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三七提取物的制备工艺对其抗凝血生物效价的影响

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中药材 2018年第4期41卷 934-937页

作者：满金辉崔秀明林亚蒙杨野高明菊王承潇昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500 云南中医学院中药学院云南昆明650500 云南省三七资源可持续利用重点实验室云南昆明650500 云南白药集团中药资源有限公司云南昆明650500 文山学院云南文山663000

目的:考察三七提取物的制备工艺对其抗凝血生物效价的影响。方法:采用不同提取/干燥方法,制备三七提取物,并测定其抗凝血活性,根据量反应平行法计算生物效价;采用HPLC法测定提取物活性成分;并对活性成分与生物效价进行线性关联分析。结... 详细信息

目的:考察三七提取物的制备工艺对其抗凝血生物效价的影响。方法:采用不同提取/干燥方法,制备三七提取物,并测定其抗凝血活性,根据量反应平行法计算生物效价;采用HPLC法测定提取物活性成分;并对活性成分与生物效价进行线性关联分析。结果:当物料比为1∶8时,80%乙醇超声提取结合冷冻干燥法所得到的提取物生物效价最高;且生物效价与活性成分之间呈显著正相关,R^2为0.7837。结论:三七提取物的制备工艺可显著影响其抗凝血生物活性。

关键词：三七提取物生物效价制备工艺关联分析

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三七配方颗粒新型制备工艺研究及表征

中药材 2019年第2期42卷 375-379页

作者：满金辉王承潇崔秀明杨野高明菊云南中医学院中药学院云南昆明650500 昆明理工大学生命科学与技术学院/云南省三七资源可持续利用重点实验室云南昆明650500 文山学院云南文山663000

目的:通过对比分析配方颗粒的吸湿性以及IR、DSC、XRD和SEM等表征结果,考察新型制备工艺的合理性与可行性。方法:通过考察不同混合方式下的三七配方颗粒的吸湿性,同时运用IR、XRD、DSC和SEM等分析手段对配方颗粒进行表征。结果:通过对比... 详细信息

目的:通过对比分析配方颗粒的吸湿性以及IR、DSC、XRD和SEM等表征结果,考察新型制备工艺的合理性与可行性。方法:通过考察不同混合方式下的三七配方颗粒的吸湿性,同时运用IR、XRD、DSC和SEM等分析手段对配方颗粒进行表征。结果:通过对比5种常用辅料,新型混合工艺制备的配方颗粒的平衡吸湿量较传统工艺降低范围在18%~30%,平衡时间延长范围在13%~17%;经新型混合工艺制备的配方颗粒其药物有效成分与辅料未发生物理与化学变化,提取物在颗粒中更多以无定形或微晶形式存在,同时颗粒表面结构有较大改观。结论:新型工艺制备的配方颗粒吸湿性较好,提取物与辅料未发生物理化学变化,表面结构平整光滑,说明新型制备工艺适用于中药配方颗粒的生产。

关键词：制备工艺配方颗粒表征三七

基于KingSCADA粮库数据采集与监控系统研究与实现

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自动化博览 2013年第6期30卷 68-70页

作者：胡攀满金辉李玉宝仪忠江北京亚控科技发展有限公司

介绍了基于KingSCADA的粮库数据采集和处理系统,实时监控分布在不同地点的数据信息。该监控系统为分布在异地的采集点提供统一的数据采集方式,为各业务应用模块提供统一的数据接口服务,并实现了C/S、B/S两种模式的访问。该系统能够实现... 详细信息

介绍了基于KingSCADA的粮库数据采集和处理系统,实时监控分布在不同地点的数据信息。该监控系统为分布在异地的采集点提供统一的数据采集方式,为各业务应用模块提供统一的数据接口服务,并实现了C/S、B/S两种模式的访问。该系统能够实现粮仓管理、温湿度巡检、超限报警、历史查询、打印报表等功能。

关键词： KingSCADA 数据采集与监控系统温湿度巡检

基于叶绿体基因matK及UPLC对市售大黄的种质资源鉴定和质量分析

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药学学报 2022年第2期57卷 514-524页

作者：满金辉石玥张靖晗张志飞尹光耀王馨刘凤波张媛王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

大黄是多基原大宗常用药材,不同基原大黄其药理活性存在一定差异。本研究基于叶绿体基因matK序列对市售大黄饮片的种质资源进行鉴定,通过UPLC对其总蒽醌和游离蒽醌含量进行测定,以期确定市售大黄的主要种质及质量。本研究从27省40市收... 详细信息

大黄是多基原大宗常用药材,不同基原大黄其药理活性存在一定差异。本研究基于叶绿体基因matK序列对市售大黄饮片的种质资源进行鉴定,通过UPLC对其总蒽醌和游离蒽醌含量进行测定,以期确定市售大黄的主要种质及质量。本研究从27省40市收集89份市售大黄样品并提取DNA,通过PCR扩增matK基因,扩增的matK基因序列的分析结果表明,收集的市售大黄样品都是同一基原,即掌叶大黄,共鉴定了其8个基因型:Rp1、Rp2、Rp3、Rp4、Rp5、Rp6、Rp10和Rp12,其中来自甘肃、四川和云南省的Rp4和Rp6是主要流通基因型,分别占总样品量40.45%和37.08%。系统发育树结果表明,8个基因型主要分成2大支,其中主要基因型Rp4和Rp6聚在同一大支,遗传距离分析结果表明8个基因型遗传距离在0.001~0.010之间。利用UPLC检测市场样品中的总蒽醌和游离蒽醌含量结果表明,93.26%样品符合药典标准。样品之间总蒽醌含量和游离蒽醌的含量差异显著,其中游离蒽醌相差1.01%;总蒽醌含量相差3.79%,说明市售大黄样品质量存在参差不齐的现象,但是不同采集省份之间市售大黄总蒽醌和游离蒽醌含量没有显著性差异,各基因型之间的大黄样品中总蒽醌和游离蒽醌含量没有显著性差异。本文对大黄市场样品的种质资源、产地来源和药材质量进行研究,有利于指导大黄市场样品流通及临床科学合理用药,为其他中药材市场样品种质及质量鉴定提供参考。

关键词：大黄 matK基因分子鉴定质量评价

基于DNA条形码及HPLC对市售黄芩的种质资源鉴定和质量评价

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中国中药杂志 2022年第7期47卷 1814-1823页

作者：张靖晗刘珊瑚张志飞石玥满金辉尹光耀王馨刘凤波王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

黄芩Scutellaria baicalensis是我国常用的大宗药材,该研究根据以前的叶绿体基因组测序结果,选取trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA序列对市售黄芩样品进行种质资源鉴定,并通过HPLC测定市售样品的黄芩苷含量,以期确定检测黄芩市场样品的... 详细信息

黄芩Scutellaria baicalensis是我国常用的大宗药材,该研究根据以前的叶绿体基因组测序结果,选取trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA序列对市售黄芩样品进行种质资源鉴定,并通过HPLC测定市售样品的黄芩苷含量,以期确定检测黄芩市场样品的最佳DNA条形码,市场样品的种质资源和质量。该研究从我国24个省收集104份样品并提取DNA进行PCR扩增,trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA 3段序列的扩增效率分别为100%、59.62%、25.96%;序列分析结果表明利用trnH-psbA、petA-psbJ、ycf4-cemA分别能够鉴定5、4、2个基因型,但是与野生型基因型序列不相同,3段序列联合分析仅形成6个基因型;系统进化树和遗传距离分析结果表明,trnH-psbA片段可用于鉴别黄芩真伪样品,因此trnH-psbA片段为鉴定市场样品种质资源最佳片段,对其所鉴定的市场样品基因型(THap1~THap5)进行分析,发现THap2为市场样品主要流通基因型,占总样品量的86.55%,说明市场黄芩样品种质资源比较少。HPLC检测市售黄芩样品中的黄芩苷含量结果表明,所有采集的市售黄芩样品黄芩苷含量均超过药典规定标准,样品之间黄芩苷含量差异显著,最大相差12.21%,说明市售黄芩样品质量参差不齐,而且不同采集省份和各个基因型之间的黄芩苷含量没有显著性差异。该研究为建立黄芩鉴定标准化体系提供依据,有利于指导黄芩市场样品的流通及临床科学合理用药。

关键词：黄芩 DNA条形码分子鉴定质量评价

三七PnMYB1R1基因的克隆、亚细胞定位与不同胁迫下的表达分析

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药学学报 2022年第5期57卷 1506-1515页

作者：石玥满金辉江伟业张靖晗张志飞尹光耀王馨黄钰莹张媛王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以三七(Panax notoginseng)为材料,设计特异引物,克隆了三七中1R-MYB转录因子PnMYB1R1基因,并进行氨基酸序列分析、原核表达... 详细信息

MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以三七(Panax notoginseng)为材料,设计特异引物,克隆了三七中1R-MYB转录因子PnMYB1R1基因,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、转录活性分析、组织特异性分析及非生物胁迫下的诱导表达分析。PnMYB1R1基因开放阅读框(ORF)长738 bp,编码245个氨基酸,蛋白分子质量27.0 kD。序列分析及系统进化树结果表明PnMYB1R1包含1个保守的R3结构域,属于1R-MYB型转录因子中的TRF-like类蛋白。构建原核表达载体pET28a-PnMYB1R1并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达PnMYB1R1重组蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。亚细胞定位实验结果表明PnMYB1R1定位于植物细胞的细胞核中。转录活性分析显示PnMYB1R1转录因子具有转录激活活性。实时荧光定量PCR结果表明PnMYB1R1基因在三七主根中表达量最高,茎、叶次之,须根中表达量最低。盐、低温及干旱胁迫均能够影响主根、须根、茎、叶中PnMYB1R1基因的表达水平,其中盐胁迫能够显著提高主根、须根、茎和叶中PnMYB1R1基因的表达水平。本研究为进一步揭示1R-MYB转录因子在三七中防御反应中作用奠定基础。

关键词：三七 PnMYB1R1 原核表达亚细胞定位转录活性表达分析

北柴胡特异DNA 条形码筛选及种质资源鉴定

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中草药 2023年第17期54卷 5703-5715页

作者：王馨尹光耀张志飞陈颖刘珊瑚满金辉石玥黄钰莹张晓芹王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学中药研究院北京100029

目的基于北柴胡Bupleurum chinense叶绿体基因组筛选特异性DNA条形码,并利用特异DNA条形码鉴定不同产地北柴胡种质资源。方法利用Illumina HiSeq X Ten平台对北柴胡进行叶绿体基因组测序,利用mVISTA软件和核酸多样性分析筛选特异性片段... 详细信息

目的基于北柴胡Bupleurum chinense叶绿体基因组筛选特异性DNA条形码,并利用特异DNA条形码鉴定不同产地北柴胡种质资源。方法利用Illumina HiSeq X Ten平台对北柴胡进行叶绿体基因组测序,利用mVISTA软件和核酸多样性分析筛选特异性片段,基于特异性片段进一步分析不同产区北柴胡样品单倍型。结果不同产地3份北柴胡叶绿体基因组全长为155557~155959 bp,均呈现典型的环状四分体结构,均编码131个基因。trnV-UAC、trnC-GCA_petN、petN_psbM、ndhF_rpl32可以作为潜在的北柴胡种质资源鉴定的特异性DNA条形码。基于扩增效率,选择petN_psbM和ndhF_rpl32对来自4省7个产地177份北柴胡样品进行序列分析,结果表明petN_psbM和ndhF_rpl32分别有91和78个变异位点,分别鉴定到28、29个单倍型;两段序列联合分析形成40个单倍型(Hap1~Hap40),各单倍型的遗传距离为0~0.022。6个产地拥有特有单倍型,可以将不同产地的北柴胡种质资源进行区分。结论利用比较叶绿体基因组学筛选的特异DNA条形码petN_psbM和ndhF_rpl32可以用于北柴胡种内种质资源鉴定,为后续鉴定北柴胡的产地来源、种质资源保护利用和育种等工作奠定基础。

关键词：北柴胡叶绿体基因组序列对比种质资源 DNA条形码

北苍术特异性DNA条形码筛选、种质资源鉴定及遗传多样性分析

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药学学报 2023年第6期58卷 1693-1704页

作者：尹光耀袁林王馨张志飞陈颖刘珊瑚满金辉石玥黄钰莹张晓芹王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 国家药品监督管理局北京100037 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102

北苍术Atractylodes chinensis具有重要药用价值和经济价值。本研究利用Illumina平台测序获得4份不同产地的北苍术的叶绿体全基因组序列,筛选特异DNA条形码,并利用特异DNA条形码对不同产区北苍术样品种质资源鉴定及居群的遗传多样性分... 详细信息

北苍术Atractylodes chinensis具有重要药用价值和经济价值。本研究利用Illumina平台测序获得4份不同产地的北苍术的叶绿体全基因组序列,筛选特异DNA条形码,并利用特异DNA条形码对不同产区北苍术样品种质资源鉴定及居群的遗传多样性分析。该4份北苍术叶绿体全基因组均为典型的环状四分体结构,均注释112个基因。比较基因组学研究结果表明ccsA和trnC-GCA_petN是潜在的北苍术种内鉴别的特异DNA条形码。选择ccsA和trnC-GCA_petN对来自9省14产区的256份样品进行PCR扩增,扩增效率为100%。序列分析结果表明ccsA和trnC-GCA_petN分别有11和22个变异位点,分别能鉴定16和22个单倍型,两段序列联合分析鉴定39个单倍型,命名为Hap1~Hap39,其中占比最多和分布最广的基因型为Hap9。单倍型多样性(Hd)=0.896,核苷酸多样性(Pi)=0.002 22,说明北苍术在物种水平上有较高的遗传多样性。各单倍型的遗传距离为0.000 00~0.004 88,说明各个单倍型之间有较小的遗传差异。系统进化树分析结果表明, 39个单倍型有很近的亲缘关系,并且与除白术外其余同属类群形成明显的两个分支。本研究为后续鉴定北苍术产地来源和后续种质资源保护和育种方面起到重要作用。

关键词：苍术叶绿体基因组 DNA条形码单倍型遗传多样性

桔梗特异DNA条形码筛选、种质资源鉴定及遗传多样性分析

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药学学报 2024年第1期59卷 243-252页

作者：王馨石玥满金辉黄钰莹张晓芹安克露何高洁刘子齐关范圆郑语嫣王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 北京中医药大学生命科学院北京102488 黑龙江诺初中药材种植有限公司黑龙江哈尔滨150600

中药材桔梗为桔梗科植物桔梗的干燥根,具有多种药理作用,是常用的大宗中药材。本研究利用Illumina HiSeq X Ten平台对6份来自不同产地的桔梗进行叶绿体基因组测序,筛选特异性DNA条形码,基于特异性DNA条形码对不同产区的桔梗样品的种质... 详细信息

中药材桔梗为桔梗科植物桔梗的干燥根,具有多种药理作用,是常用的大宗中药材。本研究利用Illumina HiSeq X Ten平台对6份来自不同产地的桔梗进行叶绿体基因组测序,筛选特异性DNA条形码,基于特异性DNA条形码对不同产区的桔梗样品的种质资源和遗传多样性进行分析。6份桔梗叶绿体基因组全长为172260~172275 bp,均呈现典型的环状四分体结构,编码141个基因。根据比较基因组学分析和扩增效率分析发现trnG-UCC和ndhG_ndhF可作为潜在的桔梗种内种质资源鉴定的特异性DNA条形码。对来自9省15个产地305份桔梗样品的trnG-UCC和ndhG_ndhF进行PCR扩增和序列分析,结果表明trnG-UCC和ndhG_ndhF分别有5和11个变异位点,分别鉴定到5和7个单倍型;两段序列联合分析鉴定13个单倍型(Hap1~Hap13),其中占比最多的是Hap4,其次是Hap1。3个产地拥有的特异单倍型,可作为该产地的DNA分子标签与其他产地的桔梗种质资源进行区分。单倍型多样性、核苷酸多样性和遗传距离分别为0.94、4.79×10^(-3)和0.0000~0.0203,表明桔梗在物种水平上有较高的遗传多样性,种内各单倍型之间亲缘关系比较接近。本研究为桔梗产地鉴定、种质资源保护利用和分子育种等工作奠定基础。

关键词：桔梗叶绿体基因组 DNA条形码种质资源遗传多样性