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基于甾类激素信号转导的药物筛选模型的建立

基于甾类激素信号转导的药物筛选模型的建立

作者：潘飞燕南京师范大学

学位级别：硕士

药物筛选模型是发现新药、证明药物作用途径与机制的重要条件之一。在漫长的药物实践过程中,涌现出大量用于新药筛选的各类模型,在新药发现和研究中发挥了积极作用。而且随着分子生物学、细胞生物学、生物信息学的发展,各种研究手段与... 详细信息

药物筛选模型是发现新药、证明药物作用途径与机制的重要条件之一。在漫长的药物实践过程中,涌现出大量用于新药筛选的各类模型,在新药发现和研究中发挥了积极作用。而且随着分子生物学、细胞生物学、生物信息学的发展,各种研究手段与方法不断更新,使药物筛选向着定向、微量、快速、简便的方向发展,应用这些药物筛选模型可显著加快药物发展的进程。本研究顺应药物筛选的新动向,着眼于细胞水平,建立基于甾类激素信号转导的药物筛选模型,用来对传统中药成分进行初步分析,试图能够找到某些中药的活性成分。 1.基于雌激素与雄激素信号转导的报告载体的构建我们参考相关文献,合成雌激素与雄激素的有效反应元件,分别装入pGL3-P的多克隆位点,构建出基于雌激素与雄激素信号通路的以荧光素酶为报告基因的载体。另外,我们也尝试用GFP作报告基因,从EGFP-N1质粒中克隆该基因,将其替换pGL3-P上的Luc+,构建出以GFP为报告基因的载体。结合雌激素与雄激素反应元件,同样构建出基于雌激素与雄激素信号通路的以绿色荧光蛋白为报告基因的载体。经酶切鉴定以及测序分析确定载体构建正确。 2.基于雌激素与雄激素信号通路的药物筛选模型的建立将构建的质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞和人前列腺癌PC-3细胞,用雌激素和雄激素分别刺激,通过检测荧光素酶以及绿色荧光蛋白的表达量来验证模型的正确性和有效性。实验证明,雌激素信号通路的模型建立有效。我们选用该模型来分析治疗女性疾病的中药(代号CMZYC),发现在其传统的三种提取成分中,水溶成分能够引起通路的有效变化,而乙酸乙酯及乙醇提取成分对报告基因的表达变化不明显。据此,我们初步认为,水溶成分中存在着该种中药的活性成分。本实验为进一步分析该种中药的活性成分提供了依据。 3.中药CMZYC对肝癌细胞生长的影响我们采用MTT、流式细胞术、细胞计数等实验手段,考察了三种中药提取成分对肿瘤细胞形态、生长增殖和细胞周期的影响。研究发现,10母液浓度的CMZYC乙酸乙酯提取物能够显著抑制肝癌细胞BEL-7402、SMMC-7721的生长(P<0.05),同时BEL-7402形态也发生变化,细胞变细变长,而SMMC-7721在

关键词：药物筛选模型激素反应元件报告基因信号转导 MTT 流式细胞术

45,X/46,X,idic(Y)(q11.2)嵌合体1例胎儿的遗传学分析

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中华医学遗传学杂志 2024年第8期41卷 897-902页

作者：潘飞燕张蔚卿章卫国台州医院中心实验室临海317000 台州医院妇产科临海317000

目的探讨1例胎龄25^(+)周无创产前筛查(NIPT)提示为性染色体可能异常的胎儿的遗传学特征。方法选取2023年1月6日就诊于台州医院不孕与优生门诊的1例无创产前检测结果异常的胎儿作为研究对象,回顾性分析相关临床资料。应用NIPT、染色体... 详细信息

目的探讨1例胎龄25^(+)周无创产前筛查(NIPT)提示为性染色体可能异常的胎儿的遗传学特征。方法选取2023年1月6日就诊于台州医院不孕与优生门诊的1例无创产前检测结果异常的胎儿作为研究对象,回顾性分析相关临床资料。应用NIPT、染色体核型分析、染色体拷贝数变异测序(CNV-seq)、荧光原位杂交(FISH)和多重PCR检测对胎儿进行遗传学分析。结果孕妇孕30^(+)周的NIPT检测为X染色体单体,胎儿G显带染色体核型为45,X[59]/46,X,del(Y)(q11.2)[17],CNV-seq提示Y染色体q11.222q12区存在7.98 Mb的拷贝数缺失,p11.31q11.221区存在16.92 Mb的嵌合性拷贝数缺失,FISH提示胎儿为嵌合体型性染色体异常,且含有2个SRY基因,多重PCR检测显示AZF b+c区完全缺失,C显带显示Y染色体两端均可见一深染致密着丝粒。胎儿的染色体核型最终被确定为45,X/46,X,idic(Y)(q11.2)嵌合体。胎盘组织CNV-seq结果与NIPT一致,胎儿组织CNV-seq结果证实为45,X/46,XY嵌合体。夫妻双方外周血CNV-seq检测未见明显异常。结论联合NIPT、染色体核型分析、CNV-seq、FISH和多重PCR检测技术诊断该胎儿核型为45,X/46,X,idic(Y)(q11.2)嵌合体伴AZF b+c区缺失,为该孕妇夫妇提供了产前诊断依据。

关键词：产前诊断 45,X/46,XY嵌合体 AZF区微缺失 SRY基因

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2在恶性脑肿瘤中的普遍标志性表达

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解剖学报 2015年第5期46卷 587-590页

作者：高维董士业潘飞燕刘丹慧温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室浙江温州325035

目的检测烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2)在恶性脑肿瘤中的表达。方法使用免疫组织化学法检测了NADK2在75例恶性脑肿瘤中的表达。结果本实验检测了NADK2在75例恶性脑肿瘤中的表达情况,包括55例星形细胞瘤、13例少突神经细胞瘤、3例髓... 详细信息

目的检测烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2)在恶性脑肿瘤中的表达。方法使用免疫组织化学法检测了NADK2在75例恶性脑肿瘤中的表达。结果本实验检测了NADK2在75例恶性脑肿瘤中的表达情况,包括55例星形细胞瘤、13例少突神经细胞瘤、3例髓母细胞瘤和4例室管膜瘤,74例样本中NADK2的表达都明显高于正常对照组织。对免疫组织化学结果进行吸光度分析,比较NADK2在不同肿瘤类型和不同分级的脑肿瘤中的表达,结果表明,NADK2在恶性脑肿瘤中的表达与肿瘤类型和分级无关。结论高表达NADK2是恶性脑肿瘤的一个普遍特征。

关键词：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2 恶性脑肿瘤免疫组织化学人

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煤矿乏风蓄热氧化发电技术研究及应用

工业汽轮机 2017年第1期 12-20页

作者：潘飞燕姚锐杭州汽轮机股份有限公司杭州汽轮工程股份有限公司

本文介绍了国内外煤矿乏风蓄热氧化利用技术：辅助燃料技术和主要燃料技术。同时，结合某煤矿的乏风蓄热氧化发电项目，对乏风引风系统、抽采瓦斯混配系统、抽采瓦斯输送安全保障系统、乏风脱水系统、乏风蓄热氧化系统及发电系统等进行... 详细信息

本文介绍了国内外煤矿乏风蓄热氧化利用技术：辅助燃料技术和主要燃料技术。同时，结合某煤矿的乏风蓄热氧化发电项目，对乏风引风系统、抽采瓦斯混配系统、抽采瓦斯输送安全保障系统、乏风脱水系统、乏风蓄热氧化系统及发电系统等进行具体介绍，并分析了该项目的意义。

关键词：乏风瓦斯热逆流氧化蓄热氧化

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mitoNEET在细胞铁硫簇转运中的作用

mitoNEET在细胞铁硫簇转运中的作用

以趣为引,以图为重,以生活为落脚点——从“认识台湾”一课谈初中地理综合探究课的教学策略

2015年浙江省医学遗传学学术年会暨高通量基因测序产前...

作者：潘飞燕温州医科大学

目的:探究线粒体外膜蛋白mitoNEET在细胞铁硫簇转运中的作用。方法:通过RNA干扰技术和真核转染高表达质粒分别使细胞低表达和高表达线粒体外膜蛋白mitoNEET。通过密度梯度离心法制备线粒体提取液和细胞质提取液,并分别测定mitoNEET蛋白...

目的:探究线粒体外膜蛋白mitoNEET在细胞铁硫簇转运中的作用。方法:通过RNA干扰技术和真核转染高表达质粒分别使细胞低表达和高表达线粒体外膜蛋白mitoNEET。通过密度梯度离心法制备线粒体提取液和细胞质提取液,并分别测定mitoNEET蛋白表达改变后的细胞质和线粒体内铁硫簇的水平。Western blot反映其铁硫簇蛋白表达量。结果:稳定筛选得到低表达mitoNEET的HepG2细胞和MCF-7细胞以及其相应对照细胞株,利用RT-PCR与Western blot反映mitoNEET mRNA与蛋白质表达均稳定下降。aconitase在细胞中有两种类型:c-aconitase和m-aconitase,分别位于细胞质和线粒体,它的活性依赖于一个[4Fe-4S]铁硫簇中心,若蛋白质水平一致,c-aconitase和m-aconitase的酶活性分别代表了细胞质和线粒体内铁硫簇的水平。低表mitoNEET相对于对照组,线粒体内铁硫蛋白m-aconitase,complexⅠ的蛋白表达和酶活性均没有显著性差异;而线粒体外铁硫蛋白c-aconitase的蛋白表达无显著性差异,但其酶活性显著性下降。而高表mitoNEET相对于对照组,线粒体内外酶m-aconitase和c-aconitase的蛋白表达和酶活性均没有显著性差异,这可能是由于mitoNEET在细胞中的正常表达量已足够发挥其生物学功能。结论:mitoNEET极有可能参与细胞中线粒体内外铁硫簇的转运。

关键词：

来源： cnki会议评论

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新课程研究（下旬） 2017年第4期 106-108页

作者：潘飞燕浙江省杭州滨兰实验学校

综合探究课作为（沥史与社会》教材设计中的一大亮点，当引起教师的重视。尤其是七年级的地理综合探究课，在学生地理方法技能培养方面占有重要地位。本文以“认识台湾”一课为例，探讨了几点地理综合探究课的教学策略。

关键词：初中地理综合探究课教学策略

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浅析工业机器人与机床集成应用

机电信息 2015年第30期 40-41页

作者：阮蒋兴潘飞燕浙江卧龙希尔机器人有限公司浙江绍兴312352 绍兴欧力-卧龙振动机械有限公司浙江绍兴312352

工业机器人是一项集信息技术、传感技术、精密传动、驱动制造、数字控制、IT技术于一体的综合性高新产品。在当前制造业的大时代中,人工智能和数控技术的不断发展使得工业机器人正在快速融入机床领域,并集成在一起形成更具自动化的单元... 详细信息

工业机器人是一项集信息技术、传感技术、精密传动、驱动制造、数字控制、IT技术于一体的综合性高新产品。在当前制造业的大时代中,人工智能和数控技术的不断发展使得工业机器人正在快速融入机床领域,并集成在一起形成更具自动化的单元,为工业生产提供了更多的智能解决方案。工业机器人的核心技术包括控制算法、控制器、伺服系统、机械传动等,现就当前工业机器人与机床的集成应用进行探讨,介绍机床企业的研制情况和面临的一些问题。

关键词：机器人机床集成应用

XE-2100幼稚通道在恶性胸腹腔积液筛查中的应用

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中国卫生检验杂志 2013年第17期23卷 3385-3387页

作者：金先富潘飞燕朱优优卢国光郑巧飞李俊台州医院检验科浙江台州317000 台州医院病理科浙江台州317000

目的评价Sysmex XE-2100分析仪幼稚粒细胞通道(IMI)在检测胸腹腔积液幼稚细胞的意义。方法对70例患者胸腹水应用IMI检测和病理细胞学检查进行幼稚细胞检测并分析。结果 24例肿瘤组的IMI检测阳性率为87.5%,高于病理细胞学检查的阳性率,... 详细信息

目的评价Sysmex XE-2100分析仪幼稚粒细胞通道(IMI)在检测胸腹腔积液幼稚细胞的意义。方法对70例患者胸腹水应用IMI检测和病理细胞学检查进行幼稚细胞检测并分析。结果 24例肿瘤组的IMI检测阳性率为87.5%,高于病理细胞学检查的阳性率,有显著性差异(P=0.046);46例非肿瘤组的IMI检测阳性率为30.4%,高于病理细胞学检查的阳性率,但无显著性差异(P>0.05)。两种方法的一致性较好,K值为0.60(P=0.00)。结论 XE-2100 IMI在恶性胸腹水检测中与病理细胞学检查一性较好,敏感性高,简便、快捷,可用于临床胸腹腔积液标本中肿瘤细胞的常规筛查。

关键词： XE-2100 IMI通道胸腹水检查恶性胸腹腔积液细胞细胞学检查

渭河流域蒸散发时空反演及其对人类活动的响应

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水利水电技术（中英文） 2023年第12期54卷 120-132页

作者：王丽霞夏鹏宇杨潇潘飞燕罗旭长安大学地质工程与测绘学院陕西西安710054 长安大学地球科学与资源学院陕西西安710054

【目的】土地类型变化、土地工程建设和工业农业生产等人类活动通过改变下垫面性质而对地表蒸散发起到重要的影响作用,而目前针对人类活动驱动力的定量化研究十分有限。【方法】基于MODIS遥感影像和气象数据,利用地表能量平衡系统(SEBS... 详细信息

【目的】土地类型变化、土地工程建设和工业农业生产等人类活动通过改变下垫面性质而对地表蒸散发起到重要的影响作用,而目前针对人类活动驱动力的定量化研究十分有限。【方法】基于MODIS遥感影像和气象数据,利用地表能量平衡系统(SEBS)模型和趋势分析法探究了2009—2019年较长时间序列尺度上渭河流域蒸散发的时空演变特征,并利用残差分析法定量化评价了其对人类活动的响应。【结果】结果显示:(1)SEBS模型估算的蒸散发(ET)与水量平衡法所得实测值的拟合系数(R2)、均方根误差(RMSE)和平均相对误差(MRE)分别为0.78、0.84 mm和34.1%。(2)2010—2018年渭河流域耕地净减少约1 622.5 km2,增长率为-2.91%,主要流向为草地;建设用地面积净增加785.75 km2,增长率约15.55%,主要流入为耕地,未利用地转入最少。(3)人类活动对渭河流域ET起促进作用的区域面积约占比45.41%,其中贡献率在80%以上的区域约占比30%;起抑制作用的区域面积约占比4.24%,关中地区的贡献率在80%以上。【结论】结果表明:(1)SEBS模型在研究区具有较好的适用性。(2)时间尺度上,实际蒸散发呈现逐年波动上升趋势,变化速率约为0.019 mm/a;空间尺度上,实际蒸散发呈现东南高、西北低的地带性分布规律。(3)在研究时段内,人类活动对地表蒸散发有不同方向的驱动作用,其中促进渭河流域蒸散发的区域主要分布在泾河、北洛河流域中部及渭河上游的部分地区;抑制蒸散发的区域主要分布在关中地区。

关键词：蒸散发人类活动 SEBS模型残差分析渭河流域

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