结果:新鲜游离的雌性大鼠BMSCs,RT-PCR示有LHR和FSHRmRNA的表达。结论:新鲜游离的雌性大鼠BMSCs表达LHR和FSHR mRNA,表明雌性BMSCs在体时能分化为表达LHR的卵泡膜细胞样细胞和表达FSHR的颗粒细胞样细胞,由于卵泡膜细胞产生雄激素,雄激素转运到颗粒细胞再产生雌激素,这两种细胞还产生多种因子促进卵母细胞发育成熟,因此这两种细胞在体时分化条件和干细胞移植治疗不育中的作用值得进一步研究。

关键词：

来源： cnki会议评论

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大鼠骨髓干细胞表达PTH初探

大鼠骨髓干细胞表达PTH初探