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特异性CTL胞毒作用与HLA型别关系探讨

免疫学杂志 2002年第3期18卷 201-203页

作者：郝友华杨东亮吴雄文熊仕秋熊平龚非力华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫学研究室湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院免疫学教研室湖北武汉430030

目的探讨特异性CTL胞毒作用与靶细胞的HLA型别关系。方法本实验以特定HLA型别、EB病毒转化的B淋巴母细胞（EBV-LCL）与同种异体单个核细胞（PBMC）混合培养,激活同种抗原特异性细胞性T细胞（CTL）;观察其对携带不同HIA型别的EBV-LCL... 详细信息

目的探讨特异性CTL胞毒作用与靶细胞的HLA型别关系。方法本实验以特定HLA型别、EB病毒转化的B淋巴母细胞（EBV-LCL）与同种异体单个核细胞（PBMC）混合培养,激活同种抗原特异性细胞性T细胞（CTL）;观察其对携带不同HIA型别的EBV-LCL靶细胞的杀伤活性。结果用EBV-LCL1致敏的效应细胞1对EBV-LCL2的杀伤效应比对EBV-LCL3强;用EBV-LCL2致敏的效应细胞2对EBV-LCL1的杀伤效应比对EBV-LCL3强;用EBV-LCL3致敏的效应细胞3对EBV-LCL1、2几乎无杀伤效应。结论特异性CTL对不同HLA型别的靶细胞的胞毒作用存在差异,这不仅仅与HLA型别关联,而可能取决于抗原肽与MHC所组成的抗原综合信息。

关键词：特异性CTL HLA型别胞毒作用 B淋巴细胞抗原

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造血干细胞移植——一种免疫治疗方法

海南医学院学报 2002年第3期8卷 190-192页

作者：何家武熊仕秋海南边防医院内科，海口570208 中山医科大学免疫学教研室，广州510089

对许多患有致命性造血系统肿瘤的病人而言，大剂量全身化疗或放化疗后进行异基因造血干细胞移植(HCT)是一种有效方法。治愈率变异大，从慢性期慢粒高达80％的治愈率，到难治性急性白血病用常规化疗的低达15％～20％的治愈率。虽然有其... 详细信息

对许多患有致命性造血系统肿瘤的病人而言，大剂量全身化疗或放化疗后进行异基因造血干细胞移植(HCT)是一种有效方法。治愈率变异大，从慢性期慢粒高达80％的治愈率，到难治性急性白血病用常规化疗的低达15％～20％的治愈率。虽然有其局限性和毒性，HCT仍足够有效，仅去年一年就用来治疗了约18 000名患者。……

关键词：造血干细胞细胞移植免疫疗法恶性血液病

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人胎脑动脉发育相关基因表达谱的研究

中国病理生理杂志 2006年第12期22卷 2311-2316页

作者：李明昌石忠松夏之柏熊仕秋黄正松中山大学附属第一医院神经外科中山大学中山医学院免疫教研室广东广州510080

目的:比较人胎儿脑动脉与成人脑动脉基因表达谱的差异,筛选与人胎脑动脉发育相关的差异表达基因。方法:收集3例意外流产的胎儿(胎龄18-20周)及3例成人W illis脑动脉环及主要分支,抽提组织中的总RNA,制备成生物素标记的cRNA探针后分别与A... 详细信息

目的:比较人胎儿脑动脉与成人脑动脉基因表达谱的差异,筛选与人胎脑动脉发育相关的差异表达基因。方法:收集3例意外流产的胎儿(胎龄18-20周)及3例成人W illis脑动脉环及主要分支,抽提组织中的总RNA,制备成生物素标记的cRNA探针后分别与A ffym etrix U133A基因芯片杂交,扫描杂交信号并用专用软件分析杂交结果,筛选出在两种组织中差异表达的基因。随机选择3个差异表达基因,用荧光定量RT-PCR验证。结果:在所检测的总共22 215个基因中,胎儿脑动脉与成人脑动脉相比,表达水平相差2倍、3倍、4倍、5倍以上的基因分别有935个、302个、177个、110个;在表达水平相差5倍以上的基因中,32个基因在胎儿脑动脉中高表达,78个基因在胎儿脑动脉中低表达。基因功能分类显示:25个基因与细胞信号转导和通讯有关,16个基因与细胞外基质和细胞骨架有关,与细胞防御反应有关的基因有14个,转录因子10个,另外有45个为未分类或功能未知的基因或表达序列标签(EST)片段。结论:人胎脑动脉的正常发育受到众多基因的调控,研究这些基因的功能可能有助于认清脑动脉瘤等脑动脉发育相关性疾病的发病机制。

关键词：脑动脉胚胎基因表达谱寡核苷酸序列分析

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双向排斥反应联体动物模型的建立

第一军医大学学报 2005年第12期25卷 1511-1513,1516页

作者：熊兵陈华德赖文熊仕秋郑少逸高辉卞徽宁刘族安广东省人民医院烧伤科广东广州510080 中山大学基础医学院免疫教研室广东广州510080

目的探讨在异基因成年小鼠之间建立联体模型用以研究双向排斥反应。方法54只雄性C57BL/6(H-2b,C57)小鼠和54只雌性Balb/c(H-2d)小鼠配对分为3组:1组(注射生理盐水)、2组(注射脾细胞+环磷酰胺)、3组(注射脾细胞+环磷酰胺+环孢素A)。于术... 详细信息

目的探讨在异基因成年小鼠之间建立联体模型用以研究双向排斥反应。方法54只雄性C57BL/6(H-2b,C57)小鼠和54只雌性Balb/c(H-2d)小鼠配对分为3组:1组(注射生理盐水)、2组(注射脾细胞+环磷酰胺)、3组(注射脾细胞+环磷酰胺+环孢素A)。于术中经尾静脉注入对方的脾细胞;术前3d和术后1周每日分别腹腔注射环孢素A(30mg·kg·d-1);术后2d腹腔注射环磷酰胺(150mg/kg)1次。对经以上处理的部分联体小鼠在术后1周后分开,相互植皮。观察联体维持时间,并分别检测其混合淋巴细胞反应和诱导迟发型超敏反应(DTH)。结果第3组联体时间明显延长;第3组联体小鼠DTH,2、3组显示明显抑制,但3组小鼠抑制程度明显比第2组小鼠深。结论应用免疫抑制剂,可成功建立双向排斥反应联体动物模型。

关键词：免疫抑制动物模型排斥反应

多器官功能障碍综合征患者外周血白三烯B4与p38丝裂原活化蛋白激酶的变化

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中国危重病急救医学 2005年第4期17卷 231-233页

作者：唐皓 MA Zhong-fu 梁艳冰翟诚顺熊仕秋熊艳 510080 广州中山大学附属第一医院急诊科中山大学免疫教研室

目的探讨多器官功能障碍综合征(MODS)患者外周血白三烯B4 (LTB4)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)含量的变化及与MODS病情的关系.方法对26例MODS患者进行病情评分,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血中LTB4与p38 MAPK含量,并与12例健康... 详细信息

目的探讨多器官功能障碍综合征(MODS)患者外周血白三烯B4 (LTB4)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)含量的变化及与MODS病情的关系.方法对26例MODS患者进行病情评分,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血中LTB4与p38 MAPK含量,并与12例健康体检者进行对照.比较MODS患者MODS评分与外周血LTB4和p38 MAPK的相互关系,及MODS组死亡与存活患者的MODS评分、外周血LTB4与p38 MAPK含量.结果 MODS患者血清LTB4含量为(923.96±308.65)ng/L,明显低于健康对照组(2 453.31±400.93)ng/L(P0.05).MODS组中死亡患者的血清LTB4含量为(444.98±206.30)ng/L,明显低于存活患者的(1 334.51±530.35)ng/L(P<0.05);p38 MAPK含量为(272.08±207.37)ng/L,明显高于存活患者(115.59±57.99)ng/L(P<0.05).结论 MODS晚期病理生理变化与一般炎症反应有所不同.外周血LTB4与p38 MAPK可作为MODS病情严重程度及预后判断指标.

关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶多器官功能障碍综合征外周血白三烯B4 MODS评分酶联免疫吸附法 LTB4 MAPK 健康对照组病理生理变化病情严重程度健康体检者相互关系死亡患者炎症反应判断指标含量存活血清显著性

肠毒素大肠杆菌攻毒小鼠模型的建立以及疫苗候选株保护效果的评价

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世界华人消化杂志 2006年第28期14卷 2753-2758页

作者：王志斌姜普林曾年华李淑琴王令春李燕熊仕秋张兆山广州军区疾病预防控制中心广东省广州市510507 北京生物工程研究所北京市100071 中山大学基础医学院广东省广州市510089

目的:建立肠毒素大肠杆菌攻毒小鼠模型以及应用模型对疫苗候选株免疫效果进行评价．方法:通过鼻饲半数致死量(LD50)肠毒素大肠杆菌E44813,E44815和E11881A观察小鼠肺病理学变化、肺部细菌清除情况变化,建立肠毒素大肠杆菌鼻饲小鼠模型;... 详细信息

目的:建立肠毒素大肠杆菌攻毒小鼠模型以及应用模型对疫苗候选株免疫效果进行评价．方法:通过鼻饲半数致死量(LD50)肠毒素大肠杆菌E44813,E44815和E11881A观察小鼠肺病理学变化、肺部细菌清除情况变化,建立肠毒素大肠杆菌鼻饲小鼠模型;应用鼻饲小鼠模型观察疫苗候选株FE1,FE3,FE6保护效果．结果:鼻饲LD50剂量肠毒素大肠杆菌小鼠的病理特征是肺组织存在大量的淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和浆细胞,为多病灶支气管肺炎,肺部细菌清除缓慢,至第7天仍能检测到105数量级的细菌．应用疫苗候选株免疫后进行攻毒,小鼠没有发病和死亡,病理特征主要是淋巴细胞少量增多,肺部细菌清除迅速,至第7天已检测不到细菌,与对照有显著性差异(0 CFU／g vs 6．2×105,5．4×105,2．3×105 CFU／g,P<0．05)．结论:肠毒素大肠杆菌鼻饲小鼠模型能够为疫苗筛选和评价提供了有效途径,同时也证实了疫苗候选株FE1,FE3,FE6具有良好的免疫保护效果．

关键词：肠毒素大肠杆菌攻毒实验小鼠模型疫苗菌株保护效果

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双向排斥反应联体动物模型的建立

双向排斥反应联体动物模型的建立

稳定表达乙型肝炎病毒含前S2的表面抗原重组细胞系的建立

第八届全国烧伤外科学年会

作者：熊兵陈华德赖文熊仕秋郑少逸高辉卞徽宁刘族安广东省人民医院烧伤科中山大学基础医学院免疫教研室

目的探讨在异基因成年小鼠之间建立联体模型用以研究双向排斥反应。方法54 只雄性 C57BL/6（H-2b,C57）小鼠和54只雌性 Balb/c（H-2d）小鼠配对分为3组:1组（注射生理盐水）、2组（注射脾细胞+环磷酰胺）、3组（注射脾细胞+环磷酰胺+环...

目的探讨在异基因成年小鼠之间建立联体模型用以研究双向排斥反应。方法54 只雄性 C57BL/6（H-2b,C57）小鼠和54只雌性 Balb/c（H-2d）小鼠配对分为3组:1组（注射生理盐水）、2组（注射脾细胞+环磷酰胺）、3组（注射脾细胞+环磷酰胺+环孢素 A）。于术中经尾静脉注入对方的脾细胞;术前3 d 和术后1周每日分别腹腔注射环孢素 A（30mg·kg·d-1）:术后2 d 腹腔注射环磷酰胺（150mg/kg）1次。对经以上处理的部分联体小鼠在术后l周后分开,相互植皮。观察联体维持时间,并分别检测其混合淋巴细胞反应和诱导迟发型超敏反应（DTH）。结果第3组联体时间明显延长;第3组联体小鼠 DTH,2、3组显示明显抑制,但3组小鼠抑制程度明显比第2组小鼠深。结论应用免疫抑制剂,可成功建立双向排斥反应联体动物模型。

关键词：

来源： cnki会议评论

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广东医学 2006年第7期27卷 960-962页

作者：王莉吴志峰熊仕秋黎毓光谢杏仪吕世华胡淑芬林晓晖卢绍佳姚春松广东省广州市番禺区人民医院检验科 511400 中山大学基础医学院免疫学教研室广州510089

目的建立稳定表达含有pre-S2的HBsAg的细胞系。方法构建在真核细胞表达pre-S2-HB- sAg的重组质粒PCI-HBs2。用此质粒转染HepG2细胞,经克隆化培养以及G418筛选,建立稳定表达HB2Ag的细胞系。对其分泌动态、细胞纯度、遗传稳定性等生物学... 详细信息

目的建立稳定表达含有pre-S2的HBsAg的细胞系。方法构建在真核细胞表达pre-S2-HB- sAg的重组质粒PCI-HBs2。用此质粒转染HepG2细胞,经克隆化培养以及G418筛选,建立稳定表达HB2Ag的细胞系。对其分泌动态、细胞纯度、遗传稳定性等生物学特性做了鉴定。同时对该细胞实验室大量培养的条件进行了优化。结果成功构建表达pre-S2-HBsAg的重组质粒。转染细胞后筛选到一个稳定表达pre-S2-HBsAg的细胞系3E3。ELISA检测表明该细胞系分泌的HBsAg水平高,生物学性状研究结果表明稳定表达HBsAg的3E3细胞纯度好,遗传性状稳定。结论成功建立了稳定表达pre-S2-HBsAg的细胞系。该细胞系遗传性质稳定,表达蛋白产量高。此细胞系可用于pre-S2-HBsAg的制备及纯化。

关键词：乙型肝炎病毒表面抗原转基因细胞系

全身炎症反应综合征与多器官功能障碍综合征患者外周血单核细胞COX-2与p38MAPK的关系

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中华急诊医学杂志 2007年第7期16卷 730-734页

作者：唐皓陈敏英梁艳冰熊艳李欣詹红熊仕秋马中富中山大学附属第一医院普内科广州510080 中山大学附属第一医院SICU 广州510080 中山大学附属第一医院急诊科广州510080 中山大学免疫教研室

目的了解环氧化酶-2（COX-2）与p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）在全身炎症反应综合征（SIRS）与多器官功能障碍综合征（MODS）患者发病机制中的作用。方法选择2004年6月-2005年6月广州中山大学属第一医院EICU、SICU与急诊观察区患者... 详细信息

目的了解环氧化酶-2（COX-2）与p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）在全身炎症反应综合征（SIRS）与多器官功能障碍综合征（MODS）患者发病机制中的作用。方法选择2004年6月-2005年6月广州中山大学属第一医院EICU、SICU与急诊观察区患者符合美国胸科医师协会／危重病医学会（ACCP／SCCM）SIRS和MODS诊断标准的患者28例，其中SIRS13例，MODS15例；与患者年龄、性别相区配的健康正常对照组11例。采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMCs）。用酶联免疫测定法（EIA）检测PBMCs的COX-2与p38MAPK含量；用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法检测PBMCs中COX-2与p38MAPK的mRNA的表达。用方差分析和简单相关分析法进行统计学分析。结果MODS组患者PBMCs的COX-2与p38MAPK含量及两者的mRNA表达均显著高于正常对照组和SIRS组（P均〈0．05），正常对照组与SIRS组间差异无统计学意义；死亡患者高于存活患者（P〈0．05）；三组PBMCs中COX-2与p38MAPK含量呈正相关关系（r=0．663，P〈0．01）。死亡患者的外周血白细胞、淋巴细胞、氧合指数与存活患者比较差异无统计学意义；血糖、血肌酐则明显高于存活患者（P〈0．05）；二氧化碳总含量（TCO2）、pH明显低于存活患者（P〈0．01）。结论COX-2与p38MAPK参与了MODS的发病过程，而且可作为判断SIRS与MODS预后的参考指标之一。

关键词：全身炎症反应综合征多器官功能障碍综合征环氧化酶-2 p38丝裂原活化蛋白激酶