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糖通饮经miRNA-21/TGF-β1/Smad信号转导对糖尿病肾病大鼠肾脏功能的保护作用

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中药新药与临床药理 2023年第4期34卷 452-458页

作者：潘艳伶陈洪民伏红颖杨红凌湘力贵州医科大学附属医院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州贵阳550004

目的基于miRNA-21/TGF-β_(1)/Smad信号转导探讨糖通饮(黄芪、生地黄、山药、山萸肉等)对糖尿病肾病(DN)大鼠的肾脏保护作用及机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组(13.5 mg·kg^(-1))及糖通饮低、中、高剂量组(6.21、12... 详细信息

目的基于miRNA-21/TGF-β_(1)/Smad信号转导探讨糖通饮(黄芪、生地黄、山药、山萸肉等)对糖尿病肾病(DN)大鼠的肾脏保护作用及机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组(13.5 mg·kg^(-1))及糖通饮低、中、高剂量组(6.21、12.42、24.84 g·kg^(-1)),每组10只。采用高脂高糖饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素制备DN大鼠模型。模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,连续8周。采用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白;全自动生化分析仪检测血清空腹血糖、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平;HE及PAS染色法观察肾组织病理改变;RT-PCR法检测肾组织miRNA-21、转化生长因子(TGF)-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达水平;Western Blot法检测肾组织TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达。结果与正常组比较,模型组的空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平均明显升高(P<0.05);肾小球系膜细胞增生,基底膜增厚,肾小管萎缩,小管间质间均可见有炎性细胞的浸润,肾小球系膜区可见明显PAS阳性染色物质沉积;大鼠肾组织miRNA-21、TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达及TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达均明显上调(P<0.05)。与模型组比较,糖通饮各剂量组的空腹血糖、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三酯水平均明显降低(P<0.05);肾小球和肾小管病变程度均出现减轻,PAS阳性染色物质均有不同程度减少;糖通饮中、高剂量组大鼠肾组织miRNA-21、TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Col-ⅢmRNA表达及TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Col-Ⅲ蛋白表达均明显下调(P<0.05)。结论糖通饮可能通过下调miRNA-21的表达,抑制TGF-β_(1)/Samd信号转导,从而有效降低细胞外基质进行性累积,从而改善DN大鼠的肾脏损伤,保护其肾脏功能。

关键词：糖尿病肾病糖通饮 miRNA-21/TGF-β1/Smad信号转导细胞外基质大鼠

糖通饮对糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的延缓作用

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中成药 2023年第9期45卷 2860-2866页

作者：陈洪民潘艳伶伏红颖杨红凌湘力贵州医科大学贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院贵州贵阳550004

目的探讨糖通饮延缓糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的作用机制。方法随机抽取10只大鼠为正常组,其余50只采用高脂高糖饮食联合STZ多次注射进行糖尿病肾病造模,造模成功后随机分为模型组,厄贝沙坦组,糖通饮低、中、高剂量组,每组10只。各组大... 详细信息

目的探讨糖通饮延缓糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的作用机制。方法随机抽取10只大鼠为正常组,其余50只采用高脂高糖饮食联合STZ多次注射进行糖尿病肾病造模,造模成功后随机分为模型组,厄贝沙坦组,糖通饮低、中、高剂量组,每组10只。各组大鼠给予对应药物干预8周后,代谢笼收集大鼠24 h尿液,股动脉取血,处死大鼠并取双侧肾组织。检测各组大鼠肾脏肥大指数、空腹血糖、24 h尿微量白蛋白、血尿素氮、血肌酐;HE、Masson染色观察各组大鼠肾组织形态学变化;RT-qPCR法检测miRNA-21、TGF-β_(1)、Col-Ⅲ、FN mRNA表达;Western blot法及免疫组化染色法检测肾组织TGF-β_(1)、Col-Ⅲ、FN蛋白表达。结果与模型组比较,糖通饮各剂量组大鼠肾脏肥大指数、空腹血糖、24 h尿微量白蛋白、血尿素氮、血肌酐水平降低(P<0.05),糖通饮中、高剂量组改善效果优于糖通饮低剂量组(P<0.05);光镜下厄贝沙坦组与糖通饮各剂量组大鼠肾组织病理形态得到不同程度改善;糖通饮中、高剂量组与厄贝沙坦组miRNA-21表达及TGF-β_(1)、Col-Ⅲ、FN mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。结论糖通饮能够延缓糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化,其机制可能是通过对miRNA-21、TGF-β_(1)调控产生的。

关键词：糖通饮糖尿病肾病肾脏纤维化 miRNA-21 TGF-β_(1)

糖通饮靶向microRNA-21调控Smad7、PTEN抑制糖尿病肾病肾纤维化

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中药材 2023年第8期46卷 2023-2029页

作者：潘艳伶伏红颖陈洪民杨红梅璇凌湘力贵州医科大学附属医院贵州贵阳550001 贵州医科大学贵州贵阳550025

目的:探讨糖通饮抑制糖尿病肾病肾纤维化的作用机制。方法:60只SD大鼠中随机选取10只作为正常对照组,其余采用高糖高脂饲料喂养联合STZ多次小剂量腹腔注射制备糖尿病肾病(DKD)大鼠模型,将造模成功的DKD大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦(13.... 详细信息

目的:探讨糖通饮抑制糖尿病肾病肾纤维化的作用机制。方法:60只SD大鼠中随机选取10只作为正常对照组,其余采用高糖高脂饲料喂养联合STZ多次小剂量腹腔注射制备糖尿病肾病(DKD)大鼠模型,将造模成功的DKD大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦(13.5 mg/kg)阳性对照组及糖通饮低(6.21 g/kg)、中(12.42 g/kg)、高(24.84 g/kg)剂量组,每组10只,灌胃给药,1次/d,共8 w。检测各组大鼠FBG、24 h尿mAlb;HE及Masson染色观察大鼠肾组织病理学变化;Western Blot检测大鼠肾组织Smad7、PTEN、E-cadherin、FN、Vimentin、α-SMA蛋白表达;RT-PCR检测大鼠肾组织Smad7、PTEN、FN、Vimentin α-SMA、E-cadherin mRNA及miRNA-21表达。体外实验对高糖状态下HBZY-1细胞进行miRNA-21过表达慢病毒转染并予糖通饮含药血清进行干预,Western Blot法检测细胞Smad7、PTEN、α-SMA蛋白表达,RT-PCR法检测细胞miR-21、Smad7、PTEN、α-SMA mRNA表达。结果:体内实验结果显示,与模型组比较,糖通饮能显著降低DKD大鼠肾组织FN、Vimentin、α-SMA mRNA及蛋白表达,显著升高Smad7、PTEN、E-cadherin mRNA及蛋白表达,显著降低miRNA-21表达及FBG、24h尿mAlb水平(P<0.05),改善DKD大鼠肾组织病理学变化。体外实验结果显示,经miRNA-21过表达慢病毒转染后,高糖状态下HBZY-1细胞中Smad7、PTEN mRNA及蛋白表达显著降低,α-SMA mRNA及蛋白表达显著升高,糖通饮可使HBZY-1细胞中miRNA-21表达显著降低,Smad7、PTEN mRNA及蛋白表达显著升高,α-SMA mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:miRNA-21是糖通饮防治DKD的靶点之一,糖通饮可通过作用于miRNA-21进而良性调节其靶标Smad7、PTEN的表达,抑制糖尿病肾病肾纤维化。

关键词：糖通饮糖尿病肾病肾纤维化 microRNA-21 Smad7 PTEN

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芪荷地黄汤防治糖尿病脂代谢紊乱的实验研究

陕西中医 2008年第9期29卷 1245-1246页

作者：潘艳伶凌湘力贵阳医学院附属医院中医科贵阳550004

目的:通过观察中药芪荷地黄汤对糖尿病脂代谢紊乱大鼠血清载脂蛋白、胰岛素敏感指数(ISI)等的影响,初步探讨芪荷地黄汤防治糖尿病脂代谢紊乱的可行性和可能的作用机理。方法:通过腹腔注射四氧嘧啶,加高脂饲料喂养建立的糖尿病脂代谢紊... 详细信息

目的:通过观察中药芪荷地黄汤对糖尿病脂代谢紊乱大鼠血清载脂蛋白、胰岛素敏感指数(ISI)等的影响,初步探讨芪荷地黄汤防治糖尿病脂代谢紊乱的可行性和可能的作用机理。方法:通过腹腔注射四氧嘧啶,加高脂饲料喂养建立的糖尿病脂代谢紊乱大鼠模型,在接受芪荷地黄汤治疗10周后,测定其有关生化指标。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清载脂蛋白AI(ApoAI)、高密度脂蛋白(HDL)含量及ISI明显降低,血清载脂蛋白B(ApoB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、脂蛋白a[Lp(a)]、空腹血糖(FBG)及空腹血浆胰岛素(FINS)含量显著升高。而芪荷地黄汤治疗后与模型对照组相比,上述指标均有明显改善,差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:中药芪荷地黄汤可在一定程度上防治糖尿病脂代谢紊乱。

关键词：芪荷地黄汤/分析糖尿病脂代谢紊乱动物实验

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糖通饮治疗糖尿病周围神经病变临床观察

时珍国医国药 2009年第11期20卷 2828-2829页

作者：潘艳伶凌湘力贵阳医学院附属医院贵州贵阳550004

目的评价中药内服加外用对糖尿病周围神经病变的疗效。方法将60例符合诊断标准的患者随机分为两组,治疗组予经验方糖通饮水煎内服,配合自拟舒筋通络、化瘀定痛外治中药方洗泡患肢;对照组单纯使用甲钴胺注射液肌注治疗。结果治疗组对麻... 详细信息

目的评价中药内服加外用对糖尿病周围神经病变的疗效。方法将60例符合诊断标准的患者随机分为两组,治疗组予经验方糖通饮水煎内服,配合自拟舒筋通络、化瘀定痛外治中药方洗泡患肢;对照组单纯使用甲钴胺注射液肌注治疗。结果治疗组对麻木、疼痛、腱反射改善的临床疗效优于对照组(P<0.05);正中神经、腓总神经运动传导速度(MNCV)及感觉传导速度(SNCV)均较治疗前明显增快(P<0.05);其改善程度明显好于对照组(P<0.05),差异均具有显著性。结论经验方糖通饮内服加自拟外用方较甲钴胺效果显著,丰富了对该病的治疗手段,提高了临床疗效。

关键词：糖尿病周围神经病变糖通饮中药外治方

糖通饮对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠肝组织的保护作用及机制

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贵州医科大学学报 2022年第4期47卷 373-378页

作者：陈俞如马欢伏红颖潘艳伶贵州医科大学临床医学院中医学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院中医科贵州贵阳550004

目的研究糖通饮对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝模型大鼠肝组织的保护作用及可能机制。方法44只SPF级SD雄性大鼠,随机抽取10只作为正常对照组予基础饲料喂养,其余大鼠予高脂高糖饲料喂养及低剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射以建立T2D... 详细信息

目的研究糖通饮对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝模型大鼠肝组织的保护作用及可能机制。方法44只SPF级SD雄性大鼠,随机抽取10只作为正常对照组予基础饲料喂养,其余大鼠予高脂高糖饲料喂养及低剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射以建立T2DM合并非酒精性脂肪肝模型,并随机分为模型组、糖通饮(低、中、高)剂量组(相应剂量的糖通饮灌胃治疗8周);检测各组大鼠空腹血糖(FBG),测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用HE染色法观察肝组织病理学变化,油红O染色法观察肝细胞脂质沉积情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肝组织脂质沉积增多,存在明显脂肪样变性,FBG及血清TG、TC、ALT、AST、MDA、SOD、TNF-α水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,各剂量组大鼠肝组织脂质沉积减少,脂肪样变性明显减轻,FBG及血清TG、TC、ALT、AST、MDA、SOD、TNF-α水平均有不同程度降低(P<0.05或P<0.01)。结论糖通饮对T2DM合并非酒精性脂肪肝模型大鼠肝组织具有一定的保护作用,其机制可能与改善肝脏脂代谢紊乱、提高抗氧化能力、减轻炎症反应以及脂质过氧化损伤有关。

关键词：糖通饮 2型糖尿病非酒精性脂肪肝肿瘤坏死因子-α 脂质过氧化

经验方糖通饮对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢的影响及机制

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贵州医科大学学报 2022年第4期47卷 379-385页

作者：陈俞如潘艳伶马欢伏红颖贵州医科大学临床医学院中医学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院中医科贵州贵阳550004

目的探讨经验方糖通饮对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠脂质代谢的影响及机制。方法选取8周龄(SD)雄性大鼠44只,随机取10只作为正常组(基础饲料喂养,注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液),其余大鼠建立T2DM合并NAFLD模型... 详细信息

目的探讨经验方糖通饮对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠脂质代谢的影响及机制。方法选取8周龄(SD)雄性大鼠44只,随机取10只作为正常组(基础饲料喂养,注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液),其余大鼠建立T2DM合并NAFLD模型(高脂高糖饲料喂养,低剂量链脲佐菌素腹腔注射),连续处理8周,于正常组和造模大鼠中各取2只验证造模成功与否;将余下造模成功的32只大鼠随机分为模型组及糖通饮低(12 g/kg)、中(24 g/kg)、高剂量(36 g/kg)组,各剂量组大鼠分别予相应浓度糖通饮灌胃,模型组和正常组大鼠予等容积双蒸水灌胃,连续8周;各组大鼠灌胃结束后,称取体质量,取尾静脉血检测空腹血糖(FBG)水平;10%水合氯醛腹腔注射麻醉各组大鼠,取腹主动脉血采用ELISA法检测血清胰岛素(FINS),分光光度计比色法检测血清游离脂肪酸(FFA),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(ISI);各组大鼠取血后迅速摘取肝组织计算肝脏指数、GPO-PAP法检测甘油三酯(TG)含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肝组织学特征,Western blot法检测磷酸化c-Jun氨基末端激酶-1(p-JNK1)/c-Jun氨基末端激酶-1(JNK1)、磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)/胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠肝细胞内存在明显脂肪样变性,HOMA-IR、肝脏指数、血清FFA水平、肝组织TG含量及肝组织p-JNK1/JNK1、p-IRS-1/IRS-1蛋白表达水平均升高(P<0.05),ISI水平降低(P<0.05);与模型组比较,糖通饮各剂量组大鼠肝细胞脂肪样变性均有不同程度的改善,HOMA-IR、肝脏指数、血清FFA水平、肝组织TG含量、肝组织p-JNK1/JNK1及p-IRS-1/IRS-1蛋白表达水平均降低(P<0.05),ISI水平增高(P<0.05)。结论经验方糖通饮可有效调节T2DM合并NAFLD大鼠肝脏的脂质代谢,减轻肝细胞脂肪变性程度,其机制可能与抑制肝组织JNK信号通路相关蛋白表达有关。

关键词： 2型糖尿病糖通饮非酒精性脂肪肝脂质代谢 c-Jun氨基末端激酶-1 胰岛素受体底物-1 磷酸化

耳针及加味六味地黄汤对糖尿病脂代谢紊乱防治作用的实验研究

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四川中医 2007年第7期25卷 9-11页

作者：潘艳伶凌湘力贵阳医学院附属医院贵州贵阳550004

目的:通过观察耳针、中药对糖尿病脂代谢紊乱大鼠血清载脂蛋白、胰岛素敏感指数(ISI)等的影响,初步探讨耳针、中药防治糖尿病脂代谢紊乱的可行性和可能的作用机理。方法:通过腹腔注射四氧嘧啶,加高脂饲料喂养建立的糖尿病脂代谢紊乱大... 详细信息

目的:通过观察耳针、中药对糖尿病脂代谢紊乱大鼠血清载脂蛋白、胰岛素敏感指数(ISI)等的影响,初步探讨耳针、中药防治糖尿病脂代谢紊乱的可行性和可能的作用机理。方法:通过腹腔注射四氧嘧啶,加高脂饲料喂养建立的糖尿病脂代谢紊乱大鼠模型,在分别接受耳针、中药(加味六味地黄汤)、耳针+中药治疗10周后,测定其有关生化指标。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清载脂蛋白AI(ApoAI)、高密度脂蛋白(HDL)含量及ISI降低,血清载脂蛋白B(ApoB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、脂蛋白a[Lp(a)]、空腹血糖(FBG)及空腹血浆胰岛素(FINS)含量升高,差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01)。而耳针、中药特别是耳针+中药治疗后上述指标均有明显改善。结论:耳针(肝、脾、肾穴)、加味六味地黄汤可在一定程度上防治糖尿病脂代谢紊乱,二者联合应用效果更佳。

关键词：糖尿病脂代谢紊乱耳针加味六味地黄汤载脂蛋白胰岛素敏感指数

糖通饮含药血清对高糖环境下HBZY-1细胞增殖的影响及其作用机制

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贵州医科大学学报 2022年第6期47卷 621-627页

作者：伏红颖潘艳伶陈俞如陈洪民贵州医科大学临床医学院中医学教研室贵州贵阳550000 贵州医科大学附属医院中医科贵州贵阳550000

目的分析糖通饮含药血清对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖的影响及可能作用机制。方法将30只SPF级雄性SD大鼠随机均分为空白血清组和糖通饮含药血清组,糖通饮含药血清组大鼠予以糖通饮灌胃,空白血清组大鼠予以等体积的双蒸... 详细信息

目的分析糖通饮含药血清对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖的影响及可能作用机制。方法将30只SPF级雄性SD大鼠随机均分为空白血清组和糖通饮含药血清组,糖通饮含药血清组大鼠予以糖通饮灌胃,空白血清组大鼠予以等体积的双蒸水灌胃,灌胃7 d后股动脉取血;常规培养第3~15代HBZY-1细胞分为正常糖+空白血清组、高糖+空白血清组以及高糖+糖通饮含药血清组,按分组给予相应大鼠血清干预;细胞培养结束后,CCK-8法检测各组细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法检测各组细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad 2、Smad 3 mRNA表达,Western blot法检测各组细胞TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3蛋白表达。结果与正常糖+空白血清组相比,高糖+空白血清组HBZY-1细胞明显增殖,细胞中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达增加,TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3蛋白表达也增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);与高糖+空白血清组相比,高糖+糖通饮含药血清组HBZY-1细胞增殖被抑制,细胞中的TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达降低,TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3蛋白表达也降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论糖通饮可以抑制高糖状态下HBZY-1细胞的增殖,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路的过度激活有关。

关键词：肾小球系膜细胞细胞增殖糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1/Smad信号通路高糖环境糖通饮含药血清