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中医药调控TGF-β_(1)/Smad信号通路治疗糖尿病肾病的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2022年第23期28卷 237-249页

作者：潘保朝李函舟张辉李艺萌温伟波吕树泉河北中医学院研究生院石家庄050091 承德医学院承德067000 沧州市第三医院沧州061000 云南中医药大学附属第一医院昆明650021 河北中医学院附属沧州中西医结合医院沧州061000

糖尿病肾病(DN)是糖尿病的严重微血管并发症之一,是终末期肾脏的主要病因。糖尿病肾病的发生发展与肾脏纤维化进展息息相关,研究表明肾脏纤维化是各种慢性肾脏疾病的重要病理特征和最终病理结果。因此,针对肾脏纤维化的治疗有利于延缓D... 详细信息

糖尿病肾病(DN)是糖尿病的严重微血管并发症之一,是终末期肾脏的主要病因。糖尿病肾病的发生发展与肾脏纤维化进展息息相关,研究表明肾脏纤维化是各种慢性肾脏疾病的重要病理特征和最终病理结果。因此,针对肾脏纤维化的治疗有利于延缓DN的疾病进展。转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路是肾脏纤维化的关键信号通路之一,TGF-β_(1)是介导肾脏纤维化的关键因子,在与纤维化有关的肾脏疾病中呈现出高表达状态,Smads蛋白是TGF-β_(1)信号转导通路中下游主要效应分子,TGF-β_(1)通过激活Smads蛋白将信号从胞质异位到细胞核中,并调节与纤维化相关靶基因的转录,从而发挥生物学效应促进肾脏纤维化进程。近年来中医药在DN的防治中起到越来越重要的作用,探索中医药通过调控TGF-β_(1)/Smad信号通路预防和治疗DN的研究也日益增多。基于中医药研究现状,该文查阅相关文献,通过综述TGF-β_(1)/Smad信号通路的基本结构及其与DN的关系,中药单体及提取物、中成药及中药复方基于TGF-β_(1)/Smad信号通路改善和延缓肾脏纤维化的研究现状及其通过调节TGF-β_(1)/Smad信号通路起到缓解炎症反应及氧化应激、减少细胞外基质的累积和抑制上皮间质转化等作用,旨在为DN的防治提供新思路和方向。

关键词：糖尿病肾病肾纤维化转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路中医药病理机制研究进展

基于IRE1/GPR78信号通路研究三黄益肾胶囊抑制DKD大鼠肾组织细胞凋亡的作用机制

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天津中医药 2024年第5期41卷 642-648页

作者：张辉吕树泉潘保朝河北省沧州中西医结合医院沧州061001

[目的]探讨三黄益肾胶囊对糖尿病肾病(DKD)模型大鼠的治疗作用,同时研究三黄益肾胶囊对DKD模型大鼠肌醇酶1(IRE1)/G蛋白偶联受体78(GPR78)信号通路的影响。[方法]将30只大鼠平均分为正常组、模型组、阳性药组、三黄益肾低剂量及三黄益... 详细信息

[目的]探讨三黄益肾胶囊对糖尿病肾病(DKD)模型大鼠的治疗作用,同时研究三黄益肾胶囊对DKD模型大鼠肌醇酶1(IRE1)/G蛋白偶联受体78(GPR78)信号通路的影响。[方法]将30只大鼠平均分为正常组、模型组、阳性药组、三黄益肾低剂量及三黄益肾高剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组运用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)注射建立DKD模型,造模后正常组与模型组每天灌胃生理盐水,阳性药组每天灌胃厄贝沙坦11.51 mg/kg,三黄益肾低剂量及三黄益肾高剂量组每天分别灌胃三黄益肾胶囊0.81、1.62 g/kg,分别干预8周。通过观察给药期间各组大鼠血糖、体质量水平,检测造模给药后生化指标水平及肾组织病理学染色评估三黄益肾胶囊对DKD的治疗作用;其次,运用试剂盒及酶联免疫吸附(ELISA)法研究三黄益肾胶囊对DKD大鼠肾组织中氧化应激及炎症因子水平的影响;最后运用免疫荧光、Tunel染色、蛋白免疫印迹(Western blot)等方法研究三黄益肾胶囊对DKD大鼠肾组织细胞凋亡以及IRE1/GPR78信号通路的影响。[结果]经三黄益肾胶囊干预后,DKD大鼠体质量显著增加,血糖水平降低,血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白水平下降,同时也可改善DKD大鼠肾组织病理学变化,肾组织炎细胞浸润及纤维化减轻。此外,三黄益肾胶囊可显著升高DKD模型大鼠肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性、降低丙二醛(MDA)水平,并降低DKD大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。Western blot结果显示,三黄益肾胶囊显著降低了DKD模型大鼠肾组织中内质网应激标志性因子GRP78、IRE1蛋白表达水平,同时有效降低了模型大鼠肾组织中促凋亡蛋白BcL2关联X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的表达,提高了抑制凋亡蛋白BcL2的表达。[结论]三黄益肾胶囊对DKD模型大鼠具有显著治疗作用,其作用机制可能与抑制肾组织中IRE1/GPR78信号通路激活,改善内质网应激有关。

关键词：三黄益肾胶囊糖尿病肾病内质网应激细胞凋亡 IRE1/GPR78信号通路

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白虎加人参汤对2型糖尿病大鼠脂代谢的影响

世界中医药 2024年第7期19卷 962-968页

作者：吕树泉张辉张淑芳潘保朝姚彬苏秀海王元松李文东李函舟田甜苗静河北中医学院附属沧州中西医结合医院沧州061001 河北中医学院研究生院石家庄050091 承德医学院研究生院承德067000 天津市第二人民医院天津300192

目的:研究白虎加人参汤对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)/固醇反应元件结合蛋白-1(SREBP1)信号通路的影响。方法:通过高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)注射建立T2DM模型大鼠,并用不同剂量的白虎加人参汤灌胃。通过检... 详细信息

目的:研究白虎加人参汤对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)/固醇反应元件结合蛋白-1(SREBP1)信号通路的影响。方法:通过高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)注射建立T2DM模型大鼠,并用不同剂量的白虎加人参汤灌胃。通过检测各组大鼠造模给药后血清中相关生化指标和肝组织病理学变化,评估白虎加人参汤对T2DM模型大鼠的治疗作用;然后,运用定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质免疫分析法检测白虎加人参汤干预后,各组大鼠肝组织中AMPK/SREBP1信号通路关键因子腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合成酶(FASN)、ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)基因及蛋白水平,初步探究白虎加人参汤治疗T2DM模型大鼠的作用机制。结果:白虎加人参汤可明显降低T2DM模型大鼠血清中空腹血糖(FBG)、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,同时改善T2DM模型大鼠肝组织病理学变化。qPCR及蛋白质免疫分析结果显示,白虎加人参汤可显著降低T2DM模型大鼠肝组织中AMPK基因与蛋白水平,上调SREBP1、ACC1、ACLY、FASN基因与蛋白水平。结论:白虎加人参汤对T2DM模型大鼠具有治疗作用,其作用机制可能与调节肝组织中AMPK/SREBP1信号通路,改善脂代谢有关。

关键词：白虎加人参汤 2型糖尿病血糖脂代谢腺苷一磷酸活化蛋白激酶/固醇反应元件结合蛋白-1(AMPK/SREBP1)信号通路中医药作用机制实验研究

三黄益肾胶囊调控NF-κB信号通路减轻糖尿病肾病大鼠炎症反应的机制研究

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世界中医药 2024年第10期19卷 1406-1413页

作者：吕树泉潘保朝刘爱茹孙文娟刘晓菲杨越王丛香李函舟崔换天苏秀海河北省沧州中西医结合医院沧州061001 天津中医药大学中西医结合学院天津301617 云南中医药大学昆明650500

目的:旨在探究三黄益肾胶囊治疗糖尿病肾病(DN)可能的炎症反应机制。方法:按照随机数字表法将60只大鼠分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及三黄益肾低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ... 详细信息

目的:旨在探究三黄益肾胶囊治疗糖尿病肾病(DN)可能的炎症反应机制。方法:按照随机数字表法将60只大鼠分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及三黄益肾低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)注射建立DN模型。正常组和模型组给予生理盐水2 mL灌胃;厄贝沙坦组给予厄贝沙坦11.51 mg/kg灌胃;三黄益肾低、中、高剂量组分别给予三黄益肾胶囊0.41、0.81、1.62 g/kg灌胃。各组大鼠均1次/d,连续给药4周。比较各组大鼠空腹血糖(FBG)、体质量、24 h尿白蛋白、肾功能指标、肾组织病理学变化、肾组织抗氧化相关指标(SOD、GSH-Px活性及MDA水平)、肾组织炎症介质[白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、肾组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肾组织CD68、CC趋化因子受体2(CCR2)表达、肾组织CC趋化因子配体2(CCL2)、NF-κB P65、p-NF-κB P65、IκB、p-IκB表达。结果:与模型组比较,各三黄益肾胶囊组大鼠体质量高,FBG、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白水平低,肾脏组织病理变化减轻,三肾组织中SOD、GSH-Px活性高,MDA水平低,IL-6、IL-1β、TNF-α水平低,肾组织中iNOS水平低,肾组织CCR2与CD68共定位水平低,CCL2、p-NF-κB P65、p-IκB蛋白表达低。结论:三黄益肾胶囊治疗DN的机制可能与抑制肾组织中NF-κB信号通路激活,减轻肾脏氧化应激及炎症反应有关。

关键词：三黄益肾胶囊糖尿病肾病炎症反应大鼠 CC趋化因子配体2/CC趋化因子受体2信号通路转录因子κB信号通路肾功能血糖

基于SIRT1/TGF-β1/Smad通路研究健脾固肾化瘀方治疗糖尿病肾病机制

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天津中医药大学学报 2024年第7期43卷 625-631页

作者：董礼陈晓婷张辉潘保朝苏秀海王庆海吕树泉河北省沧州中西医结合医院沧州061000

[目的]研究健脾固肾化瘀方(JPGS)治疗糖尿病肾病(DKD)效果,并从去乙酰化酶1(SIRT1)/转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路介导的上皮间质转化(EMT)研究JPGS治疗DKD的作用机制。[方法]60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,高脂饮食喂养联合链... 详细信息

[目的]研究健脾固肾化瘀方(JPGS)治疗糖尿病肾病(DKD)效果,并从去乙酰化酶1(SIRT1)/转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路介导的上皮间质转化(EMT)研究JPGS治疗DKD的作用机制。[方法]60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,高脂饮食喂养联合链脲佐菌素腹腔注射造模,并随机平均分为正常组、模型组、SIRT1激动剂组(50 mg/kg,灌胃)、低剂量JPGS组(2.4 g/kg,灌胃)、中剂量JPGS组(4.8 g/kg,灌胃)、高剂量JPGS组(9.6 g/kg,灌胃)。治疗8周后,收集小鼠24 h尿液样本、血液样本、肾脏进行分析测定。使用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量(24 h-UPQ)、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平以评估肾功能。对肾脏同一部位进行苏木精-伊红(HE)、Masson染色,观察其病理学变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)以及蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测EMT相关因子[E-钙黏蛋白(E-cad)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、波形蛋白(VIM)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达情况,以评估JPGS对EMT的影响。运用Western Blot法检测SIRT1和TGF-β1蛋白表达水平,以及Smad2、Smad3磷酸化水平,评估JPGS对SIRT1/TGF-β1/Smad通路的调控作用。[结果]与模型组比较,经JPGS治疗后,DKD小鼠Cr、BUN、24 h-UPQ降低,肾组织病理损伤好转,E-cad、ZO-1表达升高,VIM、α-SMA表达降低,SIRT1表达上调,TGF-β1、磷酸化Smad2/Smad2、磷酸化Smad3/Smad3表达下调。[结论]JPGS可以抑制SIRT1/TGF-β1/Smad通路介导的EMT,以缓解DKD肾损伤。

关键词：健脾固肾化瘀方糖尿病肾病上皮间质转化去乙酰化酶1/转化生长因子-β1/Smad通路

健脾固肾化瘀汤对糖尿病肾脏病大鼠肾脏保护及IGF-1 mRNA、MCp-1 mRNA和Nephrin mRNA表达的影响

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河北中医药学报 2022年第6期37卷 1-6,10页

作者：陈晓婷潘保朝张辉苏秀海孙文娟吕树泉河北中医学院附属沧州中西医结合医院内分泌糖尿病科沧州061001

目的:研究健脾固肾化瘀汤对糖尿病肾脏病(DKD)大鼠肾脏病理变化的改善及肾病蛋白(Nephrin)、单核细胞趋化因子1(MCp-1)和类胰岛素1号生长因子(IGF-1)的影响。方法:采用雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射链脲霉素(STZ)来复制糖尿病肾病大... 详细信息

目的:研究健脾固肾化瘀汤对糖尿病肾脏病(DKD)大鼠肾脏病理变化的改善及肾病蛋白(Nephrin)、单核细胞趋化因子1(MCp-1)和类胰岛素1号生长因子(IGF-1)的影响。方法:采用雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射链脲霉素(STZ)来复制糖尿病肾病大鼠模型。根据随机数表随机选择6组,即正常组、模型组、雷米普利组、健脾固肾化瘀汤低、中、高剂量组(1.9、3.8、7.6 g/kg),各10只。用药8周后,测定各组血清肌酐、尿素氮、甘油三酯、总胆固醇和24 h尿白蛋白的指标。在光学显微镜下观察肾脏的形态学变化。用免疫组化法观察Nephrin、MCp-1和IGF-1的表达,用RT-PCR方法观察Nephrin、MCp-1、IGF-1 mRNA的表达。结果:与正常组相比,模型组的甘油三酯、总胆固醇、肌酐、尿素氮、24 h尿微量白蛋白、MCp-1和IGF-1 mRNA的水平明显升高(P保护作用。

关键词：健脾固肾化瘀汤糖尿病肾脏病肾病蛋白单核细胞趋化因子1 类胰岛素1号生长因子肾脏保护

藏红花素抑制铁死亡改善糖尿病肾病的机制研究

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天津中医药 2024年第4期41卷 510-516页

作者：陈晓婷潘保朝王元松苏金浩陈伟及晓晖吕树泉河北省沧州中西医结合医院沧州061000

[目的]研究藏红花素(CRO)治疗糖尿病肾病(DN)的效果并从脂质过氧化与铁死亡角度探究其作用机制。[方法] 60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,HFD继续喂养8周,之后链脲霉素(STZ)造模并随机平均分为正常组、模型组、铁死亡抑制剂组(铁死亡抑制... 详细信息

[目的]研究藏红花素(CRO)治疗糖尿病肾病(DN)的效果并从脂质过氧化与铁死亡角度探究其作用机制。[方法] 60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,HFD继续喂养8周,之后链脲霉素(STZ)造模并随机平均分为正常组、模型组、铁死亡抑制剂组(铁死亡抑制剂Fer-1,10 mg/kg,灌胃)、低剂量CRO组(CRO 5 mg/kg,灌胃)、中剂量CRO组(CRO 10 mg/kg,灌胃)、高剂量CRO组(CRO 20 mg/kg,灌胃)。治疗8周后,收集小鼠24 h尿液样本、血液样本、肾脏进行分析测定。采用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量(24 h-UPQ),血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN),肾组织丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平,评估其肾功能与脂质过氧化水平。对肾脏同一部位进行苏木精-伊红(HE)、Masson以及TUNEL染色,观察其病理学变化以及细胞死亡情况。测定肾组织Fe水平并采用实时荧光定量反转录聚合酶连锁反应(RT-qPCR)以及蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测前列腺六跨膜上皮抗原3(STEAP3)、转铁蛋白(TF)、重链铁蛋白(FTH1)、轻链铁蛋白(FTL)以及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达情况,以评估CRO对铁死亡的影响。[结果]与模型组相比,CRO治疗后,DN小鼠Cr、BUN、24 h-UPQ有不同程度降低,肾组织病理损伤有不同程度的好转,MDA、ROS、4-HNE水平显著降低,肾组织中TUNEL荧光阳性反应明显减弱,肾组织Fe水平出现不同程度降低,STEAP3与TF表达下调,FTH1、FTL以及GPX4蛋白表达上调。[结论] CRO可以通过抑制脂质过氧化并减轻细胞铁死亡发挥对DN小鼠肾脏的保护作用。

关键词：藏红花素糖尿病肾病脂质过氧化铁死亡

基于NLRP3通路研究金樱子抑制肾小管上皮细胞间质化治疗糖尿病肾病的作用机制

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天津中医药 2024年第11期41卷 1468-1474页

作者：王平孙文娟潘保朝苏秀海张天宇郭煊吕树泉河北省沧州中西医结合医院沧州061000

[目的]研究金樱子对糖尿病肾病(DN)模型小鼠的治疗效果及基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路抑制肾小管上皮细胞间质化(EMT)的作用机制。[方法]通过链脲佐菌素(STZ)联合高脂饮食诱导建立DN小鼠模型,并灌胃不同剂量... 详细信息

[目的]研究金樱子对糖尿病肾病(DN)模型小鼠的治疗效果及基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路抑制肾小管上皮细胞间质化(EMT)的作用机制。[方法]通过链脲佐菌素(STZ)联合高脂饮食诱导建立DN小鼠模型,并灌胃不同剂量的金樱子。通过检测各组小鼠体肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白,肾石蜡切片苏木精-伊红(HE)染色及过碘酸-Schiff(PAS)染色评估金樱子对DN模型小鼠的治疗作用;通过检测上皮性钙黏附蛋白(E-CDH)、波形蛋白(VIM)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMΑ)和转化生长因子β(TGF-β)mRNA和蛋白表达水平研究金樱子对DN小鼠EMT的影响;通过检测NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cleaved Caspase-1)、成熟的白细胞介素-1β(mature IL-1β)、成熟的白细胞介素-18(mature IL-18)的蛋白水平评估金樱子对DN小鼠NLRP3信号通路的影响。[结果]金樱子可明显降低DN小鼠Cr、BUN及24 h尿蛋白水平;同时改善DN模型小鼠肾组织病理学变化,提示金樱子对DN模型小鼠具有治疗作用;进一步研究发现金樱子提升了E-CDH,降低了VIM、α-SMΑ和TGF-βmRNA和蛋白水平,改善了DN小鼠的EMT;降低了NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1、mature IL-1β、mature IL-18蛋白水平,提示金樱子干预降低了DN小鼠NLRP3信号通路的活化程度。[结论]金樱子对DN模型小鼠具有治疗作用,其作用机制可能与通过降低NLRP3信号通路活化抑制EMT有关。

关键词：金樱子糖尿病肾病上皮细胞间质化 NLRP3信号通路

清肺排毒合剂联合西医常规治疗方案治疗儿童新型冠状病毒感染的临床观察

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中国民间疗法 2025年第1期 64-67页

作者：张登辉潘朝云张娜曹晓涵甘肃中医药大学宁夏回族自治区中医医院暨中医研究院

目的：观察清肺排毒合剂联合西医常规治疗方案治疗儿童新型冠状病毒感染湿热蕴肺证的临床疗效。方法：选取80例新型冠状病毒感染湿热蕴肺证患儿，按随机数字表法分为对照组和治疗组，每组40例。对照组给予退热、祛痰平喘、雾化吸入等西... 详细信息

目的：观察清肺排毒合剂联合西医常规治疗方案治疗儿童新型冠状病毒感染湿热蕴肺证的临床疗效。方法：选取80例新型冠状病毒感染湿热蕴肺证患儿，按随机数字表法分为对照组和治疗组，每组40例。对照组给予退热、祛痰平喘、雾化吸入等西医常规治疗方案治疗，治疗组在对照组治疗基础上，口服清肺排毒合剂。比较两组患儿临床症状、体征消失时间，以及治疗前后白细胞总数(WBC)、淋巴细胞绝对值(LC)、C反应蛋白(CRP)水平。比较两组患儿胸部CT检查结果、核酸转阴情况及平均住院时间，并评估临床疗效。结果：治疗组退热时间及咳嗽、咳痰、咽痛、肺部湿啰音消失时间均短于对照组(P0.05)。治疗后，两组患儿新型冠状病毒核酸检测全部转为阴性，转阴率100%。治疗组最快转阴者所用时长为7 d,最慢转阴者所用时长为14 d,中位转阴时长为10 d,第14日核酸转阴率为100%(40例)。对照组最快转阴者所用时长为9 d,最慢转阴者所用时长为16 d,中位转阴时长为12 d,第14日核酸转阴率为80%(32例)。两组患儿核酸转阴情况比较，差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗组平均住院时间为(9.70±1.40)d,对照组平均住院时间为(11.50±1.50)d。两组患儿平均住院时间比较，差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率为90.00%(36/40),高于对照组的70.00%(28/40),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：清肺排毒合剂联合西医常规治疗方案治疗儿童新型冠状病毒感染湿热蕴肺证，可明显改善患儿的临床症状，有效缩短新型冠状病毒核酸转阴时间及住院时长。

关键词：新型冠状病毒感染疫病清肺排毒合剂湿热蕴肺