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中国艾滋病抗病毒治疗20年的实验室检测进展与成就

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中国艾滋病性病 2022年第5期28卷 505-508页

作者：金聪邱茂锋潘品良姚均肖瑶邢文革吕毅刘佩蒋岩中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京102206

实验室检测是艾滋病临床诊断、病程进展监测、抗病毒治疗启动、治疗效果监测、耐药性检测及调整治疗方案等诊疗工作不可或缺的技术支撑。为满足不断增加的艾滋病诊断和治疗相关的防治需求,全国艾滋病实验室网络不断发展壮大。特别是实... 详细信息

实验室检测是艾滋病临床诊断、病程进展监测、抗病毒治疗启动、治疗效果监测、耐药性检测及调整治疗方案等诊疗工作不可或缺的技术支撑。为满足不断增加的艾滋病诊断和治疗相关的防治需求,全国艾滋病实验室网络不断发展壮大。特别是实施“四免一关怀”政策以来,实验室网络建设快速持续发展,检测技术和检测策略也适时进行完善、更新.

关键词：艾滋病实验室检测进展成就

参比校正对中国15个大城市MSM人群HIV感染者病毒载量抽样调查结果的影响

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中华流行病学杂志 2017年第12期38卷 1683-1687页

作者：斗智江震潘品良宋炜路徐杰吴尊友中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心预防干预室北京102206 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室北京102206 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京102206

目的通过对HIV病毒载量（VL）实验室检测方法的参比校正，分析中国MSM人群HIV感染者（MSM感染者）社区VL水平（CVL）。方法利用国家科技重大专项2014-2015年15个大城市MSM感染者VL抽样调查数据。15个大城市根据各自配置的检测设备、... 详细信息

目的通过对HIV病毒载量（VL）实验室检测方法的参比校正，分析中国MSM人群HIV感染者（MSM感染者）社区VL水平（CVL）。方法利用国家科技重大专项2014-2015年15个大城市MSM感染者VL抽样调查数据。15个大城市根据各自配置的检测设备、试剂完成VL检测。VL检测方法主要包括RT-PCR、核酸序列依赖性扩增法（NASBA）、分支DNA测定技术（bDNA）、雅培M2000（M2000）4种方法。按照国家HIV参比实验室2013-2015年VL能力验证结果，将EasyQ、bDNA和M2000这3种方法检测的VL值转换成相应的TaqMan 2.0检测的VL值，校正不同检测方法之间的参比关系。采用SPSS 17.0软件对数据进行描述性分析。结果 15个城市CVL对数均值参数校正前后，2014年分别为（2.38±1.47）、（2.99±1.31），2015年分别为（2.07±1.34）、（2.72±1.19）。分别以VL水平≤ 200拷贝/ml、≤ 400拷贝/ml、≤ 1 000拷贝/ml作为VL成功抑制标准，对参比校正VL值前后比例进行比较发现，以VL水平 ≤ 400拷贝/ml及 ≤ 1 000拷贝/ml标准的参比校正前后数据变化幅度较小。结论各地区保持统一的检测方法，能增加各年度间VL的可比性；以VL ≤ 400拷贝/ml或 ≤ 1 000拷贝/ml作为人群VL成功抑制标准，进行各地区间VL比较，数据稳定性较好。

关键词：艾滋病病毒病毒载量社区病毒载量测量参比校正

干血斑样本用于HIV-1基因序列测定和亚型分析的研究

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中华流行病学杂志 2006年第9期27卷 798-802页

作者：张麒潘品良邓红王临虹蒋岩中国疾病预防控制中心妇幼保健中心北京100013 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心

目的将干血斑样本用于HIV-1基因序列测定和亚型分析。方法采集20例静脉吸毒HIV-1感染者的EDTA抗凝静脉全血2 ml,80μl制备干血斑样本。QIAamp Blood Mini试剂盒,10％Chelex 100树脂分别提取全血和干血斑中细胞DNA。HIV-1 env基因Gp41区... 详细信息

目的将干血斑样本用于HIV-1基因序列测定和亚型分析。方法采集20例静脉吸毒HIV-1感染者的EDTA抗凝静脉全血2 ml,80μl制备干血斑样本。QIAamp Blood Mini试剂盒,10％Chelex 100树脂分别提取全血和干血斑中细胞DNA。HIV-1 env基因Gp41区2对外侧和内侧引物,按照巢式PCR方法,扩增Gp41区,PCR产物用内侧正反向引物测序。MEGA 3．0等软件完成序列比对及亚型分析。结果18对符合要求的干血斑和全血样本进入研究。16对经序列分析归为中国流行的BC重组亚型,样本间的基因平均离散率为5．79％,与中国流行的BC重组亚型的基因离散率为4．91％,与C亚型代表序列基因离散率为8．89％,与其他几个国际亚型代表株的基因离散率在15％～20％之间。另2对样本分别归属于泰国B’亚型和欧美B亚型。结论干血斑样本与全血样本HIV-1 DNA PCR产物亚型分析一致,氨基酸序列比对同义和非同义替换比例、位置和类型基本一致,其易采集,便于运输,保存条件和生物危险性低,费用低廉的优点适合作为实验条件较差的偏远地区HIV-1分子流行病学研究的一种样本采集手段。

关键词：艾滋病病毒亚型分析干血斑

2013—2015年全国HIV-1病毒载量检测能力验证方法的比较

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中华流行病学杂志 2017年第9期38卷 1231-1235页

作者：张岭金聪江震唐涛蒋岩潘品良中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室北京100050 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心干预室北京102206

目的通过分析2013-2015年全国HIV-1病毒载量检测能力验证（VQA-PT）结果，了解法国bioMerieux公司的NucliSens EasyQ HIV-1 v2.0（EasyQ）、美国Siemens Healthcare Diagnostics公司VERSANT HIV-1 RNA 3.0 assay（bDNA）、美国罗氏分子诊断公司COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV-1 test（Taqman）、美国Abbott Molecular公司Abbott Real Time HIV-1 Kit（M2000）、中山大学达安基因股份有限公司和东北制药集团辽宁生物医药有限公司的HIV-1核酸定量检测试剂盒（国产试剂）5种方法检测结果之间的定量换算关系，为不同方法检测HIV-1病毒载量结果的横向比较提供参考。方法参照《HIV-1病毒载量测定及质量保证指南》（2013版）的要求，由中国CDC性病艾滋病预防控制中心参比实验室统一组织全国HIV-1的VQA-PT。采用多中心回溯性研究方法，2013-2015年共计考核6次，考核实验室155家，涉及阳性样本22个，相应结果2 954个。针对每个阳性样本的所有结果，首先转换为对数值，而后按照检测方法分类，计算对数值的均值，获得不同方法检测相同样本的一组数据。对最终获得的22组数据进行Bland-Altman分析和线性回归分析。结果 Bland-Altman分析显示，EasyQ及bDNA与Taqman的一致性为100%，M2000及国产试剂与Taqman的一致性≥ 90%。回归分析结果显示，EasyQ、bDNA、M2000及国产试剂检测结果在数值上与Taqman之间存在相应的换算关系（P〈0.01）。结论对于我国HIV-1感染者，使用不同病毒载量检测方法获得的结果一致性良好，不同方法的结果之间可以转换，进而对治疗效果进行分析评价。

关键词：艾滋病病毒病毒载量能力验证方法比较

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ICP－AES测定氟化铈中杂质元素

云南大学学报（自然科学版） 1994年第S2期16卷 118-119页

作者：潘品良北京市理化分析测试中心

ＩＣＰ－ＡＥＳ测定氟化铈中杂质元素潘品良（北京市理化分析测试中心北京市，１０００８１）氟化铈是一种新型晶体、作为发展高尖端技术的新材料，对其纯度要求很高．纯铈和氧化铈中杂质测定己有报道，但难溶的氟化铈测定未见报道．现... 详细信息

ＩＣＰ－ＡＥＳ测定氟化铈中杂质元素潘品良（北京市理化分析测试中心北京市，１０００８１）氟化铈是一种新型晶体、作为发展高尖端技术的新材料，对其纯度要求很高．纯铈和氧化铈中杂质测定己有报道，但难溶的氟化铈测定未见报道．现代分析方法应该是化学手段与现代仪器...

关键词：氟化铈 AES ICP 杂质测定现代分析方法氧化铈现代仪器纯度要求萃取回收率有机溶剂

基于三个基因区片段的Hiseq高通量测序用于HIV-1传播方向调查

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中国艾滋病性病 2023年第4期29卷 372-377页

作者：陈宇杨锦冯凯迪龚渝蓉潘品良王继宝姚均段星段松邱茂锋中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京102206 德宏傣族景颇族自治州疾病预防控制中心云南芒市678400 潍坊医学院山东潍坊261053

目的研究将基于HIV-1三个基因区(gag、pol、env)片段的Hiseq高通量测序和系统进化树分析用于HIV-1传播方向调查。方法采集有明确HIV-1传播关系的3对夫妻的血液样本,提取全血中的DNA,进行HIV-1基因亚型分析。针对HIV-1 gag、pol、env... 详细信息

目的研究将基于HIV-1三个基因区(gag、pol、env)片段的Hiseq高通量测序和系统进化树分析用于HIV-1传播方向调查。方法采集有明确HIV-1传播关系的3对夫妻的血液样本,提取全血中的DNA,进行HIV-1基因亚型分析。针对HIV-1 gag、pol、env基因区片段(长度依次为385 bp、388 bp、352 bp)分别进行巢式PCR扩增,将每份血样的三个基因区片段PCR产物纯化后混合构建DNA文库、Hiseq测序,根据测序结果分析HIV-1准种群分布,计算样本内、样本间的平均基因离散率,使用最大似然法构建所用优势准种群序列数由少到多(20、50、100、全部)时所得的系统进化树。结果每对夫妻两人感染的HIV-1基因亚型分别相同。采用Hiseq测序,各基因区片段均获得了十万级的有效核酸序列数,代表71~793个独特准种群序列。样本内平均基因离散率分别为gag区0.5%~0.7%、pol区0.5%~1.0%、env区0.7%~4.4%,样本间平均基因离散率分别为gag区0.6%~17.3%、pol区0.6%~13.0%、env区1.6%~19.8%。利用不同数量的优势准种群序列构建系统进化树、结合不同靶基因片段的结果进行综合分析,每对夫妻两人间的传播方向均与背景信息相符。所用gag基因区片段在推断HIV-1传播方向方面的价值低于env和pol基因区片段的价值。结论 Hiseq测序可以有效用于HIV-1传播方向调查,不同基因区片段、不同优势准种群序列数分析结果的结合使用可以提高分析结果的可靠性。

关键词： 1型艾滋病病毒分子流行病学高通量测序准种系统发育分析

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HIV储存库检测方法的研究进展

中国艾滋病性病 2020年第12期26卷 1365-1368页

作者：张鑫潘品良金聪中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京102206

艾滋病病毒(HIV)感染者通过抗病毒治疗(ART)能够使血浆中的病毒量下降至检测不到的水平,但由于HIV整合在宿主细胞的基因组中形成病毒储存库,难以被根治。精准测量感染者体内病毒储存库的大小对评价治疗方案的疗效以及判断感染者是否获... 详细信息

艾滋病病毒(HIV)感染者通过抗病毒治疗(ART)能够使血浆中的病毒量下降至检测不到的水平,但由于HIV整合在宿主细胞的基因组中形成病毒储存库,难以被根治。精准测量感染者体内病毒储存库的大小对评价治疗方案的疗效以及判断感染者是否获得功能性治愈均具有重要的临床意义。目前已有多种HIV储存库检测方法,但检测性能参差不齐,缺乏统一的衡量标准,限制了HIV治疗方案的准确评估和发展。基于体外培养的HIV储存库检测方法能够检测出病毒储存库,但仅能代表病毒储存库的最低水平。基于荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测技术的传统PCR检测和数字PCR检测因为无法区分复制功能缺陷的病毒储存库而高估病毒储存库的大小。近来出现的IPDA和Q4PCR检测方法通过应用多重PCR检测可以在PCR高灵敏度的基础上特异地检测出完整的病毒库。本文对HIV储存库的特征及其现有的主要检测方法和新近技术进展进行了综述。

关键词：艾滋病病毒病毒储存库检测方法

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一起疑似输血传播HIV的分子流行病学研究

中华预防医学杂志 2013年第5期47卷 427-430页

作者：时丽丽赵琦蒋岩潘品良张桂云邱茂锋中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室北京102206

目的采用基于准种分析的HIV暴露后感染溯源检测技术调查一起疑似输血传播HIV案件。方法采集可疑传播链上3例HIV感染者（编号T1～T3）及作为对照的13例已知HIV感染者或艾滋病患者（编号c1～C13）的血样，共计16份血样。提取血浆RNA后，... 详细信息

目的采用基于准种分析的HIV暴露后感染溯源检测技术调查一起疑似输血传播HIV案件。方法采集可疑传播链上3例HIV感染者（编号T1～T3）及作为对照的13例已知HIV感染者或艾滋病患者（编号c1～C13）的血样，共计16份血样。提取血浆RNA后，进行逆转录套式PCR扩增，对扩增成功的PCR产物进行克隆、测序。利用BioEdit6．0．7和MEGA4．0软件分析基因序列，计算基因离散率、构建系统进化树。结果成功获得了13份样品的核酸序列，T1、T2和耶样品中毒株为CRF07-BC重组亚型，与12和r乃来自同一城市的6份对照样品中有5份毒株为CRF07-BC重组亚型，而与T1来自同一城市的4份对照样品中毒株全部为CRF01-AE重组亚型。T1与T2间的平均基因离散率最小（2．O％），随后依次为C12（2．8％）和乃（2．9％）等。系统进化树分析显示，T1、他、仍和C12的所有克隆聚为一簇，并提示HIV的传播方向是从T3经T2到T1。结论实验结果支持HIV从乃经12传播到T1的流行病学调查线索，显示分子流行病学技术可以为HIV暴露后感染溯源调查提供更直接的证据。

关键词： HIV 疾病传播输血分子流行病学

3例艾滋病患者不同组织来源HIV分离株异同性的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2003年第1期17卷 58-61页

作者：张晨阳蒋岩邢辉冯毅潘品良范秀娟张辉刘德恭邵一鸣北京地坛医院 100011 卫生部艾滋病预防与控制中心参比室北京佑安医院

目的　了解艾滋病 (AIDS)患者外周血和部分组织人免疫缺陷病毒 (HIV)生物学性状和基因序列的特点。方法　将 3例患者的PBMC、淋巴结活检组织或脑脊液接种于PHA刺激 72h的正常人PBMC进行病毒分离 ,将分离的毒株接种于MT2细胞 ,观察分离... 详细信息

目的　了解艾滋病 (AIDS)患者外周血和部分组织人免疫缺陷病毒 (HIV)生物学性状和基因序列的特点。方法　将 3例患者的PBMC、淋巴结活检组织或脑脊液接种于PHA刺激 72h的正常人PBMC进行病毒分离 ,将分离的毒株接种于MT2细胞 ,观察分离株的致细胞病变性。同时提取前病毒DNA ,对外膜基因进行序列分析。结果　同一患者不同组织来源的毒株 ,其生物学性状和基因序列存在差异 ;2例来自脑脊液的毒株 ,其基因序列与国际标准株SF162同源性较高。结论　在同一宿主体内的不同组织、体液内有不同的病毒种群存在 ;

关键词：获得性免疫缺陷综合征 HIV 基因序列细胞培养