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Nrf2激动剂CDDO-Im对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪变性的影响

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现代生物医学进展 2024年第5期24卷 822-827,886页

作者：翟小莹赵琳夏煜栋木尼拉·吐尔孙焦谊省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830000 华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科湖北武汉430030

目的:探究Nrf2激动剂CDDO-Im对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪变性的作用。方法:33只雄性C57BL/6J小鼠随机分为两组:一组16只饲喂普通饲料,另一组17只饲喂高脂饲料建立肥胖模型。造模成功后将小鼠随机分成四组:普通饲料溶剂对照组(Cont... 详细信息

目的:探究Nrf2激动剂CDDO-Im对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪变性的作用。方法:33只雄性C57BL/6J小鼠随机分为两组:一组16只饲喂普通饲料,另一组17只饲喂高脂饲料建立肥胖模型。造模成功后将小鼠随机分成四组:普通饲料溶剂对照组(Control ND组)、普通饲料Nrf2激动剂组(Nrf2(+)ND组)、高脂饲料溶剂对照组(Control HFD组)和高脂饲料Nrf2激动剂组(Nrf2(+)HFD组)。分别给予Nrf2激动剂CDDO-Im和等体积溶剂灌胃干预6周后,检测各组小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)。苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织形态学变化。RT-qPCR检测肝脏Nrf2下游抗氧化基因Nqo1、Ho1和Gclc的m RNA表达水平,Western Blot检测肝脏NQO1、HO-1和GCLC的蛋白表达水平。结果:与正常小鼠相比,肥胖小鼠的体重、TG和LDL-C升高(P<0.05),肝脏脂肪变性增加,GCLC的蛋白表达水平降低(P<0.05)。在肥胖小鼠中,与溶剂对照组相比,Nrf2激动剂组小鼠的体重、血清TG降低(P<0.05),肝脏脂肪变性减轻,Nqo1和Gclc的m RNA表达水平升高(P<0.05),NQO1和GCLC的蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:Nrf2激动剂CDDO-Im可改善高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪变性,可能与Nrf2激动剂CDDO-Im激活抗氧化基因的表达来减轻肝细胞氧化应激有关。

关键词：肥胖肝脂肪变性核因子E2相关因子2 氧化应激

三法三穴推拿对坐骨神经损伤大鼠的即刻镇痛作用及其机制

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山东医药 2024年第17期64卷 12-15页

作者：张润龙杨震杰于天源萨出拉陈金平刘志凤焦谊北京中医药大学针灸推拿学院北京102401 北京中医药大学东直门医院推拿疼痛科中日友好医院临床医学研究所

目的观察三法三穴推拿对坐骨神经损伤大鼠的即刻镇痛作用并探讨其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组及推拿组,每组6只。模型组及推拿组建立轻型坐骨神经慢性压迫性损伤模型模拟临床神经病理性疼痛,假手术组仅暴露神经并缝合。... 详细信息

目的观察三法三穴推拿对坐骨神经损伤大鼠的即刻镇痛作用并探讨其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组及推拿组,每组6只。模型组及推拿组建立轻型坐骨神经慢性压迫性损伤模型模拟临床神经病理性疼痛,假手术组仅暴露神经并缝合。推拿组在造模后7 d采用按摩推拿手法模拟仪进行三法三穴推拿干预,假手术组及模型组进行等时间的抓握束缚。分别于造模前(T_(1))、造模后推拿前(T_(2))、推拿后(T_(3))采用机械缩足反射阈值及热缩足反射潜伏期评价三法三穴推拿即刻镇痛效果;评价结束后取大鼠腰膨大节段脊髓背角组织,采用Western blotting法检测各组大鼠脊髓背角组织嘌呤能受体P2Y12(P2RY12)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白。结果与假手术组同时点比较,模型组、推拿组在T_(2)及T_(3)时点MWT、TWL均降低(P均0.05)。结论三法三穴推拿在坐骨神经损伤大鼠中具有较好的即刻镇痛效果,其机制可能为抑制小胶质细胞P2RY12/p38 MAPK/TNF-α通路从而缓解神经病理性疼痛。

关键词：推拿坐骨神经损伤神经病理性疼痛痛觉敏感化小胶质细胞

退热六法对不同月龄脂多糖致热幼兔通热效果及对TLR4/NF-κB p65影响的研究

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退热六法对不同月龄脂多糖致热幼兔通热效果及对TLR4/NF-κB p65...

作者：焦谊北京中医药大学

学位级别：硕士

[背景]小儿推拿退热疗效显著,具有疗效确切、提高患儿舒适度、无不良反应等特点,但其退热机制尚不完善,缺乏高质量科学依据,影响小儿推拿的临床应用及发展。所以亟需进行基础实验探究小儿推拿退热的机制,为临床小儿推拿退热提供参考。[... 详细信息

[背景]小儿推拿退热疗效显著,具有疗效确切、提高患儿舒适度、无不良反应等特点,但其退热机制尚不完善,缺乏高质量科学依据,影响小儿推拿的临床应用及发展。所以亟需进行基础实验探究小儿推拿退热的机制,为临床小儿推拿退热提供参考。[目的]为评价小儿推拿对发热患儿的退热特点及退热机制,为临床小儿推拿退热提供科学依据,本研究通过疗效观察评价退热六法对不同月龄脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致热幼兔的退热疗效、退热幅度、退热时程等退热特点,利用分子生物学技术从外周和中枢角度探究退热六法是否可以调节LPS致热幼兔Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB p65(nuclearfactor-kappaBp65,NF-κB p65)通路,从而阐明小儿推拿可能的中枢和外周退热机制。[方法]实验分成两部分,实验一为研究退热六法对不同月龄LPS致热幼兔的退热效果及特点,实验二为研究退热六法对2月龄LPS致热幼兔外周和中枢TLR4/NF-KB p65的影响。选取清洁级1月龄、2月龄、3月龄新西兰雄性幼兔,按照月龄将幼兔随机分为模型组、推拿组、盐水组,每组8只。模型组和推拿组经耳缘静脉注射0.5 μg/kg LPS建立细菌性发热模型,造模后1h肛温升高0.6℃为造模成功,盐水组经耳缘静脉注射等量无热原生理盐水。推拿组于造模后1h进行退热六法干预,包括开天门、推坎宫、揉太阳、揉耳后高骨、清天河水、推脊,模型组和盐水组束缚处理。1.连续6 h监测肛温变化,每20min记录一次肛温,描记肛温变化曲线,观察肛温变化、最大肛温上升高度(ΔTmax)和1h、2 h、3 h、6 h体反应指数(thermal response index,TRI)三项指标,评估退热六法对1、2、3月龄幼兔退热的效果及特点,初步明确退热六法的适宜月龄范围。2.选取2月龄新西兰雄性幼兔,在造模后3 h抽取耳缘静脉血,通过血常规检测LPS致热幼兔中性粒细胞比率(neutrophil ratio,NEUT%),评估感染程度;在造模后3 h取材,取腹主动脉血、肝、肺、下丘脑组织,通过酶联免疫吸附法(enzyme linked immunsorbentassay,ELISA),检测LPS致热幼兔血浆和下丘脑中白介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF)-α表达;通过蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB),检测LPS致热幼兔肝、肺、下丘脑组织中TLR4、NF-κB p65蛋白含量;通过逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),检测LPS致热幼兔下丘脑组织中TLR4、NF-κB、IL-1β、TNF-αmRNA,从中枢和外周阐明退热六法退热机制。[结果]1.疗效评价1.1退热六法对1月龄LPS致热幼兔退热效果及特点肛温结果:造模后80 min、100 min、120 min,与模型组比较,推拿组肛温显著下降(P0.05,P>0.05)。1月龄幼兔即刻降温幅度明显,为(1.33±0.5)℃,最低肛温为(38.88 ±0.58)℃,推拿抑制的发热时程为(57.5±29.15)min,但在造模后180min肛温出现反弹,维持时间短。TRI及ΔTmax结果:造模后60 min,推拿组(干预前)与模型组无显著差异(P>0.05)。造模后 120min、180min、360min,推拿组 TRI 小于模型组(P0.05)。1.2退热六法对2月龄LPS致热幼兔退热效果及特点肛温结果:造模后80～260min,与模型组比较,推拿组肛温都下降(P0.05,P>0.05)。2月龄幼兔降温效果稳定,推拿抑制的发热时程为(192.5±93.77)min,最大降温幅度为(0.8±0.51)℃,最低肛温为(39.28±0.54)℃,在造模后300 min肛温出现反弹,肛温波动幅度小。TRI及ΔTmax结果:造模后60 min

关键词：核因子-κB p65 Toll样受体小儿发热小儿推拿炎症反应

β2肾上腺素能受体基因多态性同哈萨克族和维吾尔族肥胖的关联分析

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β2肾上腺素能受体基因多态性同哈萨克族和维吾尔族肥胖的关联分析

作者：焦谊新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在分析β肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR orADRB2)基因Arg16/Gly、Gln27/Glu多态在新疆哈萨克族与维吾尔族人群中的分布特征以及它们与肥胖发生的相关性。方法:采用Taqman技术对新疆923例哈萨克族、754例维... 详细信息

目的:本研究旨在分析β肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR orADRB2)基因Arg16/Gly、Gln27/Glu多态在新疆哈萨克族与维吾尔族人群中的分布特征以及它们与肥胖发生的相关性。方法:采用Taqman技术对新疆923例哈萨克族、754例维吾尔族受试者进行β肾上腺素能受体基因Arg16/Gly、Gln27/Glu位点基因分型,以此来分别观察两民族各基因型和等位基因频率在不同体重指数(Body Mass Index,BMI)水平的分布及其与超重肥胖的关系。结果:ADRB2基因Arg16/Gly、Gln27/Glu位点各基因型频率分布均符合Hardy-Weirlberg平衡。哈萨克族及维吾尔族群体中这两个多态位点的基因型频率与等位基因频率在正常体重组、超重组与肥胖组之间的分布均无统计学差异(P＞0.05),按性别分层后,哈萨克族男性Arg16/Gly基因型频率分布在三组间存在统计学差异(χ=10.047,P=0.040),且突变型纯合子分布频率在正常体重组、超重组及肥胖组依次升高,哈萨克族女性中未发现这种差异;而哈萨克族女性中Gln27/Glu等位基因频率三组间比较,超重、肥胖组等位基因分布频率较正常组显著升高(χ=6.748,P=0.034)。维吾尔族按性别分层后未见基因型与等位基因频率的分布在三组间存在差异。以性别分层并用Logistic回归模型校正年龄、血压、甘油三酯等之后,在哈萨克族男性中,Arg16/Gly基因型与甘油三酯的水平对肥胖症的发生存在显著相关,组间基因型频率分布存在统计学差异(χ=40.504,P=0.034)。结论:ADRB2基因Arg16/Gly多态可能与哈萨克族男性肥胖相关。

关键词：哈萨克族维吾尔族肥胖 β2肾上腺素能受体基因基因多态性

脂肪细胞因子chemerin与代谢综合征的关系

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西安交通大学学报（医学版） 2011年第6期32卷 701-704页

作者：陈红王延蛟焦谊张成关亚群新疆医科大学生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆维吾尔自治区人民医院新疆乌鲁木齐830000

目的通过检测脂肪细胞因子chemerin在代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠脂肪组织及血清中表达水平的变化,探讨其与MS的关系。方法将60只SD大鼠随机分为代谢综合征模型组(MS)和正常对照组(NC),采用高脂、高糖、高盐饲料联合腹腔注... 详细信息

目的通过检测脂肪细胞因子chemerin在代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠脂肪组织及血清中表达水平的变化,探讨其与MS的关系。方法将60只SD大鼠随机分为代谢综合征模型组(MS)和正常对照组(NC),采用高脂、高糖、高盐饲料联合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建MS大鼠模型。采用RT-PCR方法检测两组大鼠脂肪组织中chemerin mRNA的表达情况;采用酶联免疫吸附实验检测大鼠血清chemerin蛋白的表达变化。结果①在大鼠肾周围、附睾旁及肩胛间肌旁部位脂肪组织中,chemerin mRNA的表达水平MS组较NC组增高,且差异有统计学意义(P0.05)。②MS组大鼠血清chemerin水平较NC组有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Chemerin在高脂、高糖、高盐饮食联合STZ构建的MS大鼠模型的发病过程中可能起重要作用。

关键词： CHEMERIN 代谢综合征逆转录-聚合酶链反应

推拿退热六法对脂多糖致热幼兔下丘脑COX-2/PGE2/EP3信号通路的影响

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北京中医药大学学报 2022年第11期45卷 1160-1167页

作者：张英琦刘志凤于天源王厚融焦谊刘迪徐亚静官乾北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学东直门医院北京中医药大学东方医院

目的观察推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热作用,并探究对下丘脑环氧化酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)/E-前列腺素类激素3受体(EP3)信号通路的影响。方法采用随机数字表法,将24只新西兰兔(2月龄)随机分为对照组、模型组和推拿六法... 详细信息

目的观察推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热作用,并探究对下丘脑环氧化酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)/E-前列腺素类激素3受体(EP3)信号通路的影响。方法采用随机数字表法,将24只新西兰兔(2月龄)随机分为对照组、模型组和推拿六法组,每组8只。模型组、推拿六法组采用LPS(0.5 mg/L)耳缘静脉注射复制发热模型,注射体积1 mL/kg。LPS注射后1 h,推拿六法组采用推拿退热六法干预:开天门200次,2 min;推坎宫200次,2 min;揉太阳200次,2 min;耳后高骨揉24次掐3下,2 min;清天河水500次,5 min;推脊300次,5 min。在相同时段内模型组、对照组动物在相同部位涂抹等量的室温清水,抓握但不进行推拿手法干预。观察各组体温变化,LPS注射后每20 min记录肛温1次,连续测量180 min,计算最大体温变化值和体温反应指数(TRI)。ELISA法检测下丘脑PGE2、环磷酸腺苷(cAMP)表达水平,Western blotting检测下丘脑COX-2、EP3、cAMP蛋白表达水平,RT-PCR检测COX-2、EP3、cAMP的mRNA表达。结果与对照组比较,模型组肛温上升(P<0.01),推拿六法组推拿退热六法干预后幼兔肛温较模型组降低(P<0.01)。造模后60 min,模型组、推拿六法组最大体温变化值与TRI较对照组升高(P<0.01);造模后60 min,推拿六法组最大体温变化值与TRI较模型组差异无统计学意义;造模后180 min,模型组最大体温变化值与TRI升高(P<0.01),推拿六法组较模型组最大体温变化值与TRI降低(P<0.01)。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑PGE2、cAMP表达量升高(P<0.01),推拿六法组PGE2、cAMP表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。Western blotting结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑COX-2、EP3、cAMP表达量升高(P<0.01),推拿六法组COX-2、EP3、cAMP表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。RT-PCR结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑COX-2、EP3、cAMP mRNA表达量增加(P<0.01),推拿六法组下丘脑COX-2、EP3、cAMP mRNA表达均较模型组减少(P<0.01)。结论推拿退热六法对LPS致热幼兔有良好的退热作用,其作用机制之一与抑制致热原对下丘脑COX-2/PGE2/EP3信号通路的激活,减少体温中枢终端的正调节介质cAMP水平有关。

关键词：推拿退热六法发热下丘脑 COX-2/PGE2/EP3信号通路 cAMP 兔

小儿推拿退热六法对脂多糖致热幼兔下丘脑的代谢组学研究

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2645-2650页

作者：刘志凤张英琦于天源焦谊刘迪王厚融徐亚静官乾北京中医药大学北京100029 北京中医药大学东方医院北京100078

目的:探究小儿推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热疗效及退热机制。方法:将30只新西兰幼兔随机分为盐水组、模型组和推拿组。模型组和推拿组通过耳缘静脉注射LPS建立发热模型。推拿组在造模后1 h行退热六法(开天门、推坎宫、揉太... 详细信息

目的:探究小儿推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热疗效及退热机制。方法:将30只新西兰幼兔随机分为盐水组、模型组和推拿组。模型组和推拿组通过耳缘静脉注射LPS建立发热模型。推拿组在造模后1 h行退热六法(开天门、推坎宫、揉太阳、揉耳后高骨、清天河水、推脊)干预,实验过程中监测肛温。造模后3 h,取下丘脑进行液相色谱-质谱联用(LC-MS)非靶向代谢组学研究。结果:造模后2 h和3 h,推拿组肛温显著低于模型组(P<0.05)。代谢组学结果显示盐水组与模型组共有171个差异代谢物,富集到123条通路上;推拿组与模型组共有116个差异代谢物,富集到mTOR、PI3K-AKT、GABA能突触等77条通路上。结论:退热六法可降低发热幼兔体温,其退热机制可能与调节糖代谢、脂质代谢有关。

关键词：退热六法发热小儿推拿代谢组学下丘脑脂多糖糖代谢脂质代谢

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于天源应用膻中穴治疗神志病经验撷要

中国针灸 2022年第5期42卷 552-554页

作者：王厚融刘志凤于天源张英琦焦谊刘迪官乾徐亚静北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学名师工作坊北京100029 北京中医药大学东方医院

总结于天源应用膻中穴针刺和推拿治疗神志病的经验。于天源单用膻中穴或与其他穴位配伍治疗失眠、心慌、胸闷等神志病。治疗时强调刺激量轻心神安、联合刺激重调神、离穴守经范围大、走气开胸方向全,形成治疗神志病的独特方法。

关键词：神志病穴膻中名医经验于天源

Minor CCI与经典CCI大鼠模型成模特点的比较研究

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中国比较医学杂志 2022年第10期32卷 1-7页

作者：王厚融刘志凤于天源张英琦焦谊刘迪徐亚静官乾北京中医药大学针灸推拿学院北京102488 北京中医药大学东方医院北京100078

目的比较研究轻度和经典方法诱导的大鼠慢性压迫性神经损伤(chronic constriction injury,CCI)模型的成模特点,为基础研究实验设计提供参考。方法将18只8周龄SD雄性大鼠随机分为假手术组、Minor CCI组和经典CCI组,每组6只。于坐骨神经... 详细信息

目的比较研究轻度和经典方法诱导的大鼠慢性压迫性神经损伤(chronic constriction injury,CCI)模型的成模特点,为基础研究实验设计提供参考。方法将18只8周龄SD雄性大鼠随机分为假手术组、Minor CCI组和经典CCI组,每组6只。于坐骨神经结扎铬制可吸收外科缝线,Minor CCI组结扎1根,经典CCI组结扎4根。3组动物于造模前和造模后7、14、21、28 d检测机械缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期和累积疼痛评分变化情况。透射电镜观察坐骨神经超微结构变化情况。结果Minor CCI组和经典CCI组机械缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期痛敏趋势一致,Minor CCI组累积疼痛评分较经典CCI组低。Minor CCI组造模后出现痛敏,造模后14 d进入平台期,约10 d,各症状逐渐恢复;经典CCI组造模后出现痛敏,造模后14 d进入平台期,造模后28 d痛敏依然稳定甚至出现进一步敏化。Minor CCI组和经典CCI组坐骨神经超微结构变化一致,均表现为髓鞘结构破坏、崩脱,形成髓鞘球、自噬体等。结论Minor CCI模型更稳定,痛敏症状可维持至造模后28 d,基本无自残现象,适用于短期实验设计,可最大程度减小实验动物的痛苦。经典CCI模型痛敏症状持久,造模后28 d依然处于平台期,但自残现象明显,适用于中、长期实验设计。

关键词：周围神经病理性疼痛慢性压迫性神经损伤模型 SD大鼠疼痛