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脉冲电磁场对糖尿病大鼠急性下肢缺血血管再生作用的实验研究

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脉冲电磁场对糖尿病大鼠急性下肢缺血血管再生作用的实验研究

作者：潘云虎第四军医大学

学位级别：硕士

研究背景糖尿病导致的下肢缺血是缺血性疾病中的常见症状,具有发生率高、致残率高及病死率高等特点,严重的影响人们的生活质量,成为社会经济发展的沉重负担。对于缺血性疾病,治疗性血管性新生是当前的研究热点。治疗性血管新生主要包... 详细信息

研究背景糖尿病导致的下肢缺血是缺血性疾病中的常见症状,具有发生率高、致残率高及病死率高等特点,严重的影响人们的生活质量,成为社会经济发展的沉重负担。对于缺血性疾病,治疗性血管性新生是当前的研究热点。治疗性血管新生主要包括包括干细胞移植、直接注射重组成血管因子的蛋白疗法和基于传递编码成血管因子基因的基因疗法。这些方法在缺血性疾病中取得了一定的疗效,但是其价格昂贵,技术要求高,对具有庞大患病人群但医疗资源相对十分缺乏的我国难以普遍推广。随着脉冲电磁场的发展,在临床中广泛应用于促进骨愈合、治疗肿瘤和一些神经损伤性疾病,取得了较好的疗效,在实验研究方面,已发现脉冲电磁场可促进内皮细胞增殖、加快血管化的作用,因此,本实验研究脉冲电磁场对糖尿病大鼠急性缺血下肢血管再生的影响。研究目的建立糖尿病大鼠急性下肢缺血模型,对实验组大鼠给予脉冲电磁场处理,应用激光多普勒、免疫组化、免疫荧光、ELISA、Western-blot等多种方法研究脉冲电磁场对糖尿病大鼠急性下肢缺血模型血管再生的作用,并探讨其机制。实验方法 1.糖尿病大鼠模型的建立:雄性SD大鼠禁食12小时,以60mg/kg的剂量腹腔注射链脲菌素(streptozotocin, STZ)(溶于0.1 mol/L新鲜配制柠檬酸缓冲液中)。1周后检测空腹血糖,采用鼠尾采血方法,空腹血糖>300mg/dl者为造模成功。 2.急性下肢缺血动物模型的建立选用符合糖尿病标准的SD雄性大鼠,术前常规禁食12小时,自由饮水,腹腔注射3%戊巴比妥进行麻醉,麻醉成功后在大鼠的右侧腹股沟韧带致膝关节间切一纵行切口,分离各层组织,暴露股动、静脉,分离股动脉,于近心端结扎,并切除下端及其分支。术后随机分为实验组和对照组(每组60只),实验组:术后即给予脉冲电磁场治疗(脉冲宽度4.5 ms、频率15 Hz、磁感应强度为12 Gs)。治疗时间为每天2小时,共28天。对照组除给予正常饮食外不给予任何处理。 3.在术后当天及术后7、14、28天运用激光多普勒技术检测脉冲电磁场治疗组及对照组下肢血流灌注情况。并于术后7、14、28天在实验组与对照组每组随机每次处死10只大鼠,分离缺血后肢的肌肉,采用免疫组织化染色法检测CD31、α-SMA的表达;免疫荧光方法检测RECA-1的表达,ElISA检测VEGF、FGF-2;采用Western-blot法检测VEGF、FGF-2、VEGFR2、FGFR1、ERK1/2、P-ERK1/2、P38及P-P38的表达。实验结果 1.激光多普勒检测显示:在术后、术后7天、14天、28天,实验组缺血右下肢与对侧相应部位的血流比率分别为:0.15±0.013,0.32±0.017,0.64±0.020,0.85±0.021;而对照组分别为:0.15±0.009,0.27±0.014,0.48±0.023,0.61±0.021。在术后14天及28天,实验组血流恢复明显高于对照组(P0.05)。 2.免疫组化染色结果显示:术后7、14、28天,实验组CD31的表达分别为430.2±18.15/mm,677.4±15.63/mm,837.2±25.60/mm;而对照组为357.8±26.64/mm,495.2±25.31/mm,619.4±19.24/ mm。实验组术后14、28天明显高于对照组(P0.05)。实验组α-SMA的表达在7、14、28天分别为22.6±1.91/mm,35.8±2.08/mm和50.6±3.08/mm;对照组为18.2±1.07/mm,25.6±1.94/mm和32.4±1.72/mm,两组α-SMA的表达对比结果与CD31一致。 3.免疫荧光染色可见:术后7、14、28天,实验组RECA-1表达分别为:96.4±4.00/mm,179.8±6.95/mm,253.0±8.67/mm;对照组为89.6±4.51/mm, 150.4±5.35/mm,184.6±6.09/mm;实验组在14、28天时明显高于对照组(P0.05)。 4.VEGF、FGF-2及其受体检测结果:实验组7、14、28天等不同时间点VEGF的ELISA检测值分别为38.6±6.27pg/ml,91.4±10.51pg/ml,59.8±6.48 pg/ml;对照组为40.4±5.83 pg/ml,80.4±10.88pg/ml,51.6±2.90 pg/ml;两组相比差异无统计学意义(P >0.05),Western blot的结果与ELISA一致。实验组FGF-2的ELISA检测值在各个时间段内分别为13.4±1.91pg/ml,28.4±3.67 pg/ml,47.4±6.80 pg/ml;对照组分别为:7.6±1.

关键词：脉冲电磁场下肢缺血血管再生 CD31 α-SMA FGF-2

miR-24及Menin在肺癌患者中的临床意义及相关性研究

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中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生 2023年第11期 108-111页

作者：刘杰季志宇杨艳玲魏腾陈潘云虎联勤保障部队第九〇七医院呼吸内科福建南平353000

探讨miR-24及Menin在肺癌组织中表达情况与患者临床因素关系及二者相关性研究。方法通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法,对70例肺癌患者的癌组织及癌旁组织检测miR-24表达情况,分析其表达水平与患者的各项临床因素关系。之后在癌组织及... 详细信息

探讨miR-24及Menin在肺癌组织中表达情况与患者临床因素关系及二者相关性研究。方法通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法,对70例肺癌患者的癌组织及癌旁组织检测miR-24表达情况,分析其表达水平与患者的各项临床因素关系。之后在癌组织及癌旁组织检测Menin蛋白mRNA水平。最后分析癌组织中miR-24及Menin表达的相关性。结果癌组织中miR-24的表达水平显著高于其癌旁组织(P0.05)。通过相同方法检测发现肺癌患者的癌组织Menin蛋白的mRNA水平与癌旁组织相比显著降低(P<0.05)。进一步分析提示miR-24在癌组织中表达检测水平与Menin蛋白mRNA水平呈负相关(P<0.05)。结论 miR-24可能在肺癌的发生发展中起到促癌基因的作用,而Menin蛋白可能其发挥作用的靶蛋白,miR-24可能成为肺癌检测的一个潜在的肿瘤标记物。

关键词： miR-24 肺癌 Menin 预后临床价值

重症肺炎伴感染性休克行早期限制性液体复苏的治疗分析

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中国卫生标准管理 2022年第11期13卷 101-104页

作者：魏腾陈余艳梅潘云虎谢凯帆联勤保障部队第九O七医院呼吸内科福建南平353000 联勤保障部队第九O七医院肾内科福建南平353000

目的分析重症肺炎伴感染性休克患者应用早期限制性液体复苏治疗对其凝血功能及降钙素原(procalcitonin,PCT)、血清可溶性髓系细胞表达触发受体-1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cell-1,sTREM-1)水平的影响。方法选... 详细信息

目的分析重症肺炎伴感染性休克患者应用早期限制性液体复苏治疗对其凝血功能及降钙素原(procalcitonin,PCT)、血清可溶性髓系细胞表达触发受体-1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cell-1,sTREM-1)水平的影响。方法选择2019年8月—2021年3月呼吸科和重症医学科收治的重症肺炎合并感染性休克患者,共120例。按随机数字表法分为对照组和观察组,对照组接受常规液体复苏治疗,观察组在对照组的基础上给予早期限制性液体复苏治疗,比较两组休克期恢复时间以及治疗前后的心输出量(cardiac output,CO)、血乳酸水平(blood lactic acid,BLA)、凝血功能、血清降钙素原(PCT)和可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)水平,观察两组不良反应发生情况。结果观察组患者休克期恢复时间明显少于对照组,治疗后观察组CO高于对照组,BLA低于对照组,凝血酶原时间(prothrombin time,PT)和活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)高于对照组,纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)和凝血酶时间(thrombin time,TT)低于对照组,且PCT、sTREM-1水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论早期限制性液体复苏能有效地降低大量液体输入造成的不良影响,改善凝血功能,降低血清PCT和sTREM-1水平,具有临床应用价值。

关键词：肺炎感染性休克早期限制性液体复苏凝血功能血清PCT sTREM-1

支气管肺泡灌洗液hnRNPA2/B1、NSE和CEA联合检测在肺癌患者中的临床意义

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中国现代医学杂志 2011年第1期21卷 129-131页

作者：陈艺坛潘云虎熊勇喇海芹解放军第92医院福建南平353000

目的探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)中异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hn RNPA2/B1)、神经元烯醇化酶(NSE)和癌胚抗原(CEA)水平测定在肺癌患者中的临床意义。方法对该院2006年1月～2009年6月之间88例肺癌病人(实验组)及68例肺良性疾病患者(对照... 详细信息

目的探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)中异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hn RNPA2/B1)、神经元烯醇化酶(NSE)和癌胚抗原(CEA)水平测定在肺癌患者中的临床意义。方法对该院2006年1月～2009年6月之间88例肺癌病人(实验组)及68例肺良性疾病患者(对照组)行BALF中hn RNPA2/B1、NES和CEA的水平测定。结果肺癌组BALF中hn RNPA2/B1、NES和CEA明显高于肺良性疾病组(hnRNPA2/B1:(78.82±4.50)vs(32.43±4.73),P=0.0001;NSE:(28.92±2.84)vs(11.66±1.58),P=0.0008;CEA:(54.82±5.50)vs15.84±2.63,P=0.0002),差异有统计学意义(P<0.05),三项联合检测可明显提高肺癌阳性检出率(P<0.05)。hnRNPA2/B1及CEA非小细胞癌明显高于小细胞癌(P<0.05),NSE在小细胞癌中明显高于非小细胞癌(P<0.05),NSE在小细胞癌中明显高于非小细胞癌(P<0.05)。结论 hnRNPA2/B1、NSE和CEA与肺癌的病情变化呈负相关,联合应用可提高其敏感性,尤其在支气管肺泡灌洗液中更为敏感,对肺癌患者早期诊断、病情动态变化、判断预后有一定的参考价值。

关键词：肺癌支气管肺泡灌洗液异质性胞核核糖核蛋白A2/B1 神经元烯醇化酶癌胚抗原

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老年人院内获得性肺炎的临床分析(英文)

中国现代医学杂志 2004年第16期14卷 9-12页

作者：陈艺坛陈志斌潘云虎蓝行远解放军第92医院福建南平353000 福建南平第二医院福建南平354200

目的探讨老年人院内获得性肺炎(HAP)的临床、病原学特点、易患因素及防治对策。方法对36例老年HAP患者进行回顾性分析。结果36例老年HAP患者的临床表现不典型,病原菌主要以Gˉ杆菌为主,占71.1%;同时两种细菌或细菌和真菌的混合感染严重,... 详细信息

目的探讨老年人院内获得性肺炎(HAP)的临床、病原学特点、易患因素及防治对策。方法对36例老年HAP患者进行回顾性分析。结果36例老年HAP患者的临床表现不典型,病原菌主要以Gˉ杆菌为主,占71.1%;同时两种细菌或细菌和真菌的混合感染严重,占46.2%。革兰氏阴性菌主要对头孢哌酮、头孢他啶、泰能、氧哌嗪青霉素、环丙沙星、丁胺卡那霉素敏感;而G+主要是金黄色葡萄球菌,主要对万古霉素敏感。结论老年人生理功能的退变,机体抵抗力低下,合并慢性基础疾病,营养不良、肺功能低下,同时反复大量使用多种抗生素,是造成HAP的主要危险因素;增强免疫功能、加强营养及病房的空气消毒是主要的防治措施。

关键词：院内获得性肺炎老年人临床特点病原学

支气管肺泡灌洗抢救重症肺炎并呼吸衰竭的临床研究

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中国内镜杂志 2007年第9期13卷 972-974页

作者：陈艺坛陈志斌潘云虎丁珠云中国人民解放军第92医院内科福建南平353000

目的探讨支气管肺泡灌洗抢救重症肺炎并呼吸衰竭的临床价值。方法将37例患者随机分为灌洗组和非灌洗组,灌洗组18例在常规治疗基础上加支气管肺泡灌洗,非灌洗组19例采用常规治疗,观察两组病例的治疗效果。结果治疗48h和72h后灌洗组的PaO... 详细信息

目的探讨支气管肺泡灌洗抢救重症肺炎并呼吸衰竭的临床价值。方法将37例患者随机分为灌洗组和非灌洗组,灌洗组18例在常规治疗基础上加支气管肺泡灌洗,非灌洗组19例采用常规治疗,观察两组病例的治疗效果。结果治疗48h和72h后灌洗组的PaO2和氧合指数(PaO2/FiO2)明显高于非灌洗组(P<0.01),PaCO2明显低于非灌洗组(P<0.01);灌洗组总有效率为88.8%,非灌洗组为47.4%,两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论支气管肺泡灌洗抢救重症肺炎并呼吸衰竭,可减少使用有创机械通气,疗效确切,有较高的临床价值。

关键词：支气管肺泡灌洗术重症肺炎呼吸衰竭

重型颅脑损伤患者血清、脑脊液中t-PA、PAI-1的临床意义研究

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中国现代医学杂志 2009年第18期19卷 2835-2838页

作者：陈志斌陈艺坛潘云虎林庆喜陈金弟中国人民解放军第92医院福建南平353000

目的探讨重型颅脑损伤后的血清及脑脊液中t-PA和PAI-1的变化及临床意义。方法动态观察50例重型颅脑损伤及50例轻型颅脑损伤患者血清及脑脊液中t-PA和PAI-1,进行不同的分组比较分析。结果重型颅脑损伤组脑脊液及血清t-PA、PAI-1在伤后24h... 详细信息

目的探讨重型颅脑损伤后的血清及脑脊液中t-PA和PAI-1的变化及临床意义。方法动态观察50例重型颅脑损伤及50例轻型颅脑损伤患者血清及脑脊液中t-PA和PAI-1,进行不同的分组比较分析。结果重型颅脑损伤组脑脊液及血清t-PA、PAI-1在伤后24h、3d、1周、2周和3周均明显高于对照组(P<0.01)。GCS(3～5分)组脑脊液及血清中此2项指标在伤后各阶段明显高于GCS(6～8分)组,两组差异有统计学意义(P<0.01)。重型颅脑损伤预后良好组(n=28例)脑脊液及血清t-PA、PAI-1伤后各阶段均明显低于预后恶劣组(n=22例),两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论重型颅脑损伤后t-PA、PAI-1的变化可以反映出脑实质损伤的严重程度,同时与预后呈负相关。临床上通过对重型颅脑损伤患者脑脊液及血清t-PA、PAI-1的检测,可以评估患者病情的严重程度及预后,在临床中有重要意义。

关键词：重型颅脑损伤脑脊液酶联免疫吸附试验组织纤维蛋白溶酶原激活剂纤维蛋白溶酶原激活抑制剂-1

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军人精神疾病200例致病因素分析

东南国防医药 2004年第5期6卷 356-357页

作者：王笑春潘云虎解放军第92医院福建南平353000

近年来,我军部队精神疾病患者数量仍居高不下,影响了部队的战斗力,增加了部队的额外负担,为了进一步探讨军人精神疾病的致病因素,收集我院近十年来首次住院的军人精神疾病患者的病历资料进行了回顾性研究,为军人精神卫生咨询工作提供参... 详细信息

近年来,我军部队精神疾病患者数量仍居高不下,影响了部队的战斗力,增加了部队的额外负担,为了进一步探讨军人精神疾病的致病因素,收集我院近十年来首次住院的军人精神疾病患者的病历资料进行了回顾性研究,为军人精神卫生咨询工作提供参考依据.

关键词：军人致病因素精神疾病患者首次住院回顾性研究病历资料精神卫生军部

低频脉冲电磁场对糖尿病大鼠急性后肢缺血微循环血管再生的影响

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中华物理医学与康复杂志 2010年第7期32卷 498-502页

作者：潘云虎李飞陈江红张申伟郭文怡福建省南平市解放军第92医院二病区南平353000 第四军医大学西京医院心脏内科

目的观察低频脉冲电磁场对糖尿病大鼠急性后肢缺血微循环血管再生的影响。方法选取雄性SD大鼠60只，用60mg／kg体重链脲菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型后，制备大鼠急性后肢缺血模型。造模成功后分成实验组和对照组，每组30只，实验组... 详细信息

目的观察低频脉冲电磁场对糖尿病大鼠急性后肢缺血微循环血管再生的影响。方法选取雄性SD大鼠60只，用60mg／kg体重链脲菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型后，制备大鼠急性后肢缺血模型。造模成功后分成实验组和对照组，每组30只，实验组术后第1天即给予低频脉冲电磁场治疗，每天治疗2h；对照组除正常饮食外不予任何处理。于术后第1天及术后第7，14，28天，采用激光多普勒技术检测2组大鼠缺血右后肢肌肉血流，2组分别于术后第7，14，28天时每次随机处死10只大鼠，分离缺血后肢膝关节至踝关节肌肉，分别采用免疫荧光方法检测大鼠内皮细胞抗原-1（RECA-1）表达，ELSIA方法检测血管内皮生长因子（VEGF）和成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）的表达，并采用Westernblot方法检测VEGF、FGF-2及各自受体VEGFR2、FGFR1的表达。结果术后第14，28天，实验组缺血后肢血流量和RECA-1阳性数量均明显高于对照组（P〈0．05）。FGF-2及其受体在各个时间段实验组均高于对照组（P〈0．05），而VEGF及其受体无明显差异（P〉0．05）。结论低频脉冲电磁场可以促进糖尿病大鼠急性后肢缺血的血管新生，机制可能为可以通过刺激血管内皮细胞释放FGF-2。

关键词：低频脉冲电磁场后肢缺血血管再生鼠内皮细胞抗原-1 成纤维细胞生长因子-2