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四川省松树散斑壳菌的种类及其rRNA基因ITS区的PCR、克隆和序列分析

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四川省松树散斑壳菌的种类及其rRNA基因ITS区的PCR、克隆和序列分...

作者：潘欣四川农业大学

学位级别：硕士

本研究以松落针病病原菌散斑壳Lophodermium. spp为对象，对四川省10县6市的松树林区进行了深入细致地调查，并按照Minter(1981)的分类标准，对不同地区、不同松树(云南松、华山松、马尾松、湿地松、油松、高山松等)、同一松树不同部位... 详细信息

本研究以松落针病病原菌散斑壳Lophodermium. spp为对象，对四川省10县6市的松树林区进行了深入细致地调查，并按照Minter(1981)的分类标准，对不同地区、不同松树(云南松、华山松、马尾松、湿地松、油松、高山松等)、同一松树不同部位(树冠中下部枝条、落地针叶)上的散斑壳菌进行了形态学种的鉴定，共发现散斑壳菌6种，即针叶树散斑壳Lophodermium. conigenum(Brunaud)Hilitz、松针散斑壳Lophodermium. pinastri(Schrad)Chev、四川散斑壳Lophodermium. sichuanense Qiu et Liu、印度散斑壳Lophodermium. indianum Singh et Minter、南方散斑壳Lophodermium. australe Dearn和待定新种二郎山散斑壳Lophodermium. hui. (暂定名)。对这6种散斑壳菌进行了分离培养并对其产孢特性作了研究，发现带有病斑的针叶和培养物在8个星期内均没有子囊果产生;但在人工创造的高湿条件下，带有成熟子囊果的松针很快释放出子囊孢子并萌发。采用改良氯化苄法，获得了7株散斑壳菌的基因组DNA。利用真菌通用引物ITS和ITS，对这7株散斑壳菌的rRNA基因ITS区进行了PCR扩增，分别获得了长约550bp的特异性条带。然后将PCR扩增片段定向克隆到pUCm-T质粒的多克隆区，并转化到大肠杆菌JM109载体菌中，筛选获得阳性克隆菌株，最后对阳性克隆质粒中的外源DNA片段进行了序列测定。将所得的7株散斑壳菌的rRNA基因ITS区序列分别与GenBank中已有的序列(序列号分别为AY247751、AF473559、AF473555、AF247753)进行了比较，并构建了系统发育树，结果表明：这11个菌株可以分为3个大组，即前8株(L. conigenum-1、L. conigehum-2、L. conigenum-3、L. pinastri、AY247751、AF473559、AF473555、和AY247753)为第一组;L. sichuanense、L. hui为第二组;L. conigenum-TM单独为第三组。其中第一组又可以分为L. conigenum组与L. pinastri组。L. conigenum组中5株菌株相互之间的同源率均在93.5％以上，L. pinastri组中3株菌株相互之间的同源率也在91.2％以上，说明它们分别为同一种内的不同菌株。而L. conigenum组中的各个菌株与L. pinastri组中的各个菌株之间的同源率仅在86.8％-87.5％之间，反映了种间较大的遗传差异，这与形态学上把它们鉴定为不同的种相吻合。L. sichuanense、L. hui相互之间的同源率在90.0％左右，被归为第二组，它们与第一组各个菌株之间的同源率仅仅在81％左右;L. conigenum-TM单独归为一组，它与其他菌株之间的同源率最低，在63.1％-79.3％之间。已将本研究所得的针叶树散斑壳***一1、***一2、***·3和松针散斑壳LPinastri的rRNA基因ITS区序列在国际基因库(GenBank)中注册，序列号分别为AY422489、AYS 1 5318、AY515319和AY422490。

关键词：四川,松,散斑壳菌,ITS区,PCR,克隆,序列测定

Banach空间中几类脉冲微分方程解的存在性

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Banach空间中几类脉冲微分方程解的存在性

作者：潘欣安徽大学

学位级别：硕士

本文主要研究半线性发展脉冲微分方程解和正解的存在性，以及脉冲微分方程终值问题解的存在性。全文分为四章。第一章介绍脉冲微分方程问题的应用前景与研究展望，给出结论需要的预备定理，并介绍主要结论。第二章研究半线性发展脉冲微... 详细信息

本文主要研究半线性发展脉冲微分方程解和正解的存在性，以及脉冲微分方程终值问题解的存在性。全文分为四章。第一章介绍脉冲微分方程问题的应用前景与研究展望，给出结论需要的预备定理，并介绍主要结论。第二章研究半线性发展脉冲微分方程解的存在性。本章通过将原微分方程问题转化为相应的积分方程，在合适的条件下，运用Schauder不动点定理获得解的存在性，并构造例子说明所得结果的应用。第三章研究半线性发展脉冲微分方程正解的的存在性。我们采用相同的方法利用抽象锥上的不动点定理，在合适的条件下获得正解的存在性，并构造例子说明所得结果的应用。第四章我们采用不动点定理的方法，获得了Banach空间中脉冲微分方程终值问题的解的存在性。

关键词：脉冲微分方程正解线性算子半群终值间题锥

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海关预算绩效评价研究 ——以A海关为例

海关预算绩效评价研究 ——以A海关为例

作者：潘欣首都经济贸易大学

学位级别：硕士

预算绩效评价是对预算目标设定、资金投入和使用、取得效益和成果的综合评定,是预算绩效管理的关键一环。近年来,预算绩效管理工作受到党中央、国务院的持续关注和高度重视,因此充分实行预算绩效管理,强调预算执行效果,对于提升预算资... 详细信息

预算绩效评价是对预算目标设定、资金投入和使用、取得效益和成果的综合评定,是预算绩效管理的关键一环。近年来,预算绩效管理工作受到党中央、国务院的持续关注和高度重视,因此充分实行预算绩效管理,强调预算执行效果,对于提升预算资金管理水平、财政资金使用效率都具有重要的意义。海关是我国重要的监督管理机关,也是率先实行预算绩效管理的部门之一。其绩效管理工作的进展以及所产生的积极传导效应,决定了对此问题研究的必要。鉴于上述重要因素,本文首先以现有的国内外理论研究为基础,结合海关实际情况,以直属海关A海关为例,分析其预算绩效评价现状及其存在的不足;然后,根据A海关预算绩效目标设定情况,参考预算绩效评价共性指标体系,采用层次分析法设置指标权重,对现有评价指标体系进行进一步调整和完善;最后,通过变动前后预算绩效评价结果的比较,得出层次分析法下所优化的评价指标具有更多优势的结论。本文以我国全面推进实施预算绩效管理的若干举措为背景,将研究对象聚焦于国家行政机关之一海关,试图通过对A海关绩效评价具体情况的探究,为海关系统其他部门开展预算绩效管理工作提供借鉴思路,同时也为类似性质的监管部门、行政机关深入开展预算绩效管理工作提供参考,研究结果显示了一定的时效性和应用价值。

关键词：绩效评价预算绩效层次分析法

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淮河流域极端降水演变特征及模拟

淮河流域极端降水演变特征及模拟

作者：潘欣南京信息工程大学

学位级别：硕士

利用淮河流域50个分布相对均匀的气象站点的逐日降水资料,借助于线性趋势、MK检验、R/S分析、圆形统计、EOF分析等方法对淮河流域1961～2014年的极端降水强度、频率以及发生时间的时空演变特征进行研究。同时,利用广义极值模型(GEV)对... 详细信息

利用淮河流域50个分布相对均匀的气象站点的逐日降水资料,借助于线性趋势、MK检验、R/S分析、圆形统计、EOF分析等方法对淮河流域1961～2014年的极端降水强度、频率以及发生时间的时空演变特征进行研究。同时,利用广义极值模型(GEV)对流域极值降水进行了模拟,探究气候因子与极值降水之间的联系。主要结论:(1)从长时间尺度分析,淮河流域极端降水阈值有明显提高(达到0.1显著性水平),频率和极值降水量等无显著变化。但从2000s中期之后分析,极端降水阈值、频率、极值降水量等均呈下降趋势且达到了 0.05显著性水平。(2)受地理位置以及台风、梅雨等影响,流域极端降水存在明显的空间差异性。流域东部(沿海地区)以及西南部(较低纬度地区)的极端降水事件偏多。(3)流域整体降水强度在逐渐增强。极端降水阈值、频次、贡献率和极值降水量均呈“中西部-东部”反位相分布,中西部以上升趋势为主,东部以下降趋势为主。结合R/S分析,未来极端降水将会以目前趋势继续发展。(4)流域极端降水发生时间主要集中在7月中下旬,并表现出明显的年际振荡;流域平均的发生时间表现出提前趋势,但未达到0.05显著性水平。(5)发生时间在空间上由西南向东北逐渐推迟,大部分站点的发生时间呈微弱提前的线性趋势;这样的空间分布可能与梅雨和台风的影响有关,而提前趋势与1990年代以来我国主雨带的年代际北移有关。(6)经EOF分析,发生时间前两个模态空间分布分别为“西北-东南”反位相分布和全区一致性分布。(7)流域绝大部分站点PX3D指数序列通过平稳性检验,平稳GEV模型能够较好地拟合PX3D指数序列。采用以时间为位置参数协变量的非平稳GEV模型能够显著提高模型对于存在显著趋势序列的拟合情况,同时在设计极端降水预估时应当考虑显著性趋势的影响。(8)以气候因子指数(AMO、EASMI、PDO、SOI、Nino3.4SST)作为GEV模型参数协变量,对流域各站点PX3D指数拟合情况均有所提高。在对极值降水频率进行预估时,以气候因子SOI、Nino3.4SST指数作为位置参数协变量,能够较好地模拟极值降水的峰谷变化;以气候因子AMO、EASMI、PDO指数作为尺度参数协变量,可以较好地模拟极值降水的波动幅度变化。

关键词：极端降水 R/S分析 GEV模型气候因子时空演变

云南地区胃癌患者TS和MTHFR基因多态性与mRNA及蛋白表达的相关性分析

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云南地区胃癌患者TS和MTHFR基因多态性与mRNA及蛋白表达的相关性...

作者：潘欣昆明医科大学

学位级别：硕士

目的：对5-FU相关代谢酶TS和MTHFR进行基因多态性检测,探讨这些基因多态性与TS和MTHFR在云南胃癌患者中mRNA、蛋白表达的相关性,并将云南胃癌患者和健康人群的TS基因多态性分布频率进行比较,为阐明氟尿嘧啶类药物疗效个体差异的分子机... 详细信息

目的：对5-FU相关代谢酶TS和MTHFR进行基因多态性检测,探讨这些基因多态性与TS和MTHFR在云南胃癌患者中mRNA、蛋白表达的相关性,并将云南胃癌患者和健康人群的TS基因多态性分布频率进行比较,为阐明氟尿嘧啶类药物疗效个体差异的分子机制和胃癌个体化化疗提供理论依据。方法：1.收集经病理组织学检查确诊,且并未接受术前辅助化疗的31例云南籍胃癌患者癌组织,采用PCR-RFLP方法检测胃癌患者TS基因3'UTR+/-6bp、5'UTR2R/3R及3R G>C基因型,用Taqman探针方法对MTHFR677C>T和1298A>C基因型进行检测,用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹分别检测胃癌患者的TS和MTHFR的mRNA和蛋白表达。采用单因素ANOVA检验TS和MTHFR基因多态性与mRNA、蛋白表达量的相关性。2.采集入选的31例胃癌患者外周血2m1,比较胃癌患者组织和血液DNA基因型差异性,在此基础上,收集云南籍健康志愿者200人,采取其外周血2ml,并采用PCR-RFLP方法检测胃癌患者和健康人群TS基因3'UTR+/-6bp(?)5'UTR2R/3R基因型,采用四格表卡方检验比较云南地区胃癌患者和健康人群的等位基因频率差异。结果：1.在本研究中,发现TS基因3'UTR基因多态性+/-6bp基因型患者较-/-6bp基因型患者的mRNA和蛋白表达量明显升高(mRNA:P=0.043;protein:P=0.011)。5'UTR2R/3R基因多态性3R/3R基因型患者较2R/2R基因型患者的蛋白表达量显著升高(P=0.003),2R/3R基因型患者较2R/2R基因型患者的蛋白表达量明显升高(P=0.016)。其余多态性位点的基因型与其mRNA和蛋白表达量间未发现相关性(P>0.05)。2.本研究中31例胃癌患者的组织DNA和外周血DNA基因分型一致。TS基因3'UTR+6bp和-6bp等位基因在云南健康人群中的频率为33.5%和66.5%,在胃癌患者中的频率为25.8%和74.2%;5'UTR2R和3R等位基因在云南健康人群中频率为15%和85%,在胃癌患者中的频率为22.6%和77.4%。云南地区健康人群和胃癌患者的TS基因3'UTR+/-6bp和5'UTR2R/3R等位基因分布频率未发现统计学差异(P>0.05)。结论：本研究发现TS基因3'UTR+/-6bp和5'UTR2R/3R多态性与TS蛋白表达存在相关性,TS基因多态性可能通过改变表达水平从而影响TS的酶活性。其余多态性未发现与mRNA和蛋白表达的相关性,具体的分子机制还有待进一步究。在本研究中,云南胃癌患者和健康人群的TS基因3'UTR+/-6bp和5'UTR2R/3R等位基因分布频率未显示出差异,因此推断,基于更大样本量得出的云南健康人群基因分布频率在一定程度上更能反映本地胃癌患者的基因分布频率。

关键词：胃癌胸苷酸合成酶亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性表达量

PDPGA优化方法及其在炼厂气脱硫优化中应用

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PDPGA优化方法及其在炼厂气脱硫优化中应用

作者：潘欣武汉理工大学

学位级别：硕士

化工生产过程,已从过去的单纯考虑经济利益最大化单一目标,转向兼顾生态环境、能量消耗等多个目标的评价上,多目标优化问题在化工中越来越受到重视。流程模拟软件的出现为人们模拟实际工业过程提供了方便,在模拟的基础上将其与进化算法... 详细信息

化工生产过程,已从过去的单纯考虑经济利益最大化单一目标,转向兼顾生态环境、能量消耗等多个目标的评价上,多目标优化问题在化工中越来越受到重视。流程模拟软件的出现为人们模拟实际工业过程提供了方便,在模拟的基础上将其与进化算法结合来解决化工过程多目标优化问题,成为近些年来各方学者研究的一个热门课题。但是,因流程模拟软件存在模型复杂性高、收敛性弱等问题,导致了应用该方法对化工多目标问题进行优化求解的时间消耗大且优化效率不高。而工程与科学研究领域中常用到的并行算法将一个复杂问题交由多个处理器同时处理,可以在有效提高收敛性的同时,降低运算时间提高效率。并行算法的这些特点为人们解决化工多目标优化问题提供了一种高效可行的解决方法。基于对上述问题的考虑,本文对并行算法和多目标优化方法进行系统的研究。通过比较各种进化算法的优劣,选取NSGA-II作为本文的多目标优化研究方法,对其进行并行化改进,提出了一种基于种群的分布式并行遗传算法。该方法与流程模拟软件结合优化能有效解决化工多目标优化中计算速度慢和优化效果不理想的问题。在应用经典测试函数验证该并行算法可靠性的基础上,将该并行优化方法应用到干气脱硫和富液集中回收系统的多目标优化中,在合理的优化时间内取得了降低系统能耗、减少排放的优化目标。本文的研究主要包括以下内容:(1)学习和总结近几十年来国内外的优秀算法,选取带精英策略的非支配排序遗传算法作为研究对象,对其可并行的部分进行研究。(2)通过选取主从式模型,考虑对NSGA-II的适应度评价部分进行并行计算,提出种群分布式并行遗传算法(PDPGA),并与流程模拟软件结合对脱硫溶剂再生塔这一简单实例进行优化求解,结果表明该方法能有效提高优化效率降低时间消耗。(3)选取适宜的吸收剂对炼厂气体脱硫及溶剂再生的工业过程进行研究,并对溶剂集中再生的改进方案进行全流程模拟,通过调节溶剂MDEA浓度、再生塔回流比和塔顶采出率等操作变量,使用PDPGA与Aspen Plus结合的优化方法对上述过程进行了全流程优化。(4)对本文的工作进行系统总结,并对下一阶段的工作进行了展望。

关键词：多目标优化并行计算 MDEA 干气脱硫

本科护生OSCE考试中TSP培训教学大纲的设计研究

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本科护生OSCE考试中TSP培训教学大纲的设计研究

作者：潘欣山西医科大学

学位级别：硕士

研究目的探讨护理专业TSP培训教学大纲的主要构成要素;探讨护理专业TSP培训教学大纲构建的理论与现实依据、基本原则;应用专家咨询法,从护理问诊和健康教育两个方面初步设计一个符合我国目前护理本科教育特点,符合当前我国TSP培训特点的... 详细信息

研究目的探讨护理专业TSP培训教学大纲的主要构成要素;探讨护理专业TSP培训教学大纲构建的理论与现实依据、基本原则;应用专家咨询法,从护理问诊和健康教育两个方面初步设计一个符合我国目前护理本科教育特点,符合当前我国TSP培训特点的,科学的、实用性和操作性较强的护理专业TSP培训教学大纲,基于此培训教学大纲对符合条件的临床护理教师进行TSP培训,发挥TSP作为一种教学资源的优势。研究对象担任SP三种角色功能(病人、评估者、教学指导者)的具有10年以上临床护理工作经验和5年以上护理本科生临床带教和课堂教学经验的临床护理教师研究方法应用文献分析法、理论分析法、专家访谈法,探讨构建护理专业TSP培训教学大纲的理论与现实依据、基本原则;采用德尔菲法,进行护理专业TSP培训教学大纲各课程及其教学内容的初筛,并确定其权重;利用克朗巴赫系数a、相关系数等进行TSP培训教学大纲的信效度检验;运用Excel2003和SPSS13.0软件进行数据处理。研究结果1.护理领域中TSP的概念及其内涵由具有丰富的工作经验和教学经验的临床护理教师作为标准化病人施教,创设逼真模拟的临床护理氛围,对护生进行各项临床基本实践技能和多种临床综合能力的训练、指导和考核,是符合现代护理教学和考核需要的一种新型实践教学方法和考核方法。TSP具有与SP相同的职能和优点,能较好地发挥作为模拟病人、考核者、指导者的三大作用。2.护理专业TSP培训教学大纲的确定通过两轮专家咨询,筛选标准以同时满足重要性赋值均数>4.0、变异系数<0.25,结合专家协调小组意见,最终形成护理专业TSP培训教学大纲,由目的要求、教学内容、教学时数以及教学方法四个方面组成的七课培训课程和由目的要求、考核方式、内容以及考核时间三个方面组成的一课考核课程。3.护理专业TSP培训教学大纲权重的设置通过专家评分法,设置各课程及其教学内容权重。计算每一课程及其教学内容的平均分数,再行归一化处理,即得各课程及其教学内容分权重,再用乘积法计算组合权重。最终形成的八课课程权重分别为0.1254、0.1170、0.1279、0.1221、0.1263、0.1288、0.1263和0.1263。4.专家组选择合理,调查结果的可信性高通过对专家组的基本情况进行定性分析(专业相关性、年龄结构层次、职称职务等),以及对专家组权威程度进行定量分析(专家组个人权威系数在0.7667～1.0000之间,专家群体权威系数值为0.8618),结果表明专家组具有较好的代表性、层次性和权威性;两轮专家咨询问卷回收率分别为:97.14%,94.12%,提出建设性意见的专家比例分别为44.12%,28.13%,说明专家对本研究有很高的积极性和关切度;两轮调查总体协调系数分别为0.389,0.368(P<0.001),说明专家意见协调性好。因此,专家的预测是建立在实践经验和理论基础上的,可信度较高,调查结果可取。5.护理专业TSP培训教学大纲具有较好的信度和效度通过分析TSP培训教学大纲专家的可靠性、内容效度、结构效度等显示该培训教学大纲具有较好的信效度。研究结论1.构建了护理专业TSP培训教学大纲,且覆盖面较广、科学合理、实用性和操作性较强;***如何扮演好病人和教师(含评估与教学指导)的双重角色是培训中的关键和重要内容,对临床护理教师达到一名合格的TSP的水平起到举足轻重的作用。建议1.构建专门的培训机构,使培训工作走向专业化、制度化、系统化;***技术的应用需要国家有关部门采取倾斜政策给予大力支持。本研究的创新之处1.界定护理领域中TSP的概念及内涵;2.将TSP作为一个研究整体,科学设计护理专业TSP培训教学大纲,完善和弥补了目前我国在SP培训方面研究的不足。进一步开展本研究的设想1.进一步科学完善护理专业TSP培训教学大纲;2.护理专业TSP培训教学大纲的设计,为以后的相关研究提供一定的基础;3.基于此课题的研究,可以形成一系列有关模拟教学的研究课题。

关键词：本科护生客观结构化临床考试教师标准化病人培训设计

水凝胶:口腔颌面部组织缺损修复中的作用与问题

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中国组织工程研究 2025年第10期29卷 2178-2188页

作者：伍志鑫蒋雯雯詹健辉李杨书润任文燕王一宇济宁医学院口腔医学院山东省济宁市272067 济宁医学院临床医学院山东省济宁市272067

背景:水凝胶因优越的机械及生物性能在生物医学领域占据独特优势,已成为研究热点。目前水凝胶相关研究涉及组织工程和创口敷料等方面。目的:综述水凝胶的优势性能与在口腔颌面部缺损修复领域中的应用研究进展,探讨水凝胶目前在应用推广... 详细信息

背景:水凝胶因优越的机械及生物性能在生物医学领域占据独特优势,已成为研究热点。目前水凝胶相关研究涉及组织工程和创口敷料等方面。目的:综述水凝胶的优势性能与在口腔颌面部缺损修复领域中的应用研究进展,探讨水凝胶目前在应用推广中的局限以及在此领域所面临的挑战,为未来研究方向提供新思路。方法:利用计算机检索Pub Med、中国知网、万方数据库发表的相关文献,检索词为“水凝胶,口腔颌面部缺损,机械性能,组织工程,创口敷料”“hydrogel,oral and maxillofacial defects,mechanical properties,guided tissue regeneration,wound dressing”。通过阅读文题和摘要进行初步筛选,排除与文章主题不相关的文献,根据纳入标准和排除标准,最终纳入108篇文献进行结果分析。结果与结论:(1)水凝胶具有良好的生物学活性、机械可控性及刺激响应等优势性能。(2)聚合物、金属和陶瓷联合制备的水凝胶复合物具有适当的机械性能、生物降解性以及可控的释放速率,契合颌面骨组织工程的需求。(3)纤维蛋白基水凝胶可填充穿过神经缺损区域的中空神经导管并促进轴突再生和生长从而恢复颌面神经功能。(4)控制纳米材料和水凝胶的相互作用可以改善肌纤维定向结构的形成以促进颌面肌组织再生。(5)多糖水凝胶,因具有控制药物递送和携带生物活性分子等作用,并且与其他材料联合应用可以产生与细胞外基质相匹配的最佳支架,因此逐渐成为修复不规则牙周缺损的首选。(6)磷酸钙或碳酸钙基水凝胶中填充不规则形状或精细的组织缺损并使牙体硬组织再矿化,自组装水凝胶制备简便且生物活性优良。(7)唾液腺来源的细胞外基质样凝胶有望参与许多唾液腺疾病的治疗。(8)水凝胶可作为伤口敷料结合生物黏合剂、脱细胞生物材料、抗微生物和抗氧化剂或干细胞等而被广泛用于治疗各种伤口。(9)纤维蛋白基水凝胶在口腔颌面部缺损修复中最具潜力,其具有优良的生物相容性、柔韧性和可塑性,可与细胞、细胞外基质蛋白和各种生长因子结合,能够促进间充质干细胞的成骨分化、轴突的再生与生长、血管生成、肌管分化、唾液腺组织再生和牙周组织再生,在口腔颌面部缺损组织的修复中具有广泛前景。然而其治疗效果取决于所携带物质的功能,复杂的制备工艺、安全性和长期疗效以及口腔颌面特殊的解剖结构是阻碍推广的难题,这也为未来的研究提供了方向。

关键词：水凝胶口腔颌面部缺损骨组织工程生物材料创口敷料机械性能刺激响应综述

蔓越莓汁对幽门螺杆菌感染者胃粘膜损伤、肠道菌群变化及氧化应激水平的影响研究

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蔓越莓汁对幽门螺杆菌感染者胃粘膜损伤、肠道菌群变化及氧化应激...

作者：潘欣青岛大学

学位级别：硕士

目的:幽门螺杆菌(***,Hp)是一种螺旋状革兰氏阴性菌,与胃粘膜损伤及肠道菌群特征密切相关,而其诱导的氧化应激在胃黏膜损伤中起非常重要的作用。膳食多酚具有胃粘膜保护、抗氧化以及调节肠道菌群等作用,蔓越莓是一种富含多种维生素、矿... 详细信息

目的:幽门螺杆菌(***,Hp)是一种螺旋状革兰氏阴性菌,与胃粘膜损伤及肠道菌群特征密切相关,而其诱导的氧化应激在胃黏膜损伤中起非常重要的作用。膳食多酚具有胃粘膜保护、抗氧化以及调节肠道菌群等作用,蔓越莓是一种富含多种维生素、矿物质及多酚类化合物的浆果。大量研究证实其具有天然抗菌活性和较强的抗氧化活性,但是否对胃黏膜损伤及肠道菌群具有一定的影响却鲜有报道。课题组前期研究重点观察了蔓越莓果汁补充4周后对Hp感染转阴率的影响;本研究拟观察蔓越莓果汁补充4周后对Hp感染者胃粘膜损伤、胃部不适反应及肠道菌群变化的影响,比较干预前后血液氧化应激水平的变化,分析肠道菌群和氧化应激变化与胃粘膜损伤和胃部不适反应变化之间的相关关系;为Hp感染的胃粘膜损伤者的膳食营养提供参考依据。方法:本研究采用随机双盲对照试验的研究方法,按照纳入和排除标准筛选研究对象,选取18～65岁的Hp感染者,随机分为高剂量组(27%的蔓越莓果汁480 ml/d,A组)、低剂量组(27%蔓越莓果汁240 ml/d+安慰剂240 ml/d,AB组)和安慰剂组(安慰剂480 ml/d,B组)。果汁及安慰剂外观相同,均为瓶装(240ml/瓶)但编号不同。干预试验为期4周。采集研究对象基本信息,24小时膳食回顾法收集其膳食摄入情况。定期随访每一位研究对象居家服用果汁及安慰剂情况,检查日志记录卡内容,收集干预期间研究对象的胃部不适反应变化。部分研究对象在干预前和干预后分别进行胃镜检查,根据京都胃炎分类标准中19种内镜表现(包括萎缩、弥漫性发红、增生性息肉、地图状发红、黄色瘤、陈旧性出血斑、脊状发红、肠上皮化生、粘膜肿胀、斑状发红、凹陷性糜烂、皱襞肿大/蛇型、白色浑浊粘液、胃底腺息肉、点状发红、多发性白色扁平隆起、集合细静脉的规则排列(RAC)、鸡皮样和隆起性糜烂)观察干预前后胃镜下粘膜表现的种类变化、发生率变化以及依据标准对其进行胃癌相关风险内镜表现评分。收集研究对象干预前和干预后血液和粪便样本,并及时放于-80℃冰箱冻存,以备血液指标检测和肠道菌群分析。采用试剂盒分析血浆总抗氧化能力(T-AOC)、8-异前列腺素(8-iso-PG)、红细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)等氧化应激指标;脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎性指标以及分泌型免疫球蛋白(sIgA)等指标。采用全自动生化分析仪检测血清C反应蛋白(CRP)的含量。提取粪便样本中细菌基因组DNA,PCR扩增rDNA的V3-V4区特定序列,用Illumina Hi Seq平台测序,分析三组样本的微生物群落和结构,并对各组的微生物构成进行比较,了解干预前后肠道菌群的变化。采用单因素方差分析、配对t检验、秩和检验、χ2检验和Spearman相关性分析等统计学方法,分析蔓越莓果汁的补充对Hp感染者胃粘膜损伤、胃部不适反应、血液中氧化应激和炎症的影响、肠道菌群的变化及其变化之间的相关关系。结果:本研究共纳入Hp感染者399名,其中伴胃粘膜损伤者有246人。80名Hp感染伴胃粘膜损伤者胃镜下观察结果显示,三组胃粘膜表现(19种)的发生率干预前后比较均无统计学差异。A组干预前胃镜下粘膜表现种类平均有5.23种,干预后平均有5.19种(P=0.918);AB组干预前有5.96种,干预后减少为5.61种(P=0.462);B组干预前平均有5.23种,干预后平均有4.55种(P=0.207)。根据京都胃炎中胃癌风险的内镜表现评分标准,A组干预前平均评分为2.04分,干预后评分为2.15分(P=0.670);AB组干预前评分为3.52分,干预后增加到3.61分(P=0.780);B组干预前为2.10分,干预后评分为1.97分(P=0.677)。此外,对180名Hp感染伴胃粘膜损伤者干预期间胃部不适反应分析发现,根据研究对象消化道不适的症状与程度进行评分结果显示,A组干预前和干预后中位数得分均为0分(P<0.001);AB组(P=0.044)和B组(P=0.009)干预前中位数得分均为0分,干预后中位数得分均增加到1分。28天干预时间中,A组平均不适反应出现天数(6天)显著少于AB组(12天)和B组(15天)不适反应发生的天数(P=0.041)。测序分析了264份粪便样品,结果显示,A、AB和B组厚壁菌门和拟杆菌门干预前后均为最优势菌门,干预前丰度和分别为84.68%、81.15%、83.43%,干预后丰度和分别为81.03%、77.10%、76.02%。A组干预后拟杆菌门显著升高(P=0.049),AB组干预后拟杆菌门显著增加(P=0.010),厚壁菌门显著减少(P<0.001),B组干预后厚壁菌门显著减少(P=0.023)。4周干预后,三组间ɑ多样

关键词：蔓越莓果汁胃粘膜损伤肠道菌群氧化应激多酚